Revista de Patologia do Tocantins 2017; (4): 55-6. 6 acesso uvee Crago: Cerutti PHP, Lopes CG, Lopes Filho §G, Guedes VR (2017) Métodos clagnosticos da Leishmaniose Tegumentar Americana: uma revisio de Iteratura Revista de Patologia do Tocantins, 4(4) 5559 Insttuigdo: *Académico(a) de Medicina, Universidade Federal do Tocantins, Tocantins, Brasil, *Docente, Médico Patologista, Universidade Federal do Tocantins, Tocantins, Brasil [Autor correspondente: Pedro Hen Pietrzaki Ceruti; ppedrohcerutti@gmal.com Editor, Guedes Vv. R. Medicina, Universidade Federal do Tacantins, Brasil Publicado: 01 de dezemioro de 2017. Direites Autorais: © 2017 Cerutt) et al Este & um artigo de acesso aberto que permite 0 uso, 2 distibuigio © a reprodugio som restrigfes om qualquer meio, desde que o autor original ea fonte sejam ereditados. Conflito de interesses declararam que nio existem confitos de imeresses, Dov: 10.20872/uMt 2446-6402 2017v4n4pS6 ‘const et a REVISAO DE LITERATURA METODOS DIAGNOSTICOS DA LEISHMANIOSE TEGUMENTAR AMERICANA: UMA REVISAO DE LITERATURA DIAGNOSTIC METHODS OF AMERICAN LEISHMANIASIS: A LITERATURE REVIEW CUTANEOUS Pedro Henrique Pietrzaki Cerutti', Carine Gongalves Lopes’, Fabio Goncalves Lopes Filho’, Virgilio Ribeiro Guedes”. RESUMO. A leishmaniose tegumentar americana (LTA) é uma doenca infecciosa causada pelo protozodrio do génera Leishmania, De acordo com a OMS é uma das doencas de maior importancia mundial, e se encontra em expansdo pelo pals, devido ao avango urbano nas éreas endémicas do seu vetor. A sua variedade de espécies e manifestacSes atipicas comuns transformam diagnéstico da lelshmaniose tegumentar uma tarefa dificil para os médicos. Uma anamnese completa, conhecimentas sobre a epidemiologia e métodas de diagnéstico sto essenciais para a confirmacao da doenca no periodo inicial, Ao partir do principio de que nao existe exame padrdo ouro para a LTA, este trabalho reine informacbes sobre diferentes métodos diagnésticos e empregabilidade desses testes, de forma a direcionar o pensamento clinico e faciltar a confirmacao da doenca. Palavras-chave: Leishmaniose tegumentar americana; Diagndstico leishmaniose tegumentar; Ferramentas diagnosticas LTA. da ABSTRACT ‘American tegumentary leishmaniasis (ATL) is an infectious disease caused by the protozoan of the genus Leishmania. According to WHO, it is one of the most important diseases worldwide, and is expanding in the country, due to the urban advance in the endemics areas of the vector. The variety of species and common atypical manifestations make the diagnosis of cutaneous leishmaniasis a difficult task for physicians. A thorough history, knowledge of the epidemiology methods of diagnosis are essential for the confirmation of the period. Assuming that there is no gold standard trial for ATL, this work gathers information on different diagnostic methods and employability of these tests, in order to direct clinical thinking and facilitate the confirmation of the disease. Keywords: American tegumentary leishmaniasis; Diagnosis of tegumentary leishmaniasis; ATL diagnostic tools.Revista de Patologia do Tocantins 2017; (4): 55-6. INTRODUGAO A leishmaniose tegumentar americana (LTA) uma doenga endémica em diversas regiées do nosso pais, com relatos t80 antigos quanto 1895, sob o nome de botdo da Bahia. (VALE; FURTADO, 2005) fm expansio no pais, pelo avango urbano sobre as ‘reas de floresta, habitat natural do seu vetor, os