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CENTRO AVANÇADO EM DIAGNÓSTICOS


CAD LABORATÓRIO DE ANÁLISES CLÍNICAS – SETOR DE HEMATOLOGIA
HEMOGRAMA COMPLETO Procedimento Operacional Padrão
SANGUE TOTAL Data da 1ª versão: 05/07/2021
Automação Celltac ES Mek 7300 k Versão n.º: 1
Data da efetivação: 06/07/2021
POP: H01

GLOSSÁRIO
EDTA: Ácido Etilenodiamino Tetra-Ácetico
IG: Granulócitos Imaturos
POP: Procedimento Operacional Padrão
RBC: Red Blood Cells (Hemácias)
WBC: White Blood Cells (Leucócitos)
NEU: Contagem absoluta de neutrófilos
%Ne: Percentual de neutrófilos de WBC
%Ly: Percentual de linfócitos de WBC
%MO: Percentual de monócitos de WBC
%EO: Percentual de eosinófilos de WBC
%BA: Percentual de basófilos de WBC
HGB: Hemoglobina
HCT: Hematócrito VCM: Volume Médio das Hemácias
HCM: Hemoglobina Corpuscular Média
CHCM: Concentração de Hemoglobina Corpuscular Média
RDW: Variação no tamanho das Hemácias
PLT: Contagem total de Plaquetas
VPM: Volume corpuscular médio das Plaquetas

1. Sinonímia:

Hemograma: HEM / HC /HMG

2. Aplicabilidade:

Biomédicos, Técnicos e auxiliares (estagiários) de laboratório do setor de hematologia do


CAD – Centro Avançado em Diagnósticos.

3. Aplicação clínica:

Exame laboratorial de rotina para avaliação quantitativa e qualitativa dos elementos figurados
do sangue. Sofre alterações significativas tanto nas doenças hematológicas quanto em doenças
das mais variadas patogêneses, tendo, por isso, grande valor preditivo e diagnóstico.
É composto pelos seguintes parâmetros: Contagem de eritrócitos, dosagem de hemoglobina,
determinação do hematócrito, volume corpuscular médio (VCM), hemoglobina corpuscular
média (HCM), concentração hemoglobínica corpuscular média (CHCM) e amplitude de
distribuição dos eritrócitos (RDW) que compõem o eritrograma; Contagem de leucócitos e
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fórmula leucocitária que compõem o leucograma; Plaquetograma, amplitude plaquetária


(PDW/VPM).

4. Principio do teste:

O hemograma é realizado em equipamentos de automação total (Celltac es Mek 7300 L) com


reavaliação microscópica. O analisador hematológico de vários parâmetros é usado no
diagnóstico in-vitro em laboratórios clínicos através do método de impedância volumétrica
para contagem de célula, a medição espectrofotometria é usada para medir a hemoglobina,
outra característica é a técnica de dispersão de luz para distinguir as WBC em contagem de
neutrófilos, linfócitos, monócitos, eosinófilos e basófilo.

Amostra:

4.1 Preparo do paciente:

Sempre observar as orientações do médico assistente.


Apenas evitar colheitas de material após exercício físico (causa leucocitose) e nas duas horas
que sucedem refeições fartas e ricas em gordura. As diferenças nas contagens do repouso à
deambulação (aumento de 2 a 5% na hematimetria) e da manhã para a tarde (aumento na
contagem de leucócitos), não apresentam significação clínica. Sempre observar as orientações
do médico assistente. Vide POP-L4 – Coleta.

4.2 Tipo de amostra:

Sangue total anticoagulado com EDTA K3 ou K2 (pó ou solução) na concentração final de


1,5 a 2,2 mg/ml.

