2a Avaliao de Anlise Instrumental II Professoras: Monica Padilha / Sidnei Bessa Data: 08/01/2007 Nome: Turma:

1) Um analista injetou uma mistura em um cromatgrafo gs, obtendo o cromatograma abaixo.

Condies cromatogrficas: Temperatura da coluna: 100C; Coluna: VF-5ms (5% fenil, 95% dimetilpolisiloxana) (30m x 0,25mm x 0,25 m) Temperatura do injetor: 160C; Modo de injeo: Injeo por vaporizao com diviso de fluxo (split); Taxa de diviso: 1:10 (split 1:10) Temperatura do detector: 200C; Solvente utilizado: Etanol PE = 76,8C.

Explique, resumidamente (mximo de cinco linhas), cada tem abaixo: a) Ao mudar a temperatura da coluna para 160C no modo isotrmico, houve melhora em relao aos sinais com maiores tempo de reteno, porm houve fuso entre os picos 1, 2 e 3 (esboce o novo cromatograma). b) Injetou-se 1,0 L de acetato de etila juntamente com 1,0 L da amostra mas no foi posvel identificar a posio dessa substncia, pois houve um aumento demasiado do sinal na regio em torno de 5 min. A identificao positiva somente foi possvel ser feita, quando forma co-injetados 0,3 L de acetato de etila com 0,7 L da amostra. c) As substncias 11 e 12 so lcoois lineares. Aps injetar n-pentanol juntamente com a amostra, observou-se a formao de um novo pico entre os sinais 11 e 12. Quais so as substncias que corresponderiam aos referidos picos e como se poderia confirmar tal hiptese com maior exatido? d) Por que os dois ltimos picos ficaram mais alrgados? e) Tentou-se infrutiferamente, otimizar o cromatograma com uma programao de temperatura de 1C/min, partindo de 100C. f) Tentou-se, infrutiferamente, otimizar o cromatograma diminuindo a temperatura do detector para 160C. g) O que aconteceria se a injeo fosse feita em vaporizador aquecido sem diviso de fluxo (splitless), sem alterar a temperatura da coluna. h) O que ocorreria caso a temperatura inicial da coluna fosse de 40C e o modo de injeo utilizado fosse sem diviso de fluxo (splitless).

2) A cafena (trimetilxantina) uma substncia comumente presente em matrizes naturais como caf, chocolate, coca-cola e alguns chs. Esta substncia adicionada a medicamentos analgsicos para auxiliar na ao efetiva do medicamento no alvio da dor. Determinou-se por CLAE o teor de cafena presente no medicamento referncia Neosaldina e no similar Neoralgina para comparao entre estes valores e o especificado pelos respectivos laboratrios fabricantes. Foi utilizado coluna ODS (C18), com detector UV-Vis em 272 nm. Para a quantificao preparou-se 100 mL de uma soluo padro a 100 g/mL da substncia. Em vidraria especfica de laboratrio foram adicionadas alquotas da soluo me a fim de obter-se as concentraes de 50, 40, 30, 20 e 10 g/mL da substncia. Como fase mvel foi utilizado metanol / gua 50% v/v. Para a construo da curva de calibrao foi utilizado o mtodo do padro externo, e feita a plotagem da rea do pico pela concentrao injetada. A equao da reta obtida : y = 24888.x 37175. Para o oreparo das amostras, um comprimido (1g) de cada um dos medicamentos foi macerado e solubilizado em 10 mL de metanol. A mistura foi filtrada em filtro de papel. O resduo foi lavado e o filtrado foi avolumado em balo volumtrico de 25,00 mL com gua Milli-Q. O volume injetado foi de 50 L. As reas obtidas foram: A Neosaldina = 9718921 A Neoralgina = 6433705 Segundo os dois fabricantes cada comprimido contm 10mg de cafena.

a) Qual o material de laboratrio deve ser utilizado para o preparo de solues, com a finalidade especificada no problema? b) Que tipo de material de laboratrio deve ser usado para retirar alquotas da soluo me, com o objetivo de construir a curva de calibrao. c) Quais os cuidados que deveos ter com as vidrarias de laboratrio envolvidas no problema?

d) Para obter as solues padro nas concentraes acima, a partir da soluo me de 100
g/mL, deve-se adicionar alquotas de _____, _____, _____, _____, _____ mL respectivamente e avolumar em material de laboratrio prprio. Quais as vidrarias de laboratrio utilizadas neste procedimento. e) O que aconteceria com o tempo de reteno se fose aumentado o teor de metanol na fase mvel? f) A massa calculada de cafena por comprimido de neosaldina _____________ e de neoralgina ______________.

g) Qual (is) o (s) medicamento (s) apresenta (m) a especificao correta do fabricante? ________________. h) Compare os princpios de funcionamento de um detector de UV-Vis com seleo de comprimento de onda com um detector de sequncia de diodos (diode array).

