MINISTÉRIO DA EDUCAÇÃO

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Minicurso:

Microbiologia e a Microbiota Humana

Docente orientador: Prof. Dr. Jorge Kleber Chavasco

Ministrantes/Discentes: Ana de Souza Santos
Gabriella Martiniano Pereira
Paulo Fernando Carlstrom

Alfenas-MG
2017
1 INTRODUÇÃO

O conhecimento científico sobre as interações humanas relacionadas à diversidade de

microrganismos componentes da microbiota humana se desenvolveu nos últimos anos em
diferentes áreas da ciência. A microbiota humana é o conjunto de microrganismos que reside
no organismo humano, o que traz benefícios mútuos (GONÇALVES, 2014).
No corpo humano encontra-se grande quantidade de microrganismos, os quais se
distribuem em diferentes órgãos e tecidos, podendo-se encontrar dez vezes mais células
microbianas que células humanas. A distribuição dos microrganismos depende de vários
fatores, tais como: umidade, acidez, temperatura e disponibilidade de nutrientes. Esses
microrganismos influenciam o sistema imunológico, a resistência aos patógenos e o
aproveitamento dos alimentos (GONÇALVES, 2014).
Os diferentes microrganismos componentes da microbiota humana exercem funções
importantes e fundamentais para a saúde humana. Segundo Cândido, Tunon e Carneiro
(2009), a aquisição de uma microbiota residente, ou seja, uma população microbiana que
permanece no corpo ao longo da vida ocorre em etapas. A colonização dá-se pela pele
(Staphylococcus epidermidis), seguida pela orofaringe (estreptococos α – hemolíticos) e, em
seguida, o trato gastrointestinal e outras mucosas. O organismo humano fornece habitats com
condições ambientais favoráveis distintas que selecionam o crescimento e distribuição das
populações microbianas em resposta a fatores externos e fisiológicos do hospedeiro como
idade, dieta, estado hormonal, saúde e higiene pessoal (GONÇALVES, 2014).
Na microbiota humana os microrganismos podem ser mutualistas, comensais e
oportunistas. Mutualistas são os microrganismos que protegem o hospedeiro, pois produzem
nutrientes importantes e colaboram para o crescimento e desenvolvimento do sistema
imunológico. Comensais são os microrganismos que mantêm associações sem benefícios ou
malefícios detectáveis, sendo estas associações neutras. Oportunistas são os microrganismos
que causam doenças em indivíduos com o sistema imune comprometido devido a vários
fatores, tais como nos casos de: infecção pelo vírus da imunodeficiência adquirida humana,
terapia imunossupressora de transplantados, radioterapia, quimioterapia anticâncer,
queimaduras extensas ou perfurações das mucosas (CÂNDIDO; TUNON; CARNEIRO,
2009).
O organismo humano dispõe de mecanismos de defesa contra a patogênese
bacteriana decorrente da microbiota humana. Porém, alguns microrganismos podem agir
como oportunistas, sendo assim, a microbiota constitui-se em reservatório de bactérias
patogênicas e estas podem invadir os tecidos do hospedeiro causando doenças graves, mas
apenas no caso de imunodeficiência transitória ou persistente (CÂNDIDO; TUNON;
CARNEIRO, 2009).

2 BENEFÍCIOS DA MICROBIOTA HUMANA

Segundo Cândido, Tunon e Carneiro (2009), a microbiota é multifuncional e tem a

capacidade de:

o Auxiliar na digestão de polissacarídeos vegetais, na biotransformação de conjugados

ácidos da bile e na degradação de oxalatos;
o Sintetizar e excretar vitaminas, como ocorre com bactérias entéricas, que produzem
vitaminas K e B12 e bactérias láticas, que produzem outras vitaminas do complexo B;
o Impedir a colonização por patógenos, por meio da competição por sítios e nutrientes
essenciais;
o Antagonizar outras bactérias, por meio de síntese de substâncias inibidoras ou letais
contra espécies não pertencentes à microbiota normal;
o Promover o desenvolvimento de tecidos, como o ceco e tecido linfático no trato
gastrointestinal;
o Estimular a produção de anticorpos naturais, em baixos níveis, contra os componentes
da microbiota normal e que são capazes de reconhecer cruzadamente patógenos
relacionados;
o Ajudar o sistema imune na apresentação de antígenos, o que torna o organismo mais
tolerante a alguns determinantes imunológicos, reduzindo assim as respostas alérgicas
a comida e antígenos ambientais.

