COLORAÇÕES: Coloração de Gram: 1.preparar o esfregaço; 2.fixar rapidamente no Bico de Bunsen; 3.cobrir com cristal violeta (1min.); 4.

colocar lugol (1 min.); 5.descorar com álcool-cetona; 6.cobrir com safranina ou fucsina (30 seg.); 7. lavar; 8. secar; 9. examinar ao microscópio em objetiva de imersão; 10. resultado: bactérias Gram +: roxo escuro bactérias Gram -: avermelhadas (rosadas). Wirtz-Conklin Coloração de Esporos Algumas bactérias são capazes de formar células de repouso muito resistentes, denominadas esporos ou endosporos. A formação de esporos é pouco comum entre bactérias patogênicas, ocorrendo principalmente nas espécies saprófitas do Gênero Bacillus, o qual apresenta uma espécie patogênica, o B. inthracis. O gênero Clostridium, bacilos Gram-positivos anaeróbios, também formam esporos. Os esporos consistem em um cerne central denso, um córtex fibrilar e uma capa externa. Numa cultura em que há bacilos esporulados e outros ainda nãio portadores de esporos, dá-se a estes últimos o nome de formas vegetativas, ao passo que os esporos correspondem às formas de repouso ou resistência. Quando os esporos são colocados em meio nutritivo conveniente, germinam retornando à forma vegetativa. O mecanismo de formação do esporo pode ser resumido em: a. condensação do cromossomo bacteriano no lugar correspondente ao pré-esporo; b. formação de um septo transversal que isola o pré-esporo do corpo bacteriano; c. crescimento da parede transversal em torno do pré-esporo e formação de uma membrana própria; d. maturação do pré-esporo com a elaboração de uma capa lipoprotéica (exósporo); e. liberação do esporo. Os esporos são muito letais aos efeitos do calor, dessecamento, congelamento, substâncias químicas tóxicas (anti-sépticos e desinfetantes) e radiações, do que as formas vegetativas. Material necessário: - duas lâminas para microscopia; - suporte para lâminas; - corante verde-malaquita; - corante safranina; - cultura de bactérias esporuladas( B. subtilis); - Bactéria para coloração de Gram; - lápis para vidro; - microscópio, óleo de imersão, papel absorvente. Procedimentos: a. fazer um esfregaço da cultura bacteriana, fixar e corar pelo Gram. b. fazer um esfregaço da cultura bacteriana, fixar e corar pelo Wirtz-Conklin, conforme segue: - corar por 5 min. com solução de verde malaquita a quente; - deixar esfriar e lavar em água;

bateria para coloração de Ziehl fucsina de Ziehl álcool-ácido azul de metileno . Não deixar ferver nem secar. corar o fundo durante 30n seg. b. de colorações especiais. O mecanismo da coloração de Ziehl-Neelsen parece estar relacionado com a estrutura e composição da parede celular das micobactérias.e núcleos : vermelho .lavar em água.. MÉTODO DE GRAM : composição química e integridade da parede celular 1 . para a qual a parede celular é relativamente impermeável à temperatura ambiente. A parede celular destas bactérias permite coloração pela fucsina apenas quando a temperatura é elevada (coloração a quente). 6 . . contrastando com outros microorganismos e núcleos celulares em azul. dentro da placa de Petri. c. 7 . . o corante (fucsina) fica numa fase imiscível na água. bactérias Gram .lavar em água corrente . d.CONKLIN : evidenciação de esporos 1 . ocorrendo precipitação da fucsina. 5 . tornando as células coradas resistentes a descoloração pelo álcool-ácido.. Bactérias Gram + : roxo .Resistentes: Ziehl-Neelsen Mecanismo de coloração para ácido-resistentes: As micobactérias dificilmente adquirem colorações convencionais (Gram). Resultado: esporos coram-se em verde. e. formas vegetativas em vermelho. Material necessário: .microscópio. . com safranina a frio. corar com fusina de Ziehl concentrada. 2 .15 segundos ) . necessitanto. 3 .esfregaço preparado de material de escarro de paciente tuberculoso já fixado. papel absorvente.esfregaço fixado pelo calor .grampo para lâminas. com solução de lugol . . Correr exaustivamente o campo até encontrar bacilos corados em vermelho.suporte para lâminas.diferenciar com álcool ( tempo delicado .corar com 1 min.lavar e secar . aproximadamente 15 seg. lavar em água corrente. Coloração de Bactérias Álcool-Ácido. observar em imersão. deixar secar e observar em imersão. lavar e secar. 4 . ricas em lipídeos (ácido micólico). durante 5 min. escorrer o corante e diferenciar com álcool-ácido (álcool a 95% e ácido clorídrico a 1%).lavar em água corrente .corar por 1 a 2 min. com solução aquosa diluída em azul de metileno. com solução violeta genciana . aquecendo a lâmina até a emissão de vapores. MÉTODO DE WIRTZ .escorrer o corante e cobrir por 1 min. f. portanto.corar o fundo rapidamente com fucsina diluída ( fucsina de Gram ) . óleo de imersão. . Tempo delicado. Técnica: a. Nas micobactérias coradas pelo método de Ziehl-Neelsen.

