L. Maldonado, N.

Santos y Ma Cura

TEMA 16: Neoplasias: Bases moleculares. Biologa del crecimiento.

Diciembre de 2006. Revisado en Enero de 2008.

163  Bases moleculares del cncer:  La mayor parte de los cnceres derivan de una nica clula anormal.  El cncer resulta de mutaciones somticas.  Una nica mutacin somtica no es suciente como causa del cncer.  La progresin tumoral resulta de rondas sucesivas de mutaciones y de la seleccin natural celular.  Muchas, aunque no todas las neoplasias, tiene como causa un dao del ADN causado por un agente cancergeno.  Virus implicados en el desarrollo de los tumores:  Virus ADN:  Papovavirus: HPV 16, 18  Poliomavirus: SV-40, adenovirus, poxvirus, VHB  Herpesvirus: Virus de Epstein-Barr, Herpes simples tipo 2  Virus ARN: Retrovirus  Virus transformante de accin rpida: Virus del sarcoma de Rous (VSR)  Virus transformante de accin lenta (lentivirus): Virus de la leucemia aviar (ALV)  HTLV  Protooncogenes y oncogenes celulares: Deniciones.  Factores de crecimiento.  Receptores de factores de crecimiento.  Transductores.  Factores de transcripcin (Oncogenes nucleares).  Protooncogenes relacionados con la regulacin del ciclo celular.  Protooncogenes que regulan positiva o negativamente la apoptosis.  Mecanismos de activacin de los protooncogenes:  Mutaciones puntuales.  Mutaciones insercionales.  Delecciones.  Translocaciones.  Amplicaciones.  Sobreexpresin.  Genes supresores de tumores: Antioncogenes. Deniciones.  Gen supresor Rb  Gen supresor p53  Otros  Acortamiento de telmeros y desarrollo de cncer.  Mecanismos de transformacin neoplsica:  Teora gentica de la mutacin somtica.  Teora epigentica de la difereciacin aberrante.

BASES MOLECULARES
Un tumor es una masa normal de tejido de crecimiento prcticamente autnomo que supera el de los tejidos normales. Lo podemos diferenciar de las proliferaciones no neoplsicas porque el crecimiento de los tumores persiste cuando cesan los estmulos que dieron lugar al cambio, sin embargo, en las proliferaciones no neoplsicas al cesar los estmulos cesa el crecimiento. El cncer es una enfermedad gentica. En la mayor parte de los casos, los agentes ambientales externos provocan lesiones genticas en las clulas somticas que dan lugar a la aparicin del cncer. Pero en otras ocasiones las alteraciones genticas son hereditarias. Se puede denir cncer como un trastorno celular que se caracteriza por un acmulo progresivo de clulas, que es consecuencia de una proliferacin celular excesiva que no se compensa con una prdida celular adecuada, y las clulas acaban invadiendo y daando los tejidos del organismo. Las clulas anormales mueren ms rpido que las normales, aun as, la tasa de muerte celular no es suciente para compensar la formacin de clulas nuevas.

