Cromatografia em papel
Alex Schulz e Felipe Lucas
Engenharia Química
as002883@fahor.com.br/ fl002921@fahor.com.br
Resumo: A cromatografia é uma técnica quantitativa, tem por finalidade geral duas utilizações, a de
identificação de substâncias e de separação-purificação de misturas. Usando propriedades como solubilidade,
tamanho e massa.
Palavras chave: cromatografia, identificação, separação.
Introdução:
A descoberta da cromatografia, no final do
século passado, é creditada a um botânico chamado
Tswett. Ele usou uma coluna com carbonato de
cálcio e um solvente que perolava pela mesma, para
separar pigmentos de folhas em uma série de
bandas coloridas.
A cromatografia é um método empregado de
forma ampla e que permite a separação,
identificação e determinação de componentes
químicos em misturas complexas. Nenhum outro
método de separação é tão poderoso e de aplicação
tão generalizada como a cromatografia.
O processo cromatográfico ocorre como um
resultado dos fenômenos de adsorção (interação é
entre um sólido e um fluido - um líquido ou gás) e
dessorção (capacidade de uma substância química
para mover-se com a fase móvel) que acontecem
repetitivamente, durante o movimento dos
componentes da amostra, através do leito
estacionário. A separação ocorre devido a
diferentes constantes de distribuição destes
componentes entre as fases móvel e estacionária
(DEGANI; CASS e VIEIRA, 2011).
Segundo Skoog et al (2008, p. 875) “é uma
técnica na qual componentes de uma mistura são
separados com base nas diferenças de velocidade
nas quais são transportados através de uma fase fixa
estacionária por uma fase móvel líquida ou gasosa”.
Para a identificação usa-se a comparação dos
resultados da análise com outros resultados
previamente conhecidos, como por exemplo, usa-se
tabela de gráficos conhecidos e através desta
compara-se os resultados obtidos que também são
em gráficos achando-se os que mais se assemelham
assim descobrindo quais as substâncias que
pertence a mistura. É também um método muito
versátil, podendo “utilizar colunas de diferentes
tipos e dimensões, bem como diversas combinações
de diversas fases móveis e estacionárias” (SIMÕES
et al, 2007, p. 241)
As substâncias cujas moléculas são polares
interagem mais intensamente com solventes
polares. As substâncias apolares tem mais afinidade
com solventes apolares. Assim, variando a
polaridade do solvente, ou misturas de solventes,
pode-se separar os componentes de uma amostra.
Materiais e reagentes:
 2 Béqueres de 150 ml, 2 de 600ml,
 Proveta de 100ml, 50ml e de 5 ml,
 Capsula de porcelana,
 Balança analítica,
 Tubo capilar,
 Pisseta com água destilada,
 Vidro relógio,
 Espátula,
 Fio de algodão,
 Pipeta de Pasteur,
 Banho-maria,
 Bico de Bunsen, tela de amianto, tripé,
 Tesoura, papel filtro,
 Ácido clorídrico HCl,
 Hidróxido de amônia,
 Suco de uva em pó,
 Gelatina sem sabor,
 Corantes comerciais, vermelho, azul,
verde e amarelo
 Solvente preparado pelas professoras
 Experimento:
Iniciou-se a experiência escolhendo dois
produtos industrializados para retirar o corante
neles contidos, essas amostras foram de suco de uva
em pó e gelatina sem sabor de kiwi e limão, após
isso pesou-se 12 g de cada uma das amostras dentro
de um béquer em uma balança analítica, primeiro
dilui-se o suco de uva em 300 ml de água destilada,
após todo o suco ser diluído transferiu-se 150 ml
para outro béquer e o que sobrou foi descartado,
fez-se o mesmo com a gelatina sem sabor porem
com água quente que ajuda na diluição, em cada
béquer contendo as amostras diluídas adicionou-se comprimento; é preciso muito cuidado também na
30 cm de um fio de algodão e 5 gotas de ácido hora de aplicar as amostras no papel filtro, não pode
clorídrico (HCl) p.a., colocou-se os dois béqueres ser uma gota muito grande e nem muito pequena,
contendo as amostras em banho-maria fervente por por isso é fundamental treinar e aplicar em outro
aproximadamente uma hora, após isso foi retirado papel primeiro para depois fazer no definitivo, após
do banho-maria as amostras, com uma espátula pendurado o papel filtro com as amostras no béquer
retirou-se os fios de algodão e colocou-se cada fio e adicionado solvente, o solvente foi subindo pelo
em um béquer de 100 ml, nesses béqueres foram papel filtro e arrastando consigo as amostras dos
adicionados 5 ml de água destilada e 5 gotas de seis corantes adicionados, na subida, as amostras
hidróxido de amônia p.a., novamente foi colocado dos corantes que eram formados por mais de um
em banho-maria os béqueres para a retirada do tipo de cor foram separados, observou-se também
corante que estava preso nos fios de algodão, após a quem nenhuma substância subiu ao mesmo nível do
extração do corante de cada fio retirou-se os solvente, na tabela 1 a seguir mostram-se a
béqueres do banho-maria e também os fios de elevação das substâncias de cada corante obtidos na
