XIV ENCONTRO SOBRE METODOLOGIAS E GESTÃO DE

LABORATÓRIOS DA EMBRAPA

VALIDAÇÃO
UMA REVISÃO BASEADA EM
DOCUMENTOS E NORMAS

e-mail: paulafda@iq.ufrj.br
PAULA FERNANDES DE AGUIAR
PROF. DEPARTAMENTO DE QUÍMICA Tel: (021) 2562-7877 / 9122-3216
ANALÍTICA DO IQ/UFRJ Tel: (011) 7711-2760 / 9435-0310
 OBJETIVOS

APRESENTAR O ENTENDIMENTO
SOBRE A VALIDAÇÃO DE
MÉTODOS DE ANÁLISE A PARTIR
DE VÁRIOS DOCUMENTOS E
NORMAS
 TIPOS DE DOCUMENTOS E NORMAS

GERAIS

PODEM, EM PRINCÍPIO, SER UTILIZADOS

PARA QUALQUER MÉTODO OU TÉCNICA
ANALÍTICA

ESPECÍFICOS

SÃO UTILIZADOS PARA ATENDER A UMA

DETERMINADA EXIGÊNCIA OU A UM
ORGANISMO CERTIFICADOR,
ACREDITADOR OU HABILITADOR
DOCUMENTOS/NORMAS GERAIS USADOS
COMO BASE PARA A APRESENTAÇÃO

1. ICH: 2005
VALIDATION OF ANALYTICAL PROCEDURES:
TEXT AND METHODOLOGY - Q2(R1)

2. IUPAC: 2002
HARMONISED GUIDELINES FOR SINGLE-LABORATORY
VALIDATION OF METHODS OF ANALYSIS

3. INMETRO: 2008
ORIENTAÇÃO SOBRE VALIDAÇÃO DE MÉTODOS
ANALÍTICOS – DOQ-GCRE-008

4. VIM: 2008
VOCABULÁRIO INTERNACIONAL DE METROLOGIA
DOCUMENTOS/NORMAS GERAIS USADOS
COMO BASE PARA A APRESENTAÇÃO

5. ISO/IEC 17025: 2005

VOCABULÁRIO INTERNACIONAL DE METROLOGIA

6. EURACHEM: 1998
THE FITNESS FOR PURPOSE OF ANALYTICAL METHODS.
A LABORATORY GUIDE TO METHOD VALIDATION AND
RELATED TOPICS

7. ANVISA: 2005
GUIA PARA A QUALIDADE EM QUÍMICA ANALÍTICA. UMA
ASSISTÊNCIA À HABILITAÇÃO. SÉRIES TEMÁTICAS 1 -
LABORATÓRIO
 DOCUMENTOS/NORMAS ESPECÍFICOS
USADOS COMO BASE PARA A
APRESENTAÇÃO

1. RESOLUÇÃO 899 DA ANVISA (AGÊNCIA NACIONAL DE

VIGILÂNCIA SANITÁRIA): 2003
GUIA PARA VALIDAÇÃO DE MÉTODOS ANALÍTICOS

2. GUIA PARA VALIDAÇÃO DO MAPA (MINISTÉRIO DA

AGRICULTURA, PECUÁRIA E ABASTECIMENTO): 2008
GUIA PARA VALIDAÇÃO DE MÉTODOS DE ANALÍTICOS E
CONTROLE DE QUALIDADE INTERNA DAS ANÁLISES DE
MONITORAMENTO DO PLANO NACIONAL DE RESÍDUOS
E CONTAMINANTES – PNCRC ANIMAL
 DOCUMENTOS/NORMAS ESPECÍFICOS
USADOS COMO BASE PARA A
APRESENTAÇÃO

3. DIRETIVA 657 - 96/23/CE: 2002

DESEMPENHO DE MÉTODOS ANALÍTICOS E
INTERPRETAÇÃO DE RESULTADOS

4. U.S. PHARMACOPOEIA CONV. (USP) – VOL. 31: 2008

CAPÍTULO 1225 - VALIDAÇÃO
 VALIDAÇÃO

VALIDAÇÃO DE MÉTODO (5.4.5.1)

“VALIDAÇÃO É A CONFIRMAÇÃO POR

EXAME E FORNECIMENTO DE EVIDÊNCIA
OBJETIVA DE QUE OS REQUISITOS
ESPECÍFICOS PARA UM DETERMINADO USO
PRETENDIDO SÃO ATENDIDOS”
ABNT NBR ISO/IEC 17025 : 2005
 VALIDAÇÃO DE MÉTODO (5.4.5.2)

“CONVÉM QUE A TÉCNICA USADA PARA A

NOTA 2 DETERMINAÇÃO DO DESEMPENHO DE UM
MÉTODO SEJA UMA DAS SEGUINTES OU UMA
COMBINAÇÃO DESTAS:”
1. CALIBRAÇÃO COM USO DE PADRÕES DE REFERÊNCIA
OU MATERIAL DE REFERÊNCIA
2. COMPARAÇÕES COM RESULTADOS OBTIDOS POR
OUTROS MÉTODOS
3. COMPARAÇÕES INTERLABORATORIAIS
4. AVALIAÇÃO SISTEMÁTICA DOS FATORES QUE
INFLUENCIAM O RESULTADO
5. AVALIAÇÃO DA INCERTEZA DO RESULTADO COM BASE
NO CONHECIMENTO CIENTÍFICO DOS PRINCÍPIOS
TEÓRICOS DO MÉTODO E NA EXPERIÊNCIA PRÁTICA
ABNT NBR ISO/IEC 17025 : 2005
 TABELA COMPARATIVA DOS CRITÉRIOS
SOLICITADOS PELOS DOCUMENTOS E NORMAS
CRITÉRIOS DE DESEMPENHO
DOCUMENTOS E NORMAS
S/E LIN SENS F. TRAB LD LQ α
CCα β
CCβ EXAT RECUP REPE P. INT REPRO ROB

ICH X X X X X X X X X X

USP X X X X X X X X X X X

ANVISA X X X X X X X ** X X

INMETRO X X X X X X X X X X

MAPA X X X X X X X X

657 X X X X X X X X X

IUPAC X X X X X X X X X

EURACHEM X X X X X X X X X X X X

** = SE HOUVER REPRODUTIBILIDADE A PREC. INTERM. NÃO É NECESSÁRIA

DEFINIÇÕES
 SELETIVIDADE/ESPECIFICIDADE
CAPACIDADE DO MÉTODO CAPACIDADE DO MÉTODO EM
EM QUANTIFICAR COM DETERMINAR INDUBITAVELMENTE O
EXATIDÃO O ANALITO DE ANALITO DE INTERESSE NA PRESENÇA
INTERESSE, NA DE COMPONENTES PASSÍVEIS DE
PRESENÇA DE IUPAC(S) ESTAREM PRESENTES NA AMOSTRA,
INTERFERENTES COMO IMPUREZAS, PRODUTOS DE
DEGRADAÇÃO, EFEITOS DE MATRIZ,
VIM(S) ETC.
USP(E)
PROPRIEDADE DE UM SISTEMA DE ANVISA(E/S)
ICH(E)
MEDIÇÃO,..., SEGUNDO A QUAL O
SISTEMA FORNECE RESPOSTA DE
UM OU MAIS ANALITOS, DE TAL
FORMA QUE AS RESPOSTAS DOS
ANALITOS SEJAM INDEPENDENTES CAPACIDADE DO
ENTRE SI ... MÉTODO DE
DISCRIMINAÇÃO ENTRE
MÉTODO QUE PRODUZ RESPOSTA PARA A SUBSTÂNCIA A
VÁRIOS ANALITOS, MAS QUE PODE ANALISAR E
DISTINGUIR A RESPOSTA DO ANALITO DE SUBSTÂNCIAS ANÁLOGAS
INTERESSE DA DE OUTROS
INMETRO(S) MAPA(S/E)
 SELETIVIDADE/ESPECIFICIDADE