3 VARIAÇÃO DA MICROBIOTA AO LONGO DA VIDA

O desenvolvimento da microbiota ocorre logo após o nascimento e esta influencia a

fisiologia do hospedeiro, o desenvolvimento e morfogênese de órgãos e a manutenção do
equilíbrio de tecidos e órgãos (GONÇALVES, 2014). As partes do corpo expostas ao
ambiente, como a pele e a mucosa, rapidamente sofrem colonização por diversos
microrganismos. Estes se distribuem de maneira não uniforme compondo a microbiota
normal, a qual permanece em desenvolvimento no indivíduo até o fim de sua vida. Segundo
Cândido, Tunon e Carneiro (2009), graças a essa distribuição, cada região habitada no
organismo possui uma microbiota com características próprias.
Estudos mostram que a forma de nascimento pode afetar no desenvolvimento da
microbiota de recém-nascidos podendo afetar ainda a saúde futura do indivíduo. Segundo
Cândido, Tunon e Carneiro (2009):

A criança entra em contato com os microrganismos da mãe durante a

passagem pelo canal vaginal e através do próprio ambiente hospitalar.
As que nascem de cesariana tem este último fator como elemento
primordial. A população bacteriana se desenvolve logo no primeiro
dia de vida e quando nos tornamos adultos a nossa população
bacteriana já excede o nosso número total de células somáticas e
sexuais.

A microbiota no período perinatal é influenciada pela microbiota materna, a forma de

nascimento, o tipo de alimentação, além de outros fatores. A composição da microbiota no
período neonatal e depois parece ter papel relevante na saúde, mas os pesquisadores ainda têm
muito para aprender sobre o processo de formação da microbiota em bebês e quais aspectos
podem ter relação causal com doenças futuras (MUELLER et al. 2015).
O envelhecimento é acompanhado por alterações orgânicas que podem gerar
problemas clínicos. Segundo Zapata e Quagliarello (2015):

Adultos com mais de 65 anos de idade têm alta prevalência de

doenças comorbidas e exposição concomitante a múltiplos
medicamentos, incluindo antibióticos. Com o envelhecimento do trato
digestório, este fica sujeito a várias mudanças: dentição e função
salivar prejudicada, modificação da dieta, doença diverticular, dentre
outras. Juntos, esses fatores podem contribuir para mudanças na
microbiota e podem ainda aumentar a susceptibilidade a doenças
infecciosas.

Com isso, percebe-se que o envelhecimento pode provocar diversas modificações na

microbiota intestinal, devido às condições orgânicas individuais.

4 FATORES QUE AFETAM A COMPOSIÇÃO DA MICROBIOTA HUMANA

Os diversos locais do organismo constituídos por flora comensal tendem a sofrer

alterações na composição dos microrganismos. Estas alterações devem-se tanto a fatores
ambientais, como variações na idade, dieta, estilo de vida do hospedeiro, higiene e terapêutica
com antibióticos (FIGURA 1; SOMMER E BÄCKHED, 2013).

Figura 1: Representação dos fatores ambientais que afetam a composição da microbiota

intestinal. Fonte: adaptado de Sommer e Bäckhed (2013).

A idade é um fator interessante que modifica a microbiota humana, uma vez que, esta
alteração na microbiota pode ser devida, por exemplo, ao aumento da necessidade de digerir a
alimentação, com o objetivo de compensar a diminuição da funcionalidade do sistema
digestório (MARIAT et al., 2009).
A microbiota intestinal é importante para a fermentação de polissacarídeos
provenientes da dieta que, por sua vez pode afetar a composição da microbiota bem como a
sua atividade. Um exemplo desta situação ocorre quando o indivíduo tem uma dieta rica em
fibras (alimentos integrais, cereais, verduras, legumes) que, leva ao aumento de substratos
fermentáveis no intestino e da velocidade de trânsito intestinal. Consequentemente, o trânsito
intestinal acelerado leva a que microrganismos de crescimento rápido se sobreponham aos de
crescimento lento (GONÇALVES, 2014).
 O impacto da dieta na microbiota intestinal pode ser estimado pela forma como
alterações alimentares em curto prazo influenciam a composição da microbiota
(GONÇALVES, 2014). David et al. (2014) observaram alterações na composição e atividade
intestinal em indivíduos, após 3 dias de mudanças na dieta, superando as diferenças
interindividuais na expressão de genes microbianos.
A microbiota intestinal é influenciada por diversas particularidades do estilo de vida
moderno, como: melhoria do saneamento básico, urbanização, uso excessivo de antibióticos,
menor exposição a infeções na infância, vacinação, sedentarismo, entre outros (BERNSTEIN;
SHANAHAN, 2008). A higiene, também relacionada com a melhoria do saneamento básico,
é um fator ambiental que pode contribuir para a alteração da microbiota. Contrário ao
pensamento popular, a exposição escassa a microrganismos, sejam eles benéficos
(simbiontes) ou prejudiciais (patogênicos) para o organismo, na fase inicial da vida, pode
influenciar negativamente o desenvolvimento normal e adequado do sistema imunológico, o
que pode ser explicado por perda de tolerância imunológica por parte do hospedeiro,
resultando em respostas imunitárias agressivas e induzindo a ativação de mecanismos de
autoimunidade (BOERNER; SARVETNICK, 2011; GONÇALVES, 2014).
O tratamento com antibióticos, embora essencial em casos de infeção, podem ter
efeitos drásticos na microbiota (especialmente na microbiota intestinal), como a eliminação da
diversidade de microrganismos e a desregulação do sistema imunológico do hospedeiro,
aumentando a susceptibilidade à doença. O espectro de ação do antibiótico, a dosagem e o
tempo de duração do tratamento, a via pela qual é administrado e também as características
relativas ao fármaco e ao organismo (farmacocinéticas e farmacodinâmicas), influenciam a
forma como os antibióticos alteram a microbiota intestinal (JERNBERG et al., 2010). Os
antibióticos usados no tratamento de doenças são, normalmente, de amplo espetro, atingindo
não só as bactérias responsáveis pela infecção, como também outros microrganismos. Os
microrganismos que resistem podem depender de produtos resultantes do metabolismo
secundário efetuado pelas bactérias eliminadas pelo tratamento, o que pode levar à perda de
nutrientes e/ou acumulação de produtos tóxicos, interferindo com o equilíbrio normal destes
microrganismos, podendo também conduzir à sua eliminação (WILLING et al., 2009).

