A frAquezA dAs clulas-tronco

Contaminao pode ser a Causa dos maus resultados Marcos Pivetta

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da terapia Contra o parkinson

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trs dcadas a terapia celular tem sido uma fonte sucessiva de entusiasmo e decepo para os pacientes com mal de Parkinson, doena caracterizada pela morte progressiva dos neurnios responsveis pela produo de uma importante substncia qumica, o neurotransmissor dopamina. Nos anos 1980 uma abordagem polmica contra a doena, que inicialmente parecia promissora, foi testada em animais e at em seres humanos em pases como Sucia, Estados Unidos e Mxico: a realizao de transplantes com clulas extradas da glndula adrenal ou do tecido cerebral imaturo de fetos abortados. A lgica dessas cirurgias, discutveis inclusive do ponto de vista tico, era dotar a estrutura cerebral conhecida como substncia negra lesada nos pacientes pela perda progressiva dos neurnios dopaminrgicos com uma nova populao de clulas capazes de fabricar o neurotransmissor. Dessa forma, os principais sintomas do Parkinson, como tremores, rigidez muscular, lentido de movimentos e dificuldade para falar e escrever, poderiam ser eliminados. Os resultados da abordagem foram decepcionantes. Nos casos em que houve melhora, o bem-estar dos pacientes foi passageiro. Em outros, nem isso ocorreu e a tentativa de tratamento at piorou a doena, levando morte alguns indivduos. Um grupo de bilogos e neurocientistas paulistas pode ter descoberto um dos motivos por trs do fracasso das antigas terapias celulares contra o Parkinson e talvez compreendido por que as verses mais modernas e refinadas desse tipo de tratamento experimental, hoje baseadas no emprego das chamadas clulas-tronco, continuam a dar resultados inconsistentes. Os transplantes que tm sido testados nos estudos pr-clnicos, em animais de laboratrio, podem conter uma quantidade significativa de fibroblastos, um tipo de clula da pele extremamente parecido com algumas clulas-tronco, mas que tem propriedades totalmente diferentes.
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MedicalRF.coM / GettyiMaGes

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os sinais que controlam os movimentos do corpo so trasmitidos por neurnios que se projetam da substncia negra at o ncleo caudado

nclEo cauDaDo

vEntrculos latErais

DEnDritos

putmEn

axnio nEurnios nigroEstriatais substncia nEgra tErminal

nEurnio normal movimEnto normal

Dopamina

rEcEptorEs

nEurnio afEtaDo por parkinson problEmas motorEs

Pesquisadores da Universidade de So Paulo (USP) e da Universidade Federal de So Paulo (Unifesp) publicaram no dia 19 de abril passado um estudo na verso on-line da revista cientfica Stem Cell Reviews and Reports mostrando que, em ratos com Parkinson induzido, a presena de fibroblastos humanos anula os possveis efeitos positivos de um implante de clulas-tronco mesenquimais, obtidas do tecido do cordo umbilical de recm-nascidos. Quando administramos apenas as clulas-tronco, os ratos melhoraram dos sintomas da doena, diz a geneticista Mayana Zatz, uma das autoras do artigo, que coordena o Centro de Estudos do Genoma Humano da USP, um dos Centros de Pesquisa, Inovao e Difuso (Cepid) mantidos pela FAPESP, e o Instituto Nacional de Cincia e Tecnologia de Celulas-Tronco em Doenas Genticas Humanas. Mas, quando
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injetamos tambm os fibroblastos, os efeitos benficos desapareceram e houve at uma piora. possvel que muitos resultados ruins em trabalhos cientficos com terapias celulares se devam a esse tipo de contaminao. De acordo com os pesquisadores, o trabalho o primeiro a mostrar, no mesmo modelo animal, tanto os efeitos positivos do emprego de clulas-tronco mesenquimais contra o Parkinson como os malefcios da contaminao por fibroblastos. Alm de representar um avano no conhecimento bsico sobre os eventuais benefcios das terapias celulares num rgo to complexo e delicado como o crebro, o resultado do trabalho serve de alerta para os familiares de pessoas com Parkinson. No h, em nenhum pas do mundo, tratamento oficialmente aprovado base de clulas-tronco para combater essa ou outras doenas neurodegenerativas. preciso olhar com