164 Las lesiones genticas pueden afectar a cuatro tipos de genes: protooncogenes promotores del crecimiento, genes supresores del tumor que inhiben su crecimiento, genes que regulan la apoptosis y genes que regulan la reparacin del DNA. Las clulas cancergenas tienen una serie de caractersticas especcas:  Origen clonal. Los tumores se desarrollan como una progenie clonal a partir de una nica clula progenitora daada genticamente. Aunque en algunos casos, hay cnceres que se pueden desarrollar a partir de mltiples clones malignos.  Inmortalidad. Las clulas normales tienen un nmero limitado de ciclos reproductivos que realizan para diferenciarse. Sin embargo, las clulas cancergenas pueden proliferar indenidamente dando lugar a una fuente inagotable de clulas precursoras. La inmortalidad de las clulas puede comprobarse observando los telmeros de los cromosomas, ya que en las clulas normales, ste se va acortando conforme la clula se va diferenciando; por el contrario, las clulas cancergenas mantienen constante la longitud de los telmeros y la clula permanece inmortal, debido a que la produccin de telomerasa se mantiene en estas clulas aunque se diferencien.  Inestabilidad gentica. Es consecuencia de defectos en la deteccin y reparacin del ADN que produce heterogeneidad de las clulas cancergenas.  Prdida de la inhibicin por contacto y del crecimiento dependiente de anclaje. Las clulas normales solo se dividen en un cultivo si estn ancladas a un sustrato slido al que se puedan adherir. Adems dejan de dividirse cuando forman una monocapa continua aunque el medio de cultivo cumpla todas las condiciones adecuadas para la divisin. Por el contrario, las clulas cancerigenas no necesitan un sustrato al que adherirse, pueden proliferar en un cultivo semislido, y continan dividindose aunque formen una monocapa.  Proliferacin progresivamente independiente de factores de crecimiento y nutrientes.  Metstasis. Es una caracterstica del cncer que no poseen ni los tejidos normales ni los tumores benignos. Consiste en la prdida o anomala de protenas celulares que se encargan de la adhesin a la matriz extracelular, anomalas en la interaccin entre clulas unin anormal a la membrana basal, etc. Por tanto, el cncer es el resultado de mutaciones somticas. La carcinognesis es un proceso que consta de varias etapas y recibe el nombre de progresin tumoral. La progresin a nivel gentico es la acumulacin de mutaciones sucesivas, ya que una nica mutacin somtica no es suciente para que se desarrolle un cncer. Para que aparezca un tumor es necesario que se pierdan los controles mltiples ejercidos por las tres categoras de genes: oncogenes, genes supresores del cncer y genes reguladores de la apoptosis. La acumulacin de estas mutaciones es una consecuencia de la inestabilidad gentica de las clulas anormales. La mayora de las neoplasias son consecuencia de un agente cancergeno que provoca alteraciones en el ADN. Algunos de estos agentes cancergenos son:  Tabaco : el riesgo de cncer de pulmn es de 10 a 20 veces mayor en fumadores que en no fumadores; el 90% de las muertes por cncer de pulmn se deben a este hbito. Adems tambin provoca canceres del tracto respiratorio superior, tracto genitourinario, tracto gastrointestinal y pncreas.  Radiaciones ionizantes : estas radiaciones tienen un gran potencial para inducir mutaciones. La radiaciones de partculas son ms cancergenas que las radiaciones electromagnticas (rayos X o gamma).  Radiacin no ionizante : la radiacin UV natural procedente del sol puede provocar cncer de piel. Puede aparecer una lesin del ADN por la formacin de dmeros de pirimidina.  Carcingenos qumicos : algunos de estos agentes son:

165  Agentes alquilantes: como la ciclofosfamida o el busulfn usados en tratamiento del cncer.  Hidrocarburos aromticos: presente en el humo de los cigarrillos.  Colorantes azo: colorante de anilina usado en la industria del caucho.  Carcingenos naturales  Nitrosaminas y amidas: pueden sintetizarse en el aparato gastrointestinal e inducen la aparicin del cncer gstrico. Adems de los agentes cancergenos mencionados, la aparicin de un cncer tambin puede estar determinada por virus DNA y RNA. Distintos virus hacen que se desarrolle cncer en animales; y algunos intervienen en el cncer humano, pero para que las clulas se hagan malignas se requiere adems mutaciones de genes celulares, deciencia o estimulacin del sistema inmune y otras infecciones virales. Los virus implicados en la formacin de tumores pueden ser: 1. Virus ADN: A) Papovavirus: HPV 16 / 18-31 / 33, 35, 39, 45 / 51, 52, 56, 58 / 59, 68, 73, 82 / 26, 53, 68 / B) Poliomavirus: SV-40, adenovirus, poxvirus, VHB C) Herpesvirus: Virus de Epstein-Barr, Herpes simples tipo 2 2. Virus ARN: retrovirus A) Virus transformante de accin rpida: Virus del sarcoma de Rous (VSR) B) Virus transformante de accin lenta (lentivirus): Virus de la leucemia aviar (ALV) C) HTLV

1.- Virus ADN:

Los oncogenes del ADN viral codican protenas que afectan a sustancias regidoras del crecimiento de la clula. Estos virus son:

A ) PAPOVAVIRUS: VIRUS DEL PAPILOMA HUMANO (HPV)

Son virus ADN de doble cadena circular, de los que se han identicado alrededor de 70 tipos genticamente distintos. Son muy especcos de especie y de tejido. Con tropismo selectivo para el epitelio escamoso de determinados rganos. Son capaces de inducir tumores epidermoides (verrugas y papilomas) y broepiteliomas. El genoma del papilomavirus humano tiene tres regiones diferenciadas:  a) regin larga de control (LCR), no contiene genes, contiene el punto de origen de replicacin del ADN y elementos de control de la transcripcin  b) regin E (precoz), tiene capacidad de transformacin y codica protenas que regula la transcripcin y la replicacin  c) regin L (tardo) no tiene capacidad de transformacin y codica protenas de la cpside del virus. Este virus se asocia a carcinomas epidermoides del aparato genital, sobre todo a los cnceres de cuello uterino (carcinoma de crvix). Se encuentran secuencias de su ADN en ms del 80% de este tipo de cnceres, en el 70% de los casos se encuentran dos tipos de este virus: HPV-16 y HPV-18. El HPV parece ser necesario, aunque no suciente, para el desarrollo de la mayor parte de los cnceres de crvix. Tambin esta relacionado con tumores de vias aerodigestivas. Y se ha aislado ADN del HPV en otros tumores como: el carcinoma de coln, ovario, prstata y en el melanoma; pero la presencia del virus en estos cnceres esta pendiente de estudio. En los ltimos aos, ha aumentado el nmero de casos de cncer anal en varones homosexuales o bisexuales y su etiologa parece ser viral. Los datos

166 obtenidos en los estudios acerca de estos cnceres indican que el principal factor etiolgico es el papilomavirus, aunque otros factores podran actuar como facilitadores (inmunodepresin, tabaquismo).

