Conservação de Recursos Genéticos: A Pesquisa com Plantas
Medicinais no Litoral do Paraná
As plantas medicinais são aquelas que apresentam ação farmacológica, ou seja,
ajudam na cura ou tratamento de várias doenças. O domínio da Mata Atlântica é um complexo ecossistema de grande importância, pois abriga uma parcela significativa da diversidade biológica do Brasil e do mundo. Os altos níveis de riqueza e endemismo, associados à destruição sofrida no passado, incluíram a Mata Atlântica definitivamente no cenário mundial como um dos 34 hotspots de biodiversidade (MITTERMEIER et al., 2004). Dentro dessa ótica, entendemos recurso genético como a variabilidade de plantas, integrantes da biodiversidade, de interesse socioeconômico atual e potencial para utilização em programas de melhoramento genético, biotecnologia e outras ciências afins (VALOIS ,1996). Assim, o objetivo deste trabalho foi apresentar o recurso genético disponível na floresta, a diversidade cultural local e o uso sustentável dos recursos naturais no litoral paranaense, no intuito de valorizar o saber tradicional de plantas medicinais pela comunidade para a descoberta de novos compostos químicos e refletir sobre as possibilidades de geração de renda para pequenos agricultores. As plantas medicinais da Mata Atlântica constituem um capítulo à parte, na história dessa floresta litorânea. Não pela ameaça de desaparecimento de suas espécies, que não deixa de ser preocupante, mas pela promessa com que acenam. Um recente levantamento da Unicamp revelou o potencial de sua bioquímica para a produção de novos medicamentos. Entre 710 espécies utilizadas para fazer 1200 diferentes medicamentos, utilizados no tratamento de 147 diferentes doenças, escolheu-se, para pesquisa de campo, o município de Registro (SP), no Vale do Ribeira. Essa região reúne algumas importantes características: é o maior remanescente em área contínua da floresta, e o comércio de grande parte das drogas vegetais provenientes do extrativismo é feito com plantas coletadas nessa região (BANDINI; CZEPAK,2008). A teoria da ação coletiva e dos bens comuns tem comprovado que é possível que os indivíduos ajam coletivamente para manejar recursos naturais, de forma compartilhada e em base sustentável, por meio da ação coletiva ou de acordos coletivos, e tem constatado a importância da comunicação, da reciprocidade, da confiança na iniciação e manutenção da ação coletiva ou cooperativa. A primeira etapa do trabalho consistiu no preenchimento de uma entrevista semi-estruturada geral com moradores de uma comunidade tradicional no Litoral do Paraná. Nesta etapa, as pessoas elencaram todas as plantas que conhecem da região, tais como medicinal, alimenticia, madeira serrada, ornamental, forragem, entre outros. Utilizou-se como referencia o método “bola de neve” (Albuquerque et al., 2003). Assim, obteve-se um total de 25 entrevistas. Realizou-se o check-list a fim de identificar as plantas usadas e manejadas pela comunidade. Neste caso, fez-se uso da aplicação de métodos visuais para obter informações sobre o uso e o conhecimento das plantas da região (MEDEIROS et al., 2008). Todo o material coletado foi incorporado ao acervo do Herbário da Universidade Federal do Paraná ou Museu Botânico Municipal de Curitiba. A confirmação das identificações foi realizada por comparações morfológicas com exsicatas identificadas, e ainda, por consultas aos especialistas do grupo de pesquisa (LAWRENCE, 1951; IBGE, 1992). O material vegetal foi transportado até o Laboratório, Setor Litoral da UFPR, Matinhos, PR, para a extração do óleo por meio de hidrodestilação durante 2h 30min, em aparelho graduado tipo Clevenger utilizando-se 100g de material fresco em 1L de água destilada, com 3 repetições. Para determinação do teor de umidade do material vegetal no momento da extração, foram coletadas amostras de 20g, em triplicatas, submetidas à secagem em secador elétrico modelo FANEM - Mod. 320 SE com circulação de ar, a 65ºC até massa constante. A partir do “regime de propriedade comum” ou “propriedade comum”, observamos que os indivíduos e grupos constroem estratégias de uso dos recursos naturais a partir da sua interação com o ambiente, baseados em suas histórias de uso. Isso quer dizer que esses bens coletivos se traduzem na vida da comunidade, no seu modo de vida. Se configuram em uma expressão de sua realidade, cultura e reprodução social. Para Ostrom, a interação dessas comunidades com o ecossistema contradiz a “tragédia dos comuns”, pois esses grupos podem se beneficiar economicamente da natureza, quando organizados com um objetivo comum, no qual os interesses coletivos perpassam os interesses individuais, comprovando que, na prática, os usuários tendem a se organizar quando se envolvem em uma negociação face a face e tem autonomia para mudar suas regras. Essa organização depende dos atributos do sistema de recursos, dos próprios usuários, que influenciam