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0.6
0.5
0.4
0.3
V
0.2
0.1
0
-1.00E+04 1.00E+04 3.00E+04 5.00E+04 7.00E+04 9.00E+04 1.10E+05 1.30E+05 1.50E+05
[S]
2.-Se prepararon diez mezclas de reacción, cada una conteniendo la misma concentración de
enzima, pero diferentes concentraciones de sustrato, a las cuales se les determinó su velocidad
inicial, obteniendo los datos que se muestran a continuación. Empleando la ecuación de
Lineweaver-Burk, determine gráficamente la Vmax y la Km de la reacción.
a) Discuta cuál es el rango de las concentraciones de sustrato más útil para estas
determinaciones
b) Con los mismos datos emplee el trazo directo y compare los valores.
c) ¿Cuáles son las ventajas del trazo directo comparado con el de Lineweaver-Burk?
40000
35000
y = 5302.4x + 9418.8
30000
25000
1/V
20000
15000
10000
5000
0
0 1 2 3 4 5 6
1/[S]
7.00E-05
6.00E-05
5.00E-05
4.00E-05
3.00E-05
2.00E-05
1.00E-05
0.00E+00
0.00E+00 2.00E-04 4.00E-04 6.00E-04 8.00E-04 1.00E-03 1.20E-03
3.-Se prepararon cinco mezclas de reacción conteniendo concentraciones iguales de una enzima
que se mezcló con las concentraciones de sustrato indicadas en la siguiente tabla. El experimento
incluía otro juego de reacciones en presencia de un inhibidor de la enzima, el cual se adicionó en
una concentración de 2.2x10-4 M en cada mezcla de reacción.
50000
40000
Inhi. Ausente
inhibidor presente
30000
10000
0
-2000 0 2000 4000 6000 8000 10000 12000
4.-Haciendo un trazo lineal de los datos siguientes, los cuales fueron obtenidos de un experimento
similar al del problema anterior.
a) Indique de que tipo de inhibidor se trata.
b) ¿Qué información adicional necesitarías para determinar la KI del trazo?
c) ¿Cómo usarías tu trazo para determinar la KI (no lo calcule)?
7000000
6000000
5000000
4000000
3000000
y = 59.326x + 1E+06
2000000
1000000
0
0 5000 10000 15000 20000 25000
a) Es un inhibidor A competitivo
b) La concentración del inhibidor
c) Extrapolaria para encontrar interseccion en X y despejar la KI
5. La siguiente tabla indica el rango en la cual una enzima cataliza la conversión de un sustrato
siguiendo una cinética del tipo de Michaelis-Menten: 1) en ausencia de inhibidor; 2) y 3) en
presencia de una concentración de 10 mM de cada uno de dos inhibidores. Asumir que [E]T es la
misma para todas las reacciones.
[S] (1) Vo (2) Vo (3) Vo 1/[S] (1) Vo (2) Vo (3) Vo (1) 1/Vo (2) 1/Vo (3) 1/Vo
(mM) (M.s-1) (M.s-1 ) (M.s-1) (mM) (mMs-1) (mMs-1) (mMs-1) (mMs-1) (mMs-1) (mMs-1)
1 2.5 1.17 0.77 1 2.50E-03 0.00117 0.00077 400 855 1299
2 4 2.1 1.25 2 4.00E-03 0.0021 0.00125 250 476 800
5 6.3 4 2 5 6.30E-03 0.004 0.002 159 250 500
10 7.6 5.7 2.5 10 7.60E-03 0.0057 0.0025 132 175 400
20 9 7.2 2.86 20 9.00E-03 0.0072 0.00286 111 139 350
1.00E-02
9.00E-03
8.00E-03
Ausencia del inhibidor
7.00E-03
6.00E-03
5.00E-03
4.00E-03
3.00E-03
2.00E-03
1.00E-03
0.00E+00
0 5 10 15 20 25
0.008
0.007
0.006
0.005
Inhibidor A
0.004
0.003
0.002
0.001
0
0 5 10 15 20 25
0.0035
0.003
0.0025
Inhibidor B
0.002
0.0015
0.001
0.0005
0
0 5 10 15 20 25
Sin inhibidor
Vmax= 0.0085 mMs-1
Km= 2.2 mM