METABOLISMO E

CRESCIMENTO BACTERIANO

Professora: Adrianne M. Alcântara

alcantara.adrianne@gmail.com
Metabolismo bacteriano
 Metabolismo bacteriano
• Metabolismo  soma de todos os processos
químicos realizados pelos organismos vivos

• Anabolismo  síntese de moléculas

complexas a partir de moléculas mais simples

• Catabolismo  quebra de moléculas

complexas para obtenção de energia
 Metabolismo bacteriano
• Micro-organismos apresentam grande
diversidade metabólica

• Vias metabólicas não disponíveis para plantas

e animais

• Classificados de acordo com seus padrões

nutricionais – fonte de energia e carbono
 Classificação nutricional
Saprófita
Quimioheterótrofo

Parasita
Química

Quimioautótrofo
Fonte de
energia Cianobactérias

Fotoautótrofo Fotossíntese

Sulfobactérias
Luz

Fotoheterótrófo
 Obtenção de Energia

Respiração aeróbia

Processo metabólico Respiração anaeróbia

Fermentação
 Tipos de fermentação
• Homolática – ácido lático
– Lactobacilos e estreptococos

• Heterolática – ácido lático e etanol

– Lactobacilos

• Alcoólica – etanol
– Leveduras
 Tipos de fermentação
• Acética – ácido acético
– Clostridium aceticum

• Butanodiólica – butanodiol
– Klebsiela pneumoniae

• Butírica-butílica – acido butírico e butanol

– Clostridium tetani, C. botulinum e C. perfringens
Crescimento bacteriano
 Crescimento bacteriano
• Crescimento em número não em
tamanho

• Formação de colônias
Fatores que influenciam no
crescimento bacteriano
• Físicos
– Temperatura
– pH
– Pressão osmótica

• Químicos
– Fontes de carbono
– Nitrogênio
– Enxofre, fósforo
– Oxigênio
– Oligoelementos e Vitaminas
 Fatores físicos
• Temperatura

– Psicrófilos – 0 ͦ a 15 ͦC
– Pscicotróficos – 0 ͦ a 20-30 ͦC
– Mesófilos – 25 ͦ a 40 ͦC
– Termófilos – 45 ͦ a 60 ͦ C
– Hipertermófilos – 70 a 80 ͦ C
Classificação das bactérias de acordo com
sua temperatura ótima de crescimento
• Temperatura mínima
• Temperatura ótima
• Temperatura máxima
Temperatura de preservação
de alimentos
 Efeito da quantidade de alimento
em relação à velocidade de resfriamento
 Fatores físicos
• pH

– Acidófilas
– Neutrófilas
– Alcalófilas
Taxa de crescimento

2 7 14
pH
 Fatores físicos
• Pressão osmótica
– Meios com elevada pressão osmótica podem levar a
plasmólise
• Halófilas  adaptados a concentrações elevadas de sal
• Conservação de alimentos
 Fatores Químicos
• Fontes de carbono

– Um dos fatores mais importantes para o

crescimento microbiano

– Esqueleto estrutural da matéria viva

– Todos os compostos orgânicos

 Fatores Químicos
• Nitrogênio

– Síntese de proteínas, enzimas e ácidos nucléicos

– Alguns micro-organismos patogênicos obtêm

aminoácidos a partir das células hospedeiras

– Fixação de nitrogênio – utilizam o nitrogênio

diretamente da atmosfera
 Fatores Químicos
• Enxofre
– Aminoácidos e vitaminas

• Fósforo
– ATP, fosfolipídeos e ácidos nucléicos
 Fatores Químicos
• Oxigênio
 Fatores Químicos
• Oligoelementos
– Cobre, Zinco, Ferro, Cobalto
– Co-enzimas

• Vitaminas
– Co-enzimas
– Algumas bactérias conseguem sintetizar
suas próprias vitaminas
Investigação da atividade
metabólica das bactérias
 Esporulação
• Condições ambientais adversas
• Bacillus spp. e Clostridium spp.
 Ciclo do crescimento
bacteriano
• Fase Lag

• Fase Log

• Fase estacionária

• Fase de declínio e
morte
 Fase Lag
• Intervalo antes do inicio do crescimento
populacional

• Tempo necessário para a biossíntese de

moléculas

• Duração variável
 Fase Log
• Fase de crescimento exponencial
• População duplicada a intervalos regulares
• Período de maior atividade metabólica
Tempo (h) Numero de células
0 1
0,5 2
1 4
1,5 8
2 16
2,5 32
3 64
10 1.048.576
Taxa de crescimento de uma cultura bacteriana
 Fase estacionária
• Número de mortes equivalente ao
número de células novas