B) POLIOMAVIRUS:
El virus SV-40 esta asociado a tumores primarios de cerebro, cnceres seos, mesoteliomas malignos y linfomas no-Hodgkin en el hombre. Pruebas bioqumicas realizadas en diferentes estudios han demostrado la presencia de molculas del virus en la membrana de clulas cancerosas, secuencias del SV40 estaban integradas en las clulas cancerosas, y la oncoproteina viral (la que produce el efecto oncognico) se hallaba unida a los genes supresores de tumores p53 y pRb. Por tan es posible que el virus sea un posible factor etiolgico en la produccin de tumores. Causan transformacin de clulas en cultivo, pero todava no se ha demostrado que contribuyan a causar el cncer. Es un virus ADN de doble cadena circular. El ADN viral puede encontrarse libre (el que se detecta en las infecciones agudas) o integrado en el genoma del husped (el que se detecta en las hepatitis crnicas o en el hepatocarcinoma). Existen numerosos estudios epidemiolgicos que muestran que las personas infectadas con virus de hepatitis B tienen un riego importante de padecer un hepatocarcinoma. Hay una gran evidencia epidemiolgica en la relacin del VHB y el hepatocarcinoma, sin embargo, no se conoce con certeza el papel que el virus desempea en la patogenia de este tumor, el proceso probablemente es multifactorial. Se sabe que este virus produce infeccin en los hepatocitos pudiendo llegar a ocasionar una cirrosis, o desarrollar una neoplasia. Van a actuar sobre protenas como: LMP 1 y 2, EBNA 1,2 y 3.

* SV-40

* ADENOVIRUS Y VIRUS DE LA POLIO * VHB (VIRUS DE LA HEPATITIS B)

C) HERPES VIRUS:
Son virus ADN bicatenarios. El virus de Epstein Barr (VEB), es el primer virus identicado como carcingeno para el ser humano. Todas aquellas clulas que tienen y expresan el genoma del VEB en un estado latente expresan un conjunto de antgenos virales que reciben el nombren de EBNA 2 junto con la protena latente de membrana denominada LMP 1, parecen ser las responsables de la inmortalizacin de los linfocitos infectados por el VEB, que se considera el paso inicial de la carcinognsis por este virus. El VEB se asocia a cuatro tipos de cncer humano: a) Linfoma de Burkitt : es un tumor de linfocitos B que se debe a una translocacin. En zonas de frica, este linfoma es endmico; las biopsias de linfoma de Burkitt africano siempre contienen el genoma del VEB, sin embargo, es poco probable que el VEB pueda por s solo desarrollar el linfoma. En personas normales la proliferacin de clulas B inducida por el VEB es autolimitada y controlada. Por tanto, el VEB necesita un cofactor, que puede ser la repetida estimulacin del sistema inmunolgico, que se produce por la infeccin paldica. Secuencia de sucesos para la aparicin que llevan a la aparicin de un linfoma de Burkitt: 1o inmortalizacin de los linfocitos B por el VEB. 2o proliferacin de clulas estimuladas (facilitada por el paludismo en zonas endmicas). 3o translocacin recproca entre un locus del gen de las inmunoglobulinas y el gen c-myc del cromosoma 8. b) Carcinoma nasofarngeo : este tipo de cncer es endmico en el sur de China y otras zonas. En todos los casos se ha detectado el genoma del VEB en sus clulas. Al igual que en el linfoma de Burkitt el virus debe actuar junto a

* VIRUS DE EPSTEIN BARR

167 otros factores. El genoma viral es activo y codica las protenas de los linfocitos infectados de forma latente. c) Linfoma de clulas B en pacientes inmunodeprimidos, sobre todo en aquellos que padezca el sndrome de inmunodeciencia adquirida (SIDA): EL VIRUS DE Epstein Barr tambin se ha asociado a personas inmunocompremetidas por SIDA, inmunodeciencias iatrognicas o hereditarias. d) Algunas formas de enfermedad de Hodgkin : existen datos serolgicos y epidemiolgicos que muestran una posible relacin entre esta enfermedad y el VEB. En biopsias de pacientes con esta enfermedad se ha detectado la presencia de ADN, ARN y protenas virales. Por otra parte, dentro de este grupo de los herpes virus, encontramos otro tipo de virus, el herpes simple tipo 2 o herpes genital, que es el responsable de algunos cnceres del cuello uterino, aunque la mayor parte de los casos se debe al virus del papiloma humano.

