1. Qual a vantagem do método de Biureto em relação aos outros métodos de
caracterização de proteínas? A REAÇÃO DE BIURETO SE CARACTERIZA PELA FORMAÇÃO DE UM COMPLEXO ENTRE OS RESÍDUOS DE LIGAÇÕES PEPTÍDICAS E O ÍON METÁLICO QUE SE ENCONTRA NO REAGENTE DE BIURETO, SENDO ESTE UM MÉTODO USADO PARA A DETERMINAÇÃO DE CONCENTRAÇÕES DE PROTEÍNAS TOTAIS EM MEIOS DISTINTOS. A VANTAGEM DO MÉTODO DE BIURETO EM RELAÇÃO AOS OUTROS MÉTODOS É QUE ELE QUANTIFICA, OU SEJA, É UM TESTE QUE CONFIRMA SE NAQUELE MEIO TEM PROTEÍNA, EMBORA NÃO SE CONSIGA IDENTIFICAR QUAL PROTEÍNA ESTÁ PRESENTE, MAS CONSEGUE IDENTIFICAR QUAL PROTEÍNA, E PARTINDO DE UM ESPECTOFOTOMETRO 540 NANOMETRO, SERIA POSSÍVEL TAMBÉM VERIFICAR A QUANTIDADE DE PROTEÍNAS DENTRO DA AMOSTRA (PRECISARIA DE UMA CURVA PADRÃO DE PROTEÍNA PARA REALIZAÇÃO DO EXPERIMENTO). PARA A FORMAÇÃO DE UMA PROTEÍNA OU ENZIMA É NECESSÁRIO A UNIÃO DE PEPTIDEOS E PARA A FORMAÇÃO DE PEPTIDEOS PRECISA HAVER A UNIÃO DE AMINOÁCIDOS E ESSA UNIÃO SE DAR PELA LIGAÇÃO PEPTIDICA. OUTROS MÉTODOS IDENTIFICAM A PRESENÇA DE NITROGÊNIO, JÁ O MÉTODO DE BIURETO NO MEIO POSSUI SAIS DE COBRE, ELES VÃO COMPLEXAR O NITROGÊNIO PRESENTE NOS PEPTIDEOS, HAVENDO ESSA COMPLEXAÇÃO VAI TER A MUDANÇA DE COR, VIOLETA OU ROCHO. 2. Quais proteínas foram testadas no teste de Biureto? GELATINA 1%, FENILALANINA 1% 3. Por que ocorre a mudança de cor nas amostras? 4. O MÉTODO DE BIURETO NO MEIO POSSUI SAIS DE COBRE, ELES VÃO COMPLEXAR O NITROGÊNIO PRESENTE NOS PEPTIDEOS, HAVENDO ESSA COMPLEXAÇÃO VAI TER A MUDANÇA DE COR, VIOLETA OU ROCHO. VAI DEPENDER DA QUANTIDADE DE PROTEÍNA QUE TEM NO MEIO. NO REAGENTE TEM O NAOH, NA QUAL TEM A FUNÇÃO DE DESNATURAR A PROTEÍNA, PARA DESNATURAR A LIGAÇÃO PEPTIDICA, A MEDIDA QUE DESNATURA A PROTEÍNA PERDE A SUA CONFORMAÇÃO E EXPÕE AS LIGAÇÕES PEPTIDICAS E É NESSE MOMENTOS QUE OS SAIS DE COBRE VÃO COMPLEXAR ESSES NITROGÊNIOS E VÃO APRESENTAR ESSA COLORAÇÃO. EXISTE TEMBÉM O COBRE E O TARTARATO DE POTÁSSIO QUE VAI GARANTIR QUE ESSE COBRE PERMANEÇA EM SOLUÇÃO E NÃO PRECIPTE.
5. Por que a intensidade das cores é diferente entre as amostras após a
reação? CADA TONALIDADE A DEPENDER DA INTENSIDADE, QUANTO MAIS ROCHO OU VIOLETA FOR, SIGNIFICA QUE POSSUI UMA QUANTIDADE MAIOR DE PROTEÍNAS E QUANTO MENOR A INTENSIDADE, MENOR A QUANTIDADE DE PROTEÍNA
6. Por que é usada a precipitação de proteínas?
7. Quais foram os tipos de precipitação realizados na aula? Qual o principio deles? 8. Quais proteínas foram testadas? 9. Porque a glicose não precipitou? 10. Qual sal é o mais utilizado na precipitação de proténas? 11. Como ocorre a precipitação por solventes orgânicos?