mosquitos do género Lutzomyia, sua incidéncia fica atrés apenas da malaria na categoria de doencas causadas por protozoarios. (BARCAROL et al, 2011) Seus agentes etiol6gicos sdo protozosrios do género Leishmania © no Brasil a espécie Leishmania (viannia) braziliensis 0 principal agente etioldgico envolvido com a apresentacio clissica da doenca. (FERNANDES etal, 2016) Diversas outras espécies de Leishmania esto catalogadas no pais, como L(V) guyanesis aparentemente limitada a bacia do amazonas e L. (L.) amazonensis que se distribui desde 0 Amazonas até o sudeste de Minas Gerais, centre outras. (FERREIRA; GOMES; PEREIRA-CHIOCCOLA, 2015; FIOCRUZ, 2016) Fssa_variedade de especies, assim como polimorfismos, em territério nacional implica em dois desafios ara 0s médicos, as apresentagdes atipicas muito comuns, de apresentaco similar 20 grupo de doencas_infecciosas conhecidas pela sigla PLECT —(paracoccidioidomicose, leishmaniose, esporotricose, cromomicose e tuberculose), e 0 peril de resistencias drogas encontrado entre as diferentes cepas de protozoérios. (FERREIRA; GOMES; PEREIRA- CHIOCCOLA, 2015; SHIRIAN et al, 2014; BARCAROL et al, 2011) (© sucesso do diagndstico e tratamento da doenca baseia-se, portanto, numa anamnese séida, conhecimentos sobre a epidemiologia e exames complementares para confirmagdo da doenga, (GOMES et a, 2014) Existem diversos exames e testes empregados no Giagndstico da LTA, esses variam muito de sensibiidade e espetifcidade, n3o existindo um exame considerado padrio oro, (ANDRADE et al, 2005), ‘do empregados exames que tém como base 0 uso de antigenos, testes sorolégicos, examinacSo direta e histopatolégica, imunofluorescéncia, cultura e reacBes em cadeia de polimerase (PCR). 0 uso de testes seriados ou em paralelo pode ser necessirio, por isso é preciso levar em conta 25 propriedades de cada exame, assim como a disponibilidade esses nas diferentes redes de sauide nacionais (ASSIS et al, 2015) Fsse trabalho tem como objetivo revisar e atualizar os conceitos dos testes diagnésticos aplicados na investigagio os casos de LTA, dessa forma fornecer informagao sdlida para que o médico de qualquer regido do pais possa confirmar © diagnéstico da doenca em tempo e com 0 uso de recursos, adequados MATERIAIS € METODOS © trabalho foi desenvolvido através de pesquisas bibliograficas nas bases de dados Pubmed, Scielo, Lilacs Google académico que ocorreram no periodo de janeiro a Dov: 10.20872/uMt 2446-6402 2017v4n4pS6 conumietal | 56 junho de 2017. Foram pesquisadas palavras chave como “Leishmaniose tegumentar”, “diagnéstico da Leishmaniose tegumentar” e “ferramentas diagnésticas LTA”. Com a selecSo de referéncias bibliograficas de relevancia, foi preparado este trabalho de reviso sobre os métodos diagnésticos da leishmaniose tegumentar americana, que aborda desde métodos conceituados e praticados em todo o mundo, até as novas propostas em estudo. DESENVOLVIMENTO As manifestagdes clnicas da LTA so bastante varidveis e dependem de fatores relacionados a0 hospedeiro e 20 parasita. A apresentac3o mais clissica € 2 chamada leishmaniose cutinea localizada, que inicialmente se presenta como um ponto eritemataso no local da picada do mosquito, esse evolui ao longo de 2 12 semenas para uma papula e entdo para uma ileera no periodo de 6 meses Manifestagées aberrantes a essas devem ser investigadss, pois simulam a aparéncia das lesdes presentes no ja citado grupo dde doengas