* HERPES SIMPLE TIPO 2

2.- Virus ARN (retrovirus)

La oncologa viral se ha centrado ms en el estudio de estos retrovirus. Se trata de virus que tienen un cido nucleico ARN monocatenario y durante la infeccin sintetizan ADN por medio de la transcriptasa inversa. La relacin de los retrovirus y el cncer se estableci gracias al descubrimiento del virus del sarcoma de Rous y el virus de la leucemia felina.

A) VIRUS DE SARCOMA DE ROUS (virus transformante de accin rpida)

Este virus puede ser portador de un oncogn que se incorpora y expresa en la clula husped por un mecanismo de transduccin dando lugar a un rpido desarrollo de una neoplasia. En la carcinognesis humana no es muy importante este mecanismo, y en animales provoca la aparicin de tumores con un corto periodo de latencia tras la infeccin.

B) VIRUS DE LEUCEMIA AVIAR (virus transformante de accin lenta)

Este virus carece de oncogenes, sin embargo, tambin puede transformar una clula normal en maligna. Este virus parece afectar casi exclusivamente a especies animales especcas. La transformacin se debe a que en el proceso de integracin vrica algn proto-oncogn celular puede quedar en proximidad al genoma del virus y verse as afectado por las seales reguladoras del virus. El mecanismo molecular de activacin se puede producir al quedar el protooncogn bajo control de los potentes promotores virales o a travs de la formacin de protenas hbridas con funcionalidad alterada. En este caso es una nica clula la que se transforma en un principio, por lo que el desarrollo del tumor es ms lento, asemejndose al proceso de transformacin celular inducida por un agente carcingeno.

C) VIRUS HTLV
Este virus tiene una secuencia denominada X. Entre los genes que forman la secuencia X estn el gen TAT (transactivador de la transcripcin) y otros genes que codican factores de regulacin. El gen TAT, por una parte acta incrementando la actividad de transcripcin del promotor viral, y por otra parte activa la transcripcin de genes no virales como el gen de la interleucina 2, y de su receptor, que podran desempear algn papel en la carcinognesis. Tanto el HTLV I y el HTLV II estn relacionados con la leucemis y el linfoma de clulas T.

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PROTOONCOGENES Y ONCOGENES CELULARES. MECANISMOS DE ACTIVACIN DE LOS PROTOONCOGENES.

PROTOONCOGENES Y ONCOGENES CELULARES.
La gnesis y el desarrollo tumoral, son el resultado de numerosas alteraciones moleculares que se producen en el ADN y donde estn implicados los oncogenes y los genes supresores tumorales. Los oncogenes son genes dominantes que codican para protenas (oncoprotenas) que regulan el crecimiento y la diferenciacin celular pero que a travs de variaciones en su secuencia de nucletidos por mutacin, amplicacin o reordenamiento cromosmico adquieren capacidades tumorignicas. La transformacin de uno de los dos alelos de la clulas sirve para provocar una transformacin neoplsica. Los genes supresores tumorales (antioncogenes) son genes "recesivos" que sirven para regular la proliferacin celular. Es necesario la alteracin en ambos alelos. Se ha incluido tambin a los genes mutadores, responsables del proceso de replicacin de ADN y cuya disfuncin altera mediante mutaciones a los oncogenes y a los genes supresores de tumores. Mientras que los genes que no han sufrido transformacin y realizan una actividad siolgica normal se les denomina protooncogenes. Existen dos procesos de activacin de los protooncogenes, por la accin de virus oncognicos (oncogenes virales) o en tumores no producidos por virus (oncogenes celulares). Los oncogenes se dividen en grupos en funcin de las propiedades bioqumicas que presentan sus productos proticos: 1. 2. 3. 4. 5. 6. Factores de crecimiento. Receptores. Transductores de seales. Activadores de la transcripcin. Relacionados con la regulacin del ciclo celular. Reguladores de la apoptosis.

1.- FACTORES DE CRECIMIENTO

Los factores de crecimiento son polipptidos secretados por las clulas, cuya funcin es unirse a un receptor especco y estimular el crecimiento celular. La activacin de los protooncogenes supone una estimulacin autocrina (sobre la propia clula) o paracrina (sobre clulas vecinas) de la produccin de factores de crecimiento. Algunos ejemplos: el oncogn sis codica para la cadena beta del factor de crecimiento plaquetario (PDGF) liberado por las plaquetas durante la coagulacin; el oncogn Int-2 es un factor de crecimiento broblstico activado en carcinomas mamarios de ratn.

