Universidade Federal da Integração Latino-Americana

Engenharia Química

Espectrofotometria na região
UV-VIS

Profª. Drª. Gilcélia A. Cordeiro

 Conceitos Básicos

Espectrometria: Termo analítico para quantifcaaço de

substâncias através de medidas baseadas na luz e outras
formas de radiaaço eletromagnética (interaaço da
radiaaço com a matéria);

Métodos Espectroscópicos: Qualquer técnica empregada

para o levantamento de dados físico-químicos através de
energia radiante incidente em uma amostra;

Medem a quantidade de radiaaço emitida ou absorvida

pelas substâncias de interesse = concentraaço da espécie;
 Propriedades da Radiação Eletromagnética
Comprimento de onda (): é distancia linear entre dois
máximos ou mínimos de onda (duas cristas ou dois vale
Medido em diferentes unidades:
 RADIAÇÃO ELETROMAGNÉTICA

•Comprimento de onda (λ)

f= c/ λ
•Período (p) = tempo
c = velocidade da luz no vácuo 3.1010
necessário para completar
cm s-1
um ciclo
•Freqüência (f) = ciclos.s-1 ou
Hertz

Energia (E)
E = h.f
unidades
E = h.c/λ
nm = 10-9 m
Å= 10 -10 m h= constante de Planck (6,63 × 10-34 m2 kg. s-1 )
RADIAÇÃO ELETROMAGNÉTICA
Espectro visível da luz de uma lâmpada difratada por um prisma:
(a) esquema e (b) fotografia.

Exemplo de difração de luz produzida

na natureza.
 Interação da radiação com a matéria
O que faz com que alguns raios interajam e outros passem
através das coisas?

Dois requerimentos devem ser observados para que uma

determinada radiação possa ser absorvida por uma
molécula:

1 - A radiação incidente deve ser de frequência equivalente

aquela rotacional ou vibracional, eletrônica ou nuclear da
molécula,

2 - A molécula deve ter um dipolo permanente ou um dipolo

induzido, ou seja, deve haver algum trabalho que a energia
absorvida possa fazer.
 Aplicações da espectroscopia

energia frequência de infra- visível ultra- raios-X raios-

radiante rádio vermelho violeta
_______________________________________________________________________________________
Técnica NMR Absorção Absorção Absroção Absorção Técnicas radio-
Analítica Microondas Fluorescência Difração métricas
Fosforescência
Fotometria de
chama
Espectroscopia de
emissão
_______________________________________________________________________________________

Interação desintegração
Rotação vibração e excitação eletrônica dos elétrons desintegração
com a do rotação das átomos de uma moléculs internos são do núcleo
matéria núcleo moléculas deslocados
_______________________________________________________________________________________
 Leis de absorção

Energia radiante
P0 P

Se parte da energia é absorvida pela amostra temos, P < P0

Transmitância = P/ P0 T% = P/ P0 x 100
Pierre Bouguer (1729) e de Johann Heindrich Lambert (1760)
duas leis fundamentais:
- A intensidade de luz (monocromática) transmitida por um corpo
homogêneo é proporcional à intensidade de luz incidente. Isto é:
- A intensidade de luz (monocromática) transmitida decresce
exponencialmente com o aumento da espessura da camada do
corpo homogêneo
P/P0 = 10 –cba
c= concentração; ba= constante

T = 10-cba
log T = log 10 -cba
log T = -cba log 10
log T = -cba -log T = cba
log 1/T = cba
log P0/P = Absorbância = -logT
 Lei de Lambert- Beer

log P0/P = -logT = A =bc

A = absorbância ou absorvância

A = ε b c quando a concentração é expressa em molL-1

ou

A = a b c quando a concentração é expressa em outra unidade

a/ ε = absortividade/absortividade molar
b= caminho óptico
c= concentração
Representação gráfica da Lei
de Beer, para soluções de
KMnO4 em  = 545 nm e um
caminho óptico de 1 cm.

a) Em %Transmitância %T
versus c

b) Em Absorbância A versus c
 Absortiviade (a) ou absortividade molar

Característica de uma substância para um determinado comprimento de onda

e um determinado solvente

Cu +2 Cu (NH3)4 +2 Cu-DEDC
λmax 800 600 436
ε 20 80 10.000

A = abc

Absortividade – capacidade da molécula em absorver energia

Fenômenos envolvidos quando um feixe (monocromático) de radiação incide
sobre uma cubeta contendo uma solução que absorve no comprimento de
onda incidente.

