Questionário: Métodos de análise 

1. O que você entende sobre fotometria de emissão?

A medição da luz, através do “brilho” que transmite e é percebido pelo olho
humano.

2. Quais as substâncias que podem ser dosadas por esse método no

laboratório de  Bioquímica?
Existem mais de 400 testes diferentes, indo dos mais básicos como dosagem
de sódio, cálcio, glicose aos mais especializados como de drogas,
hormônios, vitaminas e etc.

3. Qual o fundamento da fotometria de absorção?

Fotometria de absorção é a medida de intensidade luminosa da luz absorvida
por uma superfície a partir de uma fonte.

4. Qual a lei que rege a fotometria de absorção? Qual o seu

fundamento?
A lei de Beer. É uma relação empírica que relaciona a absorção
de luz com a concentração da solução, sendo que a solução
não pode ser muito concentrada (>10−2 mol/L).

5. Defina transmitância e absorbância.

Transmitância é a fração da radiação incidente que é transmitida
pela solução e absorbância é a transmitância de forma
logarítmica.

6. Que fatores devem ser considerados na escolha do comprimento de onda

para uma  determinação fotométrica?
É necessário selecionar um filtro de absorção apropriado, um filtro de
interferência, cunhas de interferência, e o monocromador. Na pratica, o
comprimento de onda escolhido é usualmente o pico máximo de
absorbância, assim atinge maior sensibilidade.
7. Que resultados práticos podem ser obtidos da realização de uma curva de
padronização?
A calibração do espectrofotômetro.
8. Qual o princípio da eletroforese? Qual a sua aplicação em laboratório
clínico?
Consiste na migração de partículas de acordo com sua carga e/ou peso
molecular. As moléculas positivas migram para o polo negativo(cátodo) e as
moléculas com carga negativa migram para o polo positivo (ânodo).
No laboratório clinico utilizamos para separar diversas moléculas orgânicas
como: proteínas, RNA, DNA, lipoproteínas entre outras.
9. O que você entende sobre espectrofotometria de absorção atômica? Qual a
sua  aplicação?
É um método de análise qualitativo e quantitativo da presença de elementos
em determinada amostra, através da emissão de luz. Pode ser utilizado em
amostras de baixas concentrações para detectar e talvez ate dosar a presença
de metais, ligas metálicas e etc.
10. Sobre cromatografia, responda:
a) Para que ela é utilizada?
Ela é utilizada na determinação de moléculas orgânicas.

b) Qual o seu princípio?

A cromatografia possui duas fases: a fase móvel e a fase estacionária. A fase
móvel passa pela fase estacionária e as partículas ficaram retidas dependendo
da sua afinidade com a as fases, assim, conseguimos separar componentes de
uma mistura, identificar substâncias e purificar amostras.
c) Cite 4 exemplos de cromatografia
Temos dentre outras a cromatografia em coluna, cromatografia em papel,
cromatografia em camada delgada e a cromatografia planar.
10) Na dosagem de uréia em um soro, obteve-se uma leitura em absorbância
igual a  0,115. Foi obtido um fator igual a 280 para um padrão de 50 mg/dL.
Com estes dados,  calcule:
A) a concentração de uréia em mg/dL.
1,36 mg/dl.
B) Se esse resultado tivesse sido obtido em amostra diluída 1:10, qual
seria a  concentração de uréia?
0,1364 mg/dL.
11) Calcule a concentração da glicose em um soro, sabendo-se que a
absorbância foi  igual a 0,428, enquanto um padrão de 100 mg/dL dosado nas
mesmas condições deu um valor em absorbância igual a 0,200.
89,88 mg/dL
12) Na dosagem de creatinina em dois soros obteve-se as seguintes leituras
em  transmitância: Soro A – 58%; Soro B – 76%. Com estes dados, em qual
dos dois soros  você espera obter maior concentração de creatinina? Justifique.
O soro A pois a absorbância é a função logarítmica da transmitância, portanto
quanto menor o valor de transmitância maior é o valor da absorbância. Já a
absorbância tem relação empírica a concentração da amostra.