EURACHEM(E) CAPACIDADE DO MÉTODO EM

DETERMINAR COM EXATIDÃO E
ESPECIFICAMENTE O ANALITO DE
INTERESSE NA PRESENÇA DE
COMPONENTES PASSÍVEIS DE ESTAREM
PRESENTES NA AMOSTRA, COMO
IMPUREZAS, PRODUTOS DE
DEGRADAÇÃO, EFEITOS DE MATRIZ, ETC.
VIM(S)
PROPRIEDADE DE UM SISTEMA DE
MEDIÇÃO,..., SEGUNDO A QUAL O
SISTEMA FORNECE RESPOSTA DE
UM OU MAIS ANALITOS, DE TAL CAPACIDADE DE UM MÉTODO
FORMA QUE AS RESPOSTAS DOS DISTINGUIR A SUBSTÂNCIA A
ANALITOS SÃO INDEPENDENTES ANALISAR DE OUTRAS
ENTRE SI ... SUBSTÂNCIAS
657(E)
 EXATIDÃO
USP MAPA ICH
EXPRESSA O GRAU DE CONCORDÂNCIA PROXIMIDADE DOS
ENTRE O VALOR ACEITO COMO RESULTADOS OBTIDOS
VERDADEIRO E O VALOR MEDIDO. PELO MÉTODO EM ESTUDO
EM RELAÇÃO AO VALOR
GRAU DE VERDADEIRO
CONCORDÂNCIA ENTRE ANVISA
O RESULTADO DE UM
ENSAIO E O VALOR DE
REFERÊNCIA ACEITO. É GRAU DE CONCORDÂNCIA ENTRE O
DETERMINADA VALOR MEDIDO E O VALOR
VIM
ATRAVÉS DA VERDADEIRO DO MENSURANDO
VERACIDADE E DA
PRECISÃO
657
HABILIDADE DO GRAU DE CONCORDÂNCIA
INSTRUMENTO EM DAR ENTRE O RESULTADO DE
RESPOSTAS PRÓXIMAS AS UMA MEDIÇÃO E O VALOR
DO VALOR VERDADEIRO VERDADEIRO DO
DO MENSURANDO MENSURANDO
INMETRO
EURACHEM
 RECUPERAÇÃO/VERACIDADE
IUPAC(V/R)
EXPRESSA O GRAU DE CONCORDÂNCIA
ENTRE O VALOR ACEITO COMO INMETRO(R)
VERDADEIRO E O VALOR MEDIDO. GRAU DE CONCORDÂNCIA
ENTRE O VALOR MÉDIO
OBTIDO DE UMA SÉRIE DE
GRAU DE CONCORDÂNCIA ENTRE A RESULTADOS DE ENSAIOS E
MÉDIA DE UM NÚMERO INFINITO UM VALOR DE REFERÊNCIA
DE REPLICATAS E O VALOR ACEITÁVEL
VERDADEIRO EURACHEM(R/V)
VIM (V)

PERCENTAGEM DA
CONCENTRAÇÃO
FRAÇÃO DA QUANTIDADE TOTAL
REAL DE UMA
DO ANALITO PRESENTE NA
SUBSTÂNCIA
AMOSTRA, QUE É OBTIDA APÓS A
RECUPERADA
FINALIZAÇÃO DO PROCESSO DE
DURANTE O
EXTRAÇÃO MAPA(R)
PROCESSO
ANALÍTICO 657(R)
 PRECISÃO
EXPRESSA O GRAU DE DISPERSÃO DE
UMA SÉRIE DE MEDIDAS E DEVE SER
CONSIDERADA EM TRÊS NÍVEIS: IUPAC
REPETITIVIDADE, PRECISÃO EXPRESSA O GRAU DE DISPERSÃO
INTERMEDIÁRIA E DE UMA SÉRIE DE MEDIDAS
REPRODUTIBILIDADE
ICH
INDEPENDENTES E REALIZADAS
EM CONDIÇÕES DEFINIDAS. DEVE
SER INVESTIGADA EM CONDIÇÕES
EXPRESSA O GRAU DE DE REPETITIVIDADE E DE
CONCORDÂNCIA DE PRECISÃO INTRA-ENSAIO
UMA SÉRIE DE USP
MEDIDAS QUANDO O
PROCEDIMENTO É É A AVALIAÇÃO DA
APLICADO PROXIMIDADE DOS
REPETIDAMENTE A RESULTADOS OBTIDOS
ALÍQUOTAS DE UMA EM UMA SÉRIE DE
AMOSTRA. ELA PODE MEDIDAS DE UMA
SER UMA MEDIDA DA AMOSTRAGEM MÚLTIPLA
REPRODUTIBILIDADE DE UMA MESMA
OU DA REPETITIVIDADE AMOSTRA ANVISA
 EURACHEM PRECISÃO
GRAU DE
CONCORDÂNCIA
É A AVALIAÇÃO DA DISPERSÃO DE
ENTRE
RESULTADOS ENTRE ENSAIOS
RESULTADOS DE
INDEPENDENTES, REPETIDOS DE UMA
ENSAIOS
MESMA AMOSTRA, AMOSTRAS
INDEPENDENTES,
SEMELHANTES OU PADRÕES, EM
OBTIDOS EM
CONDIÇÕES DEFINIDAS. AS DUAS FORMAS
CONDIÇÕES
MAIS COMUNS DE EXPRESSÁ-LA SÃO POR
ESPECÍFICAS
MEIO DA REPETITIVIDADE E DA
657 REPRODUTIBILIDADE MAPA

DISPERSÃO DE RESULTADOS ENTRE

ENSAIOS INDEPENDENTES,
REPETIDOS DE UMA MESMA
AMOSTRA, AMOSTRA SEMELHANTE
OU PADRÕES, EM CONDIÇÕES
DEFINIDAS
INMETRO
GRAU DE CONCORDÂNCIA
ENTRE RESULTADOS
OBTIDOS POR REPLICATAS
DE UMA MESMA AMOSTRA
EM CONDIÇÕES
ESPECIFICADAS VIM
 REPETITIVIDADE/PRECISÃO INTRA-ENSAIO
OU INTRA-CORRIDA
PRECISÃO EM CONDIÇÕES CONCORDÂNCIA ENTRE OS
DE REPETITIVIDADE, ISTO RESULTADOS DENTRO DE UM
É, OBTENÇÃO DE CURTO PERÍODO DE TEMPO
RESULTADOS A PARTIR DE COM O MESMO ANALISTA E
ENSAIOS INDEPENDENTES, MESMA INSTRUMENTAÇÃO ANVISA
COM O MESMO MÉTODO,
COM MATERIAL DE CONDIÇÃO DE MEDIDA ...
ENSAIO IDÊNTICO, NO QUE COMPREENDE O
MESMO LABORATÓRIO, MESMO MÉTODO, OS
PELO MESMO OPERADOR MESMOS OPERADORES, O
E UTILIZANDO O MESMO MESMO SISTEMA DE
EQUIPAMENTO MEDIÇÃO, AS MESMAS
657
CONDIÇÕES DE
FUNCIONAMENTO, O MESMO
LABORATÓRIO, E MEDIDAS
EM REPLICATAS DE UMA
EXPRESSA A PRECISÃO SOB AS
MESMA AMOSTRA, DURANTE
MESMAS CONDIÇÕES EXPERIMENTAIS
UM CURTO ESPAÇO DE
NO MENOR INTERVALO DE TEMPO
TEMPO
POSSÍVEL ICH USP VIM
 REPETITIVIDADE/PRECISÃO INTRA-ENSAIO
OU INTRA-CORRIDA

IUPAC
VARIAÇÕES OBSERVADAS
EM UMA CORRIDA MAPA
GRAU DE CONCORDÂNCIA ENTRE OS
RESULTADOS DE MEDIÇÕES INMETRO
SUCESSIVAS DE UM MESMO
MENSURANDO, EFETUADAS SOB AS
MESMAS CONDIÇÕES DE MEDIÇÃO