2.- RECEPTORES DE LOS FACTORES DE CRECIMIENTO

Son protenas de la membrana citoplasmtica que presentan tres reas o dominios:  Dominio extracelular.  Domino transmembrana.  Dominio intracelular, tambin conocida como zona tirosin kinasa. Transmiten informacin unidireccional desde la supercie de la clula, mediante la unin de un factor de crecimiento especco, hasta la zona citoplasmtica, donde la cascada de reacciones bioqumicas iniciada en la zona tirosin quinasa, termina en el ncleo celular estimulando la sntesis de material gentico. Las alteraciones en estos receptores inducen a un crecimiento anormal.

169 Los mecanismos de activacin oncognica de los receptores de crecimiento son por ejemplo, la deleccin del dominio extracelular enerb B (virus de la eritroblastosis aviaria).

3.- TRANSDUCTORES DE SEALES

La transduccin de seales consiste en una cascada bioqumica que se inicia en el interior de la membrana citoplasmtica y termina en el ncleo de la clula, estimulando la sntesis de ADN. Destaca los oncogenes de la familia ras (H-ras, K-ras, N-ras) que codican protenas de un peso molecular de 21 kDa (genricamente p21) y son protenas relacionadas con el GTP. Estos genes se activan por mutaciones puntuales especcas, localizadas en los codones 12, 13, 61 y son los ms frecuentes en los tumores humanos. La unin de ras-GTP es la forma activa de la protena, mientras que la unin ras-GDP, es la forma inactiva. Un estmulo externo es capaz de activar la fosforilacin de ras-GDP a ras-GTP, que acta activando una cascada bioqumica intracelular en la que estn implicados numerosos protooncogenes, incrementado la sntesis de ADN. Ras mutado (oncognico) no reconoce la protena GAPs, responsable de la inactivacin de ras, por lo que se produce un estmulo continuo de ras.

4.- ACTIVADORES DE LA TRANSCRIPCIN

Tambin denominados oncogenes nucleares. Se caracterizan por codicar protenas que se unen al ADN activando la transcripcin de otros genes, que estimularn la replicacin del ADN de forma directa o indirecta. Dentro de este grupo de genes se incluyen los genes supresores de tumores, la familia de genes myc (participan en tumores de origen diverso), myb, fos, rel y ski.

5.- RELACIONADOS CON LA REGULACIN DEL CICLO CELULAR

La proliferacin celular es un proceso regulado por una enzimas denominadas quinasas dependientes de ciclinas (cyclin-dependent kinase o CDK) capaces de fosforilar otras protenas mediante la transferencia de grupos fosfatos a aminocidos especcos. La actividad de las CDK depende de la formacin de complejos con otras protenas especcas del ciclo, como las ciclinas. La activacin de las CDK por su unin a las ciclinas genera una cascada de seales por fosforilacin/ desfosforilacin que permite la transcripcin y traduccin de aquellos genes involucrados en la progresin del ciclo celular. Cualquier cambio en estas enzimas estimula la proliferacin celular desordenada. En este proceso tambin intervienen genes supresores tumorales (p16) que inhibe la actividad de las quinasas.

6.- REGULADORES DE LA APOPTOSIS

La ejecucin de una muerte programada est asociada a una serie de caractersticas morfolgicas y cambios bioqumicos. El proceso de apoptosis es de central importancia para el desarrollo y mantenimiento de la vida. La apoptosis utiliza mensajeros primarios o factores como el ligando Fas (Apo1-L CD95-L), TNF-alfa, IL-1 INF-gamma que son reconocidos por receptores especcos de membrana. Una vez activados, los receptores transeren la informacin al interior celular mediante un complejo sistema de interacciones protena-protena, que termina en la activacin de una cascada de proteasas denominadas caspasas (sobre todo las caspasas-8 y -2) provocando la desconexin de los sistemas de reparacin del ADN y la activacin de la nucleasa encargada de la degradacin del ADN. Este proceso depende de la presencia de los denom-

170 inados ?death domain? (DD). Tambin intervienen un gen supresor tumoral (p53).

MECANISMOS DE ACTIVACIN DE LOS PROTOONCOGENES

Se trata de la trasformacin de una clula benigna, los proto-oncogenes, en tumoral, los oncogenes, por cambios genticos en la secuencia de nucletidos de los genes que regulan el crecimiento y la diferenciacin.