PLECT. (GUIMARAES et al, 2005) Outras apresentagdes $80 a Leishmaniose disseminada cutanea e a difusa cutanes, a primeira caracterizada pela presenca de mais de 10 placas como a cima descrita ou como lesio acneiforme, pode afetar as mucosas © acredita-se estar relacionada a disseminacl0 linfatica dos parasitas, na segunda as lesdes tendem a ser nodulares ou em extensas placas aifusas, que raramente ulceram e esto ligadas a deficiéncias na resposta imunolégica do hospedeiro (MACHADO etal, 2004; VIANA eta, 2013) ‘Na forma mucosa so encontradas lesSes ulceradas, muitas vezes associadas a deformidades na estrutura facial, com apresentagdo comum no septo nasal, associada fortemente a infecsio por L (L) brasiliensis. (GOMES et al, 2018) Demais lesbes atipicas s8o relacionadas a pacientes infectados por HIV @ também com virus endégenos do protozoério igados a exacerbagdo dos sintomas em murinos. (PARMENTIER et al, 2016) Papel da epidemiologia Relatos de viagens para zonas de mata nativa, ou regides de forte endemia para a doenca sao informagdes de grande valia para a suspeita diagnéstica da doenca, no entanto, a répida expanstio dos territ6rios urbanos torna provavel a infeccio pelo protozodria em pacientes sem 0 historico de viagens. (MAGALHAES; MOURA, 2015) Regionalismos em relagdo as espécies de Leishmania demonstram ser bastante significativos em rela¢do a evolucso das lesdes e perfil de resistencia a drogas, cepas de Leishmania (Viannia) braziliensis, sio as mais comuns nas regides centro-oeste, sudeste, mas estdo presentes em todo Brasil, as regides amazonicas e também o nordeste do pals tem incidéncias mais altas de protozodrios atipicos como 0 Leishmania (Viannia) naiffi e L(V.) panamensis.(FERREIRA; GOMES; PEREIRA-CHIOCCOLA, 2015; FAGUNDES-SILVA et al, 2015)Revista de Patologs do Tocantins 2017: 44): 55-59. vor Emprego dos exames complementares Frente a suspeitas clinicas © epidemiolégicas da presenca de LTA, 0 préximo passo € trasar uma estratégia para a confirmaso diagndstica da doenca. Devido a auséncia de um exame padrlo ouro, os testes devem ser escolhidos em fungo do tempo de evolucdo da doenga, nivel de complexidade do teste e viabilidade de aplicago do mesmo. {GOMES et al, 2014) Segue uma descricdo dos testes disponiveis para diagndstico da LTA no Brasil, Reacdo de Montenegro © teste intradérmico de Montenegro, jé existe ha mais de 90 anos © representa o principal exame complementar para o diagnéstico da lelshmaniose tegumentar ‘americana (LTA) em areas endémicas, trata-se de uma colecdo de antigenos extraidos de culturas de Leishmania spp. de acordo com os agentes etiolégicos locais baseia-se na resposta imunolégica desenvolvida apés 0 contato com o protozoario. Consiste na inoculago dos antigenos na derme do paciente, apés 48 2 72 horas do procedimento este & reavaliado, 4 linhas s80 tragadas nos pontos cardiais da aplicacSo, de mais distante para mais préximo, até ser detectada, no local da aplicag3o, uma regio endurecida, & considerado positive se o dimetro da placa for maior do que S mm. (JOSE et a., 2001) Essa reacio de hipersensibilidade tardia possul sensibilidade variando entre 86% a 100%, no entanto, reagbes cruzadas do coquetel de antigenos utilizado diminuem bastante a especificidade dessa técnica, também deve ser consideradas as seguintes pecullaridades do teste, existe uma janela imunologica de até 4 meses apés a infeccao para a reatividade positiva do teste, nem