3) Coloque entre parntesis, F se a sentena for falsa e V se for verdadeira. Cada dois tens errados anulam um certo. (na dvida, tens em branco no anulam tens certos). a) ( ) O uso do loop de injeo em CLAE permite maior exatido no volume a ser injetado, o que minimiza erros na padronizao externa. b) ( ) Em sistemas modernos de CLAE com loop de injeo a velocidade com que o operador pressiona o mbolo da seringa relevante para a resoluo do pico correspondente substncia analisada. c) ( ) Gradiente de eluio significa variao da concentrao de um dos solventes que compe a fase mvel durante a corrida. d) ( ) O aumento da concentrao do solvente polar na mistura que compe a fase mvel em coluna C2 reduz os tempos de reteno dos compostos a serem separados. e) ( ) Em cromatografia de excluso por tamanho as molculas maores saem no final por interagirem mais fortemente com a fase estacionria. f) ( ) Os detectores mais utilizados em CLAE so o UV-Vis e o ndice de refrao. O primeiro seletivo e apresenta maior sensibilidade que o segundo que universal e menos sensvel. g) ( ) A eluio isocrtica refere-se ao mtodo de eluio em que se utiliza um nico solvente ou uma mistura de composio fixa durante toda a corrida. h) ( ) A bomba de pisto duplo fornece presso pulsada que facilmente corrigida pelo uso de um amortecedor de pulsos. i) ( ) Em colunas de fase normal os compostos so eludos em ordem decrescente de polaridade. j) ( ) A aplicao de ultra-som, aquecimento, vcuo e borbulhamento de gs inerte, so os mtodos disponveis para retirar bolhas da fase mvel. k) ( ) Quando os compostos a serem separados por CLAE apresentam temperaturas de ebulio muito diferentes utiliza-se o gradiente de eluio. l) ( ) O uso de padro interno permite corrigir interferncias de matriz em CLAE.

m) ( ) O desenvolvimento da fase ligada representou um avano em CLAE por aumentar a variedade de colunas disponveis, permitindo separar um nmero maior de compostos. n) ( ) Uma amostra contendo etanol, gua, n-propanol e n-butanol foi injetada em cromatgrafo a gs munido de coluna de cromatografia convencional, com caracterstica polar. A ordem de sada das substncias foi: gua, n-butanol, n-propanol e etanol. o) ( ) Uma amostra contendo etanol, gua, n-propanol e n-butanol foi injetada em cromatgrafo a gs munido de coluna de cromatografia convencional, com caracterstica polar. A ordem de sada das substncias foi:, n-butanol, etanol, n-propanol e gua. p) ( ) Uma amostra contendo etanol, gua, n-propanol e n-butanol foi injetada em cromatgrafo a gs munido de coluna de cromatografia convencional, com caracterstica polar. A ordem de sada das substncias foi:, n-butanol, , n-propanol, etanol e gua. q) ( ) O objetivo da CGAR obter uma resoluo aceitvel, no menor tempo possvel.

r) ( ) O tempo de reteno (tr) o tempo transcorrido desde o momento da injeo da amostra at que se tenha obtido o mximo do pico, menos o tempo morto. s) ( ) O tempo de reteno caracterstico do soluto, da fase lquida, da vazo, da temperatura da coluna e da razo de diviso em injetores aquecidos com diviso de fluxo. t) ( ) A resoluo, R, uma medida quantitativa da separao de dois picos consecutivos, sendo determinada pelo t e w. u) ( ) O coeficiente de partio (k) uma propriedade fundamental, sendo caracterstica do soluto e do solvente e definida como a razo entre a concentrao do soluto na fase gasosa pela concentrao do soluto na fase lquida. v) ( ) A cromatografia de adsoro utiliza uma fase estacionria slida e uma fase mvel lquida ou gasosa. w) ( ) A cromatografia de partio utiliza uma fase estacionria lquida que forma um filme fino na superfcie de um suporte slido. x) ( ) Numa fase estacionria (difenil)x(dimetil)1-xpolisiloxano quanto maior o valor de x, maior a polaridade da fase. y) ( ) Numa fase estacionria (difenil)x(dimetil)1-xpolisiloxano quanto maior o valor de x, menorr a polaridade da fase. z) ( ) A fase estacionria carbowax (polietilenoglicol) uma fase fortemente polar.