4.3 Colheita:

Observar as precauções universais para punção venosa. A colheita pode ser realizada a
qualquer hora, observando as recomendações do médico assistente. Utilizar uma das veias da
fossa antecubital (basílica, cubital média, cefálica ou cefálica acessória), quando necessário
em caso de exceções colher gasometria. Usar seringa (de 3 a 5 ml), ou tubo a vácuo. Tubos a
vácuo contendo EDTA K3 (frascos de tampa roxa) com volume de aspiração preconizado
(pediatria: 2,0ml; adultos: 3,0 a 4,5ml), ou tubo sem vácuo contendo EDTA K2 com volume
preconizado de 2.0 ml).
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4.4 Preservação e transporte:

Transportar o material colhido a temperatura ambiente e dentro das normas de segurança


legais. A amostra deve ser encaminhada ao laboratório o mais rápido possível, sendo ideal a
realização do exame dentro de 6h após a colheita. O material colhido deve ser processamento
de forma imediata, rápida e precisa quando não a necessidade de transporte.

4.5 Identificação da amostra:

Identificação manual acompanhada de conferencia com os dados pessoais do paciente. A


identificação é realizada com caneta preta ou azul, sendo identificado o nome completo do
paciente no ato da coleta.

4.6 Estabilidade e armazenamento:

A estabilidade da amostra colhida com EDTA K3 ou K2 é de 8h à temperatura ambiente e de


24h se refrigerada (2 a 8°C). Amostras podem ser utilizadas, para confirmação de resultados,
até 48h após a colheita desde que mantidas sob refrigeração (2 a 8°C). As amostras são
armazenadas em geladeira por 48h após a realização do hemograma para confirmação de
resultados, se assim solicitado.

4.7 Amostras Inadequadas:

Colhidas em frascos errados, mal identificadas, congeladas, coaguladas e em volume


inadequado ao tubo usado.

5. Reagentes e materiais:

Reagentes para automação:

Diluente ISOTONAC 3 (18L ou 20L)


Detergente CLEANAC (5L)
Detergente CLEANAC 3 (Somente para limpeza pesada – 5L)
Reagente de hemólise Hemolynac 3N (500ml)
Reagente de hemólise Hemolynac 5N (500ml)

Reagentes para calibração e controle de qualidade:

Sangue controle: Amostra de um paciente ou colaborar que esteja com todos os parâmetros
sem apresentação de alarmes ou alterações predominantes.
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5.1 Estabilidade:

A estabilidade dos reagentes de automação é de 60 dias após a abertura e/ou instalação no


equipamento, ou até a data de vencimento.

5.2 Armazenamento:

Temperatura ambiente e abrigo da luz solar, exceto sangue controle e calibrador (em
geladeira: 2 a 8°C).

6. Equipamentos:

Um equipamento de automação Cellta ES Mek 7300 k é utilizado para as determinações


qualitativas e quantitativas das amostras colhidas dos pacientes.

7. Calibração:

A calibração dos equipamentos é realizada nas manutenções preventivas (de 6 meses a 1 ano),
manutenções corretivas quando necessária pelos técnicos AC LABOR – Acessória Cientifica.
A solicitação da manutenção pode ser agendada, ou conforme urgência.

8. Procedimento (passo a passo):

 Preparação das amostras:

Amostras de paciente: as amostras serão entregues no setor de hematologia (bancada de


registro de material) provenientes do ambulatório, UTI, pronto socorro, enfermaria da
Instituição Hospital Municipal de Senador Canedo, Hospital e Maternidade de Senador
Canedo (Unidade Alsueres – Hospital de enfrentamento a COVID-19). Avaliá-las quanto a
identificação, volume, coágulos e microcoágulos. Amostras mal identificadas devem retornar
ao setor administrativo. Amostras de pouco volume devem ser tratadas individualmente e seus
resultados avaliados. Amostras coaguladas serão rejeitadas incondicionalmente, devendo o
auxiliar de laboratório providenciar sua nova colheita conforme rotina preconizada.

