Profª Marta Disciplina: Bioquímica Molecular INTRODUÇÃO
São as macromoléculas mais importantes
das células São os instrumentos onde é expressa a informação genética Existem milhares de diferentes proteínas na célula Extremamente versáteis em suas funções DEFINIÇÃO
São polímeros lineares de -aminoácidos,
com ampla variabilidade estrutural e funcional A união de aminoácidos são denominadas peptídeos Polímeros com menos de 100 aminoácidos (oligopeptídeos) As proteínas diferem uma das outras pela:
Ordem dos aminoácidos
Tipo dos aminoácidos Número do aminoácidos VALOR BIOLÓGICO DAS PROTEÍNAS: Medida de sua qualidade. Alto valor significa que a proteína tem todos os Aa essenciais necessários nas quantidades requeridas na nutrição humana. Fonte V alor Biológico
Aa essenciais : Leucina, Isoleucina, Valina, Ovos 100
Fenilalanina, Lisina , Triptofano, Metionina, Carne boi 100 Treonina. Arginina e Histidina são Peixe 87 essenciais apenas em períodos de Leite 85 crescimento e recuperação de doença. Carne soja 67 Batata 67 Pão Integral 30 160 140 Lisina Proteínas Animais Alto 120 metionina valor porque a proteína 100 tem todos os Aa 80 essenciais necessários 60 nas quantidades 40 requeridas na nutrição 20 humana. 0 EXCETO GELATINA Feijão Arroz Arroz+Feijão
Proteínas Vegetais: Baixo valor porque a proteína
tem deficiência em algum Aa essencial (Aa limitante). A MISTURA DE DIFERENTES FONTES VEGETAIS COMO LEGUMINOSAS E CEREAIS PROPORCIONA COMBINAÇÃO DE ALTO VALOR BIOLÓGICO. As proteínas podem ser:
DINÂMICAS – transporte, defesa, catálise de
reações, controle de metabolismo e contração
ESTRUTURAIS – promovem a sustentação
estrutural da célula CLASSIFICAÇÃO DAS PROTEÍNAS
Quanto a Solubilidade:
Albuminas - Solúveis em água;
Globulinas - Insolúveis em água, mas
solúveis em soluções salinas;
Glutelinas - Insolúveis em água mas
solúveis em soluções ácidas ou básicas Quanto a Composição
Proteínas simples Somente aminoácidos
Proteínas conjugadas (proteínas ligadas a outras substâncias) Glicoproteínas
Metaloproteínas
Lipoproteínas Quanto a Forma
proteínas fibrosas - insolúveis, formadas por longas
cadeias. Ex.: colágeno, a queratina dos cabelos, ou a miosina dos músculos. proteínas globulares – esféricas. Ex.: enzimas,
hemoglobina, etc. Quanto as Funções Biológicas
Enzimas com atividade catalítica
Proteínas transportadoras Proteínas nutrientes e de reserva Proteínas estruturais Proteínas de defesa Proteínas reguladoras Outras proteínas cujas funções são, digamos, exóticas e de difícil classificação. NÍVEIS ESTRUTURAIS DAS PROTEÍNAS
Estrutura primária - sequência de aminoácidos.
Estrutura secundária – dada pelo arranjo espacial dos
aa próximos entre si na sequência primária da proteína.
Estrutura terciária - dada pelo arranjo espacial dos aa
distantes entre si na sequência polipeptídica.
Estrutura quaternária – construção de proteínas a
partir das diversas cadeias polipeptídicas (subunidades). Desnaturação Protéica
É a perda da estrutura nativa de uma
proteína, com conseqüente perda de função Pode ser reversível ou irreversível
Fatores desnaturantes: mudanças no
pH,mudanças de temperatura, solventes orgânicos, detergentes, uréia Desnaturação de proteínas por alteração do pH do meio Proteínas Homólogas:
Desempenham a mesma função em
tecidos ou em espécies diferentes
Possuem segmentos VARIÁVEIS e
segmentos FIXOS ESTRUTURA TRIDIMENSIONAL DAS
PROTEÍNAS é determinada pela sequência de aminoácidos
A função da proteína depende de sua ESTRUTURA estrutura tridimensional TRIDIMENSIONAL DAS PROTEÍNAS
são estabilizadas por interações é única não covalentes PROTEÍNAS NATIVAS Conformação – arranjo espacial dos átomos em uma proteína. Estado estrutural que pode se interconverter em outros sem a quebra de nenhuma ligação covalente
A conformação mais estável
termodinamicamente, com menor energia livre de Gibbs, é a que predomina
Proteínas nativas - proteínas em sua
conformação funcional GRUPO PEPTÍDICO PLANAR – as cadeias polipeptídicas não são livres para assumir, ao acaso, uma estrutura tridimensional qualquer ESTRUTURA SECUNDÁRIA DAS PROTEÍNAS
Arranjo espacial dos resíduos de
aminoácidos, que são adjacentes na estrutura primária