MUTACIONES
La mutacin supone un cambio hereditario en la secuencia de nucletidos de un organismo y puede o no tener consecuencias en el fenotipo (manifestacin externa y visual de las caractersticas de un organismo). El proceso por el cual se adquiere una mutacin se conoce como mutagnesis. 1. Mutaciones puntuales Es el tipo de mutacin ms frecuente. Supone el cambio de una base nitrogenada por otra, o bien la insercin o la delecin de una base nitrogenada. Puede ser:  Transiciones: cuando hay un cambio de una base prica por otra prica, o pirimidnica por otra pirimidnica.  Transversiones: cambio de una base prica por una pirimidnica o viceversa. Los efectos de una mutacin puntual sobre el fenotipo celular pueden ser muy diversas. La ms conocida es la de lafamilia ras observada en numerosos tipos tumorales. 2. Inserciones ( Frameshift) o delecciones : inclusin o prdida de una base, con la consecuencia de prdida de lectura del cdigo gentico. 3. Amplicacin gnica : incremento en el nmero de copias de un gen dentro del genoma. Implica alteraciones cromosmicas denominadas double-minute-chromosome (Dms), que son estructuras microcromosmicas sin centrmeros que representan amplias regiones del ADN genmico que contienes cientos de copias de un gen determinado. La amplicacin conduce a un incremento en la expresin del gen y generalmente se relaciona con un incremento de la proliferacin celular. 4. Translocaciones : implica roturas cromosmicas y su posterior unin en cromosomas distintos. Este mecanismo produce protenas quimricas que pueden activar la sntesis de productos anormales, como ocurre en la leucemias mieloides crnicas donde existe una fusin entre los cromosomas 9-22 resultado de la unin de los genes c-abl (Cromosoma Philadelphia). Otro ejemplo caracterstico de la activacin transcripcional es el que se produce en el linfoma de Burkitt con el gen c-myc. 5. Sobreexpresin: existe un aumento de la transcripcin de un gen y de produccin de protenas.

GENES SUPRESORES DE TUMORES

Como ya hemos dicho en el apartado anterior, los proto-oncogenes promueven el crecimiento celular, pues bien, los genes supresores u oncosupresores tienen una funcin antagnica a sta: inhibir el crecimiento y divisin celular. Una alteracin monoallica les vale para convertirse en oncogenes y mostras su fenotipo trasnformante, sin embargo, los genes supresores deben perder o variar su capacidad funcional y esto generalmente ocurre mediante la mutacin en un alelo, asociada a la prdida del alelo restante. Su funcin es prevenir o suprimir la tumorignesis, parando la proliferacin celular si hay alguna mutacin, ayudando a la reparacin del DNA o conduciendo a la clula a la muerte celular programada o apoptosis. Por tanto, cuando

171 estos genes quedan inactivados, la celula prolifera a su antojo sin detenerse ante mutaciones.  El gen Rb fue descubierto como el primer gen supresor en el estudio sobre el retinoblastomas de Knudson. Hay dos tipos de retinoblastoma, uno el familiar, en el que se trasnmite un alelo Rb mutado de forma hereditaria y el otro alelo muta en una edad muy temprana (ya que las clulas de la retina proliferan aproximadamente hasta los siete aos, por eso aparece en nios). Esto es igual en la segunda forma, la espordica del retinoblastoma, pero sta es mucho menos frecuente ya que debe darse una doble deleccin en el brazo largo de ambos cromosomas 13. Por tanto, con sta hiptesis se lleg al concepto de que un gen y un producto, que en condiciones normales impiden el crecimiento tumoral, debian perderse por mutacin para poder producir el cncer. El gen Rb se expresa en casi todas las clulas del organismo y adems de en el retinoblastoma, se han detectado mutaciones del gen en osteosarcomas, carcinomas de la prstata, vejiga, mama, microcticos de pulmn, cervix y en algunos tipos de leucemia. Aunque hay que destacar que con diferente frecuencia (y no como en el retinoblastoma) sino que combinados con mutaciones en otros genes. Este gen codica una protena que controla el ciclo celular, en concreto el punto R (paso de G1 a fase S). Acta como un interruptor. Fosforilada esta inactiva, es decir, permite el paso a fase S, pero al desfosforilarse se activa y retienen a la clula en el punto R. Por tanto al sufrir una mutacin en este gen la proteina queda inactivada permanentemente y se sufre una proliferacin celular descontrolada.  El gen p53 se localiza en el brazo corto del cromosoma 17. Codica una fosfoprotena nuclear que acta como inhibidor negativo de la proliferacin celular. La forma normal de la p53 es escasa en todas las clulas normales de mamferos. Tiene una vida media corta pero al entrar en contacto con determinadas protenas virales o celulares puede estabilizarse y alargar su vida media (p.e.con la protena E6 del HPV16). La p53 desempea diferentes funciones, bien por s misma o ejerciendo control o inuencia sobre otros genes : 1. Inhibicin del ciclo celular cuando se produce un dao en el DNA, concretamente se detiene en G1. 2. Induccin a la reperacin del DNA, por estimulacin de la escinucleasa. 3. Promocin de la muerte celular programada o apoptosis cuando el dao es irreparable (sin la p53 no se produce apoptosis como respuesta a radiacin y quimioterapia) 4. Represin de algunos oncogenes que inhiben la apoptosis. 5. Modula la aparicin de metstasis, mediante la inhibicin de la angiognesis. En los sarcomas sufre deleccin por lo que pierde su funcin. En los carcinomas de cervix causados por HPV la protena sufre proteolsis, por lo que pierde la funcin pero no por mutacin. Con esto podemos hacernos a la idea de que puede mutar o estar alterada de mltiples maneras, por ejemplo, dependiendo el tejido donde asiente: en los carcinomas lo ms normal es mutacin por sustitucin, pero en los sarcomas son ms frecuentes las mutaciones sin sentido. Dependiendo del tipo de tumor tambin vara la mutacin: en carcinomas de colon es muy comn la transicin de C a T (cambio de base prica por prica o pirimidnica por pirimidnica) y en cncer de clulas pequeas de pulmn las transversiones de G a T (prica por pirimidnica o biceversa). Lo que es normalmente comn a todas las mutaciones es el lugar donde se producen: dominio central de unin al genoma y dentro de ste, en posiciones muy concretas. Este gen est ligado a neoplsias hematolgicas y de los ganglios linfticos, entre ellas la enfermedad de Hodgkin, el linfoma de las clulas T y ciertos