 Preparação dos mapas de trabalho:

Retirar os mapas de trabalho conforme rotina preconizada. Fazer a separação dos mapas
priorizando: UTI, Enfermarias e Urgência e Emergência. Separar as amostras com os
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respectivos mapas de trabalho seguindo a prioridade estabelecida acima, identificar,


numerando seqüencialmente, os tubos de amostras com os respectivos mapas de trabalho.
Colocar os tubos já identificados nas racks, conforme prioridade e sequenciamento e iniciar a
rotina laboratorial conforme segue abaixo:

Figura 1: Analisador Hematológico Celltac Es Mek-7300 k

 Carregamento de amostras
Medição de Amostra no Modo Aberto

Na tela Ready verifique a configuração de: ID da amostra, ID do paciente e Tipo de amostra


e verifique se o modo Normal está selecionado para Modo de medição e Aberto (OPEN) para
o modo de amostragem.
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Coloque o bocal de amostra no recipiente da amostra de sangue, de modo que a ponta do bocal
de amostragem chegue perto, mas não se toque o fundo do recipiente da amostra para impedir
a aspiração, ou que possa causar danificação a agulha de aspiração.

Pressione o botão [ c contar];

A amostra é aspirada e a medição se inicia.

Medição de Amostra no Modo Fechado


Agite bem a amostra e o anticoagulante virando o tubo de amostra de cabeça para baixo pelo
menos 20 vezes, de modo que a amostra de sangue e o anticoagulante sejam misturados. Em
caso de Tubos a vácuo, não é necessário retirar a tampa do tubo, pelo contrário em casos de
tubos sem vácuo a tampa deve ser retirada (tubos de plástico por exemplo).

Na tela Ready, verifique a configuração de ID da Amostra, ID do Paciente e Tipo de amostra


e verifique se Normal está selecionado para está selecionado para Modo de medição e closed
para o modo de amostragem.

Pressione a tecla [ Ejetar] no painel frontal para abri o suporte do tubo;

Coloque o tubo da amostra selada a vácuo no suporte do tubo feche o suporte do tubo;

A medição se inicia automaticamente após o fechamento do suporte do tubo e abre


automaticamente após o término da medição.
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Obs: Quando a medição é concluida os dados da medição são armazenados na memória do


resultado numérico, junto ao histograma ,aparecendo na tela. Caso necessáreio a impressão
pode ser refeita.

TROCA DE DILUENTE:

 Pressione a tecla Preencher dil na janela de operação. Uma mensagem de


confirmação é exibida.
 Pressione a tecla sim para preencher o diluente. Uma mensagem “ Preenchendo o
diluente” e o tempo restante serão exibidos durante o preenchimento.
 Pressione a tecla OK para retornar a janela de operação, quando a operação for
realizada, na janela de alarme aparecerá a mensagem pronto.
Troca da Reagente lise

 Pressione a tecla Preencher lis na janela de operação. Uma mensagem de confirmação


é exibida.
 Pressione a tecla sim para preencher a reagente lise. Uma mensagem “ preenchendo
Hemolynac” e o tempo restante são exibidas durante o preenchimento.
 Pressione a tecla OK para retornar a janela de operação, quando a operação for
realizada, na janela de alarme aparecerá a mensagem pronto.
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Troca do Detergente

 Pressione a tecla Preencher det na janela de operação. Uma mensagem de


confirmação é exibida.
 Pressione a tecla sim para preencher o CLENAC e o detergente CLEANAC – 3. Uma
mensagem de “ preenchendo detergente” e o tempo restante são exibidos durante o
preenchimento.
 Pressione a tecla OK para retornar a janela de operação, quando a operação for
realizada, na janela de alarme aparecerá a mensagem pronto.

SERVIÇO E MANUTENÇÃO
Cronograma de Manutenção Preventiva Cronograma de Manutenção Execute os seguintes
procedimentos nos intervalos agendados:

Diariamente:

Verifique o volume de reagente, o papel de gravação e outros consumíveis;


