Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro (UFRRJ)
Instituto de Química (IQ) Departamento de Bioquímica (DBQ) Estudos Continuados Emergenciais (ECEs) – 2021.1 Profª Daniela Cosentino Gomes Lista de Exercícios I
Nome:
1) Qual é o efeito das seguintes mudanças sobre a afinidade da hemoglobina pelo
oxigênio?
a) Redução no pH do plasma sanguíneo de 7,4 para 7,2.
b) Redução na pressão parcial de CO2 no pulmão de 6 kPa (segurar a respiração) para 2
kPa (respiração normal).
c) Aumento no nível de BPG de 5 mM (nível do mar) para 8 mM (grande altitude).
d) Aumento no CO de 1 parte por milhão (ppm) de uma atmosfera normal externa para 30 ppm em uma casa que tenha um forno com mau funcionamento ou com vazamento.
2) A enzima urease aumenta a velocidade da hidrólise da uréia em pH 8,0 e 20º C por um
fator de 1014. Se uma dada quantidade de urease pode hidrolisar completamente uma certa quantidade de uréia em 5 minutos a 20º C e pH 8,0, quanto tempo (em anos) levaria para que essa mesma quantidade de uréia fosse hidrolisada sob as mesmas condições na ausência da urease?
3) Embora haja disponibilidade de métodos gráficos precisos para determinação de Vmáx
e Km de uma reação catalisada por enzimas, algumas vezes estes parâmetros podem ser rapidamente estimados pelo exame dos valores de V o aumentando a [S]. Estime os valores de Vmáx e Km da reação catalisada por uma enzima na qual foram obtidos os seguintes dados: 4) Em sua opinião, qual das seguintes mutações teria maiores possibilidades de provocar danos graves ao portador: aquela que provocasse a substituição de leucina por isoleucina ou a substituição de aspártico por lisina, na proteína modificada? Justifique.
5) Faça um paralelo entre as conformações α-hélice e folha β, ressaltando as
semelhanças e diferenças entre elas. Considerando um segmento de cadeia polipeptídica capaz de enovelar-se em α-hélice, seria mais provável que tal acontecesse se o segmento estivesse exposto a um meio aquoso ou completamente embebido no interior apolar de uma proteína? Explique.
6) Considere um experimento em que se mediu a velocidade de reação de uma enzima
em função da concentração de seu substrato em três condições:
• ausência de inibidores; • presença de concentrações constantes de um inibidor competitivo; • presença de concentrações constantes de um inibidor não-competitivo.
Os resultados estão representados no gráfico abaixo. Sabendo que a curva I corresponde aos resultados obtidos na ausência de inibidores. Quais curvas representam a presença de um inibidor competitivo e um não-competitivo? Por quê?
7) Um bioquímico descobre e purifica uma nova enzima, gerando a tabela de
purificação a seguir: a) A partir da informação contida na tabela, calcule a atividade específica da enzima após cada procedimento de purificação.
b) Qual dos procedimentos de purificação utilizados para essa enzima é mais eficaz (Ex., fornece o maior aumento relativo em pureza)?
c) Qual dos procedimentos de purificação é menos efetivo?
d) Há alguma indicação, com base nos resultados apresentados na tabela, de que a enzima está pura após a etapa 6? O que mais poderia ser feito para estimar a pureza da preparação da enzima?
8) A produção de lactato a partir de piruvato envolve a conversão de NADH em NAD +, e é
catalisada pela enzima lactato desidrogenase (LDH) (EC 1.1.1.27) (Lehninger, 2006), como mostra a reação abaixo:
Os gráficos abaixo representam a cinética enzimática da LDH de uma linhagem celular de fígado na presença de seus dois substratos. A enzima apresenta maior afinidade por qual substrato? Por quê? a) Por que a velocidade da LDH apresenta uma curva hiperbólica em relação ao aumento da concentração de substrato? b) Qual a relação entre Vmáx e Km? c) O plot de Lineweaver-Burk de uma isoforma B da LDH, utilizando o lactato como substrato, forneceu a seguinte equação de reta: y = 0,00006x + 0,0475. Calcule o Valor de Vmáx e Km para essa isoforma.