CONDIÇÃO DE MEDIDA ... QUE COMPREENDE

O MESMO MÉTODO, OS MESMOS
OPERADORES, O MESMO SISTEMA DE
MEDIÇÃO, AS MESMAS CONDIÇÕES DE
FUNCIONAMENTO, O MESMO LABORATÓRIO, E
MEDIDAS EM REPLICATAS DE UMA MESMA
AMOSTRA, DURANTE UM CURTO ESPAÇO DE
VIM TEMPO
 PRECISÃO INTERMEDIÁRIA/PRECISÃO INTER-
ENSAIOS OU INTER-
CORRIDAS/REPRODUTIBILIDADE
INTRALABORATORIAL
EURACHEM ICH USP
EXPRESSA VARIAÇÃO NO LABORATÓRIO
QUANDO DA TROCA DE DIAS, DE
ANALISTAS, DE EQUIPAMENTOS, ETC VIM

CONDIÇÕES DE MEDIDAS QUE

CONCORDÂNCIA ENTRE OS
RESULTADOS DO MESMO
LABORATÓRIO MAS OBTIDOS
EM DIAS DIFERENTES, COM
ANALISTAS DIFERENTES E/OU
EQUIPAMENTOS DIFERENTES
ANVISA INMETRO
INCLUEM O MESMO MÉTODO,
O MESMO LABORATÓRIO, E
REPLICATAS DE UMA MESMA
AMOSTRA POR UM PERÍODO
LONGO, ALÉM DE OUTRAS
CONDIÇÕES DE MUDANÇAS
VARIAÇÕES OBSERVADAS
ENTRE CORRIDAS IUPAC
 PRECISÃO INTERMEDIÁRIA/PRECISÃO INTER-
ENSAIOS OU INTER-
CORRIDAS/REPRODUTIBILIDADE
INTRALABORATORIAL

PRECISÃO OBTIDA NO MESMO

LABORATÓRIO EM CONDIÇÕES
PRÉ-ESTABELECIDAS
ESPECÍFICAS (RELATIVAS, POR
EXEMPLO, AO MÉTODO,
MATERIAIS DE
ENSAIO,OPERADORES,
AMBIENTE) E AO LONGO DE
INTERVALOS DE TEMO
JUSTIFICADAMENTE LONGOS
657
MAPA
PRECISÃO AVALIADA SOBRE
MESMA AMOSTRA, AMOSTRAS
IDÊNTICAS OU PADRÕES,
UTILIZANDOO MESMO MÉTODO,
MESMO LABORATÓRIO, MAS
ALTERANDO ALGUMAS
CONDIÇÕES, TAIS COMO:
ANALISTAS EQUIPAMENTOS E
CONDIÇÕES AMBIENTAIS, ENTRE
OUTRAS
 REPRODUTIBILIDADE/
PRECISÃO INTER-
VIM LABORATORIAL
ANVISA
CONDIÇÕES DE CONCORDÂNCIA ENTRE OS RESULTADOS
MEDIDAS QUE OBTIDOS EM LABORATÓRIOS DIFERENTES
INCLUEM COMO EM ESTUDOS COLABORATIVOS
DIFERENTES
LABORATÓRIOS,
OPERADORES, USO DE UM PROCEDIMENTO ANALÍTICO EM
SISTEMAS DE DIFERENTES LABORATÓRIOS, COMO EM
MEDIÇÃO, E COMPARAÇÕES INTERLABORATORIAIS
REPLICATAS DE USP
UMA MESMA
AMOSTRA
GRAU DE CONCORDÂNCIA ENTRE
OS RESULTADOS DE MEDIÇÕES
DE UM MESMO MENSURANDO
A REPRODUTIBILIDADE DEVE
EFETUADAS SOB CONDIÇÕES
SER AVALIADA A PARTIR DE
VARIADAS DE MEDIÇÃO
ESTUDOS COLABORATIVOS
DE ACORDO COM A NORMA INMETRO
ISO 5725-2 657
 REPRODUTIBILIDADE/
PRECISÃO INTER-
LABORATORIAL
A
REPRODUTIBILIDADE
PODE SER AVALIADA A
PARTIR DE
RESULTADOS
OBTIDOS COM O
MESMO MÉTODO NAS VIM
MESMAS AMOSTRAS
CONDIÇÕES DE MEDIDAS QUE
EM LABORATÓRIOS
INCLUEM DIERENTES
DIFERENTES COM
LABORATÓRIOS,
OPERADORES
EURACHEM OPERADORES, SISTEMAS DE
DIFERENTES E
MEDIÇÃO, E REPLICATAS DE
EQUIPAMENTOS
UMA MESMA AMOSTRA
DIFERENTES

EXPRESSA A PRECISÃO
ENTRE LABORATÓRIOS ICH
 LIMITE DE DETECÇÃO
VALOR MEDIDO ATRAVÉS
DE UM DETERMINADO
PROCEDIMENTO PARA O
QUAL A PROBABILIDADE
DE DETECTAR
INCORRETAMENTE UM
USP
ICH
ANALITO É β, E
CORRETAMENTE É α MENOR QUANTIDADE DO
ANALITO PRESENTE NA
VIM AMOSTRA QUE PODE SER
DETECTADO, PORÉM NÃO
NECESSARIAMENTE
QUANTIFICADO
ANVISA
INMETRO
EURACHEM
MENOR QUANTIDADE DE ANALITO NA
AMOSTRA QUE PODE SER
DIFERENCIADO DO ZERO
IUPAC
 LIMITE DE
QUANTIFICAÇÃO
CONCENTRAÇÃO ABAIXO DA
QUAL O MÉTODO NÃO ALCANÇA
A PRECISÃO ACEITÁVEL
IUPAC

MENOR QUANTIDADE DE ANALITO QUE

INMETRO PODE SER DETERMINADA COM NÍVEL
ACEITÁVEL DE PRECISÃO E TENDÊNCIA

EURACHEM MENOR QUANTIDADE DE ANALITO

NA AMOSTRA QUE PODE SER
QUANTIFICADA COM PRECISÃO E
ANVISA EXATIDÃO ACEITÁVEIS
USP
ICH
 LINEARIDADE
ANVISA
CAPACIDADE DE UMA METODOLOGIA
ANALÍTICA EM DEMONSTRAR QUE OS
RESULTADOS OBTIDOS SÃO DIRETAMENTE
PROPORCIONAIS À CONCENTRAÇÃO DO
ANALITO NA AMOSTRA, DENTRO DE UM
INTERVALO ESPECIFICADO
MAPA
HABILIDADE DE SE OBTER ICH
RESULTADOS DIRETAMENTE
PROPORCIONAIS À CONCENTRAÇÃO USP
DO ANALITO NA AMOSTRA

HABILLIDADE DE UM MÉTODO ANALÍTICO

PRODUZIR RESULTADOS QUE SEJAM
PROPORCIONAIS À CONCENTRAÇÃO DO
ANALITO NA AMOSTRA, EM UMA DADA
INMETRO FAIXA DE CONCENTRAÇÃO, TANTO
DIRETAMENTE QUANTO POR MEIO DE UMA
TRANSFORMAÇÃO MATEMÁTICA BEM
DEFINIDA
 LINEARIDADE

HABILILIDADE DE UM MÉTODO ANALÍTICO

PRODUZIR RESULTADOS QUE SEJAM
PROPORCIONAIS À CONCENTRAÇÃO DO
ANALITO NA AMOSTRA, EM UMA DADA
FAIXA DE CONCENTRAÇÃO, TANTO
DIRETAMENTE QUANTO POR MEIO DE UMA
TRANSFORMAÇÃO MATEMÁTICA BEM
DEFINIDA
EURACHEM