Verifique o bocal de amostragem (modo aberto), os botões, as teclas e a superfície externa do
analisador;
Verifique a conexão do tubo de reagente;
Verifique a conexão do cabo de força e do condutor de aterramento;
Verifique a conexão ao instrumento externo (impressora, PC, leitora de código de barras);
Verifique o display da tela e a tela sensível ao toque (Calibre a tela sensível ao toque);
Verifique configurações de data e hora 9;
Verifique a precisão diária (ruído de fundo, meça o controle de hematologia);
Verifique as banheiras de medição e sub-banheiras;
Verifique o tubo da bomba a cada 200 contagens;
Execute limpeza pesada semanalmente (STRONG CLEAN – 26 minutos) ou a cada 300
contagens;
Realizar a limpeza rápida (Clean Flowcell - 12 minutos) todo final de plantão;
Verifique os filtros e as embalagens dos filtros Mensalmente ou a cada 1.000 contagens, o
que ocorrer primeiro;
Troque os filtros;
Limpe as banheiras de medição e sub-banheiras;
Limpe a unidade de lavagem e verifique o bocal de perfuração de tampa
Limpe a bandeja MC A cada quatro meses ou a cada 3.000 contagens, o que ocorrer
primeiro;
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Verifique os bocais de amostragem;


Troque o tubo da bomba a cada cinco anos ou a cada 25.000 contagens, o que ocorrer
primeiro;
Troque a válvula solenoide anualmente;
Troque o tubo da válvula de aperto;
Troque o anel em o de Enxague Conforme necessário;
Troque a embalagem do filtro;
Limpe as tampas da abertura;
Verifique a função de preparação;
Verifique a função de drenagem Manual do Operador MEK7300K 9.9 9;
Verifique a função de limpeza;

INICIAÇÕES DIÁRIAS

Verificação de Reagentes e Outros Consumíveis

Verifique se os seguintes reagentes especificados pela Nihon Kohden são usados;


Diluente ISOTONAC 3;
Detergente CLEANAC;
Detergente CLEANAC 3 (Somente para limpeza pesada);
Reagente de hemólise Hemolynac 3N;
Reagente de hemólise Hemolynac 5N;
Verifique se estes reagentes não estão vencidos;
Ao trocar os reagentes, descarte o reagente antigo e conecte o novo reagente, atualizando no
display a quantidade de reagente reposta na troca;
Não há peças danificadas ou sujas no exterior do analisador;
O bocal de amostragem, os botões e as teclas não estão danificados;
Não há vazamento do analisador;
Os rótulos não estão rasgados ou foram removidos;
Verificação dos Tubos de Conexão do Reagente Verifique se os tubos de reagentes não estão
danificados, curvados ou obstruídos;
Em caso de qualquer danificação entrar em contato com o técnico para a realização da
manutenção corretiva.

9. Controle de qualidade:

9.1 Interno:

Amostra do dia anterior (duas amostras normais) e reprodutibilidade (freqüência diária).


Repetibilidade (freqüência semanal). Os dados de controle de qualidade resultam na
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liberação dos equipamentos de automação e são revistos pelo responsável do setor e/ou
laboratório.

10. Valores de referência:

Hemácias em milhões/uL 4,0 - 9,0


Hemoglobina em g/dL 12,0 - 18,0
Hematócrito em % 33,5 - 52,0
Vol. Glob. Média em fL 80,0 - 100,0
Hem. Glob. Média em pg. 28,0 - 32,0
C. H. Glob. Média em % 31,0 - 35,0
RDW 11,6 - 14,0

Leucócitos : Adultos 4.000 - 9.000


4 a 7 anos 6.000 - 15.000
8 a 12 anos 4.500 - 13.000

% uL(mm3)
Promielócitos 0
Mielócitos 0
Metamielócitos 0 - 1
Bastões 0 - 2 0 200
Segmentados 28 - 78 1.200 7.000
Eosinófilos 0 - 10 0 900
Basófilos 0 - 0 200
Monócitos 0 - 10 0 900
Linfócitos 17 - 57 700 5.100
Plasmócitos 0

Plaquetas 150.0000 a 300.0000 10³/ul


PDW 15,0 – 17,0 %

11. Valores críticos:

São resultados que podem comprometer a vida do paciente. Devendo o médico assistente ser
informado imediatamente. Pacientes com resultados já conhecidos não necessitam informação
ao médico assistente.
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POP: H01

Priorizar:

Hematócrito: inferior a 15.


