FARMACOGNOSIA

Profa Dra. Daniela Fernanda de Freitas

Profa.
prof.daniela.freitas@unincor.edu.br
@profadradaniela

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CROMATOGRAFIA

“Método físico-químico de separação dos componentes de uma

mistura, realizada por meio da distribuição destes componentes
entre duas fases, que estão em contato íntimo. Uma das fases
permanece estacionária, enquanto a outra move-se através dela.
Durante a passagem da fase móvel sobre a fase estacionária, os
componentes da mistura são distribuídos entre as duas fases, de
tal forma que cada um dos componentes é seletivamente retido
pela fase estacionária (tempo de retenção), resultando em
migrações diferenciadas destes componentes”
componentes

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CROMATOGRAFIA

•Pode ser usada para separação, identificação e quantificação de

substâncias.

•Chrom (cor) + Graphe (escrever)

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CROMATOGRAFIA

•1906: Tswett – separação dos componentes de extratos de folhas

com colunas de vidro recheadas com vários sólidos pulverizados e
arrastou estes componentes com éter de petróleo.

•1930: “Época moderna da cromatografia”

•Troca iônica
•Coluna

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Cromatografia

• 1952: surgimento da cromatografia gasosa e a líquida de alta eficiência.

• 1960: aperfeiçoamento das técnicas de CLAE

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Cromatografia em Camada Delgada (C.C.D.)
( por adsorção

•É utilizada quando se deseja uma

separação rápida e uma identificação visual
dos componentes de uma mistura.

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C.C.D.

•VANTAGENS:
•Rápida execução
•Fácil entendimento
•Baixo custo
•Grande reprodutividade
•Versatilidade, podendo ser utilizada para separar
substâncias hidrofóbicas e hidrofílicas

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C.C.D. – DISPOSITIVOS EMPREGADOS

Suporte: lâmina de vidro onde se aplica a fase estacionária

•Suporte:
(geralmente 20x20 cm).

Fase estacionária (FE): Adsorvente variados

•Fase
•Sílica (ácido Sílico amorfo); material altamente poroso; separação
de composto lipofílico como aldeídos, cetonas, fenóis, ác. Graxos,
aminoácidos, alcalóides, terpenóides e esteróides.

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C.C.D. – DISPOSITIVOS EMPREGADOS

Tipos de Sílica:
•“G”: com aglutinantes (10 – 15% de gesso)
•“H”: livre de aglutinantes
“F”: análise de substâncias fluorescentes
•“F”:
•Alumina
•Terra diatomácia

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ATIVAÇÃO DAS CROMATOPLACAS

Temperatura elevada, por tempo prolongado, torna a maioria

•Temperatura
dos adsorventes mais ativos.

Ex: sílica e alumina: ativadas de 105 a 110°C

•Ex: 110 por 30 a 60 min.

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C.C.D. – DISPOSITIVOS EMPREGADOS

Fase móvel (FM): diversos solventes que são empregados de forma

•Fase
pura ou combinada. A polaridade desta é fundamental.

Aplicação de amostra: devem estar sob forma de soluções obtidas

•Aplicação
de solventes bastantes voláteis.
A aplicação pode se feita empregando-se
•A empregando micropipetas,
microsseringas ou capilares.

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FASE MÓVEL

•Hexano
•Ciclohexano
•Tetracloreto de carbono
•Benzeno
•Tolueno
•Diclorometano
Metanol
•Metanol

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13
C.C.D. – DISPOSITIVOS EMPREGADOS

•A quantidade da amostra aplicada não é fator fundamental.

•Esta aplicação deverá ser feita 2,0 cm acima da borda inferior

da placa (acima do nível da FM).
FM)

•O desenvolvimento ou corrida cromatográfica é geralmente

ascendente e unidimensional, realizado em cubas
cromatográficas contendo a FM.
FM

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10 cm

2 cm

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REVELAÇÃO-C.C.D.

Os reveladores empregados podem ser físicos ou químicos

•Os

•Físicos: luz ultravioleta

Químicos: substâncias químicas borrifadas uniformemente sobre

•Químicos:
a placa: produto corado

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UTILIZAÇÃO-C.C.D.

•Pode ser empregada para aplicação analítica ou preparativa,

podendo ser empregada para análise quali e quantitativa.

•A quantificação pode ser efetuada sobre a própria

cromatoplaca: medida da área e intensidade das manchas
que serão comparadas com uma substância padrão.

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Fator de retenção

•A análise qualitativa de uma substância realiza-se através de

seu Rf (fator de retenção), que se determina usando a
expressão:

Distância percorrida pela substância

Rf=
Distância percorrida pela frente do eluente

Rf: quociente entre a distância percorrida simultaneamente entre o ponto de

aplicação até o centro de maior concentração da mancha do soluto e até a frente
da fase móvel 18
FATOR DE RETENÇÃO

•É uma constante física de uma determinada substância,

desde que se observem as características da fase estacionária,
a qualidade e quantidade da fase móvel, a temperatura, o
volume e a concentração da substância aplicada.

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TRABALHO FARMACOGNOSIA

•Os tipos de Cromatografia

•Tipos: conceitos
•Vantagens e desvantagens
•Normas ABNT
Individual/ Dupla: 11/09/2010
•Individual/

Não serão aceitos trabalhos entregues fora da data.

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LEITURA COMPLEMENTAR

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