3 . 6 . 3 . com solução aquosa safranina a 0. . Corpos bacterianos : verde claro . Célula : marrom claro . durante 3 a 6 minutos . outras bactérias e núcleos : azul . enxugar com papel . .fixar na chama três vezes . 3 .5 % . com solução aquosa de verde de malaquita a 0. violeta de genciana e fucsina fenicada.resistentes : vermelho . 5 .resistentes 1 .LAYBORN : evidenciação de grânulos de polifosfato metacromáticos 1 . 2 . MÉTODO DE FONTANA .corar com fucsina de Ziehl concentrada .corar o fundo rapidamente com solução diluída de azul de metileno .coloração de gram.lavar e secar . 5 .esfregaço . 5 . DE GRAM Corantes utilizados para pesquisa de bactérias gram positivas e gram negativas (coloração de gram) . 7 . 2 . granulações : violáceas .5 % .escorrer e diferenciar com álcool clorídrico a 1 % ( tempo delicado ) .escorrer e .lavar com água corrente e depois com água destilada .cobrir o esfregaço com líquido de Ruge . renovar o fixador ( para lavar a hemoglobina dissolvida ) e deixar por 1 minuto. seco ao ar . 4 . Esporos : verde .cobrir com solução de prata e aquecer até emissão de vapores durante meio minuto .TRIBONDEAU : evidenciação de flagelos 1 . flagelos : marrom escuro . corpos bacterianos e detritos : vermelho . 3 .lavar rapidamente com água corrente . COL. 5 .corar a quente . por 5 min. 4 .contracorar 1 a 2 min.lavar . MÉTODO DE ZIEHL .lavar cuidadosamente em água corrente . 4 . cobrir com lugol forte por 1 minuto .NIELSEN : coloração de bacilos ácido .esfregaço fino . SOLUÇÃO DESCORANTE P/GRAM corante utilizado para pesquisa de bactérias gram positivas e gram negativas .lavar em água corrente .corar por 3 a 5 minutos com corante de Layborn ( azul de toluidina + verde malaquita ) . aquecendo até emissão de vapores . Bacilos ácido .composto de álcool acetona.filtro e secar sem passar na chama .lavar e secar ao ar . aquecendo a lâmina até emissão de vapores . lugol fraco. 2 . 4 .2 .lavar e secar .mordençar com solução B . MÉTODO DE ALBERT . sem lavar .

onde cora o núcleo da célula e destaca a cromatina).Aq) Corante destinado a histologia. onde cora os citoplasmas na presença de queratina). composto dos seguintes corantes: hematoxilina de harris. E A 36 Corante utilizado para histologia (coloração de papanicolaou. LUGOL FRACO Corante utilizado para pesquisa de bactérias gram positivas e gram negativas (coloração de gram). CRISTAL VIOLETA (GRAM) Corante utilizado para pesquisa de bactérias gram positivas e gram negativas (coloração de gram). SAFRANINA Corante destinado a coloração de gram. VIOLETA GENCIANA P/GRAM Corante utilizado para pesquisa de bactérias gram positivas e gram negativas (coloração de gram). . HEMATOXILINA DE HARRIS corante utilizado para histologia (coloração de papanicolaou. ORANGE G-6 Corante utilizado para histologia (coloração de papanicolaou. CONJUNTO DE COLORAÇÃO DE PAPANICOLAU Conjunto de corantes utilizados para histologia (coloração de papanicolau). onde cora os citoplasmas acidófilos e basófilos).FUCSINA FENICADA (GRAM) Corante utilizado para pesquisa de bactérias gram positivas e gram negativas (coloração de gram). AZUL DE METILENO(1%Sol. ea 36 e orange g-6. AZUL DE TOLUIDINA 1% Corante destinado a histologia.