172 tipos de leucemias. El patrn mutado del gen se corresponde con una mayor agresividad, metstasis y menor supervivencia. El Sindrome de Li-Fraumeni es una rara predisposicin familiar al cancer, que se trasmite de forma autosmica dominante, en estas familias un alelo del gen p53 de la linea germinal est mutado por lo que se acumulan sucesivas mutaciones al ser ms fcil que el otro mute, y por ello son propensos a diversos canceres como los de mama, partes blandas, cerebrales, osteosarcomas, leucemias, y carcinomas suprarrenocorticoides. La protena p53 tiene una peculiaridad que la diferendia del resto de protenas codicadas por los dems genes supresores: con que est mutado un alelo vale para que tenga una mala funcin, ya que esta protena forma oligmeros y con que cambie la estructura de una de sus partes, ya vara la funcin.  Estudios sobre la Ataxia Telangiectasia indican que el gen ATM acta jerrquicamente por encima de la p53, esencialmente en el control del ciclo celular, sensibilidad a la radiacin y estabilidad genetica, al inducir la produccin de la proteina p53 para estas funciones. Si el gen ATM falla se acumulan las mutaciones ya que p53 no detiene el ciclo celular. Se cree que el gen ATM tambin est implicado en carcinomas de mama, ovario, colon y cervix. A si mismo, la prdida de funcin parece estar relacionada con un aumento de resistencia a la quimioterapia. * El tumor de Wilms se trata de un cncer peditrico que puede estar asociado a malformaciones congenitas del tracto urogenital. El gen responsable es el WT, ms concretamente tres loci de este gen: 1. WT-1 en el brazo corto del cromosoma 11 presenta delecciones en familias con aniridia, anomalias genitourinarias, retraso mental y tumor de Wilms. 2. WT-2 tambin en el brazo corto, estos pacientes desarrollan un tumor de Wilms con pocos de los sntomas asociados y padecen el Sindrome de Becwith-Wiedeman. 3. En algunos casos raros de tumor de Wilms hereditario se ve implicado un tercer locus gentico.  Los BRCA1 y BRCA2 son genes de susceptibilidad a cancer de mama y ovario, el primero se localiza en el brazo largo del cromosoma 17 y juega un papel importante en el cancer de mama familiar pero no en el espordico. Las mutaciones se producen en toda la regin codicante y esto ocasiona protenas truncadas o prdidas de un ARNm. El segundo se encuentra en el brazo largo del cromosoma 13, pero este presenta menor tendencia a la tumorignisis de ovario.  En la enfermedad de Von Hippel-Lindau el gen afectado es el VHL localizado en el brazo largo del cromosoma 3, son frecuentes los hemangioblastomas del SNC y retina, tumores de saco endolinftico, carcinomas renales y quistes renales y pancreticos.  Cuando los genes MLH1 y MSH2 (cromosomas 2 y 3) sufren una mutacin se produce la expresin aberrante de sus protenas que se asocia con el cancer colorrectal hereditario no polipoide o Sindrome de Linch. Se trata de un trastono autosmico dominante que se da en la lnea germinal de estos genes de reparacin del DNA, relacionado con la inestabilidad de microsatelites (marcador fenotpico de reparacin del DNA defectuoso).  El gen PTEN est mutado en numerosos tumores muy frecuentes, como el de endometrio, cerebro, mama o prstata. Codica una proteina con un dominio similar al de la Tyrosin-fosfatasa, ejerciendo una regulacin negativa AKT/PKB. Se localiza en el brazo largo del cromosoma 15.

