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Gram Positivas

Staphylococcus
Prof Johnatan Sousa
Bacterias Gram (+ e -)
Gram positive ou gram negativa?
Staphylococcus
Família: Micrococcaceae

Gêneros: Micrococcus, Stomatococcus,


Alloiococcus e Staphylococcus.

 Coloração de Gram: Cocos Gram-positivos;


 Esféricos;
 Ausência de endosporos;
 Diferenciados da família Streptococcaceae
através da catalase;
 Catalase positiva;
 Imóveis
Catalase

A prova da catalase: amostra de bactéria em contato com o


peróxido de hidrogênio = formação de bolhas de oxigênio.

Catalase
2H2O2 2H2O + O2
Introdução a cocos Gram-positivos

+ -
Micrococcaceae Streptococcaceae
https://www.youtube.com/watch?v=Wzh
n9CRETfU
Características do Gênero
Staphylococcus

Esta estrutura
característica lembra
cachos de uva.

Grego Staphylé = cachos de uvas


Características do Gênero Staphylococcus

 Encontrados em pele e mucosas de homens e outros


animais;
 Anaeróbios facultativos;
 Crescem em meio contendo 10% de NaCl;
 Causam:
 Doenças sistêmicas fatais;
 Infecções cutâneas, de tecidos moles, ossos e das vias
urinárias;
 Infecções oportunistas;
 Coagulase + diferencia o S. aureus das demais espécies.
Características do Gênero
Staphylococcus

As espécies mais importantes na clínica

S. lugundensis S. carnosus S. epidermidis


S. schleiferi S. simulans S. capitis
S. sciuri S. cohnii S. warneri
S. lentus S. xylosus S.saccharolyt.
S. caseolyticus S. saprophyticus S. caprae
S. hyicus S. gallinarium S. hominis
S. chromogenes S. kloosii S. haemolyticus
S. intermedius S. equorum S. auricularis
S. delphini S. arlettae S. aureus
Staphylococcus aureus

Patógeno humano mais importante entre


os estafilococos.

Presente no trato respiratório superior,


especialmente nas narinas, de
aproximadamente 30% da população
em geral
Coloniza transitoriamente pregas
cutâneas, períneo, axilas e vagina.
Staphylococcus aureus

O nome “aureus” significa


“dourado” em latim, qualidade
atribuída ao pigmento carotenóide
característico produzido pela
bactéria.
Enzimas Extracelulares

• Enzima extracelular mais importante: coagulase;


• Exclusiva ao Staphylococcus aureus;
• Critério para a identificação de uma amostra como pertencente à
espécie.
coagulase
Fibrinogênio Fibrina insolúvel
protrombina

Estafilotrombina
Causa coagulação
Staphylococcus aureus

• Ensaio com plasma de coelho.

• Se o plasma coagular, a espécie


é S. aureus.

+ -
Se não coagular deixar mais 20h, totalizando 24h verificar novamente
Fatores de virulência

Proteína A (SpA)
Tem a habilidade de se ligar à porção FC de IgG,
impedindo, portanto que ela sirva de fator de
opsonização na fagocitose.
Fab Fab
IgG
Fc
SpA (Atn)
S. aureus
Fatores de virulência

 Cápsula de polissacarídeos (aderência e proteção)


 Ácidos tecóicos (aderência a mucosas);
 Hemolisina Alfa (hemólise e lesão tecidual);
 Toxina Beta (fator CAMP);
 Hemolisina Delta (surfactante);
 Leucocidinas
 Esfoliatinas (dissolução da matriz polissacarídica da pele)
 Enterotoxinas
 Toxina I da síndrome do choque tóxico
Enzimas

 Catalase;

 Hialuronidase: hidrolisa a matriz intercelular de


mucopolissacarídios dos tecidos (facilita a disseminação)

 Fibrinolisinas: degrada coágulos de fibrina (facilita a


disseminação);

 Lipases: contribui para disseminação nos tecidos


cutâneos e subcutâneos;
Síndromes clínicas

Síndrome da pele escaldada:


 Impetigo bolhoso = forma localizada da síndrome
(altamente contagiosa)
Impetigo bolhoso

Síndrome da pele escaldada


 Intoxicação alimentar:
 Alimentos contaminados com enterotoxinas estafilocócicas;
 Vômitos intensos, diarréia aquosa não sanguinolenta;
 Dor abdominal, naúsea, cefaléia e sudorese.