diferencia infeccBes atuals @ passadas, 0 que exclui seu valor em pacientes com o histérico positivo © costuma ser negativa em LTA com apresentacgo cutanea_difusa e+ em _ pacientes imunossuprimidos, Pode estar positive em individuos sadios de zonas endémicas, 0 que indica a possibilidade de infeccBes subclinicas, mas de forma geral o teste pode ser considerado de bom valor preditiva negativo. (ANDRADE et al., 2005) Testes sorologicos 0 diagnéstico sorolégico da LTA é uma ferramenta de uso controverso na literatura, com alguns autores que consideram 0 uso dessa ferramenta bastante limitado. (ZEVREK; KORKMAZ; OZBEL, 2007; POMARES et al., 2012), A sensibilidade e especificidade desses testes varia bastante segundo 0 método utllizado, as reagées de imunofluorescéncia indireta (IF, ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) e Western blot sao as mais citadas nos trabalhos sobre o assunto, com os dois primeiros alcancando uma sensibilidade de 90% e 0 terceiro até 100%, mas apresentando maior complexidade © custo que 0s demai Nesses casos a realizacdo de testes em paralelo pode aumentar a sensibilidade os exames. (ZEYREK; KORKMAZ; (OZBEL, 2007; SZARGIKI et al, 2009) Fato a ser considerado na anilise dos resultados dos testes sorolégicos ¢ a possibilidade de reagdes cruzadas com 10.2087 3/un. 2446-6492 2017V404p55 ‘corutet al 3 Infecetes caudadas por outros protozodrios da familia tripanosoma, como 0 T. cruzi, causador da doenga de chagas, que tem perfil de endémico semelhante ao da LTA, o que Giminui a especificidade do teste. (LUCIANO et a., 2003) Outros fatores que devem ser considerados sio que testes realizados nos 3 primeiros meses de infeccSo tendem a ser negativos, assim como os empregados em pacientes que possuem a forma difusa da doenca e imunossuprimidos de forma semelhante a0 que € observado na reacdo de Montenegro. (ANDRADE et al., 2005) Novos antigenos alvo para os testes sorolégicos tem sido estudados para assim diminuir o numero de reacées cruzadas e também aumentar sua sensibilidade para deteccao de antigenos referentes a forma amastigota e promastigota do protezoario, empregando proteinas recombinantes obtidas a partir de uma selecio de proteinas mais especificas do agente etiolbgico, algumas com a sensibilidade e especificidade de até 100%, como a tryparedoxin peroxidase. (DUARTE et al, 2015; MENEZES-SOUZA et al., 2015) Outro papel dos testes soralégicos ¢ 0 acompanhamento dos titulos de IgM e IgG dos individuos como forma de atestar a cura clinica, pois estes tentem a permanecer estaveis ou decrescer a0 longo do primeiro ano apés a cura clinica e o aumento dos titulos tem potencial de prever a recidiva da doenga. (FAGUNDES-SILVA et al., 2015) Indicado como exame de primeira escolha para a avaliac3o da LTA no Brasil pela Fundaco Nacional de Saude (FUNASA), apresenta a vantagem de ser répido e facil de ser coletado e virtualmente confirma o diagnéstico em caso do achado da amastigota, a coleta do material pode ser feita pelo raspado da lesSo, aspirado por agulha fina (PAF) ou mesmo pelo lavado da cavidade oral e nasal. (MINISTERIO DA SAUDE, 2017) Tem melhores resultados nas primeiras semanas ¢ meses da instalag3o da doenga, quando a contagem de parasitas é malor, sua sensibilidade decresce ao longo dos meses de evolucio da lesio, a sensibilidade ¢ maior com 0 método PAF quando comparada com o raspado da lesio, 89% conta 80%, (HOSSEINZADEH; OMIDIFAR; LOHRASE, 