Acortamiento de telmeros y desarrollo de cncer

Los telmeros (del griego tlos = nal, y mros = componente) son complejos de protenas y cidos nucleicos que se encuentran en los extremos de los cromosomas. En vertebrados, el ADN telomrico est compuesto por la secuencia TTAGGG, la cual se repite miles de veces y es sintetizada por la enzima telomerasa.

173 Los telmeros, a parte de permitir la replicacin del genoma sin perder secuencias codicantes presentes al nal de los cromosomas, intervienen en el control de la duracin de la vida celular, funcionando como una especie de reloj control que lleva la cuenta del nmero de divisiones celulares. Esta ltima funcin cobra importancia en la mayora de los tejidos somticos, que no expresan telomerasa. En ausencia de esta enzima, los telmeros se acortan entre 80-300 pares de bases por cada duplicacin del genoma, ya que la DNA polimerasa no es capaz de replicar los extremos. Se requiere un mnimo de longitud telomrica para mantener una buena funcin, al alcanzar un tamao crtico comienza a tener dicultades para realizarla, generando asociaciones telomricas (tas), inestabilidad cromosmica y todo tipo de mutaciones, sto aumenta la probabilidad de que se produzcan neoplasias. Llegados a este punto la clula detecta que su genoma est daado y por mecanismos de control cesa la divisin y es conducida a la apoptosis o muerte celular programada. Muy raramente una clula escapa a este proceso y se hace inmortal, dividiendose indenidamente. sto es debido a la acumulacin de, al menos, dos mutaciones en los genes supresores Rb y p53, que en condiciones normales limitan la proliferacin celular, pero tambin a la reactivacin de la telomerasa que contribuye a la perpetuacin de estos clones malignos.

Mecanismos de transformacin neoplsica

Cuando comienza a formarse una neoplasia, la mayor parte de sus clulas estarn proliferando, es decir, que su crecimiento ser casi exponencial. A medida que aumenta su tamao se va encontrando trabas, como problemas de vascularizacin o de aporte de nutrientes, que condicionas su crecimiento. En este momento es cuando algunas clulas adquieren capacidad metastatizante, de sta forma migran a otras zonas y proliferan de nuevo. En este punto tambin es importante comentar el concepto de heterogeneidad tumoral, ya que los tumores monoclonares en su origen llegan a estar formados por mltiples subpoblaciones celulares que dieren en sus propiedades genticas, bioqumicas, inmunolgicas y biolgicas (como el cariotipo, la antigenidad, la inmunogenidad, la capacidad de proliferacin, la angiognesis, la composicin de la membrana celular, la expresin de receptores, la capacidad para invadir y metastatizar, y la sensibilidada genes terapeticos). Las clulas y sus mecanismos son muy complejos, por tanto al cambiar algo, de cualquier manera, aunque no sepamos cmo puede producirse una neoplasia. Actualmente hay dos teoras que explican desde diferentes puntos de vista el proceso de la carcinognesis:

* Teora gentica de la mutacin somtica

Segn esta teora las alteraciones adquiridas en el genoma de las clulas somticas da origen al cancer, ms tarde se revis y se lleg a la conclusin de que la lesin en el ADN sera fundamentalmente a nivel mitocondrial. La inestabilidad del genoma mitocondrial se debe a la falta de equilibrio entre la reparacin mitocondrial y el efecto lesivo de los radicales de oxgeno. Por tanto al perder capacidad de regeneracin mitocondrial tambin sufrir una disminucion de su capacidad para sintetizar ATP, con la consiguiente degradacin siolgica y muerte nal. Esto no ocurre en las clulas que se relican rpidamente, utilizan oxgeno pero a niveles mucho ms bajos que las clulas bien diferenciadas, por eso en las segundas la concentracin de radicales de oxgeno es mucho mayor.

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* Teora epigentica de la diferenciacin aberrante

Esta teora postula que una alteracin metablica induce a la expresin de potencialidades neoplsicas, normalmente reprimidas en el genoma. Los genes no estn necesariamente mutados sino que promueven la seleccin de una poblacin clonal en la que predomina la opcin proliferativa en lugar de la opcin de diferenciacin. Como alteraciones metablicas destacamos la metilacin de la citosina o a acetilacin de las histonas.

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