APORTES ANALITICOS A FARMACOLOGIA Y TOXICOLOGIA Algunas caractersticas del laboratorio para estas disciplinas y conceptos para la utilizacin del

mismo

De los orgenes a la Edad Media

Papiros Ebers (Egipto, 1500 AC) Hipcrates (Grecia, 400 AC) Intoxicacin por plomo. Lex Cornelia (Roma, 80 AC) Legislacin contra los envenenadores y dispensadores de drogas. Maimnides (Espaa, siglo XII) Biodisponibilidad

El Renacimiento y la Edad Moderna

Paracelso: (Suiza, 1493 1541) La dosis es la diferencia entre el veneno y el remedio Mateo Orfila (Espaa, 1787-1853) Considerado el padre de la Toxicologa Moderna. Pionero en el uso de material de autopsia y el anlisis qumico para probar el envenenamiento.

Siglos XX - XXI
Pesticidas y armas de destruccin masiva Radioactividad y fsica nuclear Qumica analtica instrumental Regulacin moderna: CAA, FDA, EPA, OSHA, Codex Alimentarius Talidomida y toxicologa del desarrollo Biologa molecular Tecnologa de la informacin

Definiciones de Toxicologa
Estudio de las propiedades venenosas de las sustancias. Estudio de los efectos adversos de los agentes quimicos en sistemas biolgicos (Cassaret & Doull) Estudio de los agentes qumicos y fsicos que producen respuestas adversas en los sistemas biolgicos con los que interactan (Williams & Burson)

Cmo clasificar a los Txicos?

Origen: minerales, vegetales, animales. (sintticos? microbianos?) Estado fsico: lquidos, slidos, gaseosos (temperatura?) Organo blanco: neurotxicos, hepatotxicos, nefrotxicos... (multiplicidad?) Estructura qumica: aminas terciarias Accin biolgica: psicoanalpticos Mecanismo de accin: inhibidores de la colinesterasa. ATC (anatomical therapeutic chemical classification system) N06DA03 Rivastigmina Encuadramiento legal: venta libre, receta archivada...

Ramas de la Toxicologa
Toxicologa Toxicologa Toxicologa Toxicologa Toxicologa Toxicologa Toxicologa clnica industrial / laboral ambiental / ecotoxicologa bromatolgica farmacutica regulatoria forense / legal

QU ES EL LABORATORIO DE TOXICOLOGIA? Establecimiento publico o privado que realiza los anlisis bsicos y especializados para la deteccin, identificacin y cuantificacin de todo tipo de sustancias qumicas, en muestras biolgicas y no biolgicas, teniendo en cuenta sus propiedades, las cuales, pueden producir intoxicacin individual, colectiva o contaminacin del medio ambiente. El mismo puede estar dedicado a una rama de la toxicologa o puede atender varias de ellas. QU ES EL ANLISIS TOXICOLOGICO? Conjunto de medios tcnicos y humanos que identifican, cuantifican y controlan los efectos de los txicos, teniendo en cuenta las propiedades qumicas, fsicas y biolgicas de la sustancia estudiada.

Utilizacion del laboratorio toxicolgico

Diagnstico y pronstico de una intoxicacin Monitoreo del tratamiento Identificacin y cuantificacin de sustancias en casos con implicancias legales (fueros laboral, penal, civil) en matrices biolgicas y no biolgicas Ensayos farmacolgicos Monitoreo medioambiental Monitoreo salud ocupacional

Demandas al laboratorio toxicolgico

URGENTES: horas, pacientes intoxicados agudos MONITOREO O DIAGNOSTICO: das, intoxicaciones crnicas, diagnstico diferencial, control teraputico, trabajos de campo

METODOS ANALITICOS Cualitativos sospecha intoxicacin? txico desconocido? Cuantitativos Interpretacin basada en nivel? Resultados previos? Implicancias forenses?