Hemoglobina: inferior a 5,0.
Leucócitos: inferior a 1.000 e superior a 100.000

12. Limitações do método:

12.1 Interferentes:

 Ligados a amostra:

Excesso de anticoagulante (EDTA): Causa desidratação dos eritrócitos (alterações


morfológicas) e alteração para menos do hematócrito (Erro pouco significativo nos contadores
eletrônicos).

Amostra de pouco volume: Pode causar hemo-diluição se o anticoagulante usado for líquido.

Pode provocar erro de diluição por aspiração incorreta do equipamento de automação. Anotar
no mapa de trabalho correspondente.

Sangue anticoagulado com heparina: Não deve ser usado para o leucograma (variação
significativa no número de linfócitos). Não deve ser usado para contagem de plaquetas. Pode
ser usado para o eritrograma. Se usado imediatamente após a colheita as diferenças são pouco
significativas. Anotar no mapa de trabalho correspondente.

Amostra com microcoágulos: Pode apresentar resultados errôneos por erro na diluição da
amostra. É provocar entupimento da tubulação do aparelho, sendo necessária a limpeza rápida
Clean Flowcell.

Na impossibilidade de nova colheita de material avisar o biomédico responsável e anotar no


mapa de trabalho correspondente.

Amostra lipêmica: interferência com hemoglobina (aumento). Anotar no mapa de trabalho


correspondente.

Amostra coagulada: Rejeição incondicional dos resultados. Providenciar nova colheita de


material.
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 Ligados ao equipamento de automação:

Erro na homogeneização da amostra por falha no sistema: Apresenta resultados menores ou


maiores dependendo da sedimentação do material. Nem sempre o resultado apresenta alarme
o que prejudica a avaliação.

Falha na aspiração da amostra: Resultados sempre com alarme. Repetir o exame.

Interferência por indução eletromagnética: Resultados sempre com alarme (*). Repetir o
exame.

Entupimento nas câmaras de diluição: Resultados das contagens tendem a zero. Proceder a
desobstrução das câmaras conforme descrito no POP. Repetir o exame.

Amostras hemolisadas: Os equipamentos de automação possuem mecanismos de


compensação afim de minimizar erros. Anotar no mapa de trabalho correspondente.

13. Interpretação dos resultados:

Exame de auxílio diagnóstico para doenças hematológicas e sistêmicas. Valores fora dos
limites de referência podem indicar: anemias, neoplasias hematológicas, reações infecciosas
e inflamatórias, acompanhamento de terapias medicamentosas, entre outras patologias.

14. Biossegurança:

Usar equipamento de proteção individual (luvas, óculos etc.). Fazer a descontaminação de


bancadas e equipamentos conforme as normas de segurança do laboratório. Descartar resíduos
de acordo com as Boas Práticas de Laboratório e com as normas federais, estaduais e locais.
Vide Manual de biossegurança.
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15. Bibliografia:

Bain, Barbara J. Células sangüíneas: um guia prático. 2.ed. – Porto Alegre: Artes Médicas,
1997.
Failace, Renato. Hemograma: manual de interpretação. 3.ed. – Porto Alegre: Artes Médicas,
1995.
Manual do operador Analisador Hematológico Automatizado MEK-7300K. Primeira Edição:
30 de julho de 2012 0614-904173 Impresso em: 30/08/2012. Responsável Técnico Sergio
Luis Cabral de Mederios.
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Informações:

Atividades Responsável Assinatura Data


Elaborado por: Sibelly Vaz Feliciano
Revisado por:
Aprovado por:
Liberado por:
Desativado por:

Distribuição:
Local Ass.responsável Data/distribuição Data/recolhimento

Revisões:

Revisado por: Assinatura Data

Desativado:

Data:_______/_______/_______

Desativado por:_____________________________________________________________

Motivo:____________________________________________________________________
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Conhecimento:

Colaboradores devem ler e dar ciência (por escrito).


Declaramos que lemos, compreendemos e seguiremos fielmente este procedimento:

Nome: Assinatura: Data: