Estudo in sílico, comparativo de estrutura-atividade, propriedades

farmacocinéticas e de toxicidade de análogos desenvolvidos a partir da

molécula GPI-1485

Resumo
O presente trabalho realizou estudo in sílico para predição e comparação de
dados relacionados a estrutura-atividade, propriedades farmacocinéticas e
toxicidade de análogos obtidos a partir da molécula GPI-1485. A molécula
molde é um ligante da neuroimunofilina que se liga às proteínas de ligação FK-
506,  que demonstraram ter eficácia variável na reversão da degeneração
neuronal e prevenção da morte celular.

Abstract
The present work carried out an in silico study to obtain and compare data
related to structure-activity, pharmacokinetic properties and toxicity of
analogues obtained from the GPI-1485 molecule. The template molecule is a
neuroimmunophilin ligand that binds to FK-506 binding proteins, which have
been shown to have variable efficacy in reversing neuronal degeneration and
preventing cell death.

Introdução
Ligantes de neuroimunofilina (NILs)
são drogas derivadas
do imunossupressor FK506
(tacrolimus) que demonstraram ter
eficácia variável na reversão
da degeneração neuronal e
prevenção da morte celular. Em
uma ampla gama de modelos
animais que mimetizam a doença
de Parkinson , demência e até
mesmo lesões nervosas cirúrgicas,
elas induzem a rebrota, são
neurotróficas ou previnem lesões
nervosas. O mecanismo
neurotrófico de ação desses
compostos não é conhecido e pode
ser dependente do tipo de dano e
da variabilidade genética em nível
de espécie ou celular. Algumas
evidências sugerem que os NILs
podem agir por meio de uma família
de proteínas chamadas proteínas
de ligação FK506 , algumas das
quais podem regular os receptores
do hormônio esteróide. Outras
evidências sugerem que os NILs
podem proteger os neurônios,
regulando positivamente
o antioxidante glutationa e
estimulando o crescimento do
nervo, induzindo a produção
de fatores neurotróficos (M.O.
Poulter; K.B. Payne;J.P.
Steiner,2004).
A modificação de moléculas é uma
ferramenta bastante importante para
a descoberta de novos fármacos
que tenham efeito superior ao
protótipo e garantam que sua propriedades farmacocinéticas e
eficácia é superior aos efeitos toxicidade, para uma análise
indesejáveis já apresentados pela comparativa dos protótipos
molécula referência. O desenvolvidos.
planejamento e desenvolvimento
Metodologia
desses novos fármacos é uma área
da Química Farmacêutica Medicinal, A referida pesquisa é tida como
ciência que engloba inovação, experimental, com abordagem
descoberta, síntese ou modificação qualitativa, quantitativa e
molecular, extração, isolamento, comparativa, baseando-se na
identificação de substâncias análise das características físico-
bioativas, bem como suas químicas, farmacocinéticas e
respectivas relações entre estrutura toxicológicas de análogos da
química e atividade biológica molécula GPI-1485, através da
(GUIDO; ANDRICOPULO; OLIVA, utilização dos softwares:
2010). Molinspirations para previsão de
atividade biológica, PreADMET para
Para o desenvolvimento de um
a predição farmacocinética e Osíris
fármaco torna-se necessário o
para predição de efeitos tóxicos.
conhecimento amplo das
propriedades físico-químicas, Os dados coletados do
farmacocinéticas e Molinspiration tem como
farmacodinâmicas para que seus parâmetros a regra dos cinco, nos
grupos funcionais favoreçam sua quais se estabelece que uma
complementariedade bioquímica molécula deve apresentar valores
com o sítio de ligação. As para 4 parâmetros múltiplos de 5:
interações de um fármaco com seu log P menor ou igual a 5, Massa
receptor biológico são determinadas Molecular menor ou igual a 500,
pelas forças intermoleculares, ou aceptores de ligação de Hidrogênio
seja, são dependentes da sua menor ou igual a 10 e doadores de
lipofilicidade, polaridade e atividade ligação de hidrogênio menor ou
eletrostática; Assim sendo, igual a 5.
substâncias que apresentam
propriedades terapêuticas, ao a permeabilidade cutânea tendo
interagirem com um receptor como parâmetros: <0,1 (alta
orgânico devem possuir uma permeabilidade), >0,1 (baixa
conformação tridimensional de permeabilidade); a absorção
forma que as disposições de seus intestinal (HIA), sendo considerados
grupos funcionais favoreçam sua os seguintes parâmetros: HIA 0-
complementariedade ao sítio de 20% (baixa absorção), 20-70%
ligação (TECHIO; BELO, 2012). (moderada absorção), >70%
(elevada absorção); Permeabilidade
Diante dos fatos citados, o presente em células Caco2 e MDCK - Alta
estudo tem como objetivo o permeabilidade >70, média
desenvolvimento de análogos de permeabilidade 4-70 e <4 baixa
GPI-1485, afim de obter dados permeabilidade; e também ligação
relacionados a estrutura-atividade, as proteínas plasmáticas tendo
como parâmetros: >70 (alta
ligação), <70 (baixa ligação).
Para avaliação dos resultados de
metabolismo foram utilizados os
seguintes critérios: se as
substâncias sofrem metabolismo de
fase 1, se inibem alguma CYP e
quais CYP foram inibidas.
Substâncias que inibem 2 ou mais Análogo 1: remoção de um grupamento metila
ligado ao carbono 3.
CYP, em especial CYP3A4 e
CYP2C9, podem interferir no
metabolismo de um grande número
de fármacos e outras substâncias,
podendo contribuir para elevação da
sua toxicidade. Para substâncias
que inibem apenas uma CYP, pode
ocorrer redução do número de
fármacos que possuem interação
farmacocinética com esta.
Substâncias não inibidoras e não
indutoras de CYP são consideradas Análogo 2: substituição de um grupamento metila
por cloro na posição 11.
substâncias ideais, pois não
interferem no metabolismo de
outros fármacos.
A predição de efeitos tóxicos foram
extraídas do software Osíris, sendo
coletados os efeitos mutagênicos,
tumorigênicos, irritantes e eficácia
reprodutiva, tendo parâmetro a
presença ou não de tal efeitos.
Resultados
Análogo 3: remoção de dois grupamentos metila na
posição 3 e inserção de insaturação na piridina.

Moléc
ula GPI-1485
Análogo 4: substituição dos grupamentos metila por
tioalcoóis na posição 11 e por hidrogênio na posição
12.
Análogo 8: substituição do grupamento metila na
posição 1 por um fenol.

Análogo 5: substituição do grupamento metila na

posição 11.
Análogo 9: substituição dos grupamentos metila nas
posições 11 e 12 e adição do grupo etila na posição
3.

Análogo 6: substituição do nitrogênio por carbono

no pentano. Análogo 10: remoção dos grupamentos metilas
ligadas ao carbono 3, e substituição do ácido
carboxílico na posição 10 por ácido sulfônico.

Análogo 7: substituição dos grupamentos metila na

posição 11 e 12 por cloro
Análogo 11: substituição das metilas ligadas ao
carbono 3 por uma amida.
Análogo 12: substituição da cetona ligada ao Análogo 16: substituição do carbono por um
carbono 4 por um etanoato de etila. grapamento amida na posição 7.

Análogo 13: substituição da cetona ligada ao Análogo 17: substituição do composto 3-dimetil-
carbono 4 por um ácido carboxílico. pentan -4,5- diona por uma cetona e um álcool,
substituião do nitrogênio por carbono na posição 3 e
substituição do carbono na posição por uma amida.

Análogo 14: substituição da piridina por um fenol. Análogo 18: substituição de grupamento metila por
uma piperidina na posição 1 por uma amida, e
substituição do carbono por uma amida na posição
10.

Análogo 15: substituição do nitrogênio do pentano

por um oxigênio ionizado positivamente.

Análogo 19: substituição do composto 3-dimetil-

pentan -4,5- diona por um oxigênio ionizado
negativamente, e adição de hidroxila no carbono 1.
Análogo 20: substituição do composto 3-dimetil-
pentan -4,5- diona por uma cetona, adição de
hidroxila no carbono 3 e ionização do grupamento
amina no ciclo pentano.
Análogo 23: substituição do grupamente metila do
carbono 1 por um tetrahidronaftaleno.

Análogo 21: substituição da piperidina pela Análogo 24:

molécula de naftol.

Análogo 25

Análogo 22: substituição do carbono 5 por uma

amina e remoção dos grupamentos metila ligados ao
carbono 3.

Análogo 26: adição de uma hidroxila ligada ao

carbono 6 e substituição do grupamento metila na
posição 6 por um cloro.
Análogo 27: adição de hidroxila ao carbono 7.

Análogo 28: substituição do ciclo pentano por ciclo

hexano com adição de metil no carbono 8.

Análogo 29: adição de ciclo hexeno com oxigênio

ionizado positivamente ligado ao carbono 6.

Tabela 1: Resultados obtidos através do software

Molinspiration.

Análogo 30: substituição da metila na posição 1 por

um indol.
Tabela 2: Predição obtida do software PreADMET.
Tabela 3: Predição obtida do software Osirios.
Discussão valores >70, significando que
possuem alta ligação ás proteínas
Nos estudos farmacocinéticos
plasmáticas, enquanto os demais
avaliou-se a barreira
obtiveram valores <70, significando
hematoencefálica (BBB), sendo
baixação ás proteínas plasmáticas.
considerados os parâmetos: BBB
O análogo 6 obteve o maior
>2 (atravessa livremente), 0,1 e 2
desempenho com o valor de 100.
(atravessa de formada moderada),
< 0,1 (atravessa de forma reduzida). b
Os análogos 2,8,25 e 26 tiveram
valores <0,1, significando que
atravessam de forma reduzida a
barreira hematoencefálica,
enquanto os demais análogos e o
GPI-1485 tiveram valores entre 0,1 Conclusão
e 2, significando que atravessam de
forma moderada a barreira REFERÊNCIAS
hematoencefálica. O análogo 6 foi o
que apresentou melhor
desempenho em relação aos
parâmentros estabelecidos com o
valor de 1,62. (tabela2)
Na avaliação da permeabilidade em
células Caco2 e MDCK, temos
parâmetros: alta permeabilidade
>70, média permeabilidade 4-70 e
<4 baixa permeabilidade. Na
permeabilidade em células Caco2 o
GPI-1485 e os análogos 4, 7, 8, 12,
14, 17, 18, 19, 20, 21, 23, 24, 26 e
28 tiveram valores entre 4 e 70,
significando que possuem média
permeabilidade, enquanto os
demais tiveram valores <4, tendo
baixa permeabilidade. O análogo 30
apresentou melhor desempenho em
relação aos parâmetros
estabelecidos com o valor de 20,9.
Na permeabilidade em células
MDCK
Na avaliação da ligação as
proteínas plasmáticas temos como
parâmetros: >70 (alta ligação), <70
(baixa ligação). O GPI-1485 e os
análogos 1, 2, 6, 7, 9, 12, 13, 14,
19, 21, 23, 28 e 30 obtiveram