AZUL DE METILENO LOEFFLER Corante destinado a pesquisa de barr (bacilo álcool-ácido resistente .ZIEHL-NELSEEN Corantes destinados a pesquisa de b. CONJ. FUCSINA FENICADA (GRAM) Corante utilizado para pesquisa de bactérias gram positivas e gram negativas (coloração de gram). na coloração de Ziehl-Nielsen.FONTANA TRIBOND.CORANTE DE MAY GRUNWALD Corante destinado a hematologia. CORANTE DE WRIGHT Corante destinado a hematologia.1%P/IMUN. foi corado pela fucsina ácida a quente e diferenciado com álcool acidulado (técnica de Ziehl-Nielsen). LUGOL FORTE Corante destinado a parasitologia.COL.a. Corantes para coloração de espiroquetas pela impregnação com a prata. AZUL DE CRESIL BRILHANTE Corante destinado a contagem de reticulócitos. CONJ.coloração de ziehl neelsen).coloração de ziehl neelsen . CORANTE DE LAYBOURN Corante destinado a pesquisa de bacilo diftérico na coloração de Albert Laybourn. AZUL DE EVANS 0.composto de álcool ácido. Para uso no preparo das diluiçoes nas técnicas de imunofluorescência indireta. PONCEAU S Para coloracão na técnica de eletroforese. (bacilo álcool-ácido resistente). Este corte de pele.COL. 3. fucsina fenicada e axul de metileno loefler.r. Hanseníase virchowiana da pele. que se coraram com a fucsina.r. Os bacilos. não são descorados pelo álcool acidulado e aparecem claramente em . de um caso semelhante ao da lâmina A.

A formação de globias é exclusiva da hanseníase virchowiana. Azul de Cresil Brilhante Corante utilizado na coloração de Reticulócitos. Papanicolau . Rees e Ecker Líquido utilizado para diluição e contagem de plaquetas. May Grunwald Corante utilizado em Hematologia anterior ao Giemsa para contagem diferencial da série branca e observação da morfologia dos eritrócitos. Hematoxilina de Harris e Orange G. não sendo observada. Observação da morfologia dos eritrócitos.vermelho (daí o termo bacilos álcool-ácido resistentes ou BAAR).Conjunto de Coloração Composto pelos corantes EA36. . Nas globias. Orange G Corante utilizado na coloração de Papanicolau. os bacilos estão unidos entre si por uma substância chamada gléia. O restante do tecido fica corado em azul pálido por azul de metileno. Álcool Acetona Utilizado como descorante para a coloração de Gram. GIEMSA Corante utilizado em hematologia posterior ao May Grunwald para contagem diferencial da série branca. Líquido de Hayem Líquido utilizado para diluição e contagem de eritrócitos. Álcool Ácido (descorante para BAAR) Descorante para a coloração de Ziehl-Neelsen. por exemplo.usado em coloração citológica humana. na tuberculose ou em micobacterioses atípicas. Líquido de Tuerck Líquido utilizado para diluição e contagem de leucócitos. Os bacilos de Hansen são vistos isoladamente ou em aglomerados chamados globias no citoplasma dos macrófagos (células de Virchow).

Diagnóstico presuntivo de Corynebacterium diphteriae. Fucsina Fenicada (Gram) Corante destinado na coloração de Gram para corar os microorganismos Gram negativos. células e leucócitos. Ziehl-Neelsen Conjunto de coloração destinado à pesquisa de bacilos álcool-ácido-resistente (BAAR). destinado à pesquisa de bactérias com granulações metacromáticas.Azul de Gabbet Corante destinado à coloração de Mycobacterium lepral na pesquisa de Hanseníase. para coloração de Ziehl-Gabbet destinado à pesquisa de Mycobacterium leprae. . destinado à pesquisa de Mycobacterium leprae. destinado a reforçar a ação do corante. Estes coram-se de vermelho e os demais elementos celulares e bactérias em azul. Fucsina de Ziehl-Gabbet Corante utilizado juntamente com o azul de Gabbet. Similar ao Cristal Violeta. Azul de Metileno Concentrado Corante utilizado na coloração de Ziehl-Neelsen. Lugol Fraco Lugol utilizado na coloração de Gram com função de mordente. Violeta de Genciana para Gram Corante utilizado na coloração de Gram. Ziehl-Gabbet Conjunto de coloração à frio. Azul de Metileno de Loeffler Corante utilizado na coloração de Albert Laybourn. Cristal Violeta Corante destinado na coloração de Gram para corar os microrganismos Gram positivos.

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