MICROBIOLOGIA É utilizado uma alça de inoculação

flambada no bico de Bunsen, para não haver

Meio de cultura- forma de simular o in vivo, contaminação, e após ser mergulhada na
in vitro para o cultivo de organismos. solução de caldo e organismo preparada
Existe o caldo simples, que é líquido, e se anteriormente, passa-se suavemente em
adicionado o ágar, agente de solidificação estrias.
retirado de algas, o meio de cultura fica sólido.
Usa-se o ágar e não gelatina pois
Desenho de como deve ser feito:
algumas bactérias consomem a gelatina e
quando aquecida a temperaturas mais elevadas
derrete, perdendo o caráter sólido,
diferentemente do ágar.
Atualmente, para a preparação de meios
de cultura existem fórmulas prontas que
precisam ser diluídas apropriadamente, as
instruções vem no produto, fazer a diluição OBS: Não é possível relacionar o número de
sempre em água destilada para não haver colônias com o número de células, por isso
contaminação nem alteração do meio de utiliza-se as UFC (unidades formadoras de
cultura. Lembrando também de aquecer o colônias).
caldo para realizar a diluição.
OBS 2: Sempre trabalhar atrás da chama do
Após a placa estar pronta é necessário bico de Bunsen para que não haja
fazer teste de qualidade, para isso deixa-se as contaminação, tanto da placa, como de quem a
placas em incubação. manipula.

Cultura pura- Cultura com somente com um OBS 3: Deve crescer bactérias somente nas
único tipo de microrganismo. estrias, fora das estrias pode ser um
contaminante.
OBS- No ambiente encontramos culturas
mistas (vários microrganismos), para fazer a Técnica de diluição em placa
cultura pura é necessário técnicas de
isolamento.

Separação de uma cultura mista

(pescagem de colônia)
Com a agulha bacteriológica esterilizada
(flambada no bico de Bunsen {deixar no fogo
até ficar fluorescente}) colete uma UFC e
coloque no tubo de ensaio com caldo (caldo
BHI nutriwente).

OBS- Não é indicada a alça para não coletar

quantidades excessivas de bactérias.
Técnica de isolamento por esgotamento
Também conhecido por estriamento é
uma forma de avaliar qualitativamente a
cultura
Pode ser utilizada para isolamento ou
para contar quantidade (avaliar
quantitativamente a cultura).
Utiliza-se o método da alça calibrada
(alça com volume específico), assim
transferindo para a superfície do ágar de um
volume específico da diluição.
Pour plate- diluição em série e deposição da água da cultura, os cristais de gelo furam a
diluição final em placa para incubação. parede da bactéria, a matando.

Spread plate- utiliza-se a alça calibrada e
esfregaço para cultivo.
Alça de 1μL- 0,001 L- 1:1000
Alça de 10μL- 0,01 L- 1:100
Ambas alças a forma de aplicação é a mesma
Uma forma de facilitar é colocar uma miçanga
esterilizada dentro da cultura, as colônias
crescem em volta formando um filme em sua
superfície, assim quando necessário apenas
retira-se a miçanga e não toda a placa (assim
evitando a contaminação das bactérias padrão)
podendo assim fazer um inóculo bacteriano
Inóculo bacteriano-

Quando os microrganismos de interesse são

Semeadura de diluição colocados em um meio de cultura para iniciar o
crescimento.

Característica das colônias bacterianas

Forma-
Aspecto
 Circular
 Irregular  Brilho
 Filamentosa  Transparência
 Fusiforme  Opacidade
Resultados
 Rizoide  Rugosidade
Tubo- Após feita as semeaduras o tubo é
levado á estufa (35°C á 37°C), em caso de
bactérias não exigentes o crescimento ocorre Consistência Tamanho
em 24 horas, já bactérias mais exigentes
demoram cerca de 72 horas.  Cremosa  Puntiforme
 Viscosa  Pequenas
É perceptível que as bactérias cresceram  Seca  Medias
no meio, pois o caldo se torna turvo (ótimo  Friável  Grandes
para observar se cresceu) e é melhor visto caso  Membranosa
haja um indicador de pH (melhor na ajuda e
identificação de bactérias).

Para manter as bactérias vivas é preciso Margem

trocar de tubo a cada 3-5 dias, pois ao passar Elevação
disso muitas toxinas se acumulam na cultura e  Lisa
faltam muitos nutrientes, o que acarreta na  Lobada  Plana
morte de muitas delas.  Ondulada  Elevada
 Filamentosa  Umbilicada
OBS: Para guardar- é importante para  Serrilhada  Umbonada
manter bactérias de controle do meio de  Concêntrica  Convexa
cultura

Congelar, porém não pode colocar direto,

precisa adicionar glicerina para não congelar a Pigmentação

 Cor
 Solubilidade
 Fluorescência