 Síndrome do choque térmico:


 Crianças e mulheres em idade menstrual;
 Hipotensão, exantema eritematoso macular difuso;
 Envolvimento de vários sistemas orgânicos (gastrintestinal,
muscular, renal, hepático, hematológico e SNC)
 Infecções cutâneas (infecções piogênicas):

 Foliculite: infecção dos folículos pilosos;

 Terçol: base das pálpebras

 Furúnculo: grandes nódulos elevados e dolorosos, com


coleção de tecido morto e necrótico;

 Carbúnculo:Furúnculos em tecidos subcutâneos mais


profundos (calafrio, febre e disseminação sistêmica);

 Infecções de ferimentos: após cirurgia ou traumatismo


com penetração dos colonizadores da pele.
Foliculite da barba

Furúnculo

Terçol Carbúnculo
 Bacteremia: bactéria no sangue;
 Endocardite: 50% mortalidade;
 Empiema: acúmulo de pus na cavidade pleural;
 Osteomielite;
 Artrite séptica: crianças de pouca idade e adultos que
recebem injeções intra-articulares ou que possuem
articulações mecanicamente anormais.
 Meningite: traumatismo, cirurgia, tumores (SNC)
Regulação de Fatores
de Virulência

Os fatores de virulência produzidos por S. aureus não são


expressados a toda hora, são dependentes da fase de crescimento
da bactéria.
 Proteína A
 adesinas
no de células  coagulase
Taxa estacionária
 hemolisinas
Toxinas

 Proteína A
 adesinas
 coagulase
 hemolisinas
 toxinas

tempo
Staphylococcus epidermidis

A segunda espécie mais importante


do gênero Staphylococcus é o
Staphylococcus epidermidis.

O Staphylococcus epidermidis faz


parte da flora normal da pele e da
mucosa de seres humanos e
animais superiores.

Importante na infecção hospitalar


Staphylococcus epidermidis
 O Staphylococcus epidermidis: espécie bem menos
virulenta do que S. aureus;

 Não apresentam a produção de coagulase;

 Algumas cepas apresentam a produção muito tímida de


certas enzimas proteolíticas.

Possui muitos fatores de adesão

 Sendo perigosa para pacientes que fazem uso de


material invasivo de plástico (cateter, próteses, stents,
etc.).
Staphylococcus epidermidis

•Staphylococcus epidermidis:

• Pacientes imunocomprometidos;

• Usuários de drogas intravenosas;

• Pode causar endocardite e infecções generalizadas


não-piogênicas.

• Infecções em locais com prótese

• Infecções de feridas

• Infecções das vias urinárias.


Staphylococcus saprophyticus

• O Staphylococcus saprophyticus:
• Frequentemente causa infecção do trato urinário,
especialmente em mulheres,
• Pode chegar a causar cistite, uretrite e pielonefrite,
• Em casos extremos bacteremia.

Discriminar o Staphylococcus coagulase positiva (S.


aureus) do Staphylococcus coagulase negativa.
Outras espécies de
Staphylococcus

No laboratório clínico, usualmente se faz a


diferenciação entre Staphylococcus coagulase
positiva (S. aureus) e Staphylococcus
coagulase negativa (não aureus).

Os Staphylococcus coagulase negativa de


interesse são subdivididos em dois grupos:
saprophyticus e não saprophyticus, baseado na
sua sensibilidade à novobiocina.
Diagnóstico Laboratorial

 Coloração de Gram: cocos Gram-positivos;


 Morfologia das colônias;
 Prova da catalase;
Identificação de S. aureus

 Coagulase em lâmina (fator de agregação) = reação


com o fibrinogênio do plasma;
 Coagulase em tubo (plasma de coelho);
 Aglutinação com látex = partículas de látex recobertas
com plasma e IgG (proteína A);
 Fermentação do manitol.
Ágar manitol salgado
Aglutinação em látex
 Sensibilidade a novobiocina;

Novobiocina sensível = S. epirdemidis


Método automatizado

 Vitek (Biomerieux)
PCR

 Detecção de genes específicos;


 Alto custo.
Resistência aos antimicrobianos

 S. aureus resistente à meticilina (MRSA ou ORSA) ;

 Resistência a todos os β-lactâmicos;

 Alteração no gene mecA

 Alternativas: Macrolídeos, Quinolonas, tatraciclina,


vancomicina.
Resistência aos antimicrobianos
Resistência aos antimicrobianos

 S. aureus resistente à Clindamicina;

 Resistência detectada por indução (Teste D);


Resistência aos antimicrobianos

 Vancomicina: Droga de escolha em UTIs;

 S. aureus com resistência intermediária à Vancomicina


(VISA);
 S. aureus com resistência plena à Vancomicina (VRSA).
Chave Geral para a
Identificação de Staphylococcus

Coco GRAM +
Streptococcaceae catalase
- +
Micrococcaceae
Sensível à
novobiocina?

Staphylococcus sp.

- + Coagulase

Staphylococcus - Staphylococcus
+
não saprophyticus aureus

Staphylococcus grupo saprophyticus


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