a confiança uns nos outros, e dos benefícios a serem alcançados, bem como dos custos necessários para atingi-los (OSTROM et al., 2011). O manejo de espécies e ecossistemas por comunidades tradicionais aponta muitas possibilidades para o desenvolvimento das mesmas. Paul Little (2000) aborda a questão do etnodesenvolvimento como uma combinação do debate do desenvolvimento com o reconhecimento da diversidade cultural, frente às ofensivas do Mercado e à maneira como o Estado trata estas comunidades. “O desenvolvimento dá um recorte étnico aos debates sobre a questão da autodeterminação dos povos e, no processo, questiona, pelo menos parcialmente, as noções excludentes de soberania nacional” (LITTLE, 2002, p.40). Acreditamos que, no modelo em que vivemos, grande parte das soluções virão da abordagem em escala menor, de atores individuais e iniciativas locais testadas e demonstradas, porém, o sistema como um todo precisará, também, de mecanismos para disseminar e replicar esses pequenos sucessos. Além disso, o contexto institucional e os processos que acontecem em escala macro podem criar, ou não, um contexto adequado para esta exploração e replicação local. Portanto, precisam-se buscar soluções em todos os níveis. Especificamente sobre as espécies identificadas como recurso genético, podem-se inferir algumas reflexões. Em se tratando da Guaricana, são necessários estudos para verificar a possibilidade do manejo por estas populações tradicionais, sendo que hoje o local em que se localiza a comunidade fica parte dentro do Parque Nacional Santi- Hilaire/ Langue e parte dentro da Área de Proteção permanente de Guaratuba (APA). Estudos podem ser conduzidos para verificar o número de indivíduos e populações bem como estratégias de regeneração, a fim de avaliar a sustentabilidade da espécie. Tal ação se dará em parceria com instituições federais, estaduais e municipais de pesquisa e extensão rural, buscando desenvolver tecnologias apropriadas que possam ser implementadas pelos agricultores locais, de forma a cultivar e beneficiar de maneira sustentável estes recursos, promovendo inclusão social, renda e conservação da biodiversidade.
CRIOPRESERVAÇÃO DE PÓLEN PARA CRIAÇÃO DE PLANTAS
E CONSERVAÇÃO DE RECURSOS GENÉTICOS
A conservação do pólen é uma ferramenta importante em a gestão dos recursos
genéticos vegetais. O criação de bancos de pólen e novas metodologias visando manter a viabilidade de longo prazo de pólen são de interesse para embriologistas e geneticistas . A conservação do pólen melhora a eficiência dos programas de melhoramento e permite a troca de germoplasma, e. para o eucalipto, palmeiras, cana- de-açúcar, inhame e outras espécies. Além disso, é outra ferramenta para a preservação da diversidade genética . Além disso, o pólen conservado também pode ser usado para apoiar a reprodução em espécies com ineficiente, ineficaz ou inexistente agentes polinizadores ; por exemplo, habilitando cruzamentos a serem feitos entre genótipos que florescer de forma assíncrona, como não adaptado materiais e espécies relacionadas , ou mesmo para permitir a hibridização duas vezes por ano. No entanto, relatos da literatura de preservação do pólen de várias espécies não sempre apresentar uma descrição detalhada do extração, secagem, conservação e descongelamento procedimentos testados, que fazem a replicação de aproxima-se um pouco difícil. O objetivo desta revisão é analisar e interpretar as principais descobertas sobre pólen criopreservação, a fim de ampliar o compreensão do assunto e encorajar o uso desta metodologia em bancos de germoplasma e programas de melhoramento de plantas. A criopreservação consiste em conservar material biológico em nitrogênio líquido (LN) em -196ºC, ou em sua fase de vapor a -150ºC , de modo que as características do material sejam mantida após o descongelamento. Esta técnica tem demonstrou ser eficiente e prático para conservação de longo prazo da genética vegetal recursos, especialmente para espécies que se propagam vegetativamente ou ter recalcitrante ou intermediário sementes. Os protocolos de criopreservação têm foi desenvolvido para muitas espécies de plantas, como gramíneas, espécies ornamentais, tropicais e espécies de árvores frutíferas temperadas, leguminosas e plantas oleaginosas, medicinais e aromáticas. A criopreservação pode ser realizada por métodos tradicionais ou modernos. Tradicional abordagens consistem em congelar o material lentamente ou ultrarrápido. Para congelamento lento, um freezer programável é usado, a uma taxa de congelamento predeterminada até uma temperatura faixa de -30 a -40 ° C, antes da exposição ao LN, permitindo a remoção da maior parte da água dentro das células por desidratação por congelamento para o espaço extracelular. Esse tipo de protocolo de criopreservação pode envolver o uso de substâncias que interagem e aceleram o distribuição de água dentro e fora da célula, além de promover