Empleo incorrecto del laboratorio toxicolgico

Errores diagnsticos (manifestaciones cutneas, convulsiones agudas, prdidas de conciencia) Considerar la gravedad de las intoxicaciones slo dependiente de la alteracin de la conciencia Desestimar los efectos subagudos y/o crnicos luego del perodo agudo (hepatoxicidad de CCl4 paracetamol, halotano, paraquat; nefrotoxicidad de etilenglicol, Hg inorgnico, aminoglucsidos)

Considerar el anlisis toxicolgico un examen de rutina. Solicitar anlisis toxicolgico sin orientacin clnica No considerar medicacin concomitante. Cuantificar cuando no existe correlacin entre los niveles sricos y el efecto del txico y no se alterarn o monitorearn conductas teraputicas (antidototerapia, depuracin extrarrenal)

TOMA DE MUESTRAS
Muestra correcta Identificacin correcta Embalaje correcto

CONCEPTOS BASICOS Muestra: Parte representativa del material objeto del anlisis Matriz: Entorno que contiene al analito. Analito: Especie qumica objeto del anlisis. Interferencia(s): Especies presentes en la matriz que causan resultados errneos en la determinacin del analito. Mtodo analtico: Secuencia fija de acciones que se llevan a cabo en un procedimiento analtico

Heterogeneidad de las muestras Espacial Temporal

Sangre
10 ml mnimo (dos tubos) Tubo con anticoagulante heparina, EDTA Tubo seco para suero. Conservantes: NaF 1 % Tubos nuevos Cierre hermtico NO cmara de aire NO Limpieza / enjuague con alcohol Fecha y hora de extraccin Conservacin 4 grados (heladera) Postmortem: vena femoral / intracardaca

Orina
Screening general Orina 24 horas / Ocasional Facilidad de recoleccin / ausencia de protenas Conservacin 4 grados (heladera) Postmortem: puncin vejiga

Adulteracin de muestras de orina: Prevencin Deteccin

Vsceras
Hgado, estmago, cerebro, cerebro, pulmn, rin. Sin conservantes/aditivos qumicos Frascos individuales Sustancias fotosensibles Conservacin 20 grados (freezer)

Pelo
Sector occipital 1- 2 gramos Aprox. 5 cm. desde la raz Envolver en papel extremo cercano al cuero cabelludo Indicar zona proximal distal al cuero cabelludo Normalmente toma 7 10 das para que las drogas incorporadas crezcan sobre el cuero cabelludo Interferencia lavado, teido y tratamientos agresivos

Drogas de abuso en saliva

THC 1 14 hs Cocana, BDZ, Metaanfetaminas, MDMA desde: tiempo de ingestin hasta: 48 72 hs

Otros fludos
Humor vtreo: resecar completamente el globo ocular. Lquidos asctico, pleural, pericrdico, amnitico, etc: pipetas Pasteur estriles para secreciones viscosas.

Cadena de custodia
Identidad Inviolabildad Trazabilidad Procedimiento que asegura que la muestra que se procesa en el laboratorio toxicolgico no sea alterada, sustituida, cambiada o manipulada entre el momento en que sta se recoge hasta el momento que finaliza el anlisis

Empaque
Primario: contacto directo con el material. Plstico vidrio. Secundario: contiene al primario. Hermtico. Irrompible y con absorbente en caso ruptura primario. Hielo seco material de envoltura / separacin Terciario: externo. Poliestireno.

Rotulacin
Descripcin del material Responsable: Institucin en la cual se obtuvo la muestra. Direccin completa Lugar de destino (describir Instituciones y responsables) Cantidad de material en el interior Fecha de salida Plan de contingencia Cadena de fro

Formulario para la cadena de custodia

Anlisis requerido---------------------------------------------Solicitado por-------------------------------------------------Nmero de identificacin de origen/Historia clnica---------Datos del paciente--------------------------------------------Firma del paciente--------------------------------------------Declaracin del testigo de la toma de muestra: Esta muestra ha sido recogida y sellada en mi presencia y la etiqueta fijada en el recipiente contiene la firma del paciente y/o familiar y/o tercero. Datos del testigo----------------------------------------------Firma del testigo----------------------------------------------Datos de la muestra en origen: Fecha y hora de recoleccin---------------------------------Fecha y hora de envo----------------------------------------

Tipo de muestra----------------------------------------------Apellido y nombre del profesional que remite---------------Firma----------------------------------------------------------Apellido y nombre del transportista--------------------------Firma del transportista----------------------------------------Condiciones de envo: Temperatura Ambiente / Refrigerada / Freezada Observaciones------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

Fecha y hora recepcin muestra en el laboratorio-------------Apellido y nombre del receptor de la muestra-----------------Firma del receptor de la muestra-------------------------------Fecha y hora apertura de muestra------------------------------Apellido y nombre de quien abre la muestra--------------------Firma de quien abre la muestra----------------------------------La muestra est en buenas condiciones si / no La cadena de fro est conservada si / no Protocolo--------------------------------------------------------Lugar de resguardo de la muestra-----------------------------Observaciones------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