• Esgotamento de nutrientes

• Acúmulo de resíduos

• Metabolismo ativo
 Fase de declínio e morte
• Numero de células vivas decresce em
velocidade algorítmica
Crescimento bacteriano
in vitro
 Meios de cultura
• Cultivo artificial de micro-organismos

• Nutrientes indispensáveis para o

crescimento

• Fonte de carbono, nitrogênio, energia e

sais minerais
Meios de cultura
 Classificação dos meios de
cultura
Sólido
Consistência Líquido
Semi-sólido

Enriquecedor
Seletivo
Meios de cultura Diferenciador
Função
Manutenção

Animado
Natureza Natural
Inanimado Sintético
Semi-sintético
 Meio enriquecedor
• Fatores de crescimento para micro-
organismos exigentes
– Ágar sangue
– Caldo BHI
 Meio seletivo
• Inibe o crescimento de alguns micro-
organismos e permite o crescimento de
outros
– Ágar Levine
– Ágar MacConkey
 Meio diferenciador
• Evidenciam características de algumas
bactérias
– Ágar sangue
– Ágar Levine
– Ágar MacConkey
 Meio de manutenção
• Manutenção das colônias por um tempo
prolongado
• Diminui a velocidade do crescimento
– Ágar nutriente
 Meio animado
• Constituído por células vivas
– Cobaias
– Ovo embrionário
 Meio inanimado
• Natural  leite
• Sintético Ágar Sal Manitol
• Semi-sintético  Ágar sangue
Controle do crescimento
bacteriano
 Controle do crescimento
bacteriano
• Esterilização

• Desinfecção

• Descontaminação

• Antissepsia

• Sanitização
 Métodos Físicos
• Calor úmido
– Fervura

– Autoclave

– Pasteurização
 Métodos Físicos

• Calor seco
– Chama direta

– Estufa
 Métodos Físicos
• Filtração
– Filtros HEPA (high-efficiency particulate air)

– Filtros de membrana
 Métodos Físicos
• Baixas temperaturas
– Temperatura de geladeira(0 a 7 ͦC)
• Reduz a taxa metabólica de alguns micro-
organismos

– Temperatura de congelador ( - 2 a -6 ͦC)

• Micro-organismos dormentes
 Métodos físicos
• Radiação
– Ionizante
• Raios gama, Raios X e feixe de elétrons
• Esterilização de seringas plásticas, luvas
cirúrgicas, fios de sutura e cateteres

– Não ionizante
• Ultravioleta
• Lâmpada UV
 Métodos físicos
• Dessecação
– Liofilização ou congelamento-dessecação
 Métodos químicos

• Agentes bactericidas
– Causa a morte do micro-organismo

• Agentes bacteriostáticos
– Inibe o crescimento do micro-organismo
 Métodos químicos
• Esterilizantes
– Destroem todas as formas de vida microbiana

– Materiais sensíveis ao calor (laboratório, hospitais)

– Óxido de etileno, formaldeído, ácido peroxiacético,

hipoclorito de sódio
 Métodos químicos
• Desinfetantes
– Descontaminação de pisos, bancadas, mesas, paredes

– Utilizados em ambientes hospitalares

– Fenol e detergentes
 Métodos químicos

• Sanitizantes
– Menos agressivos que desinfetantes

– Amplamente utilizado na indústria de

alimentos

– Hipoclorito e iodóforos
 Métodos químicos
• Antissépticos
– Atóxicos para serem usados em tecidos vivos

– Tratamento de feridas superficiais e cirúrgicas

– Iodo, álcool, clorexidina, peróxido de hidrogênio

Normas de Segurança
no Laboratório de
Microbiologia
 Normas de Segurança no
Laboratório de Microbiologia

• Uso indispensável do jaleco

• Calça comprida
• Sapato fechado (cobrindo o
peito do pé)
• Cabelos compridos devem
estar presos
• Retirar anéis, pulseiras e
relógios
 Normas de Segurança no
Laboratório de Microbiologia
• Material pessoal (bolsas, casacos, etc.) longe
da bancada de trabalho

• Sempre lavar as mãos ao entrar e sair do

laboratório

• Proibido comer, beber e fumar

• Evitar o uso do celular

 Normas de Segurança no
Laboratório de Microbiologia
• Cuidado ao manusear aparelhos e equipamentos

• Manter-se sempre atento

• Limpar a bancada com álcool 70% ao início e

término de cada uso

• Flambar alças, agulhas e pinças antes e após o

uso
 Normas de Segurança no
Laboratório de Microbiologia
• Sempre manusear placas de Petri e tubos de
ensaio atrás da chama do bico de Bunsen

• Realizar o descarte adequado dos materiais

utilizados
– Luvas  LIXO
 Normas de Segurança no
Laboratório de Microbiologia
• Não usar o Jaleco fora do ambiente
laboratorial

• Em caso de acidente, informar

imediatamente