EXPRESSÃO DA RELAÇÃO ENTRE OS

VALORES MEDIDO E INDICADO
VIM
 FAIXA DE
INTERVALO DE CONCENTRAÇÃO
DO ANALITO NO QUAL O TRABALHO/INTERVALO
MÉTODO É CONSIDERADO
VALIDADO
IUPAC FAIXA DE CONCENTRAÇÃO NA QUAL
O ANALITO EM QUESTÃO PODE SER
DETERMINADO COM PRECISÃO E
É A FAIXA ENTRE OS TENDÊNCIA ACEITÁVEIS INMETRO
LIMITES DE EURACHEM
QUANTIFICAÇÃO
INFERIOR E SUPERIOR
DE UM MÉTODO
ANALÍTICO. É ANVISA INTERVALO ENTRE A MAIOR E
DERIVADO DO ESTUDO A MENOR CONCENTRAÇÃO DO
DE LINEARIDADE E ANALITO NA AMOSTRA
CONFIRMADO PELA ICH
EXATIDÃO, PRECISÃO
E LINEARIDADE INTERVALO ENTRE A MAIOR E A MENOR
ADEQUADOS CONCENTRAÇÃO DO ANALITO NA AMOSTRA
QUE PODE SER DETERMINADO COM
PRECISÃO, EXATIDÃO E LINEARIDADE
ADEQUADAS
USP
 α)
LIMITE DE DECISÃO (CCα

LIMITE A PARTIR DO QUAL SE

PODE CONCLUIR QUE UMA
AMOSTRA É NÃO CONFORME,
COM PROBABILIDADE DE ERRO
DE α
657

CARACTERIZA A
VARIAÇÃO MAPA
PROVENIENTE DO
RUÍDO
 β)
CAPACIDADE DE DETECÇÃO (CCβ

657
TEOR MAIS BAIXO DE
SUBSTÂNCIA QUE PODE SER
DETECTADO, IDENTIFICADO
E/OU QUANTIFICADO COM UMA
PROBABILIDADE DE ERRO DE β

CARACTERIZA A
VARIAÇÃO MAPA
PROVENIENTE DA
MEDIDA
HABILIDADE DE UM ROBUSTEZ
MÉTODO ANALÍTICO NÃO EURACHEM
SER AFETADO POR
PEQUENAS E DELIBERADAS
VARIAÇÕES EM SEUS MEDIDA DA CAPACIDADE DO MÉTODO
FATORES EM PERMANECER INALTERADO
INMETRO QUANDO PEQUENAS VARIAÇÕES SÃO
IMPOSTAS AS VARIÁVEIS.
SUSCEPTIBILIDADE DE UM ICH
MÉTODO ANALÍTICO A USP
ALTERAÇÕES DAS
CONDIÇÕES É A RESISTÊNCIA DOS
EXPERIMENTAIS, AS QUAIS RESULTADOS DO MÉTODO A
PODEM SER EXPRESSAS PEQUENAS ALTERAÇÕES SÃO
COMO UMA LISTA DE FEITAS NAS CONDIÇÕES
MATERIAIS DA AMOSTRA, EXPERIMENTAIS IUPAC
DAS SUBSTÂNCIAS A
ANALISAR, DAS CONDIÇÕES
DE ARMAZENAMENTO, ANVISA
AMBIENTAIS E/OU DE
MEDIDA DA CAPACIDADE DO
PREPARAÇÃO DA AMOSTRA
MÉTODO EM RESISTIR A PEQUENAS
657 E DELIBERADAS VARIAÇÕES DOS
PARÂMETROS ANALÍTICOS
 EXECUÇÃO DOS CRITÉRIOS DE
DESEMPENHO

NENHUMA NORMA/DOCUMENTO/GUIA /
DIRETRIZ SE REFERE A UMA ORDEM DE
EXECUÇÃO OU, PELO MENOS, DE APRESENTAÇÃO
DESTES CRITÉRIOS

NO ENTANTO, CADA CRITÉRIO DE

DESEMPENHO TEM COMO OBJETIVO
DEMONSTRAR A CAPACIDADE /
ADEQUAÇÃO DE UM DETERMINADO
MÉTODO EM ATENDER EM UMA
EXIGÊNCIA ESPECÍFICA
 BRUCE ET AL. (1996) PROPUSERAM QUE ESTES CRITÉRIOS
FOSSEM APRESENTADOS NA SEGUINTE ORDEM

1. ESPECIFICIDADE / SELETIVIDADE
2. LINEARIDADE
3. FAIXA DE TRABALHO
EQUIPAMENTO
4. LIMITE DE DETECÇÃO

1. EXATIDÃO
AMOSTRA
2. LIMITE DE QUANTIFICAÇÃO

1. COMPARAÇÃO INTERLABORATORIAL
FINAIS
2. PRECISÃO DO MÉTODO
IMPLEMENTAÇÃO
DOS CRITÉRIOS
DE DESEMPENHO
ESPECIFICIDADE
ICH
ENSAIOS DE IDENTIFICAÇÃO

O MÉTODO DEVE PODER DISCRIMINAR COMPOSTOS DE

ESTRUTURAS SEMELHANTES. A DISCRIMINAÇÃO PODE
SER CONFIRMADA OBTENDO-SE RESULTADOS POSITIVOS
DE AMOSTRAS CONTENDO OS ANALITOS DE INTERESSE
(TALVEZ ATRAVÉS DE MR) E DE RESULTADOS NEGATIVOS
DE AMOSTRAS QUE NÃO CONTÉM ESTES ANALITOS

O MÉTODO TAMBÉM PODE SER APLICADO A ANALITOS

COM ESTRUTURAS SEMELHANTES OU RELACIONADAS AOS
ANALITOS DE INTERESSE, DE FORMA A CONFIRMAR QUE
UMA RESPOSTA POSITIVA NÃO VÁ SER ENCONTRADA
ESPECIFICIDADE
USP
ENSAIOS DE IDENTIFICAÇÃO
ANVISA
O MÉTODO DEVE PODER IDENTIFICAR O
ANALITO DE INTERESSE NA PRESENÇA DE
IMPUREZAS. A ESPECIFICIDADE PODE SER
CONFIRMADA ATRAVÉS DA ANÁLISE DE
AMOSTRAS FORTIFICADAS COM
IMPUREZAS EM DIFERENTES
CONCENTRAÇÕES E VERIFICANDO QUE OS
RESULTADOS FICARAM INALTERADOS
SELETIVIDADE
INMETRO

FAZER A ANÁLISE COM A AMOSTRA E

MATERIAIS DE REFERÊNCIA PELO
MÉTODO EM ESTUDO E OUTROS
MÉTODOS VALIDADOS

ANALISAR AMOSTRAS CONTENDO

VÁRIOS INTERFERENTES SUSPEITOS
NA PRESENÇA DO ANALITO DE
INTERESSE
 SELETIVIDADE
MAPA
A VERIFICAÇÃO DA SELETIVIDADE DEVE
SER REALIZADA A PARTIR DA COMPARAÇÃO
ENTRE OS SINAIS ADVINDOS DO
PROCESSAMENTO DA MATRIZ, DO EXTRATO
DA MATRIZ FORTIFICADO E DO ANALITO

ANALISAR RÉPLICAS DO EXTRATO DAS

AMOSTRAS DA MATRIZ, FORTIFICADO
EM 5 NÍVEIS DE CONCENTRAÇÃO

ANALISAR RÉPLICAS DAS

AMOSTRAS DO ANALITO COMPARAR OS
EM SOLUÇÃO, EM 5 RESULTADOS POR NÍVEL
NÍVEIS DE DE CONCENTRAÇÃO
CONCENTRAÇÃO
ESPECIFICIDADE
657
SELECIONAR UMA GAMA DE COMPOSTOS
QUIMICAMENTE APARENTADOS (METABÓLITOS,
DERIVADOS, ETC) OU OUTRAS DE SUSCEPTÍVEIS DE
SEREM ENCONTRADOS COM O COMPOSTO EM CAUSA
E QUE POSSAM ESTAR PRESENTES NAS AMOSTRAS

ANALISAR UM NÚMERO ADEQUADO DE AMOSTRAS

EM BRANCO (n ≥ 20) E VERIFICAR AS POSSÍVIES
INTERFERÊNCIAS NA REGIÃO EM QUE SE PREVÊ A
ELUIÇÃO DA SUBSTÂNCIA A ANALISAR

FORTIFICAR AMOSTRAS EM BRANCO REPRESENTATIVAS

NUMA CONCENTRAÇÃO RELEVANTE COM SUBSTÂNCIAS QUE
POSSAM INTERFERIR NA IDENTIFICAÇÃO E/OU
QUANTIFICAÇÃO DA SUBSTÂNCIA A ANALISAR
SELETIVIDADE
IUPAC
EM MUITOS TIPOS DE ANÁLISE A SELETIVIDADE É
ESSENCIALMENTE UMA AVALIAÇÃO QUALITATIVA.
NO ENTANTO, HÁ MEDIDAS QUANTITATIVAS QUE
PODEM SER REALIZADAS.

