Escola Secundária / 3º CEB da Batalha

Geologia e Biologia - 11º Ano

Protocolo experimental

COMO PODE EFECTUAR-SE A EXTRACÇÃO DO DNA DE UMA CÉLULA?

A extracção do DNA pode ser realizada a partir de diferentes tipos de células eucarióticas e consta,
fundamentalmente, de duas etapas:
. rotura das células para libertação dos núcleos;
. separação dos componentes básicos dos cromossomas: DNA e proteínas.

Material . Algodão hidrófilo

. Vareta
. Cebola pequena (± 150 g) . Água
. Bisturi . Álcool a 95%
. Almofariz . Sal de cozinha (1 colher de chá)
. Proveta . Detergente da louça (1 colher de
. Balão de Erlenmeyer sopa)
. Tubos de ensaio
. Papel de filtro
. Funil

Fig 1
Modo de proceder:

1 - Corte a cebola em pequenos fragmentos e coloque-os no almofariz.

2 - Num balão de Erlenmeyer com água até cerca de metade da altura, coloque o sal e o detergente.
Agite suavemente a mistura durante cerca de cinco minutos.
3 - Coloque cerca de metade da mistura obtida em 2 no almofariz e triture.
4 - Filtre a mistura do almofariz para o Erlenmeyer. Utilize o filtro de papel.
5 - Filtre novamente o material contido no Erlenmeyer para uma proveta, utilizando o algodão
hidrófilo.
6 - Cuidadosamente, faça escorrer lentamente um pouco de álcool pelas paredes da proveta e procure
observar a formação de duas fases: uma superior alcoólica e outra inferior aquosa.
7 - Introduza uma vareta na proveta e, com movimentos circulares, procure misturar as duas fases. O
DNA insolúvel no álcool precipita e forma uma massa filamentosa esbranquiçada que contém
também proteínas e outros materiais.
8 – Elabore o relatório da actividade