a desidratação celular, e protegendo biomembranas de lesões potenciais durante o congelamento e descongelamento de células. Esses substâncias, que agem como crioprotetores, são derivados de diferentes grupos químicos, mas compartilham funções semelhantes de redução da depressão de congelamento. O armazenamento de pólen é essencial, especialmente para espécies que têm um longo período vegetativo ou que florescem algumas vezes por ano, ou para algumas plantas que propagam-se vegetativamente. Os benefícios incluem possibilitando: i) o cruzamento de plantas que florescem em tempos diferentes; ii) a hibridização de plantas que crescem em locais diferentes e distantes; iii) a redução da transmissão da doença quando o vetores são polinizadores. Além disso, para conservar o pool genético masculino por longos períodos, pólen conservação é uma maneira útil de superar o isolamento temporal e espacial do pai espécies em programas de melhoramento, superando a necessidade de esperar pelo crescimento e floração de a planta para obter o progenitor masculino. Desta maneira, o armazenamento de pólen pode tornar-se recorrente e reprodutivo linhas imediatamente disponíveis conforme necessário, independentemente da resposta do material para floração e data de plantação. Esse trabalho pode ser facilitado pela troca rápida e uso de pólen armazenado de genótipos específicos ou únicos entre cientistas a nível nacional e internacional nível. Quando o teor de umidade do pólen é alto, o congelamento diminuirá sua viabilidade induzindo formação e crescimento de cristais de gelo que podem quebrar as membranas celulares. Na verdade, cristal de gelo a formação é um dos maiores problemas encontrados na criopreservação. Enquanto o a temperatura diminui e cai um pouco abaixo de 0 ° C, as células super resfriam até que o gelo seja nucleado. No estruturas vegetais multicelulares, cristais de gelo são formado no espaço extracelular e, de fato, a parede celular e a membrana plasmática atuam como barreiras que impedem a formação de cristais de gelo nos espaços intracelulares, reduzindo assim o probabilidade de desencadear o congelamento do citoplasma. Como os grãos de pólen são entidades únicas com apenas dois ou três núcleos, tal extracelular o congelamento é provavelmente limitado. Portanto, o pólen o nível de hidratação deve ser reduzido antes do resfriamento. Pólen binucleado é classificado como tolerante e pólen trinucleado frequentemente tão sensível à secagem. Além disso, muitos autores descrever que o pólen binucleado tem maior viabilidade quando comparada ao pólen trinucleado. Isso ocorre devido ao fato de que segunda divisão meiótica em pólen trinucleado consome reservas suficientes para impactar negativamente boa longevidade e germinação. No por outro lado, o pólen binucleado apresenta uma maior quantidade de compostos de superfície em sua parede e não há uma segunda divisão meiótica neste tipo de pólen, evitando perdas de reservas. Portanto, uma metodologia de secagem adequada para pólen trinucleado é necessário, uma vez que o pólen nuclear componentes podem ser danificados, reduzindo seu viabilidade. Em geral, as espécies de Poaceae têm pólen trinucleado, o que torna difícil armazenar os gametas masculinos de espécies de gramíneas. No além de Zea mays L. (Poaceae), pólen de Simmondsia chinensis (Link) C.K. Schneid. (Simmondsiaceae) também perdem viabilidade com secagem drástica. Williams e Brown em seu estudo recente com pólen tricelular e bicelular descobriram que o conteúdo de água e o número de as células de pólen são correlacionadas positivamente. A viabilidade do pólen depende de muitos fatores e a longevidade do pólen varia entre as espécies e pode variar de alguns dias a anos. Isto é comum ouvir relatos de criadores sobre o não sincronização da floração em espécies para ser cruzada, ou que quando a planta feminina está em forma, a planta masculina não libera pólen suficiente. É por isso que é importante entender mais sobre a resposta de armazenamento de espécies biodiversas pólen, inclusive para criopreservação. O literatura mostra que a criopreservação é um técnica viável e eficiente para pólen conservação, uma vez que o pólen pode ser armazenado por um tempo indeterminado quando o adequado metodologia é usada. No entanto, cada espécie potencialmente se comporta de maneira diferente para os processos aplicado (ou seja, secagem,resfriamento, aquecimento, viabilidade teste), por isso é de suma importância conduzir mais pesquisas e desenvolver técnicas ideais para cada espécie de interesse. A técnica tem potencial para superar os desafios da criação. programas, como assincronia de floração entre diferentes genótipos pais, e a produção de pólen insuficiente na natureza. Geralmente, as técnicas de criopreservação de pólen tendem a ser simples o suficiente para ser usado rotineiramente em programas de pesquisa, melhoramento de plantas e conservação de germoplasma.