Análise Instrumental

Aula 4. Instrumentação para

Espectrometria UV-Vis

Professor: Ayla Campos do Lago

 Estados energéticos em uma molécula

E = EELETRÔNICA + EVIBRACIONAL + EROTACIONAL

 Para cada estado eletrônico existem muitos estados vibracionais.

 Para cada estado vibracional existem muitos estados rotacionais.

Estados energéticos em uma molécula
Radiação micro-ondas
 Estados energéticos em uma molécula
Absorção Molecular
Absorção Atômica
Estados energéticos em uma molécula

Moléculas encontram-se muito próximas umas das

outras !!!!

• Em uma solução, analito e o

meio absorvem.

• Colisões
Absorção molecular no UV-Vis

Análise quantitativa
 Exemplo de cálculos
A cafeína apresenta comprimento de onda máximo de
absorção em 270 nm, e possui absortividade molar de
1,00 x 103 Lcm-1mol-1.

◦ Calcule:
1. Absorbância de uma solução 2,22x10-4molL-1 à 270 nm
quando medido numa cela de 1,25 cm.
2. A transmitância de uma solução 4,06 x 10-4 mol L-1
empregando a mesma cela de (1).
3. A absorbância da solução que tem a metade da
transmitância da descrita em (1).
Absorção molecular no UV-Vis

ε
 CÁLCULOS
1. A = bc  = 1,00 X 103 Lcm-1mol-1
c = 2,22 X 10-4 mol/L-1
b = 1,25 cm
A = 1,00 x 103 x 2,22 X 10-4 x 1,25 = xxxxx

2. A = -log T  -A = log T  T = 10-A

A = 1,00 x 103 x 1,25 x 4,06 x 10-4 = xxxxx
T = 10-xxx=xxxxx
3. A = 1,94
A = - log T  T = 10-xxx  xxxx (sol. 1)
metade de (1) = xxxxx  A = -log(xxxx) = xxxx
 CÁLCULOS
1. A = bc  = 1,00 X 103 Lcm-1mol-1
c = 2,22 X 10-4 mol/L-1
b = 1,25 cm
A = 1,00 x 103 x 2,22 X 10-4 x 1,25 = xxxxx

2. A = -log T  -A = log T  T = 10-A

A = 1,00 x 103 x 1,25 x 4,06 x 10-4 = xxxxx
T = 10-xxx=xxxxx
3. A = 1,94
A = - log T  T = 10-xxx  xxxx (sol. 1)
metade de (1) = xxxxx  A = -log(xxxx) = xxxx
 CÁLCULOS
 Determinação do teor de Ferro em águas de poços residenciais :

 Ministério da saúde, Portaria N0 2.914 de 12/12/ 2011, o LMP= 0,3

mg/L= 0,3 x10-3 g/L

510 nm
 CÁLCULOS
branco soluções de referência amostra
Qual a
concentração de
Fe em água???

c1 c2 c3 c4

adição de
fenantrolina

desenvolvimento
da reação
 CÁLCULOS

branco 4 mg/L 10 mg/L

 CÁLCULOS-Método da curva analítica

Absorbância

cFe / mg L-1 A

2,0 0,120
Concentração Fe (mg/L)
4,0 0,239
A da amostra = 0,296
6,0 0,359
A= 0,0598CFe + 0,0003
8,0 0,478
10 0,598 0,296 -0,0003= 0,0598CFe
CFe = 4,94 mg/L de Fe
MÉTODOS DE CALIBRAÇÃO
MÉTODOS DE CALIBRAÇÃO
MÉTODOS DE CALIBRAÇÃO
MÉTODOS DE CALIBRAÇÃO
MÉTODOS DE CALIBRAÇÃO
MÉTODOS DE CALIBRAÇÃO
MÉTODOS DE CALIBRAÇÃO
Coeficiente de determinação (regressão)
Coeficiente de correlação linear = 0,999
Instrumentação UV-Vis
 Espectrofotômetro

 Instrumento que mede a transmissão de luz através de

uma substância (analito - molécula orgânica ou inorgânica).