inda sem cura, o Parkinson atualmente controlado com o auxlio de medicamentos, como a levodopa, que podem ser convertidos pelo crebro em dopamina. Em casos mais graves h ainda uma segunda alternativa: implantar eletrodos no crebro de pacientes que no respondem bem ao tratamento ou apresentam muitos efeitos colaterais em decorrncia do uso dos remdios. Ligado a um pequeno gerador implantado debaixo da pele, os eletrodos tentam melhorar a comunicao entre os neurnios. A delicada cirurgia para a colocao dos eletrodos conhecida como estimulao profunda do crebro (deep brain stimulation, ou simplesmente DBS). Com exceo dessas duas abordagens, todos os demais procedimentos contra a doena ainda se encontram no estgio de testes, sem aprovao dos rgos mdicos. Mensageira qumica produzida por menos de 0,3% das clulas nervosas, a dopamina pertence a uma classe de substncia denominada neurotransmissores, cuja funo bsica levar adiante a informao, na forma de sinais eltricos, de um neurnio a outro. Esse processo de comunicao entre neurnios conhecido como sinapse. A dopamina atua especificamente em centros cerebrais ligados s sensaes de prazer e dor, tendo papel comprovado nos mecanismos que geram dependncia e vcios e tambm no controle dos movimentos. Nos

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ilustrao DE DaniEl Das nEvEs sobrE matErial Do nih

circuito cerebral do Parkinson

cuidado as pesquisas com clulas-tronco e no fazer falsas promessas de cura, afirma outro autor do artigo, o neurocientista Esper Cavalheiro, da Unifesp, que encabea os trabalhos do Instituto Nacional de Neurocincia Translacional, um projeto conjunto da FAPESP e do Ministrio da Cincia e Tecnologia (MCT). Antes de propormos terapias, precisamos entender todo o mecanismo de diferenciao das clulas-tronco nos diversos tecidos do organismo e compreender como o crebro faz para conversar e direcionar a atuao dessas clulas. At hoje as nicas doenas que contam com um tratamento base de clulas-tronco so as do sangue, em especial os cnceres (leucemias). Contra esse tipo de problema, os mdicos lanam mo, h dcadas, do transplante de medula ssea, rica em clula-tronco hematopoticas, precursoras do sangue.

casos de Parkinson, a questo motora se mostra claramente afetada devido falta do neurotransmissor. muito fcil misturar os fibroblastos com as clulas-tronco mesenquimais e essa confuso pode ser a origem dos resultados inconclusivos e contraditrios de muitas tentativas de se tratar Parkinson com terapias celulares. Ambos os tipos de clulas tm a mesma origem. Derivam do mesnquima, o tecido conjuntivo primordial, presente no embrio, a partir do qual se formaro vrios tipos de clulas. Apesar da origem comum, os fibroblastos e as clulas-tronco mesenquimais apresentam propriedades distintas. Responsveis pela sntese do colgeno, os fibroblastos formam a base do tecido conjuntivo num indivduo adulto. So, portanto, clulas especializadas e diferenciadas. J as clulas-tronco mesenquimais ainda so bastante indiferenciadas e tm a capacidade de gerar muitos tipos de tecidos, como ossos, cartilagem, gordura, clulas de suporte para a formao do sangue e tambm tecido fibroso conectivo. quase impossvel distinguir esses dois tipos de clulas se simplesmente as examinamos num microscpio, comenta o bioqumico Oswaldo Keith Okamoto, do Centro de Estudos do Genoma Humano, coordenador do artigo publicado na Stem Cell Reviews and Reports. Elas crescem in vitro nas mesmas condies e s conseguimos distingui-las com o auxlio de marcadores e ensaios especficos. As clulas-tronco mesenquimais apresentam ainda uma importante particularidade. Tm propriedades imunossupressoras e podem reduzir a necessidade de tomar remdios para diminuir a rejeio a rgos e tecidos transplantados.

roDrigo a. brEssan/ unifEsp

imagem de crebro normal com mais neurnios que produzem dopamina ( esq.) e de outro afetado por Parkinson