2012) Vantagens da coleta em gota espessa sobre 0 cesfregaco fino ja foram observadas em estudos de campo, com diferencas também em relagio a0 tempo de deteccio do protezoario relacionadas com 6 tipo de coloragao utilizado nas laminas, entre Papanicalau, hematoxilina eosina, Diff Quick e ‘Wright Giemsa, 0 ultimo possibilitou a deteccdo da Leishmania ‘em tempo consideravelmente menor que as demais, fato ligado a0 melhor contraste obtido por esse método entre as amastigotas e os elementos do sangue periférico, Porém sem diferencas em relago a sensibilidade entre os contrastes. (SAAB et al,, 2015) Exame Histopatolégico Ferramenta classica no diagnéstico da LTA, a bidpsia deve ser feita nas bordas das lesSes onde a carga parasitaria é maior € com os devides cuidados para manipulaglo e armazenamento do tecido observados. (MINISTERIO. DA ‘SAUDE, 2017) Revista de Patologia do Tocantin, Vol. 4 No. 4, Dezembro 2017Revista de Patologs do Tocantins 2017: 44): 55-59. vor Uma boa opcio para diggnéstico de lesdes recentes e crénicas, a aplicago de técnicas de imunocitoquimica imuno-histoquimica amplia grandemente a sensibilidade do teste, com niveis compardvels as técnicas de cultura e PCR, abordadas a seguir ¢ consideradas as técnicas mais sensiveis. {OUARTE; ROCHAEL, 2006) ‘As bi6psias podem ser obtidas pela técnica de punch", com a qual fragmentos de 3 a 5 mm so retirados facilmente, 0 local deve ser apropriadamente limpo © a degermacao feita, 0 fragmento deve ser manipulado sem que as estruturas.sejam danificadas e conservado em alcool (MINISTERIO DA SAUDE, 2017) Esses cuidados faciitam a visualizagao da Leishmania spp. dessa forma aumentam a especificidade do teste, pois diminuem a ocorréncia de artefatos e a deformacéo dos elementos a serem observados. (VIANA et al, 2013) Cinco padres histolbgicos foram descritos para LTA fem trabalhos de Ridley et al. (1980) so eles, 1) Reacdo Exsudativa Celular, constituida por um _infitrado histiolinfoplasmocitério; 2) Reagdo Exsudativa e Necrética, na qual ocorre uma necrose no seio do infitrado inflamatorio; 3) Reago Exsudativa e —Necrético-Granvlomatosa, que corresponde 20 quadro descrito como inflamacdo erénica granulomatosa com necrose; 4) Reagdo Exsudstiva e Granulomatosa, onde se observa uma reacéo granulomatosa desorganizada, sem que esteja presente necrose tecidual; 5) Reagao Exsudativa e Tuberculbide, caracterizada pelo granuloma tuberculbide. © tipo 1 foi identificado por Magalhées et al. (1986) como 0 mais incidente em seu trabalho, as demais formas podem representar verdadeiros desafios diagndsticos por suas semelhancas com outras patologias. (AQUN et al, 2014) cultura Considerado o métado mais especifico de identifica¢do da leishmaniose, & pouco utilizado por seu alto 20 custo e baixa sensibilidade. Os meios de cultivo in vitro ‘empregados podem ser o NNN - Nowy, MacNeal, e Nicolle € LIT (Liver Infusion Triptose) ou Schneider acrescido de 10% de soro fetal bovino (SFB), e com cultivo entre 24°C e 26°C, com resultado esperado para o prazo de 5 dias. Mesmo que nao ‘ocorra 0 crescimento nese prazo, a amostra deve ser observada por 30 dias. (MINISTERIO DA SAUDE, 2017) A microcultura é uma opcio mais répida, apenas 2 dias, menos dispendiosa e demonstrou uma acurdcia diagnéstica superior a da cultura tradicional, com a desvantagem de produzir menos formas amastigotas que 2 cultura tradicional. (MARTINS et al, 2014) Culturas in vivo s80 uma opgio