MAPA/SDA/CGAL

Código: MET POA/SLAV/21/02/01

Laboratório Nacional Agropecuário - LANAGRO/RS
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Laboratório de Produtos de Origem Animal/SLAV
Emissão: 18/07/2014
Método de Ensaio - MET

Prova de gás sulfídrico (H2S) em pescados

1 Escopo
Este método tem como objetivo determinar a presença de gás sulfídrico, proveniente da
degradação de proteínas do pescado.

2 Fundamentos
O método fundamenta-se na decomposição de aminoácidos sulfurados com liberação de
enxofre. Este, em meio ácido, se transforma em gás sulfúrico, que combinado com acetato de
chumbo produz sulfeto de chumbo que enegrece o papel de filtro.

3 Reagentes, padrões e materiais

Todos os reagentes são de grau analítico (p.a.), exceto quando especificado. Toda a água
utilizada nos procedimentos é destilada/deionizada, exceto quando especificada.

3.1 Reagentes
• Acetato de chumbo trihidratado ((CH3COO)2 Pb.3H2O);
• Ácido acético (CH3COOH).

3.2 Padrões
• Sulfeto de sódio monohidratado (Na2S.9H2O), material de referência;

3.3 Materiais
• Barbante;
• Béquer;
• Erlenmeyer;
• Espátula;
• Papel de filtro qualitativo;
• Papel filtro;
• Pipeta volumétrica;
• Proveta.
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4 Equipamentos
• Balança;
• Banho-maria.

5 Precauções analíticas
Este método emprega substâncias químicas nocivas e possui procedimentos que podem
representar risco ao operador. Equipamentos de proteção individual e uniforme apropriado
devem ser utilizados durante todo o processo.
Amostras de alimentos em geral devem ser consideradas como de risco biológico, evitando-se o
contato direto com pele e mucosas.
Ao colocar o papel filtro no erlenmeyer, precaver que o mesmo não encoste na água do banho-
maria, isso traria problemas para a avaliação do resultado.
Colocar de uma a duas folhas de papel filtro em cada erlenmeyer, acrescentando uma gota de
solução de acetato de chumbo 5% no centro, solução em excesso dificultará a amarração do
mesmo.

6 Procedimentos
Todos os procedimentos devem ser registrados no formulário “Dados brutos”, Anexo A do POP
POA/SLAV/15 “Procedimentos de rotina na análise físico-química de produtos de origem
animal”.

6.1 Preparo de soluções

6.1.1 Solução de acetato de chumbo trihidratado ((CH3COO)2 Pb.3H2O) a 5%:

Pesar em uma balança analítica, diretamente em um béquer de 250mL, 5g de acetato de
chumbo. Adicionar água deionizada, transferindo quantitativamente para um balão de 100mL.
Antes de chegar ao menisco do balão, adicionar 1mL de ácido acético glacial.

6.1.2 Solução padrão de sulfeto de sódio monohidratado (Na2S.9H2O) (0,1 g/L):

Pesar 0,1g de sulfeto de sódio em um béquer de 50mL. Transferir com água deionizada
quantitativamente para um balão volumétrico de 1000mL. Misturar e completar o volume.
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6.2 Descrição da metodologia

• Realizar o ensaio em duplicata;
• Pesar exatamente 20g da amostra homogeneizada, diretamente no erlenmeyer de 125mL,
limpando a boca da vidraria caso necessário;
• Adicionar 25mL de água deionizada ao erlenmeyer com ajuda de uma proveta de 50mL;
• Fechar o erlenmeyer com papel de filtro embebido na solução de acetato de chumbo ou de
plumbito de sódio, preso com liga de borracha ou amarrado com barbante;
• Levar ao banho-maria em temperatura máxima de 70ºC e aguardar 15 minutos;
• Em outro erlenmeyer, colocar 10mL de solução padrão que corresponde a 0,014mg de gás
sulfídrico nas condições do método adotado. Acidificar com 1mL de ácido acético e proceder
conforme citado para amostra;
Registrar as leituras no formulário “Dados brutos”, Anexo A do POP POA/SLAV/15.

7 Resultados
Comparar as manchas obtidas. A mancha da amostra não deve ser igual ou mais escura que a
do padrão (0,0014mg/mL).

7.1 Expressão dos resultados

O resultado deve ser expresso como positivo (mancha da amostra igual ou mais escura que o
padrão) ou negativo à presença de gás sulfídrico (mancha da amostra menos escura que o
padrão).

7.2 Aceitabilidade dos resultados

Todos os resultados devem ser aceitos se os requisitos para execução do ensaio forem
atendidos. Em caso de funcionamento inadequado do equipamento, ou outro motivo, o ensaio
deve ser interrompido e repetido, se possível. Caso contrário os resultados não devem ser
emitidos.

8 Arquivamento dos registros

Não aplicável.
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9 Referências
BRASIL. Ministério da Agricultura. Secretaria Nacional de Defesa Animal. Laboratório Nacional
de Defesa Animal. Portaria nº. 01, de 07 de outubro de 1981. Aprova os métodos analíticos para
controle de produtos de origem animal e seus ingredientes. Diário Oficial da União de
13/10/1981, Brasília, DF.

10 Anexos
Não aplicável.

11 Alterações
Item 3: incluído “Todos os reagentes são de grau analítico (p.a.), exceto quando especificado.
Toda a água utilizada nos procedimentos é destilada/deionizada, exceto quando especificada.”;
Itens 3.1, 3.2, 3.3: incluídos;
Item 4: excluídos “Barbante”, “Erlenmeyer de 125mL”, “Espátula”, “Papel de filtro qualitativo”,
“Papel filtro”, “Pipeta volumétrica de 10mL”, “Proveta de 50mL”;
Item 5: incluídas precauções analíticas referentes ao uso de equipamentos de proteção
individuais;
Item 6: incluído “Todos os procedimentos devem ser registrados no formulário “Dados brutos”,
Anexo A do POP POA/SLAV/15 “Procedimentos de rotina na análise físico-química de produtos
de origem animal”;
Item 6.1: incluído “Preparo de soluções”. “Descrição da metodologia”, incluído no item seguinte
(Item 6.2);
Item 6.2: incluído;
Item 8: excluído “Os registros no Anexo A devem ser arquivados na pasta “Dados brutos -
Prova de gás sulfídrico (H2S) em pescados” do POA/SLAV.”. Incluído “Não aplicável”;
Anexo A: Formulário “Dados brutos - Prova de gás sulfídrico (H2S) em pescados”, excluído.

As alterações no MET não implicam na realização de complemento de confirmação de

desempenho.
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12 Responsabilidades
O Responsável pelo POA/SLAV deve garantir a elaboração, aprovação, emissão, distribuição de
cópias, implementação, capacitação do pessoal para execução, gerenciamento de não
conformidades, análise crítica e revisão deste MET.
A UGQ é responsável pela verificação deste MET.

Elaboração/Revisão: Aprovação: Verificação:

Ana Paula Pereira de Melo – POA/SLAV Cristhiane Cattani – POA/SLAV Rosane Carlessi – UGQ
Data: 15/07/2014 Data: 17/07/2014 Data: 18/07/2014