O ÍNDICE DE SELETIVIDADE ( bANbINT ) É

UMA POSSÍVEL FORMA DE QUANTIFICAR
A SELETIVIDADE.

bAN REPRESENTA A SENSIBILIDADE DO MÉTODO

(INCLINAÇÃO DA CURVA DE CALIBRAÇÃO) E bINT A
INCLINAÇÃO DA CURVA GERADA COM O BRANCO
DA MATRIZ FORTIFICADO COM O INTERFERENTE
 EURACHEM
ESPECIFICIDADE / SELETIVIDADE

É INVESTIGADA ESTUDANDO A
HABILIDADE DO MÉTODO EM MEDIR O
ANALITO DE INTERESSE EM ALÍQUOTAS
NAS QUAIS TENHAM SIDO INTRODUZIDOS
DETERMINADOS INTERFERENTES

PODE AVALIADA TAMBÉM ESTUDANDO SUA HABILIDADE

EM MEDIR O ANALITO DE INTERESSE EM RELAÇÃO A
OUTRO MÉTODO
FAIXA DE TRABALHO
ICH
É NORMALMENTE DEFINIDA USP
ATRAVÉS DO ESTUDO DA
LINEARIDADE E DEPENDE DA ANVISA
APLICAÇÃO DO MÉTODO

É ESTABELECIDA PELA CONFIRMAÇÃO DE QUE O

PROCEDIMENTO ANALÍTICO LEVA A RESULTADOS
COM LINEARIDADE, EXATIDÃO E PRECISÃO
ACEITÁVEIS AO LONGO DA FAIXA SELECIONADA
 INMETRO
FAIXA DE TRABALHO E FAIXA LINEAR

DEVE COBRIR A FAIXA DE APLICAÇÃO PARA A QUAL O

ENSAIO VAI SER USADO E A CONCENTRAÇÃO MAIS
ESPERADA DA AMOSTRA DEVE, SEMPRE QUE POSSÍVEL,
SE SITUAR NO CENTRO DA FAIXA DE TRABALHO
FAIXA DE TRABALHO
IUPAC

A FAIXA DE TRABALHO PODE SER

UMA PARTE DA FAIXA PARA A QUAL A
LINEARIDADE FOI VERIFICADA
 EURACHEM
FAIXA DE TRABALHO E LINEARIDADE

MÍNIMO DE 6 NÍVEIS DE CONCENTRAÇÃO

A RELAÇÃO RESPOSTA-CONCENTRAÇÃO
NÃO TEM QUE SER PERFEITAMENTE
LINEAR, PORÉM, DEVE SER
REPRODUTÍVEL COM O TEMPO
LINEARIDADE
USP ICH
ANVISA
UMA RELAÇÃO LINEAR DEVE SER AVALIADA AO
LONGO DA FAIXA DE TRABALHO E DEMONSTRADA
ATRAVÉS DE DILUIÇÕES DE UMA SOLUÇÃO MÃE
PREPARADA COM O ANALITO DE INTERESSE OU
DE SOLUÇÕES DESTE ANALITO EM DIFERENTES
CONCENTRAÇÕES. É RECOMENDADO O USO DE,
NO MÍNIMO, 5 NÍVEIS DE CONCENTRAÇÃO
 INMETRO
LINEARIDADE

MÍNIMO DE 5 NÍVIES DE CONCENTRAÇÃO NA CURVA

ANALÍTICA COM UM NÚMERO DE REPLICATAS POR
NÍVEL DE CONCENTRAÇÃO O MAIS PRÓXIMO POSSÍVEL
DAQUELE EMPREGADO NA ROTINA DO LABORATÓRIO
LINEARIDADE MAPA
A CURVA DE CALIBRAÇÃO/RESPOSTA DEVE SER
OBTIDA A PARTIR DE 5 NÍVEIS DE CONCENTRAÇÃO,
EQUIDISTANTEMENTE DISTRIBUÍDOS, COM PELO
MENOS, 6 RÉPLICAS POR NÍVEL

TRÊS TIPOS DE CURVA DE CALIBRAÇÃO/RESPOSTA

DEVEM SER ELABORADOS:
* PADRÕES DE CALIBRAÇÃO EM SOLUÇÃO
* MATRIZ BRANCA FORTIFICADA COM PADRÕES DE
CALIBRAÇÃO
* EXTRATO DA MATRIZ BRANCA FORTIFICADO COM
OS PADRÕES DE CALIBRAÇÃO
 LINEARIDADE MAPA
AS REPLICATAS DE CADA NÍVEL DE
CONCENTRAÇÃO DEVEM SER
INDEPENDENTES OU REPETIÇÕES GENUÍNAS,
E NÃO SOMENTE REPETIÇÕES DAS LEITURAS

AS MEDIDAS DEVEM SER FEITAS EM ORDEM

ALEATÓRIA, ADOTANDO-SE OS DEVIDOS
CUIDADOS PARA EVITAR CONTAMINAÇÃO
CRUZADA

AS CURVAS DE CALIBRAÇÃO NÃO DEVEM

SER FORÇADAS A PASSAR PELA ORIGEM

AVALIAR A HOMOCEDASTICIDADE
CURVAS DE CALIBRAÇÃO 657

A CURVA DE CALIBRAÇÃO/RESPOSTA
DEVE SER OBTIDA A PARTIR DE 5 NÍVEIS
DE CONCENTRAÇÃO, INCLUINDO O ZERO
 CALIBRAÇÃO E LINEARIDADE IUPAC
A CURVA DEVE TER PELO MENOS 6
NÍVEIS DE CONCENTRAÇÃO

OS NÍVEIS DE CONCENTRAÇÃO DEVEM ESTAR

IGUALMENTE ESPAÇADOSO INTERVALO DE INTERESSE

O INTERVALO DE CONCENTRAÇÃO DEVE SER ENTRE 0

E 150% OU 50 E 150% DA CONCENTRAÇÃO MAIS
PROVÁVEL DE SER ENCONTRADA

AS ANÁLISE PARA CADA NÍVEL DE CONCENTRAÇÃO

DEVEM SER REALIZADAS, PELO MENOS, EM
DUPLICATA, PREFERENCIALMENTE EM TRIPLICATA
OU MAIS, EM ORDEM ALEATÓRIA
EXATIDÃO ANVISA ICH
USP
DEVE SER ESTABELECIDA AO LONGO DA FAIXA DE
TRABALHO, USANDO UM MÍNIMO DE 9 DETERMINAÇÕES
DE TAL FORMA QUE SEJAM AVALIADOS 3 NÍVEIS DE
CONCENTRAÇÃO DIFERENTES

A USP AINDA INDICA QUE PARA DEMONSTRAR A

EXATIDÃO, UM PADRÃO DE REFERÊNCIA PODE
SER UTILIZADO
 INMETRO
RECUPERAÇÃO / TENDÊNCIA

OS PROCESSOS UTILIZADOS PARA AVALIAR A

TENDÊNCIA DE UM MÉTODO SÃO, ENTRE OUTROS:
USO DE MATERIAIS DE REFERÊNCIA CERTIFICADOS,
PARTICIPAÇÃO EM COMPARAÇÕES
INTERLABORATORIAIS E REALIZAÇÃO DE ENSAIOS
DE RECUPERAÇÃO
 RECUPERAÇÃO
MAPA
ANALISAR AS 6 RÉPLICAS DA MATRIZ BRANCA
FORTIFICADA COMOS PADRÕES DE CALIBRAÇÃO
EM 5 NÍVEIS DE CONCENTRAÇÃO