que carrega certos dilemas éticos e demanda maior aptidgo técnica para ser executada, por esses motivos no castusam ser empregadas no diagnéstico da LTA. (GOMES et al, 2014) Diagnéstico molecular Considerado 0 métoda de maior sensibilidade © especificidade dentre todos os ja apresentados, 0 PCR infeliamente tem uso limitado por ser caro e de execusio complexa, por isso fica limitado aos grandes centros e laboratérios de pesquisa, (BOGGILD et al, 2008) 10.2087 3/un. 2446-6492 2017V404p55 ‘corutet al 58 0s materiais para extracio do material genético so (0s mais variados, desde amostras coletadas e condicionadas ‘em papel filtro, ha amostras de raspadas, fragmentos de biopsias congelados ou em parafina, qualquer material biolégico que contenha fragmentos de DNA de Leishmania spp. poderd ser utlizado, (SILVA et al, 2012) Certa variago na sensibilidade dos testes ocorre em diferentes publicagdes, esta costuma variar entre 70% a 100%, 0 que pode ser explicado por diferentes métodos de extracso @ armazenamento do material biopsiado, além de formas distintas para 2 manipulacdo e obten¢o dos _materiais Benéticos. A especificidade & considerada de 100%, (SHIRIAN et al, 2014; PRESTES et al., 2015; SAAB et al, 2015) Outra possibilidade € a utilizagdo das técnicas de reagio da transcriptase reversa (RT-PCR) e Polimorfismo no Comprimento de Fragmentos de Restricio —(RFLP-PCR), para © aumento da sensibilidade e determinagdo das espécies de Leishmania. (FERREIRA; GOMES; PEREIRA-CHIOCCOLA, 2015; GOMES et al,, 2014) Uma técnica promissora de diagnéstico por PCR em campo vem sendo estudada por Saldarriaga et al. (2016), esta apresenta a sensibilidade préxima de 100%, com métodos de extrago de material nuclear de facil aplicacdo e possibilidade de especificacio das cepas. COMENTARIOS Dafinir 0 diagnéstico dessa doenca de perfil grave € tratada com um perfil de drogas de alta toxicidade é fundamental para 0 bom prognéstico e esté nos principios do que € a boa pratica médica. Observados os critérios clinicos, epidemiolégicos e a aplicabilidade das _ferramentas diagndsticas com suas indicagdes e peculiaridades, descritas esse trabalho, é possivel tracar uma estratégia diagnéstica eficiente para a determinag3o da doenca. Os critérios para a escolha do teste podem ser definidos em relagdo a forma de apresentaggo da doenca, tempo de instalasio, fatores relacionadas a imunidade do hospedeira e disponibilidade dos melas diagnésticos, 0 que pode ser definida de forma simples pelo médico ao analisar as informag&es contidas nesse trabalho. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS 1. ANDRADE, Bruno @. et al, Métodos Diagnésticos da Leishmaniose Tegumantar: Fatos, Falécias e Perspectivas. Gaz IMéd. Bahia, [salvador], v. 75, n 1, .75-82, lan, 2005, AOUN J etal. Caseating Granulomas in Leishmaniasis. PLoS Neg] Trop Dis 8(10}: ©3255, 2014 ASSIS, Téa Santana Machado de et al. Study of implementation and direct cost estimates for diagnostic tests for human visceral leishmaniasis in an urban area in Brazil, Cad. Saude PAblica, Rio de Janeiro, Ry v. 31, n. 10, p.2127-2136, out. 2015. BARCAROL, Leandro Nicola et al, Aspectos clinicos © epidemiolégicos da lelshmaniose tegumentar americana: uma reviso da literatura. XVI Seminario Interinstitucional de Ensino, Pesquisa e Extensio: universidade no desenvolvimento regionals. L], 2011 BOGGILD, Andrea K. et al. Optimization of Microculture and Evaluation of Miniculture for the Isolation of Leishmania Parasites from Cutaneous Lesions in Per. Am. J. Trop. Med. Hyg. [SL], v.79, n.6, 847-852, 2008 Cutaneous Revista de Patologia do Tocantin, Vol. 4 No. 4, Dezembro 2017Revista de Patologs do Tocantins 2017: 44): 55-59. 