Tipos de intoxicacin
Autointoxicacin/Heterointoxicacin Intencional/No intencional Culpa/Dolo CRIMINAL ACCIDENTAL
Alimenticias / Ambientales Picaduras animales Medicamentos Absorcin accidental (errores de rtulo)

VOLUNTARIA
Autolesion y/o suicidios Drogadiccion : int. Aguda, impurezas, sobredosis, etc Terapeutica: intencion de aliviar dolores, tensiones, etc

Toma de muestras forenses

Toma de muestras de referencia (indubitadas) en personas vivas Recoleccin de indicios en el lugar de los hechos Recoleccin de indicios biolgicos en el cuerpo de la vctima Toma de muestras en casos de agresin sexual

Pericias criminalsticas
a) Investigacin de manchas de sangre. b) Investigacin de manchas de semen. c) Investigacin de otras manchas de origen biolgico. d) Estudios serolgicos para ETS y test de embarazo en mujeres vctimas de delitos sexuales. e) Investigacin de restos de plvora deflagrada en disparos de armas de fuego. f) Investigacin de metales provenientes del fulminante de armas de fuego (Bi, Ba, Sb) g) Estudio de pelos. h) Cotejo de fibras. i) Estudios comparativos de pinturas.

Pericias toxicolgicas
a) Individuos vivos Investigacin de etanol, metanol, drogas de abuso y sustancias psicotrpicas b) Muestras postmortem Investigacin compuestos voltiles (CO, HCN, etanol, Metanol, otros solventes ) Screening toxicolgico (sangre, orina, vsceras) de psicotrpicos, drogas de abuso y otros txicos (organofosforados, corrosivos, metales, etc) c) Otros materiales Principio activo (lquidos, pastillas, etc) Residuos (agua, alimentos)

Muestras para estudios toxicolgicos forenses

Sangre Orina Cont. Est. Vmito Cerebro Hgado, bilis Rin Pulmn Humor vtreo Pelos Sust. Sospe chosas

Drogas Abuso Etanol Solventes.

X X X X X X

X X

Medicam.

Pesticidas

Metales

CO Gases

TOMA DE MUESTRAS DE ALIMENTOS Y MEDIO AMBIENTE

Constituyentes: Constituyentes principales: > 1 % (10000 ppm) (mg/kg, g/g,) Secundarios o minoritarios: 0.1 1 % (1000 10000 ppm) Trazas: < 0.1 % (< 1000 ppm) Utratrazas del orden de las partes por milln Cantidad de muestra: Cantidad del constituyente a analizar Mtodo analtico seleccionado

Criterios CODEX ALIMENTARIUS para alimentos

Mnimo nmero de muestras a ser tomadas

Productos a granel homogneos (cereales y derivados) Peso de lote < 50 Kg Peso de lote 50 500 Kg Peso de lote > 50 Kg Productos a granel no homogneos (frutos, latas, cartones, etc) < 25 unidades en lote 26 100 unidades en lote > 100 unidades en lote 1 5 10 3 5 10

Incidencia de muestras con residuos en exceso en el lote

Mnimo numero de muestras al azar en crnicos requeridas para detectar un residuo en exceso con probabilidad de: 90 % 95 % 1 5 11 29 59 299 2995 99 % 1 7 17 44 90 459 4603

90 % 50 % 25 % 10 % 5% 1% 0.1 %

1 4 9 22 45 231 2302

Muestreo Aire
Muestreadores pasivos Absorcin (volumen) / Adsorcin (superficie) / Anlisis posterior. Simplicidad. Bajo costo. Slo valores promedio Muestreadores activos Bombeo del aire a travs de medio de coleccin Burbujeadores acidimtricos (SO2) Filtracin (PST) Mtodo de Saltzmann para NO2 Mtodo NBKI para O3

Muestreadores automticos Propiedades fsicas o qumicas del gas. Detecciin continua optoelectrnica. Seal quimioluminiscente o fluorescente. Deteccin en tiempo real. Costo. Necesidad de calibracin. Muestreadores remotos Trayectorias a lo largo de la atmsfera. Mapas tridimensionales de contaminantes.

Suelos secos y arenosos

Suelos hmedos y arcillosos