Io = Ir + Ie + Ia + It Io = Ia + It
Io = Intensidade do feixe incidente,
Ir = Intensidade do feixe refletido, resultado das diferenças do índice de refração entre o
absorvedor e o ambiente,
Ie = Intensidade do feixe espalhado, resultado de um meio não homogêneo (suspensão) e/ou
de flutuações térmicas,
Ia = Intensidade do feixe absorvido pelo meio
It = Intensidade do feixe transmitido.
 Espectro de absorção do permanganato de potássio

A amostra (1) tem 66mg/L de concentração. As demais (2),(3),(4) e (5) foram

diluídas para (0.8), (0.6), (0.4) e (0.2) da concentração da primeira amostra,
respectivamente.
 Se várias substâncias absorverem a a radiação,há um efeito aditivo:
Abs = a1b1C1 + a2b2C2 + . . .

Corante vermelho Corante azul

Máx. de absorção a 525 nm Máx. de absorção a 625 nm

A= 0,233 A = 0.318 -> a = 0,106/ppm.cm
a=

A 510 nm= 0,183

Mistura corante azul + vermelho
a = 0,061/ppm.cm
Mistura:
A 510 nm= 0,317
A625nm = 0,477
 Figura 1 - a. conjunto dos comprimentos de onda correspondentes ao espectro de
emissão de uma lâmpada de tungstênio-halogênio (luz branca); b. região espectral
transmitida por uma solução de azul de bromotimol e o respectivo espectro de
absorção; c. região espectral transmitida por uma solução de solução amarela de
fluoresceína e o respectivo espectro de absorção.

b. Espectro de uma c. Espectro de uma solução

a- Espectro de uma
solução aquosa de azul etanólica de fluoresceína
lâmpada de luz
de bromotimol 10-5 mol 10-5 mol L-1 (amarela)
branca
L-1 (laranja)
 INSTRUMENTAÇÃO

Esquema Básico de um Instrumento para Medir a Absorção

Sistema de Feixe Simples

INSTRUMENTAÇÃO

Sistema de Feixe Duplo

 Fontes de radiação UV-VIS

Lâmpada de Tungstênio e Tungstênio-Halogênio: O filamento da

lâmpada de tungstênio vaporiza-se e esses vapores fixam-se na face
interna do bulbo da lâmpada.

Lâmpada de Deutério: Normalmente usa-se a lâmpada de deutério

para comprimentos de onda entre 180 a 370nm.

Monocromadores
Filtros, Filtros de interferência, Prismas , Grades de difração
 Grade de difração

Espectro visível da luz de uma lâmpada difratada por uma grade

de difração : (a) esquema e (b) fotografia.
 Detectores

Fotografias de arranjos de
diodo com 1024
elementos (detectores de
diodo): a. vista de topo; b.
vista de perfil.
Esquema (a) e fotografia (b) do tubo
fotomultiplicador HAMAMATSU - R928
 Esquema óptico de um espectrofotômetro com detector de arranjo de diodos

Vê-se neste esquema duas fontes de radiação, as lâmpadas de deutério e de tungstênio, cujas emissões são
focalizadas através de uma lente sobre a amostra. Portanto, todo o espectro de emissão da lâmpada incide
sobre a mesma, sendo que a radiação incidente será, em parte, absorvida. Esta radiação que atravessou a
amostra (transmitida ou emergente) irá incidir sobre uma lente que focaliza o feixe sobre uma fenda, e desta
sobre uma grade de difração. Esta grade irá difratar a radiação, separando os seus diferentes comprimentos de
onda, sendo que cada um deles irá incidir sobre um diodo do arranjo. Este diodo, ao ser irradiado, produz uma
corrente elétrica cuja magnitude depende da intensidade da emissão (novamente aqui se aplica o efeito
fotoelétrico). Através de um circuito de calibração adequado, esta corrente será transformada em absorbância
nos diferentes comprimentos de onda, resultando no que se convenciona chamar de espectro de absorção.
Exemplo de espectro obtido com detector de arranjo de diodos
Espectrometria de Absoraço pode ser: Atômica ou Molecular
Espectrometria de Absoraço pode ser: Atômica ou Molecular
Espectrofotômetros
Créditos:

Chemkeys : http://www.chemkeys.com/bra/index.htm

Micronal Termos e Significados em análises espectrofotométricas UV-

Visível http://www.micronal.com.br/artigostecnicos/glossario.pdf

Gary L. Bertrand http://web.umr.edu/~gbert/color/AAcolor.html