P0 P
Seletor de
Fonte Amostra Transdutor
Comp. de onda

Se a luz é absorvida, a potência

radiante da luz é diminuída (P < P0) Leitor (Display),
computador
 Configuração dos Espectrofotômetros
 Feixe simples

 Feixe duplo
 Fontes de radiação

UV tungstênio
Intensidade

deutério

Visível

200 300 400 500 600 700 800 900 1000 1100  / nm
Fontes de radiação
Lâmpada de deutério
• Região espectral: ultravioleta
• (160 a 375 nm).
• Excitação elétrica do deutério
ou hidrogênio (D2* ou H2*)

H2 + Ee → H2*

H2* → H’ + H’’ + h
Fontes de radiação

Lâmpada de tungstênio:
• Filamento de W aquecido
• T de 2000 a 3000K
• Radiação do corpo negro
• Radiação 500-2500nm (Vis e IFV)
Fontes de radiação Lâmpada de tungstênio-
halogênio
• Filamento de W aquecido
• W(g) + I2(g) WI2(g)
• Termo-emissão: Corpo
Negro, T ~3500 K
• Região espectral:UV/
Visível/IV próximo (240 a
2500 nm).
• Maior poder de emissão
• Maior tempo de vida
Seletores de comprimento de onda
Filtros

80

filtro de
60 interferência
~ 10 nm
T (%)

40

20 filtro de absorção
~ 50 nm

400 450 500 550

 / nm
 Seletores de comprimento de onda
•Filtros ópticos:

•Isolar determinadas regiões do espectro

•Transmitem somente o comprimento de onda de interesse

Absorção:
• Somente região do Visível

• Simples, baixo custo e robusto

 Seletores de comprimento de onda
•Filtros ópticos:

❑ Interferência:

região do Visível, UV e IFV

Interferências construtivas

Remoção dos λ destrutivos

Seletores de comprimento de onda
Seletores de comprimento de onda
Monocromadores
espelhos

rede de
fenda de difração fenda de
entrada saída

fenda de lente prisma

entrada lente fenda de
saída
 Seletores de comprimento de onda
•Monocromadores:

• Fenda de entrada
• Lente colimadora ou espelho (direciona o feixe)
• Prisma ou Redes (difração ou reflexão)
• Fenda de saída
 Seletores de comprimento de onda
•Monocromadores:

•Prismas
Atenção para o material do prisma
 Seletores de comprimento de onda
•Monocromadores:

•Redes
 Celas de medida ou Cubetas
Material Transparência Aplicabilidade

quartzo 150-3000 nm UV, visível

Vidro 375-2000 nm visível
plástico 380-800 nm visível

0,1 cm < b < 5 cm

0,1 cm < b < 10 cm
10 L < V < 200 L
 Celas de medida ou Cubetas

O vidro absorve fortemente os comprimentos de onda da região do UV. Abaixo

de 300 nm toda a radiação é absorvida. O quartzo começa absorver fortemente
somente abaixo de 200 nm.
 Transdutores
• Transdutor: É um tipo especial de detector que converte
sinais químicos ou físicos (ex. intensidade de luz) em
sinais elétricos tais como em corrente elétrica, carga
elétrica ou voltagem.

• Características desejáveis:
• - Resposta rápida mesmo para baixos níveis de radiação
incidente.
• - Responder com boa sensibilidade em uma ampla faixa
de comprimentos de onda
• - Alta razão sinal/ruído
• - Proporcionalidade entre sinal produzido e intensidade
de luz incidente
 Transdutores
❑Fototubo

• Princípio de funcionamento: emissão de elétrons

• O catodo é recoberto com material fotoativo (metal alcalino ou
óxido de metal alcalino)
 Transdutores
❑Tubo fotomultiplicador

Princípio de funcionamento: Emissão de elétrons

Amplificação do sinal com a utilização dos dinodos
 Transdutores
❑Fotodiodos
 Transdutores
❑Fotodiodos

Radiação incidente

• Radiação no UV ou Vis, (energéticas) criam elétrons e vacâncias adicionais

• Aumento da condutividade proporcional à radiação incidente