CALCULAR A CONCENTRAÇÃO MÉDIA E O CV EM CADA

EXATIDÃO

DEVE SER FEITA ATRAVÉS DE ENSAIOS DE RECUPERAÇÃO

CASO NÃO HAJA MRC, A MATRIZ BRANCA FORTIFICADA

DEVE SER UTILIZADA
 VERACIDADE
657
CALCULAR A CONCENTRAÇÃO MÉDIA E O CV

DEVE SER FEITA ATRAVÉS DE MRC. NA FALTA DESTE, EM

VEZ DA VERACIDADE, A RECUPERAÇÃO PODE SER
DETERMINADA

RECUPERAÇÃO

SELECIONAR 18 ALÍQUOTAS DE UM MATERIAL EM

BRANCO E FORTIFICAR 3 GRUPOS EM 6 ALÍQUOTAS
NAS CONCENTRAÇÕES …..

CALCULAR A CONCENTRAÇÃO PRESENTE EM CADA

AMOSTRA, ASSIM COMO A CONCENTRAÇÃO MÉDIA E O CV
PARA CADA NÍVEL DE CONCENTRAÇÃO
 EXATIDÃO/RECUPERAÇÃO IUPAC
A MÉDIA DE UMA SÉRIE DE ANÁLISES COMPLETAS
REALIZADAS COM MATERIAL DE REFERÊNCIA EM
DIFERENTES CORRIDAS DEVEM SER AVALIADAS

CASO NÃO EXITA UM MRC, PODE SER UTILIZADO

UM MATERIAL BEM CARACTERIZADO COMO
REFERÊNCIA. OUTRQA ALTERNATIVA É USAR
MATRIZES FORTIFICADAS

UM MÉTODO REFERÊNCIA TAMBÉM PODE SER

USADO PARA AVALIAR A EXATIDÃO DO MÉTODO
QUE ESTÁ SENDO VALIDADO
 EURACHEM
EXATIDÃO

É ESTUDADA EM 2 COMPONENTES; RECUPERAÇÃO E

PRECISÃO

RECUPERAÇÃO

6 REPLICATAS DE MATRIZES OU AMOSTRAS

FORTIFICADAS
REPETITIVIDADE OU
PRECISÃO INTRA-CORRIDA
ICH
ANVISA
DEVE SER ESTABELECIDA AO LONGO DA FAIXA DE
TRABALHO, USANDO UM MÍNIMO DE 9 DETERMINAÇÕES
DE TAL FORMA QUE SEJAM AVALIADOS 3 NÍVEIS DE
CONCENTRAÇÃO DIFERENTES
REPETITIVIDADE
USP
PRECISÃO INTERMEDIÁRIA

REPRODUTIBILIDADE

DEVEM SER AVALIADAS ATRAVÉS DE UM NÚMERO DE

REPLICATAS DE UMA AMOSTRA HOMOGÊNEA
 INMETRO
REPETITIVIDADE

PODE SER DETERMINADA POR MEIO DA ANÁLISE DE

PADRÕES, MATERIAL DE REFERÊNCIA OU ADIÇÃO DO
ANALITO A BRANCO DE AMOSTRA, EM VÁRIAS
CONCENTRAÇÕES NA FAIXA DE TRABALHO
REPETITIVIDADE 657 MAPA
PREPARAR E ANALISAR UM CONJUNTO DE AMOSTRAS COM
MATRIZES IDÊNTICAS, FORTIFICADAS COM SUBSTÂNCIAS
A ANALISAR DE MODO A OBTER CONCENTRAÇÕES
EQUIVALENTES AS SEGUINTES...

PARA CADA NÍVEL DE CONCENTRAÇÃO, A ANÁLISE

DEVE SER REALIZADA EM, PELO MENOS, 6
RÉPLICAS

CALCULAR A CONCENTRAÇÃO MÉDIA, O DESVI

PADRÃO E O CV
 IUPAC
REPETITIVIDADE

AS EXPERIÊNCIAS DESTE CRITÉRIO DEVEM PODER

DEMONSTRAR QUE NÃO HÁ MUDANÇA NA PRECISÃO
COM A MUDANÇA DE CONCENTRAÇÃO DO ANALITO

A FORMA MAIS ECONÔMICA DE AVALIAR A

REPETITIVIDADE É A AVALIAÇÃO NOS LIMITES
INFERIOR E SUPERIOR (OU PRÓXIMO A ELES)
DA FAIXA DE TRABALHO

A ANÁLISES DEVEM SER FEITAS

EM DUPLICATA VERDADEIRAS
 EURACHEM
REPETITIVIDADE

PODE SER DETERMINADA POR MEIO DE MATERIAL DE

REFERÊNCIA OU ADIÇÃO DO ANALITO A BRANCO DE
AMOSTRA, EM VÁRIAS CONCENTRAÇÕES NA FAIXA DE
TRABALHO

REALIZAR 10 REPLICATAS PARA

CADA NÍVEL DE CONCENTRAÇÃO

CALCULAR A MÉDIA, O DESVIO

PADRÃO E O LIMITE DE
REPETITIVIDADE
 ICH
PRECISÃO INTERMEDIÁRIA

NORMALMENTE É AVALIADA SOBRE AS POSSÍVEIS

FONTES DE VARIABILIDADE DO MÉTODO COMO POR
EXEMPLO, EM DIAS DIFERENTES, COM ANALISTAS
DIFERENTES E EQUIPAMENTOS DIFERENTES
 ANVISA
PRECISÃO INTERMEDIÁRIA OU
PRECISÃO INTER-CORRIDAS

OBTIDA EM DIAS DIFERENTES, COM ANALISTAS

DIFERENTES E EQUIPAMENTOS DIFERENTES

RECOMENDA-SE UM MÍNIMO DE 2 DIAS

DIFERENTES COM ANALISTAS
DIFERENTES
 INMETRO
PRECISÃO INTERMEDIÁRIA

OBTIDA EM DIAS DIFERENTES, COM ANALISTAS

DIFERENTES E EQUIPAMENTOS DIFERENTES
 REPRODUTIBILIDADE
INTRALABORATORIAL
MAPA
657
PREPARAR E ANALISAR UM CONJUNTO DE AMOSTRAS COM
MATRIZES IDÊNTICAS, FORTIFICADAS COM SUBSTÂNCIAS
A ANALISAR DE MODO A OBTER CONCENTRAÇÕES
EQUIVALENTES AS SEGUINTES...

