UNIVERSIDADE FEDERAL DO OESTE DA BAHIA

Centro Multidisciplinar de Luís Eduardo Magalhães

Disciplina: Cultura de células animais
Prof. Kaio César da Silva Rodrigues
Segunda Prova: 17/05/2021 Valor: 3,0 pontos

Nome do aluno(a): Francyslayne de Jesus Oliveira

Número de matrícula: 2019003833

Instruções:
1) A prova é individual;
2) Respondam às questões EM VERMELHO no próprio arquivo word da prova;
3) NÃO COPIEM E COLEM textos de livros, slides ou outras fontes. Escrevam com suas
próprias palavras.
4) Ao final da prova, preencham o Formulário do Google e anexem arquivo único em
formato PDF contendo a resolução da prova;
5) Vocês terão um total de 3 HORAS PARA POSTAREM a prova resolvida.

Questão 1) Considere as seguintes afirmações. Marque verdadeiro ou falso e

JUSTIFIQUE aquelas que forem falsas. (0,8 pt)
a) (F) Para fazer a renovação (ou troca) de meio de cultura em cultivos de células
não aderentes, basta adicionar meio novo às células que estão em alta
densidade, diluindo-as até a concentração necessária.
R – O frasco ou o recipiente que contém o cultivo celular é centrifugado para que as
células se agrupem no fundo. Em seguida, o sobrenadante (meio velho) é descartado.
Por fim, meio de cultura fresco é adicionado ao frasco para ressuspender as células.
b) (V) A retenção de células em cultivos contínuos garante elevadas concentrações
celulares, aumentando a produtividades de produto.
c) (F) Os biorreatores air-lift impõem condições de cisalhamento mais severas em
comparação aos biorreatores de tanque agitado.
R – Os biorreatores air-lift possuem condições de cisalhamento mais brandas em
comparação aos biorreatores de tanque agitado, visto que a oxigenação ocorre por
métodos mais suaves.
d) (F) Se a osmolalidade do meio de cultura for muito menor do que a osmolalidade
fisiológica de determinada linhagem celular, as células podem murchar e ter suas
funções fisiológicas comprometidas.
R – Se a osmolalidade do meio de cultura for muito menor do que a osmolalidade
fisiológica de determinada linhagem celular, haverá uma grande entrada de água na
célula por osmose e ela se romperá (lise).
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Disciplina: Cultura de células animais
Prof. Kaio César da Silva Rodrigues
Segunda Prova: 17/05/2021 Valor: 3,0 pontos

Questão 2) (0,4 pt)

a) EXPLIQUE a diferença entre subcultivo e renovação (ou troca) de meio de
cultura.
R – No subcultivo, as células (uma parte ou todas) são transferidas para um novo frasco
contendo meio de cultura fresco, ou seja, um novo cultivo é iniciado. Na renovação do
meio, por outro lado, as células permanecem em cultura e apenas o meio é trocado.
Nesse caso, o cultivo é o mesmo.
b) Indique em uma curva de crescimento celular, em que momentos estes
procedimentos devem ser feitos. JUSTIFIQUE.

R – A troca do meio de cultura deve ser feita, aproximadamente, no meio da fase log
(fase de crescimento), pois isso renova os nutrientes e permite que as células continuem
se proliferando. O subcultivo, por sua vez, deve ser realizado ao final da fase log, para
adiar a morte celular.

Questão 3) A produção de anticorpos monoclonais é tipicamente não associada ao

crescimento. Baseado nesta afirmação, qual modo de operação é mais indicado para
alcançar elevada produção destas moléculas? JUSTIFIQUE (0,4 pt).
R – Batelada alimentada, visto que ela favorece a produção de metabólitos secundários,
ou seja, produtos que não estão associados ao crescimento, estendendo a fase
estacionária. Além disso, ela diminui os efeitos de inibição pelo substrato.

Questão 4) EXPLIQUE como se dá o processo de batelada repetida e como este processo

ajuda a melhorar o desempenho de um processo conduzido em batelada (0,2 pt).
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Disciplina: Cultura de células animais
Prof. Kaio César da Silva Rodrigues
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R – Na batelada repetida, ao final do cultivo coleta-se apenas uma parte do volume total,
utilizando-se o restante como inóculo para uma nova batelada. Esse processo melhora
o desempenho da produção, pois elimina o tempo de limpeza e esterilização do
equipamento, ou seja, reduz o tempo improdutivo.

Questão 5) Os microcarregadores microporosos são uma importante ferramenta para o

cultivo de células aderentes. Explique por que estas partículas devem apresentar uma
densidade LIGEIRAMENTE SUPERIOR à do meio de cultivo (0,4 pt).
R – As partículas devem apresentar uma densidade ligeiramente superior à do meio de
cultura, pois isso permite que sejam mantidas em suspensão com baixas velocidades de
rotação. Além disso, contribui para a sua fácil sedimentação. Desse modo, a coleta de
produtos e a troca de meio se tornam mais simples.

Questão 6) EXPLIQUE como é feita a aeração de meios de cultura em biorreatores de

leito fixo. (0,2 pt)
R – O ar é injetado no fundo do biorreator e passa através do leito do substrato.

Questão 7) EXPLIQUE por que o fornecimento de oxigênio é um desafio em cultivos de

células animais? (0,6 pt)
R – Porque as células animais, por não possuírem parede celular, são mais sensíveis ao
rompimento. Nesse sentido, os métodos de aeração, que fornecem oxigênio ao cultivo,
representam uma ameaça a sua integridade, pois geralmente impõem uma alta tensão
de cisalhamento. Além disso, o oxigênio possui baixa solubilidade em meios de cultura
fermentativos, o que exige uma constante reposição.