6 10 aL 2 2 4. 45, 16. v7. 18 19. 20. a. 2, Dor RIDLEY, DS. A histological classification of cutaneous leishmaniasis and its geographical expression. Trans R Soc Trop Med Hyg, [5 Lv. 74, 9515-521, 01 jan 1980. DUARTE, Maria Luisa; ROCHAEL Mayra Carrio. Perfil histopatoldgico e imuno-histoquimico da _leishmaniose ‘egumentar americana com énfase nos dendrécitos dérmicos Frllat, An Bras Dermatol, 2006, Macel6 - (AL), v. 81, n. 6, 541-548, 03 mato 2006 DUARTE, Mariana C. et al. Proteing Selected in Leishmania (Viannia) braziliensis by an Immunoproteomic Approach with Potential Seradiagnasis Applications for Tegumentary Leishmaniasis, Clnieal and Vaceine Immunology, [s. LI, ¥. 22,0, 11, p1187-1196, nov, 2015. FAGUNDES-SILVA, Gisele Aparecida et al. Leishmania (Viannia) naif: rare enough to be neglected? Mem Inst Oswaldo Cru2, Ro de Janeiro Rl, v 110, n. 6, p.797-800, set. 2015, FERNANDES A.C. S, et ol. American cutangous leishmaniasis with unusuol clinical presentation and response to treatment. Rev inst med trop So Paulo. 2016;58:20, FERREIRA, LT; GOMES, AHS & PEREIRA-CHIOCCOLA, V.L. Genotype characterization of Leishmania (Viannia) braziiensis Isolated from human and canine biopsies with American ‘cutaneous leishmaniasis. Rev. Inst. Med. Trop. S80 Paulo, 573): 257-262, 2015, FIOCRUZ LEISHMANIOSE TEGUMENTAR AMERICANA 2016, Disponivel em: https /mww.cpqrfocruz.b/informacao_em_saude/CICT/Leis hhmaniase.htmn>. Acesso er: 18 ago. 2017. GOMES, Ciro Martins et al. Complementary exams in the diagnosis of American tegumentary leishmaniasis. Anais Brasileiros de Dermatologi, [S| v.88, n.5, p.701-711, 2014, GUIMARAES, Luiz Henrique et al, Aspectos Clinicos da Leishmaniose Tegumentar. Gazeta Médica da Bahia, [salvador], v.75, 1, 66-74, jan, 2008. HOSSEINZADEH, Massood; OMIDIFAR, Navid; LOHRASB, Mohamad Hosein, Use of fine nese aspiration cytology inthe diagnosis of cutaneous leishmaniasis: 2 comparison with the conventional seraping method, Trop Doct, {s. Ll, v. 42, n. 2, .112-113, abr. 2012 JOSE, Fabio Freire et al. Avaliagdo do poder sensibiizante da reaglo Montenegro. Revista da Sociedade Brasileira de Medicina Tropica, [s. LJ, v.34, n. 6, 9537-542, nov. 2001, LUCIANO, Raquel Martins et al. Avaliagio da reatividade cruzada entre antigenos de Leishmania spp € Trypanosoma cruzi_na resposta soroldgica de cles pela técnica de imunofluorescéncia indireta (RIF). Braz. J. Vet. Ros. Anim, Sci, S80 Paulo, $8, v4, n.3, p.181-187, 2003, MACHADO, Paulo RL. etal. Macanismas de resposta imune ds infecgdes. Anais Grasleiros de Dermatologa, [s LI, v. 73, n. 6, .647-664, dez, 2006 MAGALHAES, Albino Verbosa de et al. Histopatologia da leishmaniose tegumentar por _lelshmania_brarlensis braalinsis padres histopatoldgicos @ estudo evolutio das lesées. Rev. Inst. Med. Trop, Sdo Paulo, SP, v.28, n. 4, p.253- 262, jul 1986, MAGALHAES, Sandra Célis Muniz; MOURA, Kathia. Viviane Ramos de. A expansio da leishmaniose tegumentar americana no municipio de Montes Claros - Minas Gerais. Revista brasileica de geografia médica e da sadde, [Minas Geral, v.21, 1.11, 80-92, dex. 2015. MARTINS, Ana Luiza Grizzo Peres et al. American tegumentary leishmaniasis: correlations among