PARA CADA NÍVEL DE CONCENTRAÇÃO, A

ANÁLISE DEVE SER REALIZADA EM, PELO
MENOS, 6 RÉPLICAS
REPRODUTIBILIDADE
INTRALABORATORIAL
MAPA
657
REPETIR ESTES PASSOS PELO MENOS MAIS 2
VEZES, COM OPERADORES DIFERENTES,
INSTRUMENTOS DIFERENTES, LOTES DIFERENTES
DE REAGENTES, SOLVENTES, TEMPERATURA
AMBIENTE DIFERENTE, ENTRE OUTRAS

CALCULAR A CONCENTRAÇÃO MÉDIA, O DESVIO

PADRÃO E O CV
 IUPAC
PRECISÃO ENTRE CORRIDAS

A VARIAÇÃO DAS CONDIÇÕES ENTRE CORRIDAS

DEVE REPRESENTAR A ROTINA DO LABORATÓRIO

A PRECISÃO PODE LEVAR AINDA EM

CONSIDERAÇÃO A VARIAÇÃO ENTRE
OPERADORES, DIAS E EQUIPAMENTOS
 EURACHEM
PRECISÃO INTERMEDIÁRIA - INTRALABORATORIAL

OBTIDA EM DIAS DIFERENTES, COM ANALISTAS

DIFERENTES E EQUIPAMENTOS DIFERENTES

REALIZAR 10 REPLICATAS

CALCULAR A MÉDIA, O DESVIO PADRÃO

E O LIMITE DE REPRODUTIBILIDADE
REPRODUTIBILIDADE OU
PRECISÃO INTER-LABORATORIAL

ICH
INMETRO
657
DEVE SER AVALIADA ATRAVÉS DE ENSAIOS DE
PROFICIÊNCIA/COMPARAÇÕES INTERLABORATORIAIS

EURACHEM ANVISA
 LIMITE DE DETECÇÃO

ANVISA USP
VÁRIAS ABORDAGENS PODEM SER EMPREGADAS. POR
EXEMPLO, AVALIAÇÃO VISUAL, RELAÇÃO SINAL-RUÍDO OU
NA CURVA ANALÍTICA

ICH
 INMETRO
LIMITE DE DETECÇÃO

VÁRIAS ABORDAGENS PODEM SER EMPREGADAS

DUAS FORMAS DE CÁLCULO SÃO PROPOSTAS

LIMITE DE DETECÇÃO
IUPAC

HÁ VÁRIOS MÉTODOS PARA A

DETERMINAÇÃO DO LIMITE DE DETECÇÃO

É RECOMENDADO QUE SEJAM REALZADAS ANÁLISES

DE 6 AMOSTRAS DE BRANCO DE MATRIZ E O LIMITE
DE DECISÃO SERÁ 3 VEZES O DESVIO PADRÃO
DESTAS ANÁLISES
LIMITE DE DETECÇÃO
EURACHEM
ANÁLISE DE 10 BRANCOS DE MATRIZ

O LD É DETERMINADO COMO SENDO O VALOR MÉDIO DOS

RESULTADOS DOS BRANCOS, ACRESCIDO DE 3 VEZES O
DESVIO PADRÃO DAS ANÁLISES DOS BRANCOS

OUTROS MÉTODOS, COMO OS SUGERIDOS PELA IUPAC,

PODEM SER MAIS ADEQUADOS EM ALGUNS CASOS
 α)
MAPA
LIMITE DE DECISÃO (CCα
657
OS CÁLCULOS DEVEM SER REALIZADOS,
PREFERENCIALMENTE, UTILIZANDO OS
PROCEDIMENTOS DA CURVA DE CALIBRAÇÃO
MATRIZADA, DE ACORDO COM A SÉRIE DE
NORMAS ISO 11843

O LIMITE DE DECISÃO TAMBÉM PODE SER

CALCULADA A PARTIR DE, PELO MENOS, 20
MATERIAIS EM BRANCO POR MATRIZ
 ICH
LIMITE DE QUANTIFICAÇÃO

USP
VÁRIAS ABORDAGENS PODEM SER EMPREGADAS. POR
EXEMPLO, AVALIAÇÃO VISUAL, RELAÇÃO SINAL-RUÍDO
OU NA CURVA ANALÍTICA
LIMITE DE QUANTIFICAÇÃO OU
LIMITE DE DETERMINAÇÃO

INMETRO
EURACHEM
VÁRIAS ABORDAGENS PODEM SER
EMPREGADAS

POR EXEMPLO,VISUALMENTE OU 5, 6 OU 10 VEZES

O DESVIO PADRÃO DO BRANCO DA AMOSTRA
 β)
LIMITE DE DETERMINAÇÃO (CCβ
MAPA
657
OS CÁLCULOS DEVEM SER REALIZADOS,
PREFERENCIALMENTE, UTILIZANDO OS PROCEDIMENTOS
DA CURVA DE CALIBRAÇÃO MATRIZADA, DE ACORDO COM
A SÉRIE DE NORMAS ISO 11843

O LIMITE DE DETERMINAÇÃO É
DETERMINADO A PARTIR DO
LIMITE DE DECISÃO
ROBUSTEZ
ICH USP
EURACHEM ANVISA
DEVE SER AVALIADA DURANTE A ETAPA DE
DESENVOLVIMENTO DO MÉTODO E DEVE MOSTRAR A
CONFIABILIDADE DO RESULTADO DAS ANÁLISES EM
RELAÇÃO A MUDANÇAS DELIBERADAMENTE CAUSADAS
NAS CONDIÇOES DAS VARIÁVEIS DO MÉTODO
 INMETRO
ROBUSTEZ

PARA AVALIAR A ROBUSTEZ DE UM MÉTODO

PODE-SE RECORRER AO TESTE DE YOUDEN
ROBUSTEZ
IUPAC
DEVEM SER AVALIADOS TODOS OS ASPECTOS DO
MÉTODO QUE SÃO PROVÁVEIS DE INFLUENCIAR SEUS
RESULTADOS

A ROBUSTEZ É TESTADA PELA INTRODUÇÃO DE

PEQUENAS MS DELIBERADAS MODIFICAÇÕES NO
MÉTODO

É SUGERIDO O USO DE UM PLANEJAMENTO FATORIAL

FRACIONÁRIO PARA ESTE FIM

ALGUMAS VARIAÇÕES POSSÍVEIS SÃO: MUDANÇAS DE

EQUIPAMENTOS, OPERADORES, FORNECEDORES DE
REAGENTES, CONCENTRAÇÃO DE REAGENTES, pH DA
SOLUÇÃO, TEMPERATURA DA REAÇÃO, TEMPO DE
REAÇÃO
ROBUSTEZ / APLICABILIDADE
– PEQUENAS ALTERAÇÕES
657
ESTES ESTUDOS UTILIZAM A INTRODUÇÃO,
DELIBERADA PELO PRÓPRIO LABORATÓRIO,
DE PEQUENAS VARIAÇÕES RAZOÁVEIS E A
OBSERVAÇÃO DE SUAS CONSEQÜÊNCIAS

DEVEM SER EFETUADOS ESTUDOS PRÉVIOS PARA A

SELEÇÃO DE FATORES DO PRÉ-TRATAMENTO, DA LIMPEZA
E DA ANÁLISE DA AMOSTRA, SUSCEPTÍVEIS DE
INFLUENCIAREM OS RESULTADOS DA MEDIÇÃO. ESTES
FATORES PODEM INCLUIR O ANALISTA, A FONTE, A IDADE
DOS REAGENTES, SOLVENTES, PADRÕES E EXTRATOS DE
AMOSTRA, A TAXA DE AQUECIMENTO, TEMPERATURA,
pH, ENTRE OUTROS
ROBUSTEZ - GRANDES ALTERAÇÕES
657
O MÉTODO ANALÍTICO DEVE SER TESTADO EM
DIFERENTES CONDIÇÕES EXPERIMENTAIS QUE
INCLUEM, POR EXEMPLO, ESPÉCIES DIFERENTES,
MATRIZES DIFERENTES OU CONDIÇÕES DE
AMOSTRAGEM DIFERENTES

A IMPORTÂNCIA DESTAS ALTERAÇÕES PODE

SER AVALIADA, POR EXEMPLO, UTILIZANDO A
ABORDAGEM DE YOUDEN
 ESTABILIDADE MAPA
DEVEM SER AVALIADAS A ESTABILIDADE:

1. DO ANALITO NA MATRIZ BIOLÓGICA

ESTABILIDADE DE LONGA DURAÇÃO

AS AMOSTRAS DEVEM SER ANALISADAS EM
TRIPLICATAS, EM DUAS CONCENTRAÇÕES

COMPARAR OS RESULTADOS COM AQUELES

OBTIDOS DA ANÁLISE DAS AMOSTRAS RECÉM
PREPARADAS

OS INTERVALOS DE TEMPO ENTRE AS

AMOSTRAS DEVEM SER EQUIDISTANTES
 ESTABILIDADE MAPA
APÓS CICLOS DE CONGELAMENTO E DESCONGELAMENTO

AS AMOSTRAS DEVEM SER MANTIDAS CONGELADAS

POR 24h E ENTÃO SUBMETIDAS AO DESCONGELAMENTO À
TEMPERATURA AMBIENTE

RECONGELAR AS AMOSTRAS E DESCONGELÁ-LAS EM

OUTRAS 24h. REPETIR O PROCEDIMENTO POR 3 CICLOS,
QUANTIFICANDO-SE O ANALITO APÓS O TERCEIRO CICLO

AS AMOSTRAS DEVEM SER ANALISADAS EM

TRIPLICATAS, EM DUAS CONCENTRAÇÕES

COMPARAR OS RESULTADOS COM AQUELES OBTIDOS

DA ANÁLISE DAS AMOSTRAS RECÉM PREPARADAS
ESTABILIDADE MAPA
2. DO PÓS-PROCESSAMENTO
DEVE SER ANALISADA SEMPRE QUE O EXTRATO NÃO
FOR ANALISADO IMEDIATAMENTE

AS AMOSTRAS DEVEM SER ANALISADAS EM

TRIPLICATAS, EM DUAS CONCENTRAÇÕES

COMPARAR OS RESULTADOS COM AQUELES OBTIDOS

DA ANÁLISE IMEDIATA DOS EXTRATOS RECÉM
OBTIDOS

OS INTERVALOS DE TEMPO ENTRE AS AMOSTRAS

DEVEM SER EQUIDISTANTES
ESTABILIDADE MAPA
3. DAS SOLUÇÕES PADRÃO

DEVE COMEÇAR A SER ESTABELECIDA À

TEMPERATURA AMBIENTE DO LABORATÓRIO,
APÓS 6h DEPOIS DO PREPARO

AS AMOSTRAS DEVEM SER ANALISADAS EM

TRIPLICATAS, EM DUAS CONCENTRAÇÕES
 ESTABILIDADE 657
DEVEM SER AVALIADAS A ESTABILIDADE:

1. DA SUBSTÂNCIA A ANALISAR EM SOLUÇÃO

PREPARAR UMA SOLUÇÃO MÃE DA SUBSTÂNCIA A

ANALISAR E DILUIR DE MODO A PREPARAR
ALÍQUOTAS SUFICIENTES DE CADA CONCENTRAÇÃO
SELECIONADA

REALIZAR AS ANÁLISES
ESTABILIDADE 657
2. DA SUBSTÂNCIA A ANALISAR NA MATRIZ

DEVEM SER UTILIZADOS, PREFERENCIALMENTE,

AMOSTRAS REAIS

ANALISAR AMOSTRAS REAIS APÓS 1, 2, 4 E 20

SEMANAS

EM AMOSTRAS DE BRANCO FORTIFICADAS PODEM

SUBSTITUIR S AMOSTRAS REAIS, CASO ESTAS NÃO
ESTEJAM DISPONÍVEIS
 CÁLCULOS E
TESTES
ESTATÍSTICOS
 DE UMA FORMA GERAL AS NORMAS, GUIAS E
DIRETRIZES NÃO FORNECEM MUITA
INFORMAÇÃO SOBRE QUAIS E COMO APLICAR
TESTES ESTATÍSTICOS PARA OS DIVERSOS
CRITÉRIOS DE DESEMPENHO

EXCETO O DOCUMENTO DO MAPA QUE

DESCREVE EM DETALHES O QUE E COMO
FAZER OS CÁLCULOS E IMPLEMENTAR OS
TESTES ESTATÍSTICOS
 QUE NORMA/
GUIA/ DIRETRIZ
SEGUIR ????
PARA SELECIONAR A FORMA
COMO A VALIDAÇÃO DEVERÁ
SER EXECUTADA, É
NECESSÁRIO
VERIFICAR SE ALGUMA
NORMA/DIRETRIZ OU
GUIA DEVE SER
SEGUIDO

EM CASO AFIRMATIVO, SEGUIR AS

ORIENTAÇÕES DO MESMO

CASO CONTRÁRIO, SEGUIR AS

RECOMENDAÇÕES DE UM
DOCUMENTO REFERÊNCIA, COMO
OS CITADOS NESTA APRESENTAÇÃO
 O GUIA PARA A QUALIDADE EM QUÍMICA
ANALÍTICA DA ANVISA COMENTA:

“... NÃO EXISTE UM ACORDO UNÂNIME SOBRE

A INTERPRETAÇÃO DE ALGUNS DOS TERMOS
NEM SOBRE AS CONVENÇÕES USADAS NA SUA
DETERMINAÇÃO. ASSIM, AO MENCIONAR
DADOS DE VALIDAÇÃO, É RECOMENDÁVEL
MENCIONAR QUAISQUER CONVENÇÕES
ADOTADAS.”
ABNT NBR ISO/IEC 17025 : 2005

VALIDAÇÃO DE MÉTODO (5.4.5.3)

NOTA 3
“A VALIDAÇÃO É UM EQUILÍBRIO ENTRE
CUSTOS, RISCOS E POSSIBILIDADES
TÉCNICAS. ”

BOM SENSO
 REFERÊNCIAS

1. SWARTZ, M.E.; KULL, I.; CHROATOGRAPHY ONLINE.COM; THE

WEBSITE OF LC/GC NORTH AMERICA; VALIDATION,
QUALIFICATION OR VERIFICATION?; OUT/2005

2. INTERNATIONAL CONFERENCE ON HARMONISATION OF TECHNICAL

REQUIREMENTS FOR REGISTRATION OF PHAMACEUTICALS FOR
HUMAN USE (ICH) : 2005
VALIDATION OF ANALYTICAL PROCEDURES: TEXT AND
METHODOLOGY - Q2(R1)

3. NORMA NBR ISSO 9000:2000 - 2005

SISTEMAS DE GESTÃO DA QUALIDADE – FUNDAMENTOS E
VOCABULÁRIO

4. U.S. PHARCOPOEIA (USP) 32 : 2008

VALIDAÇÃO – CAPÍTULO 1225
5. INTERNATIONAL UNION OF PURE AND APPLIED CHEMISTRY
(IUPAC) : 2002
HARMONIZED GUIDELINES FOR SINGLE LABORATORY
VALIDATION OF METHODS OF ANALYSIS

6. DECISÃO DA COMISSÃO – DIRETIVA 96/23/CE : 2002 (657)

DESEMPENHO DE MÉTODOS ANALÍTICOS E INTERPRETAÇÃO
DE RESULTADOS

7. INSTITUTO NACIONAL DE METROLOGIA, NORMALIZAÇÃO

E QUALIDADE INDUSTRIAL (INMETRO)
ORIENTAÇÃO SOBRE VALIDAÇÃO DE MÉTODOS ANALÍTICOS –
DOQ-GCRE-008 : 2008

8. GUIA PARA VALIDAÇÃO DE MÉTODOS DE ANALÍTICOS E CONTROLE

DE QUALIDADE INTERNA DAS ANÁLISES DE MONITORAMENTO
DO PLANO NACIONAL DE RESÍDUOS E CONTAMINANTES –
PNCRC ANIMAL : 2008
MINISTÉRIO DA AGRICULTURA, PECUÁRIA E ABASTECIMENTO
(MAPA)
10. VIM : 2008
VOCABULÁRIO INTERNACIONAL DE METROLOGIA

11. ISO/IEC 17025 : 2005

VOCABULÁRIO INTERNACIONAL DE METROLOGIA

12. PRACTICAL METHOD VALIDATION: VALIDATION SUFFICIENT

FOR AN ANAYSIS METHOD, P. Bruce et al., MIKROCHIMICA
ACTA, 128(1998)93-106

13. GUIA PARA A QUALIDADE EM QUÍMICA ANALÍTICA. UMA

ASSISTÊNCIA À HABILITAÇÃO. SÉRIES TEMÁTICAS 1 –
LABORATÓRIO - ANVISA: 2005