Você está na página 1de 38

ENZIMAS

▪ Enzimologia

▪ Fontes de Enzimas (Micro-organismos, Tecidos Vegetais e

Animais)

▪ Aplicações de Enzimas
Enzimologia
▪ Enzimologia: é a ciência que estuda as enzimas e todos os demais fatores
relacionados à sua ação.

▪ Enzimas são moléculas ou proteínas (formada por aminoácidos) que atuam


como catalisadores de reações específicas. Apresentam elevada massa molar
(15000-milhões Da) Composto B (produto)

Reação
catalisada
pela enzima

Composto A (substrato)

Centro ativo ou sítio catalítico


Observe que não há consumo ou
de uma enzima é a porção da molécula
onde ocorre a atividade catalítica modificação permanente da enzima
O que são as enzimas?

❑ Proteínas:

◼ Alto grau de especificidade com substratos.

❑ Apresentam poder catalítico:

◼ Muito maior do que catalisadores sintéticos

❑ Aceleram reações químicas:

◼ Em condições suaves de temperatura e pH.

❑ São o centro e o objeto de estudo principal da bioquímica:

◼ Atuando de forma organizada catalisam centenas de reações que


degradam as moléculas dos nutrientes.

❑ Enzimas realizam o controle preciso do metabolismo celular.

3
❖ ENZIMAS
• Quimicamente, são proteínas globulares constituídas de longas
cadeias de aminoácidos unidas por ligações peptídicas

✓ Atividade catalítica:
– Integridade da conformação proteica nativa;
– Perda da atividade = desnaturação e dissociação em subunidades.

5
❖ Algumas Características dos Sítios Ativos

• O sítio ativo é uma fenda ou fissura na estrutura da molécula da enzima;

• resíduos de aminoácidos capazes de interagir com o substrato e formação do


produto.

• O sítio ativo ocupa uma parte relativamente pequena da enzima;

7
Sítio Ativo Enzimático

Antes de interagir Após interagir com o


com o substrato substrato

8
❖ Algumas Características dos Sítios Ativos

• O sítio ativo é uma fenda ou fissura na estrutura da molécula da enzima;

• resíduos de aminoácidos capazes de interagir com o substrato e formação do


produto.

• O sítio ativo ocupa uma parte relativamente pequena da enzima;

• O sítio ativo tem conformação tridimensional;

• O substrato é ligado à enzima através de múltiplas forças fracas;

• A especificidade da ligação depende do arranjo precisamente definido dos


átomos no sítio ativo.

9
❑ Componente químico adicional necessário para a função:

◼ Cofator: íons inorgânicos

◼ Coenzima: moléculas orgânicas complexas

◼ Se liga muito firmemente: grupo prostético.

❑Enzima completa: holoenzima

◼Parte proteica: apoenzima ou apoproteína


10
11
❖Enzimas: Catalisadores
1. Aceleram a taxa de reação no sentido do seu equilíbrio
2. Não alteram o estado final (equilíbrio termodinâmico) de um dado sistema
químico
3. Participam da reação, mas ao final não têm sua concentração alterada
Condição de ativação:
ponto no qual a probabilidade
de que uma reação química
ocorra para originar o
produto é alta!

12
❑ Mecanismo de Ação

Teoria da Colisão:

➢ As reações químicas acontecem quando ligações são quebradas ou


formadas.

➢ Para isto átomos, íons e moléculas devem colidir.

➢ Todos os átomos, íons e moléculas estão em constante movimento e


portanto colidindo constantemente.

➢ A energia transferida pelas partículas na colisão pode desorganizar


suas estruturas eletrônicas o suficiente para que as ligações químicas
sejam quebradas ou novas ligações se formem.