immunological, histopathological and clinical parameters. Plos Neglocted Tropical Diseases, Sdo Paulo, Sp, v.89, n. 1, p.52-58, 2014. IMENEZES-SOUZA D; et al. Improving Serodiagnosis of Human ‘and Conine Leishmaniasis with Recombinant telshmania brailensis Cathepsin Llike Protein and a Synthetic Peptide 10,2087 3/uf. 2446-6492 2017 40g 23, 24, 2 26 27 28 29, 30, 31 32 3 3 corutietal. | 59 Containing Its Linear B-cell Epitope. PLoS Neg! Trop Dis 911): £3426, 2015, IMINISTERIO DA SAUDE. Secretaria de Vigilancia em Saude, Departamento de Vigilancia das Doencas Transmissvels. Manual de vigilincia da lelshmaniose tegumentar [recurso cletrdnica] / Ministério da Sade, Secretaria de Viglincia em Satide, Departamento de Vigilancia das Doengas Transmissivels, ~ Brasilia : Ministério da Saude, 2017. 189 pl PARMENTIER, Laurent et al, Case Report: Severe Cutaneous Leishmaniasis in a Human Immunodeficiency Virus Patient Coinfected with Leishmania braziiensis and Its Endosymbiotic Virus. The American Society Of Tropical Medicine And Hygiene, [s. Ll v.94, n. 4, 840-843, 2016, POMARES C; et al. Western blot analysis as an aid for the clagnosis of cutaneous leishmaniasis due to Lelshmania ‘major. Trans 8 Soe Trop Med Hyg. 2022 Ju;106:452-454 PPRESTES, Suzane Ribeiro etal, Polymerase chain reaction-based method for the identifi cation of Leishmania (Viannia) braziliensis and Leishmania (Viannia) guyanensis in. mucosal tissues conserved in paraffin, Revista da Sociedade Brasileira ‘de Medicina Tropical, Manaus, AM., v.48, n 5, p.555-559, set, 2015, SAAB, Mario et al. Diagnosis of Cutaneous Leishmaniasis: Why Punch When You Can Serape? Am. J. Trop. Med. Hyg, [SLL ¥ 92, n. 3, 9518-522, 2015. SALDARRIAGA 0. A. et al. No Innovotive Field Applicable Molecular Test to Dizgnose Cutaneous Leishmania Vionnia spp. Infections. PLosNegiTrop Dist0(4):20004638. 2016 SHIRIAN, Sadegh etal. Comparison of Conventional, Molecular, and Immunchistochemical Methods in Diagnosis of Typical and Atypical Cutaneous Leishmaniasis. Arch Pathol Lab Mad, [5.L], \ 138, n 1, 9.235-240, fev, 2014 SILVA, J080 Guilherme Lino da et al, Comparison among three polymerase chain reaction assays on detection of DNA from Lelshmania in biological samples from patients with American cutaneous leishmaniasis. Revista da Sociedade Brasileira de Medicina Tropical, Belo Horizonte, MG., v.45, n. 2, p.257-259, mar, 2012, SZARGIK, Regiane et al. Comparison of Serological and Parasitological Methods for Cutaneous Leishmaniasis Diagnosis Inthe State of Parans, Brazil. The Brazlian Journal Of Infectious Diseases, [s. LJ, v.13, n. 1, 47-52, fev. 2008. VALE, Everton Carlos ‘Siviero do; FURTADO, Tancredo. Leishmaniose tegumentar no. Brasil revisfo istrica da corigem, expansao @ etilogia® Tegumentary leishmaniasis in Braal:& historical review related to the origi, expansion and etiology. Anais Brasileires de Dermatologia [s. LI, v. 80, n. 4, p.421-428, 2008. VIANA, Agostinho Goncalves at al. Histopathological and immunohistochemical aspects of American cutaneous leishmaniasis before and after different treatments. Anais Brasileiros de Dermatologa,[s. LI, v. 88, n. 1, p.32-40, Jun 2013 ZEYREK FY, KORKMAZ M, OZBEL Y. Serodiagnosis of anthroponotic cutaneous leishmaniasis (ACL) caused by Leishmania tropica in Santurfa Province, Turkey, where ACL Is highly endemic. Clin Vaccine Immunol. 2007;14:1409-1415. Revista de Patologia do Tocantin, Vol. 4 No. 4, Dezembro 2017