5 ATIVIDADE PRÁTICA

Para diagnosticar uma doença, frequentemente, é necessária a obtenção de uma

amostra de material que possa conter o microrganismo patogênico. Algumas precauções são
necessárias para realizar uma coleta adequada até a etapa de classificação do microrganismo,
sendo:

o Coleta de amostras assepticamente;

o Identificação dos recipientes das amostras com o nome do hospedeiro, o número do
quarto (caso esteja hospitalizado), a data, o horário e os medicamentos administrados;

o Transporte imediato ao laboratório para cultura, mantendo as condições ambientais

ótimas.

No laboratório, amostras de tecidos infectados são cultivadas em meios diferenciais e

seletivos na tentativa de isolar e identificar quaisquer patógenos ou organismos que
normalmente não são encontrados em associação com estes tecidos, para então chegar-se ao
diagnóstico sobre o(s) microrganismo(s) presente(s) na amostra em estudo (TORTORA;
FUNKE; CASE, 2012).
No caso da microbiota bucal, local que possui um rico ecossistema microbiano, o
biofilme de origem bacteriana é formado sobre o esmalte dentário, o qual é composto por uma
substância amorfa, quase invisível, formado principalmente por glicoproteínas salivares
(CARNEIRO, 2008).
A cavidade bucal é o local de acesso ao ambiente interno do corpo. Devido à
existência de uma comunidade bacteriana na boca, diferentes fatores alteram funções
fisiológicas e morfológicas no local e no restante do corpo.

5.1 Visualização de bactérias em microscopia de campo escuro

Objetivo:
o Observar organismos vivos em material biológico.
Método:
o Por meio da raspagem bucal, coletar o material biológico com suabe;
o Colocar a amostra no centro da lâmina e sobrepor esta com uma lamínula;
o Levar ao microscópio de campo escuro e observar com a objetiva de 40x.

Interpretação dos resultados:

o Observar o tipo de microrganismo presente na amostra (bactérias, protozoários, fungos
ou leveduras), suas formas e motilidade.
5.2 Capacidade acidogênica da microbiota do biofilme dental

Objetivo:
o Comprovar a capacidade de produção de ácidos pelas bactérias do biofilme dental.

Método:
o Raspagem do biofilme dental e acrescentar a amostra em meio de cultura contendo
sacarose (fonte de carboidrato) e indicador de pH.

Interpretação dos resultados:

o Observar a mudança de coloração do meio demonstrando a capacidade acidogênica
dos microrganismos.
 REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS

BERNSTEIN, C. N.; SHANAHAN, F. Disorders of a modern lifestyle: reconciling the of

epidermiology of inflammatory bowel diseases. Gut 2008; 57:1185-1191.
BOERNER, P. B.; SARVETNICK, N. E. Type 1 diabetes: role of intestinal microbiome in
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Universidade Federal de Sergipe, CESAD, 2009. Disponível em:
<http://www.cesadufs.com.br/ORBI/public/uploadCatalago/10300604042012Microbiologia_
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CARNEIRO, R. C. Estudo da microbiota do biofilme supragengival de pacientes em
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(Mestrado em Ortodontia). Faculdade de Odontologia da Puc Minas, 2008. Disponível em:
<http://www.biblioteca.pucminas.br/teses/Odonto_CarneiroRC_1.pdf>. Acesso em: 20 out
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DAVID, L. A. et al. Diet rapidly and reproducibly alters the human gut microbiome. Nature,
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GONÇALVES, M. A. P. Microbiota – implicações na imunidade e no metabolismo. 2014.
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Porto, Portugal, 2014. Disponível em:
<http://bdigital.ufp.pt/bitstream/10284/4516/1/PPG_21951.pdf>. Acesso em: 2 set 2017.
JERNBERG, C. et al. Long-term impacts of antibiotic exposure on the human intestinal
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SOMMER, F.; BÄCKHED, F. The gut microbiota - masters of host development and
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TORTORA, G. J.; FUNKE, B. R.; CASE, C. L.Microbiologia.10. ed., Porto Alegre: Artmed,
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ZAPATA, H. J.; QUAGLIARELLO, V. J. The microbiota and microbiome in aging: potential
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2015.