dentro de cada béquer, levou-se cada béquer para cromatografia,
aquecimento no bico de Bunsen para evaporar parte
do líquido e ficar uma solução mais concentrada Reagente Substância 1 Substância 2 Solvente
(esse estágio é muito delicado pois tem que se ter o Suco uva Vermelho 2,4 cm Azul 7 cm 8 cm
Gelatina Amarelo 2 cm Azul 7 cm 8 cm
cuidado para não queimar a solução e perder todo o
Verde Amarelo 4,3 cm Azul 7 cm 8 cm
trabalho realizado até o momento), após as soluções Vermelho 3,5 cm 5,5 cm 8 cm
serem concentradas transferiu-se cada uma para Azul 7,8 cm 8 cm
capsulas de porcelana e reservou-as. Prosseguindo Amarelo 4,7 cm 8 cm
no experimento cortou-se dois papeis filtros com Tabela 1
medidas necessárias para caber as amostras e no
béquer, preparou-se os béqueres de 600 ml com um Na tabela 2 apresentam-se os valores de Rf (fator
fio em posição central (diâmetro) para poder de retenção) de cada substância.
pendurar o papel filtro, dentro do béquer também Rf = Valor percorrido pela amostra
colocou-se um pedaço da sobra do recorte do papel Valor percorrido pelo solvente
filtro para que haja a saturação com o solvente que
será adicionado. Voltando ao papel filtro recortado; Reagente Substância 1 Substância 2
Suco uva Vermelho 0,3 Azul 0,875
com um capilar adicionou-se as amostras extraídas
Gelatina Amarelo 0,25 Azul 0,875
e as amostras dos corantes comerciais (pouca Verde Amarelo 0,537 Azul 0,875
quantidade aprox. 1 gota ou menos) ao papel filtro a Vermelho 0,437 0,687
uma distância aproximada de um centímetro uma Azul 0,975
da outra, então pendurou-se o papel filtro com as Amarelo 0,587
amostras no fio previamente preparado no béquer Tabela 2
de 600 ml cuidando para que não encostasse o
papel ao fundo mas que também não ficara muito Componentes das amostras e dos corantes
elevado, adicionou-se um pouco de solvente comerciais: Suco de uva em pó contem vermelho
preparado pelas professoras ao fundo do béquer 40, Bordeaux, dióxido de titânio e azul brilhante
(bem pouquinho, aproximadamente 5 mm de altura FCF, a gelatina contem amarelo tartazina e azul
em relação ao fundo do recipiente), feito todo esse brilhante, o corante amarelo contém apenas o
processo foi tampado a câmara cromatográfica amarelo tartazina, verde contem amarelo tartazina e
( béquer + solvente + papel filtro com amostras) azul I e II, vermelho contém vermelho VI e II, e o
com um vidro relógio, aguardou-se por certo tempo azul contém apenas o azul II.
até o solvente subir pelo papel filtro e arrastar os O Rf dos corantes azuis da amostra e do corante
diferentes corantes encontrados nas amostras. comercial ficaram exatamente o mesmo valor
indicando que seria a mesma substância, já o
vermelho e o amarelo comparados não ficaram o
Resultados e discussões: mesmo valor de Rf, a partir da cromatografia
Observou-se que HCl ajuda na fixação do observou-se que o verde se separou completamente
corante no fio de algodão, e que o hidróxido de podendo identificar nitidamente o azul e o amarelo,
amônia ajuda na retirada do corante desse fio, que são as cores que formam o verde; com o
também foi preciso muito cuidado quando as aumento da polaridade do solvente os compostos
amostras estavam sob aquecimento no bico de mais polares tenderiam a aumentar o seu fator de
Bunsen, foi usado uma chama bem baixa nesse retenção porque uma molécula polar dissolve outra
processo para que haja uma evaporação lenta de molécula polar assim a tornaria mais miscível e
parte do solvente e para que não passara do ponto e facilitaria a subida da substância.
queimasse; o papel filtro foi recortado a uma
medida de 6,5 cm de largura e 14 cm de
 Conclusão:
Na cromatografia, os componentes de uma
mistura são identificados pela cor. Colocando
uma tira de papel pintada num frasco contendo
solvente, é possível identificar os componentes
da mistura. O solvente é absorvido
gradativamente pela tira e, devido às diferentes
solubilidade e tamanhos das moléculas, seus
componentes sobem com diferentes
velocidades, permitindo a identificação das
substâncias. Através dele também podemos
conseguir as medidas para fazer o cálculo do
fator de retenção.
Também devemos escolher o solvente
adequado para cada tipo de amostra, quanto a
polaridade dos mesmos.
Essa aula foi de grande aprendizado, pois
tivemos a oportunidade de estudar sobre algo
que não tínhamos conhecimento. Além de
aprender uma nova técnica de separação de
uma mistura que com certeza vai ser usada no
decorrer de nossa vida acadêmica e
profissional.

Referências:

•Notações feitas em aula

•Protocolo da aula

•SIMÕES, Cláudia Maria Oliveira (ORG.). et

al. Farmacognosia: da planta ao medicamento. 6.
ed. Porto Alegre: UFRGS, 2007.

•http://qnesc.sbq.org.br/online/qnesc39_2/08-
RSA-22-16.pdf

•http://www.quimicasuprema.com/2013/12/o-
que-e-cromatografia.html

•SKOOG, Douglas A.; WEST, Donald M.,

Fundamentos de Química Analítica, 8 ed. São
Paulo: Cengage Learning, 2008