Injeo de fIbroblastos fez ratos com ParkInson PIorarem dos sIntomas da doena e anulou benefcIos das clulas-tronco

o h evidncias slidas de que as clulas-tronco mesenquimais tenham a capacidade de gerar os neurnios que esto em falta ou so pouco funcionais nos pacientes com Parkinson. Elas parecem melhorar o ambiente em que ocorrem as leses associadas s doenas, diminuir a inflamao local e favorecer a preservao de mais clulas nervosas. Seus efeitos poderiam ser indiretos, ao diminuir a inflamao no crebro, diz Okamoto. Foi isso o que os pesquisadores paulistas verificaram no experimento com ratos. Eles injetaram as clulas-tronco

no crebro de um grupo de 10 roedores doentes com Parkinson induzido e, um ms depois, viram que eles no apresentavam sintomas da doena. Estavam to saudveis quanto os animais do grupo de controle que no tinham Parkinson. Esse resultado bate com concluses de outros estudos semelhantes realizados aqui e no exterior. A grande novidade ocorreu na segunda parte do experimento. Os cientistas inseriram uma cultura de fibroblastos num outro grupo de 10 ratos, tambm com Parkinson. O resultado foi desastroso. Um ms depois do procedimento os animais passaram a exibir mais problemas motores e o nmero de neurnios dopaminrgicos na substncia negra se reduziu metade. A uma terceira leva de roedores doentes foi administrada uma mistura, em partes iguais, dos dois tipos de clulas. Nesse grupo no se verificou melhora algu-

ma. como se os fibroblastos tivessem anulado os aparentes efeitos benficos das clulas-tronco. Eles parecem ser neurotxicos, afirma Mayana. Na ndia, um grupo de mdicos e cientistas do BGS-Global Hospital, de Bangalore, est testando o uso de clulas-tronco mesenquimais em sete pacientes humanos com Parkinson com idade entre 22 e 62 anos. Obtidas da medula ssea dos prprios doentes, as clulas foram injetadas nos crebros lesados de acordo com um protocolo local criado pelos indianos. Num artigo publicado em fevereiro do ano passado na revista Translational Research, os pesquisadores relataram diminuio dos sintomas da doena em trs dos sete pacientes e disseram que a abordagem parece segura. Os resultados, no entanto, ainda so preliminares e devem ser vistos com reservas. Talvez os transplantes de clulas-tronco mesenquimais no se tornem um tratamento definitivo para o Parkinson, mas complementar, como uma neuroproteo, pondera Okamoto. Esse tipo de estudo pode nos auxiliar a entender como minorar o ambiente degenerativo no crebro e, quem sabe, criar novos frmacos contra a doena.
Genes, ambiente e mistrio - Apesar de existirem casos de indivduos jovens com Parkinson, como o famoso ator canadense Michael J. Fox, que, aos 30 anos, recebeu a notcia do diagnstico da doena, essa desordem neurolgica aparece com mais frequncia em pessoas com mais de cinco ou seis dcadas de vida. Pacientes com menos de 50 anos so considerados precoces e representam uns 20% do total, diz o neurologista Luiz Augusto Franco de Andrade,
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do Instituto de Ensino e Pesquisa do Hospital Albert Einstein, de So Paulo. Mas j tratei de um menino de 13 anos com Parkinson. H evidncias crescentes de que fatores ambientais e genticos podem estar implicados no aparecimento da doena, ao menos em alguns casos. Um estudo de pesquisadores da Escola Mdica de Harvard, publicado em outubro do ano passado na revista Science Translational Medicine, mostrou que centenas de genes ligados ao funcionamento das mitocndrias, organelas que so a usina de energia do organismo, esto menos ativos em pacientes com Parkinson. At mesmo pessoas que se encontram num estgio inicial ou at pr-Parkinson parecem apresentar essas alteraes. Se essa conexo entre as mitocndrias e a doena se confirmar, drogas que atuem sobre esses genes podem se tornar teis no tratamento do problema.
Dobro de doentes em 2030 - Numa linha semelhante de investigao, um estudo divulgado em setembro de 2010 pelos National Institutes of Health (NIH), dos Estados Unidos, sugeriu que indivduos com uma determinada verso do gene GRIN2A poderiam se beneficiar mais do consumo de caf e ch. Em pessoas com esse perfil gentico a ingesto de bebidas com cafena atuaria como um fator de proteo ao Parkinson. A busca por substncias que auxiliam na manuteno dos neurnios uma estratgia adotada por muitos grupos de pesquisa. A administrao da protena GDNF, que atua nesse sentido, alvo de testes h anos para checar sua possvel ao contra a doena. A despeito de avanos localizados na compreenso de possveis mecanismos implicados em sua gnese, o Parkinson ainda mantm o status geral de doena neurodegenerativa de causa misteriosa e inexplicada. Ningum sabe ao certo por que os neurnios produtores de dopamina comeam a morrer ou param de funcionar direito num ponto da vida de certas pessoas. De concreto h um dado palpvel da realidade atual: o envelhecimento de uma populao um grande fator de risco para o Parkinson. Essa questo particularmente preocupante nas naes em desenvolvimento que esto mudando rapidamente a estrutura etria antes de se tornarem ricas.
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clulas-tronco mesenquimais ( esq.) e fibroblastos: difceis de distinguir