13
Enzimas: Catalisadores

Não alteram o estado de equilíbrio

❑ Reduzem a energia de ativação

(barreira energética a ser vencida para que

reagente se transforme em produto)

14
14
❖Energia de ativação - catálise enzimática e não enzimática

Processo Catalisador Ea (Kcal/mol)

Decomposição do peróxido de nenhum 18,0


hidrogênio platina coloidal 13,0
catalase 7,0
Hidrólise da caseína íon hidrogênio 20,6
tripsina 12,0
Hidrólise da sacarose íon hidrogênio 25,6
invertase 10,0
Hidrólise do -metilglicosídeo íon hidrogênio 32,6
-glicosidase 12,2

15
❑ Características Gerais da Enzima

- Apresentam alto grau de especificidade;

- São produtos naturais biológicos;

- São altamente eficientes, acelerando a velocidade das reações (106 a


1012 + rápida);

- São econômicas, reduzindo a energia de ativação;

- Não são tóxicas;

- Condições favoráveis de pH, temperatura, polaridade do solvente e


força iônica.
16
Obtenção das Enzimas
❑ Fontes:

Lipase pancreática, Pepsina, Renina,


Animais Quimiotripsina, Catalase
(tecidos específicos)

Vegetais Bromelina, Papaína

Lactase: A.niger
Microrganismos
Lipase: Pseudomonas aeruginosa

17
Obtenção Industrial de Enzimas – Fontes

animais

18
Classificação de Enzimas
• adição do sufixo ASE ao nome do substrato (ex: urease, catalisa
hidrólise da uréia em amônia e CO2

•adição do sufixo ASE ao tipo de reação catalisada (ex: álcool


desidrogenase)

•nome trivial (ex: pepsina, tripsina, catalase)

•nomes recomendados pela comissão internacional em enzimas


23
❑ União Internacional de Bioquímica e Biologia Molecular
(UIBBM)
• 1955 - Comissão de Enzimas (EC) da União Internacional de Bioquímica (IUB)
→ denominação e classificação

• classificadas em seis grandes grupos, de acordo com o tipo de reação


envolvida

• Cada enzima descrita recebe um número de classificação, conhecido por “E.C.”,


que é composto por 4 dígitos:

1. Classe
2. Sub-classe dentro da classe
3. grupos químicos específicos que participam da reação.
4. a enzima, propriamente dita

24
❑ Exemplo:

ATP + D-Glicose ADP + D-Glicose-6-fosfato


Glicose fosfotransferase

E.C.

2 - Classe - Transferase
7 - Subclasse - Fosfotransferases
1 - Sub-subclasse - Fosfotransferase que utiliza grupo hidroxila como receptor
1 - Indica ser a D-glicose o receptor do grupo fosfato

Nome trivial:
Hexoquinase
25
✓ As enzimas podem ser classificadas em 6 classes:

❑ Oxidorredutases;
❑ Transferases;
❑ Hidrolases;
❑ Liases;
❑ Isomerases;
❑ Ligases.

26
1. Oxirredutases – Reações de oxidação/Redução

Exemplo: Lactato desidrogenase

Redução Ác. Pirúvico


à Ác. lático

27
2. Transferases - Transferência de grupos

Exemplo Hexoquinase

Tranferência do P
do ATP para glicose

28
3. Hidrolases - Reações de Hidrólise

Exemplo: Lactase

Catalisa a hidrólise da lactose em glicose e galactose

29
4. Liases – Adição ou remoção de grupos (H2O, NH4+, CO2).
[compostos com duplas ligações]

Ex: Fumarase

hidratação de fumarato em L-malato

30
5. Isomerases – Transferência de grupos dentro da mesma molécula,
formação de isômeros

Exemplo: Triose Fosfato Isomerase

Interconversão reversível de:


dihidroxiacetona fosfato e D-gliceraldeido-3-fosfato

31
6. Ligases – catalisam a ligação de duas moléculas para a formação
de novas moléculas, sempre às custas de energia. [com hidrólise da
ligação pirofosfato na molécula de ATP (ou uma semelhante,
igualmente trifosfatada)]

