Introdução

Para a cultura de microrganismos é necessário existirem meios de cultura apropriados que

simulem ou até melhorem as condições naturais do ambiente em que se desenvolvem.

Um meio de cultura é um substrato nutritivo capaz de permitir a nutrição e o

crescimento dos microrganismos (bactérias, fungos, algas, parasitas) fora do seu ambiente
biológico natural, ou seja, é uma preparação de nutrientes utilizada para o crescimento de
microrganismos em laboratório.

A sobrevivência e o crescimento dos microrganismos depende de um adequado

suprimento de nutrientes e de um ambiente físico favorável. No entanto, há uma grande
diversidade de necessidades nutricionais e ambientais entre os microrganismos e por isso é que
só compreendendo as suas necessidades que se consegue ter sucesso na cultura de
microrganismos no laboratório.

Composição dos meios de cultura

Os meios de cultura devem conter os nutrientes em quantidades e proporções correctas

para a manutenção e multiplicação dos microrganismos. A maior parte dos microrganismos
utiliza substâncias de baixo peso molecular que são, frequentemente, derivadas da degradação
enzimática de nutrientes complexos. Por isso, os nutrientes indispensáveis ao organismo em
causa devem estar sob forma assimilável.

As necessidades nutricionais dos microrganismos são satisfeitas no laboratório através

da variedade de meios de cultura existentes. Os microrganismos têm necessidades nutricionais
variáveis de acordo com a espécie, no entanto, há determinadas substâncias cuja necessidade é
comum a todos.

Objetivo

Desenvolver habilidades no preparo dos meios de cultura, esterilização dos meios em

autoclave e placas de Petri em estufa.

Materiais e métodos

Pipeta automática
• Placa de Petri
• béquer
• Espátula
• Autoclave
• Estufa
• Ágar
• Água deionizada
Papel alumínio
Luvas térmicas
Bico de bulsen

Placas de Petri: Embalar a placa de Petri com papel alumínio. Colocar os

pacotes na estufa, para esterelização;
• Ágar: Os meios comerciais devem ser hidratados em pequena quantidade de água até que
todo o meio fique úmido e só depois deve-se acrescentar o restante da água. ƒ Os meios
preparados não comerciais, devem ser pesados separadamente em papel alumínio e
adicionados em um único frasco, hidratar em pequena quantidade de água até que todo o
meio fique úmido e só depois deve-se acrescentar o restante da água . Dissolver os meios
líquidos e soluções com agitação e leve aquecimento (não abrir fervura). „Aquecer os meios
contendo Ágar até ferver com constante agitação. A parede da vidraria deve estar lisa sem
pontos de Ágar. Caso observe pontos, Retornar ao fogo para finalizar o procedimento. „
Sempre que for necessário o aquecimento dos meios, usar vidro termo resistente tipo Pyrex e
aquecer sobre a tela de amianto ou similar e tripé, no bico de Bunsen ou em placa aquecedora.
• Ponteiras: Esterelizar as ponteiras na autoclave.
• Na autoclave: Colocar os meios de cultura e ponteiras na autoclave, à 15 bar,
com o nível de água correto. Esperar chegar a uma temperatura de 121ºC por 15 min. Os
meios devem ser autoclavados com as tampas semi-abertas, para que a esterilização seja por
igual em todo o conteúdo dos tubos - tampas fechadas não permitem a entrada do vapor.

Resultados e Discussões

Os meios de cultura foram preparados e esterelizados corretamente, sendo adequados

para o desenvolvimento dos microrganismos.

Conclusão
Concluiu-se que foi de extrema importância aprender como fazer e esterilizar meios de
cultura e utensílios em autoclave e também como esterilizar vidrarias em estufa.

Referência
Descrição dos Meios de Cultura Empregados nos Exames Microbiológicos. Agencia Nacional de
vigilância sanitária.
Murray, Patrick R. - Rosenthal, Ken S. Microbiologia Médica . Elsevier