nmero de casos da doena cresce de forma maIs exPressIva nos Pases em desenvolvImento do que nas naes maIs rIcas

inda visto como uma nao de jovens, o Brasil alterar drasticamente seu perfil demogrfico nas prximas dcadas. Um relatrio do Banco Mundial divulgado no ms passado destaca que sua parcela de habitantes com 65 anos ou mais subir dos atuais 11% para 49% em 2050. Num perodo de 40 anos o nmero de idosos triplicar. Saltar de menos de 20 milhes para cerca de 65 milhes. A velocidade do envelhecimento populacional no Brasil ser significativamente maior do que ocorreu nas sociedades mais desenvolvidas no sculo passado, dizem os responsveis pelo relatrio Envelhecendo num Brasil bem mais velho. Na Frana, foi necessrio mais de um sculo para sua populao com idade igual ou superior a 65 anos aumentar de 7% para

14% do total. Nos ltimos anos a gerontologia moderna enfatizou mais os ganhos do que as perdas fsicas e mentais do processo de envelhecimento, afirma a antroploga Guita Grin Debert, da Universidade Estadual de Campinas (Unicamp), que estuda questes ligadas s mulheres e velhice. Temos especialistas em doenas, mas no muitos no processo de envelhecimento. Um estudo de reviso publicado em janeiro de 2007 na revista cientfica Neurology analisou dados divulgados por outros 62 trabalhos e concluiu que o nmero de casos de Parkinson em pessoas acima de 50 anos vai dobrar nas prximas duas dcadas em 15 pases do globo. O trabalho analisou estatsticas das naes mais populosas do mundo, entre as quais est o Brasil, e das cinco maiores da Europa. Em 2005 esse conjunto de pases tinha entre 4,1 milhes e 4,6 milhes de pacientes com Parkinson. Em 2030 ter de 8,7 milhes a 9,3 milhes de casos da doena. Nesse mesmo perodo o nmero de doentes no Brasil saltar de 160 mil para 340 mil. Segundo o artigo cientfico, as taxas estimadas de crescimento da incidncia do Parkinson em pases em desenvolvimento, como China, ndia e Brasil, que esto passando apenas agora por um processo de envelhecimento de sua populao, sero superiores a 100%. Em economias j desenvolvidas e compostas atualmente por um grande nmero de idosos, como Japo, Alemanha, Itlia e Reino Unido, a quantidade de doentes dever aumentar menos de 50%.

