Introdução

O Teste de Sensibilidade aos Antimicrobianos (TSA ou Antibiograma) fornece o padrão

de susceptibilidade de uma espécie bacteriana frente a diferentes classes de
antibacterianos. A escolha dos antibacterianos está diretamente associada com o tipo de
organismo isolado. A técnica de disco difusão em ágar (Kirby-Bauer) fornece um
resultado qualitativo do potencial antibacteriano por meio da ausência, presença ou
presença reduzida de um halo de inibição de crescimento.

Objetivo

Objetivo de saber executar e interpretar o exame sensibilidade por disco difusão.

Materiais e métodos

Epi’s

Cepas de Escheria Coli

Bico de bulsen

Placa de Petri com Meio de cultura Ágar Muller-Hinton

Alça bacteriológica

Auto clave

Estufa

tubo contendo 5ml de solução salina estéril,

ajustando a turvação para 0,5 da escala Mac Farland

Swab

discos de antibióticos

pinça estéril

Com uma alça bacteriológica toca-se a superfície de 4 a 5 colônias bacterianas de

aspecto similar, Após a realização desse processo, transferir esse inóculo para um tubo
contendo 5ml de solução salina estéril, ajustando a turvação para 0,5 da escala Mac Farland,
que corresponde a uma quantidade de 108UFC/ml. Submergir a essa suspensão um swab,
antes de retirá-lo, eliminar todo o excesso de líquido, pressionando-o contra a parede
interna do tubo. Em seguida, realize um semeio do tipo distensão na placa de ágar Muller-
Hinton, de modo a cobrir todo o espaço da superfície do ágar com a suspensão bacteriana.
Passado este procedimento, recolocar a tampa da placa e deixar em repouso por 5 minutos
para a secagem do ágar, antes da colocação dos discos de antibióticos. A escolha do
antibacteriano deverá obedecer às recomendações do Clinical and Laboratory Standards
Institute (CLSI).
Os discos de antibióticos devem ser colocados de forma manual sobre a superfície do
meio, com auxílio de pinça estéril, respeitando um distanciamento de 20mm um do outro.
Feito isso, os discos devem ser pressionados à superfície do meio com a ponta da pinça.
Após esta etapa, as placas devem ser incubadas em estufa bacteriológica em temperatura de
35°C por um período de 18h. Passado o período de incubação, faz-se a medição do diâmetro
da zona de inibição do crescimento bacteriano ao redor de cada disco de antibiótico, caso
esta seja formada.

Resultado e Discussões

Após o resultado da urocultura, ter sido Escherichia coli., foi realizado o

antibiograma, segue abaixo o diâmetro dos alos que se formaram:

Amoxicilina+ácido clavulâmico: 20 mm
Ampicilina: 18 mm
Cefalexina: sem formação de alo
Ceftriaxona: 32 mm
Ciprofloxacin: 35 mm
Imipenem: 28 mm
Meropenem: sem formação de alo
Nitrofurantoina: 16 mm
Norfloxacin: 29 mm
Piperacilina +tazobactam: 27 mm
Tobramicina: 21 mm

Interpretação de alos de antibiograma:

Agente Halos de inibição

resistente intermediário sensível
Amoxicilina+ácido clavulâmico ≤13 14-17 ≥18
Ampicilina ≤13 14-16 ≥17
Cefalexina ≤14 15-17 ≥18
Ceftriaxona ≤19 20-22 ≥23
Ciprofloxacin ≤15 16-20 ≥21
Imipenem ≤19 20-22 ≥23
Meropenem ≤19 20-22 ≥23
Nitrofurantoina ≤14 15-16 ≥17

Conclusão

Concluiu-se que a atividade desenvolvida foi de extrema importância para

aprender sobre o exame sensibilidade por disco difusão.

Referências

Holanda, C. M. C. X. et al. Manual de bacteriologia e de enteroparasitos.edufrn, Natal,

2017.
Manual de Antibiograma 2019. Laborclin Produtos para Laboratórios Ltda.