UNIVERSIDADE FEDERAL DE ALFENAS - CAMPUS POÇOS DE CALDAS

ENGENHARIA BIOTECNOLÓGICA – ICT 526

Atividade Avaliativa 2

Grupo:

Amanda Shaianne Rodrigues - 2016.2.36.008

André Fabrício Franchini – 2016.2.36.009

Carlos Tadeu Silva Gomes - 2014.1.35.141

Felipe Zamarian – 2016.1.25.010

Rodrigo Rotella – 2017.1.36.012

Ricardo Maziero – 2015.2.36.015

Poços de Caldas – MG

02/2021
Alternativas escolhidas: C-D-Q

Parte 1

A Respeito do processo fermentativo e dos meios de cultura utilizados responda:

Figura 1: Contém os componentes dos meios de cultura e sua concentração.

C-) Qual o papel do ácido nicotínico e tiamina no meio de cultura?

Resposta

Figura 2: Figura contendo os dados do experimento do meio de cultura 1.

Figura 3: Figura contendo os dados do experimento do meio de cultura 2.

Através da figura percebe-se que o Meio 1 contém a maior quantidade de

lipídeos, e é o único que contém ácido nicotínico e tiamina. Entende-se que essas
duas substâncias ajudam no crescimento do fungo com foco na produção de lipídios, e
com biomassa controlada. O Meio 2 não contém essas duas substâncias, como pode
ser analisado na figura 2, e a quantidade de biomassa é quase o triplo, e a presença
de Lipídios é quase a metade. Isso demonstra a importância dessas duas substâncias
no controle do processo para priorizar a formação de lipídios com biomassa
controlada.

D) Qual o papel dos sais KH2PO4 e MgSO4.7H2O no meio de cultura?

Resposta

Figura 4: Figura contendo os dados do experimento do meio de cultura 3.

A presença de KH2PO4 e MgSO4.7H2O no meio 3, como é visto na figura 3,

fez com que a biomassa fosse a menos concentrada dentre os 3 meios, produzindo
apenas 3,2g/L após 120h. Portanto a presença desses Sais não contribuem para o
crescimento do micélio e para geração de produto, o que implica em uma grande
quantidade remanescente de substrato.

Parte 2

Com base nos dados obtidos, trace o gráfico da produção de biomassa, consumo de
substrato e formação de produto para todos os meios e responda:

Figura 5: Dados referentes aos meios de cultivo 1, 2 e 3.

Gráficos:
Q) Compare os meios 1 e 3. Explique as diferenças encontradas nos componentes do
processo fermentativo ao longo do tempo e o que pode ter contribuído para essas
diferenças. Diga em qual cinética de formação de produto se enquadra o óleo

Como o objetivo desta fermentação é obter lipídio (produto) e não o

crescimento celular, então o gráfico representativo da fermentação segue um modelo.
E ao comparar os gráficos 1 e 3 com o modelo a seguir, percebe-se uma similaridade.
Pois se o foco fosse a produção de células, então a curva de células estaria no lugar
da curva do produto.
Figura 6: Gráfico representativo da curva de fermentação.

Nos meios 1 e 3 foram utilizadas as mesmas fontes de carbono (glicose) e

nitrogênio (sulfato de amônio), com as mesmas concentrações. O controle do
processo fermentativo foi realizado da mesma forma para os dois meios em análise. A
diferença do meio 1 para o meio 3 está nos componentes do meio de cultivo. O meio 1
possui Ácido nicotínico (0,001 g/L) e Tiamina (0,001 g/L) e o meio 3 não possui estes
dois últimos componentes, mas contém KH2PO4 (6 g/L) e MgSO4.7H2O (0,5 g/L).
Ao analisar a amostra 1, percebe-se que esta demora mais para formar
biomassa, enquanto que na amostra 3 há a formação rápida de biomassa para depois
permanecer constante. A concentração de biomassa na amostra 1 foi maior que na
amostra 3. A presença de tiamina contribui para a formação de lipídios, enquanto que
o meio 3 com presença de fosfato monopotássico gera a menor concentração de
biomassa entre todos os meios, o que indica que esses sais controlam o crescimento
micelial. Pode-se analisar também o tempo até a biomassa atingir o seu ponto
máximo.Na amostra 1 esse processo é gradual, indicando que a cultura levou maior
tempo para se adaptar ao novo meio de cultura, enquanto que a amostra 2 passou por
essa etapa (lag) de forma mais rápida. Então após o lag, ambas as amostras entram
na fase exponencial, que possui taxa de crescimento máximo e por último entram na
fase estacionária. A queda na produção de biomassa pode estar associada à mudança
das rotas metabólicas, a energia associada ao crescimento da biomassa foi
direcionada para outras rotas, como a de produção dos lipídios.
Quando analisadas as curvas de produto e substrato, percebe-se que ambas
estão associadas com a quantidade de substrato presente no meio. Se este está em
abundância, há o crescimento celular e produção de óleo, conforme a quantidade de
substrato decai, há a diminuição da velocidade de formação de produto. A quantidade
de substrato é um fator importante na fermentação, podendo limitar a quantidade de
produto desejada. A qualidade e seletividade do substrato influencia diretamente no
processo. Pode-se observar a diferença do meio 1 para o 3 quando se muda o meio
de cultivo. Na amostra 1, a tiamina e o ácido nicotínico representaram um ponto
positivo para a fermentação, pois foi a amostra que mais gerou lipídio no tempo
analisado. Podendo ser componentes essenciais para a síntese de lipídio. Na amostra
3, contendo fosfato monopotássico e sulfato de magnésio heptahidratado, houve
produção de lipídio porém em menor concentração comparado à amostra 1,
demonstrando que estes Sais colaboram minimamente na produção de lipídios na
fermentação, porém não como os componentes da amostra 1. Estes Sais agiram
como limitadores na formação de biomassa e lipídios quando o meio 1 é comparado
ao meio 3.
Geralmente todos os microrganismos podem realizar a síntese de lipídeos
para suas funções essenciais. Porém, há espécies capazes de produzir maiores
quantidades de lipídios. Para a síntese de lipídio, é necessário haver no meio excesso
de carbono e uma quantidade limitada de outro componente, neste caso o nitrogênio.
O nitrogênio é utilizado para síntese de ácidos nucleicos e proteínas, assim o
microrganismo não se multiplica e continua utilizando o carbono do meio para a
produção de lipídios. Fica clara a importância da relação Carbono:Nitrogênio.
O meio de cultura 1 e o meio de cultura 3 possuem cinética de formação de 1º
ordem, pois o produto é formado durante o crescimento do microrganismo. Durante o
crescimento deste que são gerados o metabólico de interesse. Quando o crescimento
do microrganismo entra na fase estacionária a produção de lipídio começa a diminuir o
crescimento.