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marianE sEcco

DEsEnhos: instituto santiago ramn y cajal / WikimEDia

e forma grosseira, estima-se que 1% dos habitantes do planeta com mais de 65 anos devero ter Parkinson. Mas o ndice pode variar bastante de acordo com as caractersticas da populao analisada. Um estudo feito em 2006 na cidade de Bambu, em Minas Gerais, encontrou uma incidncia elevada do Parkinson, de mais de 7,2% em meio a um grupo de 1.186 indivduos com mais de 64 anos. O valor trs ou quatro vezes maior do que o encontrado em trabalhos semelhantes realizados na Europa, sia e Estados Unidos. Quase metade dos casos da doena em Bambu tinha sido induzida pelo uso descontrolado de remdios contra psicoses e vertigens. Atualmente acreditamos que a quantidade de casos da doena decorrentes do emprego sem controle de drogas diminuiu, afirma Francisco Cardoso, da Universidade Federal de Minas Gerais (UFMG), coordenador do estudo. O controle na venda de remdios melhorou no pas. As clulas-tronco no so a nica aposta da cincia para aprimorar as formas de tratamento do Parkinson. No h perspectivas de cura da doena a curto prazo. No entanto, os pesquisadores esperam ser possvel barrar a evoluo desse distrbio neurolgico ou ao menos retardar sua progresso por meio do desenvolvimento de novos remdios e cirurgias mais eficazes e, se possvel, menos invasivas. Hoje tentamos compensar os efeitos do Parkinson por meio da administrao de medicamentos orais, diz Cardoso. Mas a forma como repomos a dopamina no boa. Quando, por exemplo, o paciente toma a droga levodopa, um precursor da dopamina, seu crebro entra em contato com altas concentraes do neurotransmissor. Com o passar do tempo, a quantidade da substncia diminui. Dessa forma, o doente tratado experimenta ciclos de excesso e de falta do neurotransmissor, vivendo um movimento que lembra uma gangorra qumica, com altos e baixos de dopamina. Alguns remdios tentam regular o momento em que a dopamina, produzida de forma artificial devido ingesto de levodopa, se torna disponvel para ser usada pelo crebro do doente. Mas o controle desse processo ainda precisa ser refinado e a imitao dos

cIrurGIas menos InvasIvas Para melHorar a comunIcao entre neurnIos so outra aPosta contra o ParkInson

mecanismos fisiolgicos imperfeita. A situao se torna ainda mais complicada quando as drogas deixam de controlar os sintomas do Parkinson ou comeam a provocar efeitos colaterais. O uso prolongado de precursores da dopamina causa, s vezes, movimentos involuntrios e repetitivos, denominados tecnicamente de discinesias, que podem levar o paciente a morder os lbios, colocar a lngua para fora ou piscar rapidamente. Nesses casos a cirurgia de estimulao profunda do crebro, a DBS, pode ser indicada. H dois anos a equipe do neurocientista brasileiro Miguel Nicolelis, da Universidade Duke (EUA) e fundador do Instituto Internacional de Neurocincias de Natal Edmond e Lily Safra (IINN-ELS), sugeriu que a estimulao

eltrica talvez possa produzir bons resultados contra o Parkinson sem a necessidade de abrir o crnio dos doentes. Num artigo que foi capa da revista cientfica Science de 20 de maro de 2009, Nicolelis relatou um bem-sucedido experimento com ratos e camundongos que tinham Parkinson induzido: a instalao de pequenos eletrodos na superfcie da medula espinhal dos animais levou-os a recobrarem a capacidade normal de locomoo. Segundo o cientista, o procedimento de colocao dos eletrodos dura 20 minutos, pouco invasivo (abre-se apenas a pele do animal) e seguro. A nova abordagem, que agora est sendo testada em macacos, foi a primeira tentativa de tratamento do Parkinson a no atuar diretamente no crebro. difcil prever se novas terapias contra o Parkinson vo surgir de estudos como os feitos pelas equipes de Mayana Zatz, na USP, e Esper Cavalheiro, na Unifesp. Por ora, esses trabalhos, e tambm o de outros cientistas, ainda se constituem em linhas de pesquisa a serem trilhadas, e no em possibilidades imediatas de tratamento. Mas os mdicos que cuidam das pessoas com Parkinson no veem motivo para pessimismo. Os pacientes vivem cada vez mais tempo com a doena, dcadas inclusive, embora haja a questo delicada dos efeitos colaterais causados pelos remdios, e os eletrodos e baterias usados nas cirurgias DBS se tornam menores e mais eficientes. Ainda no sabemos como os neurnios conversam entre si, mas hoje conseguimos registrar a atividade de uma quantidade maior de clulas no crebro, afirma o neurocirurgio Manoel Jacobsen Teixeira, professor da USP e membro do Instituto de Ensino e Pesquisa do Hospital n Srio-Libans, de So Paulo.
Artigos cientficos 1. PEREIRA, M.C. et al. Contamination of mesenchymal stem-cells with fibroblasts accelerates neurodegeneration in an experimental model of parkinsons disease. stem cell reviews and reports. Publicado on-line no dia 19 de abril de 2011. 2. VENKATARAMANA, N. K. et al. Openlabeled study of unilateral autologous bonemarrow-derived mesenchymal stem cell transplantation in Parkinsons disease. Translational Research. v. 155 (2), p. 62-70. fev. 2010.
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