Os tipos principais de arranjos secundários
são:
a-hélice e a conformação a-hélice
É o arranjo mais simples que a cadeia polipeptídica
pode assumir
A cadeia é retorcida em torno de um eixo que passa
pelo centro da hélice com os grupos R dos resíduos de aminoácidos projetando-se para a face externa da hélice
A estrutura é estabilizada por pontes de hidrogênio
Com raras exceções, apenas as hélices orientadas
para à direita são encontradas nas proteínas Fatores que alteram a estabilidade da a-hélice
Interações entre cadeias laterais de
aminoácidos O Volume e a forma dos resíduos de Asn, Ser, Thr e Cys Resíduos de Pro e Gly Interação de aminoácidos nas extremidades e o dipolo elétrico da hélice Conformação (folha )
É a conformação mais estendida das
cadeias polipeptídicas
A cadeia polipeptídica estende-se em
uma estrutura em ziguezague, que podem ser dispostas lado a lado
Os grupos R dos aminoácidos
adjacentes, projetam-se em direções opostas Conformação (folha )
Algumas estruturas protéicas limitam os
tipos de aminoácidos que podem ocorrer em uma folha
Os grupos R dos resíduos de
aminoácidos devem ser relativamente pequenos
Apresentam uma conteúdo elevado de
Ala e Gly Probabilidade relativa de resíduos de aminoácidos nos três tipos mais comuns de estruturas secundárias ESTRUTURAS TERCIÁRIAS E QUARTENÁRIAS DAS PROTEÍNAS
Estrutura terciária – é o arranjo tridimensional
global de todos os átomos em uma proteína
A estrutura terciária inclui aspectos envolvendo
distâncias mais longas dentro da sequência de aminoácidos
Alguns peptídeos contêm duas ou mais cadeias
polipeptídicas separadas ou subunidades. O arranjo dessas subunidades protéicas constitui a estrutura quaternária Ao considerarmos esses níveis mais elevados de organização estrutural, podemos classificar as proteínas em dois grupos principais:
Proteínas Fibrosas – possuem cadeias
polipeptídicas em arranjos de folhas ou feixes
Proteínas Globulares - possuem cadeias
polipeptídicas enoveladas em formas esféricas ou globulares PROTEÍNAS FIBROSAS
A presentam propriedades que conferem
resistência e/ou flexibilidade às estruturas nas quais aparecem
São insolúveis em água, devida à elevada
concentração de aminoácidos hidrofóbicos
Exemplos: -queratina, colágeno, fibroína da
seda a-queratina
Encontradas em mamíferos, constituem
quase todo o peso seco dos cabelos, lã, unhas, garras, espinhos, chifres, cascos e a maior parte da camada externa da pele
É rica em resíduos hidrofóbicos – Ala, Val,
Leu, Ile, Met, e Phe
As -hélices da queratina possuem um
arranjo em forma de espiral. Duas fitas de - queratina enovelam-se (superenovelamento) ESTRUTURA DO CABELO Nas a-queratinas, as ligações cruzadas que estabilizam a estrutura quaternária são as ligações de dissulfeto Colágeno
Fornece resistência mecânica
Tecidos conjuntivos como tendões, cartilagens, na matriz orgânica dos ossos e na córnea dos olhos. Apresenta uma estrutura superenovelada que possui uma estrutura terciária e uma quaternária característica: 3 polipeptídeos separados Apresenta 35% de Gly, 11% de Ala e 21% de HyPro Colágeno Fibroína da seda
Produzida por insetos e aracnídeos
Suas cadeias estão predominantemente na conformação É rica em Ala e Gly É estabilizada por diversas pontes de hidrogênio e por interações de van der Waals A seda não sofre estiramento, mas é flexível devido as numerosas interações fracas ESTRUTURA DA SEDA PROTEÍNAS GLOBULARES
O enovelamento gera a diversidade estrutural
necessária para que as proteínas executem um grande número de funções biológicas
Incluem as enzimas, proteínas
transportadoras, proteínas motoras, proteínas regulatórias, as imunoglobulinas e proteínas com diversas outras funções
Mioglobina, lisozima, etc.
Mioglobina
Proteína ligante ao oxigênio relativamente
pequena
Armazena oxigênio e facilita a difusão deste
no tecido muscular em contração rápida
Contém uma única cadeia polipeptídica
É formada por 8 segmentos de -hélices que
são interrompidos por dobras MIOGLOBINA – GRUPO HEME TÉCNICAS EMPREGADAS PARA SEPARAÇÃO DE AMINOÁCIDOS, PEPTÍDEOS E PROTEÍNAS Cromatografia de troca iônica Cromatografia de exclusão molecular Cromatografia e afinidade Purificação da RNA Eletroforese polimerase da E. coli
