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1.

Objetivo
A autoclave é destinada para a esterilização de materiais e utensílios.

2. Campo de Aplicação
O PBS possui muitas aplicações, pois é isotônico (tem a mesma pressão
osmótica) e não é tóxico em relação às células. Ele pode também ser
utilizado para diluir diferentes substâncias, ou como uma solução para
limpeza celular. Para garantir uma prolongada armazenagem a seco, de
biomoléculas imobilizadas, tais como proteínas, proteínas enzimáticas etc., o
PBS é usado como um diluente biomolecular, já que pode manter água em
torno das biomoléculas imobilizadas em uma superfície sólida. Este fino filme
de água formado, previne a desnaturação das biomoléculas ou mudanças
conformacionais
3. Definições
 phosphate buffered saline (abreviado PBS) é uma solução
tampão comumente utilizada em bioquímica. É uma solução salina,
contendo cloreto de sódio, fosfato de sódio e, em algumas
formulações, cloreto de potássio e fosfato de potássio.
4. Descrição da atividade

5. Instrumentos, Equipamentos e Materiais Utilizados


- Todo material de laboratório que necessita de esterilização.

6. Procedimentos

Materiais Tempo de Autoclavação


Para esterilização 15 min
Para descontaminação 20 min
(queima)

1 - Abrir a tampa e colocar água na caldeira até atingir o descanso do cesto e introduzir o
material a ser esterilizado, devidamente empacotado com a fita de autoclave.
2 - Fechar a tampa apertando os manípulos (B) em forma de cruz;
3 - Abrir o registro de vapor (C) e ligar a chave comutadora no calor (MAX);
4 - Aguardar a saída de vapor no bico do registro (E) e em seguida fechá-lo;
5 - Atingida a pressão de trabalho (A), que deverá ser ajustada deslocando-se o contra peso
(D) para frente (menor pressão) ou para trás (maior Pressão), mudar a chave comutadora para
o calor médio (MED) para manter a pressão;
6 - Terminando o tempo de esterilização, desligar a chave comutadora (DESL), abrir o
registro de vapor (C) esperar o manômetro (A) voltar a zero e em seguida abrir a tampa.
7. Normas e Condutas de Segurança (Biológica, Química, Física, Ocupacional e
Ambiental)
-Abrir com cuidado a autoclave e somente quando o manômetro indicar ausência de pressão
dentro da mesma.
- Não ultrapassar a pressão máxima de trabalho 1,5Kgf/cm2
- Sempre manipular a autoclave utilizando os EPIs indicados no POP XX
- Não indicada para ensaios com inflamáveis, sob risco de explosão.

8. Equipamentos de Proteção Individual (EPI) e de Proteção Coletiva (EPC)


1- O uso de equipamentos de Proteção Individual (Luvas, máscaras, jaleco) é obrigatório para
o manuseio de todos os materiais, tanto no momento da distribuição quanto no momento da
retirada dos materiais da autoclave.

9. Manuseio e Transporte de Material e Amostra Biológica


O uso de EPIs é obrigatório para manuseio e acondicionamento das amostras biológicas no
interior da autoclave.

10. Manuseio e Transporte de Substâncias Químicas


Não se aplica.

11. Procedimentos em caso de acidentes


Em caso de acidentes com agente biológico no momento da entrada ou da saída de material
da autoclave, os procedimentos de descontaminação do equipamento e do ambiente devem
ser imediatamente adotados.

11.1 Exposição acidental aos agentes biológicos


Os agentes biológicos devem ser corretamente identificados para que os procedimentos
adequados sejam adotados em caso de acidentes
11.2 Exposição acidental a agentes químicos
Não se aplica

12. Documentos complementares


POP 03 - EPIs

13. Interferentes
- - Limpeza inadequada e cano de eliminação da água não devidamente fechado.
- Disjuntor da rede elétrica encontra-se desligado
- A falta de abastecimento de água a caldeira até cobrir o descanso do cesto.
- A utilização de instrumentos e lixo indevidamente empacotados e sem indicadores de
esterilização.
- Ultrapassar a quantidade limite de materiais dentro da autoclave, o que compromete a
esterilização.

14. Elaboração
Profa. Dra. Julliana Ribeiro Alves dos Santos

15. Referências
Manual do fabricante – Autoclave Vertical Linha CS (75 L) – Prismatec.
16. Histórico de Alterações

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