Exemplo: Piruvato carboxilase

Formadora de ligação C-C

32
Classificação segundo a Comissão de Enzimas
1. Oxido-redutases (reações de oxidação-redução ou transferência de elétrons)
1.1.atuam em CH-OH
1.2.atuam em C=O
1.3.atuam em C=CH-
1.4.atuam em CH-NH2
1.5.atuam em CH-NH-
1.6.atuam em NADH, NADPH

2. Transferases (transferem grupos funcionais entre moléculas)


2.1.grupos com um carbono
2.2.grupos aldeído ou cetona
2.3.grupos acil
2.4.grupos glicosil
2.7.grupos fosfatos
2.8.grupos contendo enxofre
33
3. Hidrolases (reações de hidrólise)
3.1.ésteres
3.2.ligações glicosídicas
3.4.ligações peptídicas
3.5.outras ligações C-N
3.6.anidridos ácidos

4. Liases (reações de adição a duplas ligações)


4.1. >C=C<
4.2. >C=O
4.3. >C=N-

34
5. Isomerases (transferência de grupos dentro da mesma molécula para formar
isômeros)
5.1.racemases

6. Ligases (catalisam reações de formação de novas moléculas a partir da ligação


entre duas pré-existentes, sempre às custas de energia, na forma de consumo de
ATP)
6.1. C-O
6.2. C-S
6.3. C-N
6.4. C-C

35
5.3- Aplicações Enzimas

36
❑ Aplicações Industriais das Enzimas:

a) Uso Das Enzimas Nas Indústrias Alimentícias:


- Redução da viscosidade.
- Melhoria da filtrabilidade.
- Clarificação e estabilização dos líquidos para sua conservação.
- Insolubilização das macromoléculas para formação de coágulo.
- Melhoria da digestibilidade.
- Melhoria da fermentabilidade
- Melhoria da textura.
- Melhoria da característica organolépticas.
- Aumento do poder adoçante.
- Redução da dificuldade para cristalização.
- Correção das deficiências enzimáticas de origem natural.

37
❖ Dinâmica das moléculas protéicas

➢ Intracelularmente, as proteínas apresentam conformação


tridimensional nativa indispensável à sua atividade biológica;

➢ Devido à elevada frequência de vibração de seus átomos (10-12


segundos), as proteínas estão em constante movimento interno.

Para as funções proteicas, é essencial o balanço das forças


atrativas e repulsivas envolvendo:
• os átomos que constituem as proteínas;
• as moléculas do solvente; e
• solutos presentes.
3838
Níveis Estruturais de moléculas de proteínas

- Hélice ou arranjos lado a


lado.
- Ponte de H entre –C=O
polares e -NH

- várias dobras da molécula


-fita emaranhada
- interações entre diversas partes da cadeia
3939
polipeptídica (ex: pontes dissulfeto – cisteína)
http://www.primordion.com/Cellontro/CellModelRrt/CellModel_RRT/BovineRibonuclease.html

Enzima ribonuclease:
-124 aminoácidos
- 4 pontes de disulfetos

http://gogopixlibrary.com/bovine+ribonuclease+structure 4040
Desnaturação protéica
Desnaturação: alteração nas estruturas quaternária, terciária ou secundária
das proteínas, sem rompimento das ligações peptídicas

Desenrolamento da estrutura nativa da cadeia protéica

Potencial perda de atividade biológica

Pode ser reversível:

Desnaturação Renaturação

Forma nativa Forma desnaturada Forma nativa


4141
❖ Desnaturação protéica

Agentes desnaturantes:
◼ Meio mecânicos. Ex: agitação (3ª e 4ª) - reversível

◼ Meios químicos. Ex: quebra de ligações S-S

➢ Solventes orgânicos (álcool, éter, benzeno)

➢ Soluções salinas

◼ Meios físico-químicos (2ª, 3ª e 4ª) -irreversível :


➢ Temperatura (>50°C)

➢ pH (valores extremos)

➢ Detergentes

Desnaturação ≠ degradação (alteração na estrutura


primária. Ex: efeito de proteases)
4242
Obrigada pela atenção

Continuação ➔ cinética enzimática

Você também pode gostar