Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento – MAPA

Secretaria de Defesa Agropecuária – SDA

Coordenação Geral de Apoio Laboratorial - CGAL
Manual de Métodos de Análises de Bebidas e Vinagres
Destilados ACROLEÍNA TOTAL Método 27

1 – MÉTODO
Colorimétrico.

2 – PRINCÍPIO
A acroleína é oxidada a aldeído de epihidrina ou epóxi-1,2-propanal que gera, juntamente com o
hexilresorcinol, em presença de ácido tricloroacético, por reação de adição, uma coloração azul.

3 – MATERIAL
3.1 - EQUIPAMENTO
a) Espectrofotômetro.

3.2 - REAGENTES E SOLUÇÕES

a) Solução de hexilresorcinol. Adicionar a 5 g de hexilresorcinol, 10 mL de etanol 96 %vol.
b) Solução de cloreto de mercúrio 1% (V/V) em etanol 96% vol.
c) Solução saturada de ácido tricloroacético. Dissolver 100g de ácido tricloroacético, juntamente
com 10 mL de água destilada, em banho-maria.
d) Etanol 80% (V/V).
e) Solução padrão de dimetil acetal de acroleina a 1 mg/100 mL de acroleina de álcool a 100%
em volume: diluir 1:100 em álcool a 80% vol., uma solução de dimetil acetal de acroleína a
0,1456 g em 100 mL de etanol a 80% vol.

3.3 - VIDRARIA E OUTROS MATERIAIS

a) Tubos de ensaio de boca esmerilhada.
b) Pipeta de 2 mL com graduação de 40 gotas.

4 - PROCEDIMENTO
4.1 - CURVA ANALÍTICA
Transferir para os tubos de ensaio 0; 0,5; 1,0; 1,5; 2,0 e 2,5 mL da solução padrão de dimetil
(3.2.e). Adicionar etanol 80% até completar os volumes para 2,5 mL, depois, sucessivamente
adicionar os seguintes reagentes: 2 gotas da solução de hexilresorcinol, 5 gotas da solução de
cloreto de mercúrio e 2,5 mL da solução de ácido tricloroacético. Agitar. Levar os tubos a banho
termostático a 50 °C durante 30 minutos, em seguida aguardar o aparecimento da coloração em
temperatura ambiente durante duas horas e trinta minutos. Obtidos os valores das absorvâncias
traçar a curva analítica.

Nota: Os valores das absorvâncias obtidos em função dos teores de acroleína (0,2; 0,4; 0,6; 0,8 e
1 mg/100 mL) devem formar um reta passando pela origem.

4.2 - DETERMINAÇÃO
De acordo com o manual do equipamento, zerar com o branco e ajustar o comprimento de onda
de 610 nm. Medir a absorvância em cubetas de 1 cm de caminho ótico. Corrigir o grau alcoólico
da amostra para 80% com auxílio de etanol a 95 %vol. (deve-se considerar esta diluição no
momento de expressar o resultado). Transferir 2,5 mL para o tubo de boca esmerilhada e
proceder conforme curva analítica. Agitar. Levar os tubos a banho termostático a 50 °C durante

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30 minutos. Aguardar o aparecimento da coloração em temperatura ambiente durante duas horas

e trinta minutos. Medir a absorvância a 610 nm em cubeta de 1 cm de caminho ótico.

5 - CÁLCULOS E EXPRESSÃO DO RESULTADO

Obter o teor de acroleína através da curva analítica. Para obter o resultado deve-se multiplicar o
valor obtido na curva pelo fator de diluição (Volume antes da leitura na cubeta/ volume inicial da
amostra). Os resultados devem ser expressos em miligramas de acroleína por litro de destilado
(mg/L), conforme fórmula abaixo:
Ac = C × F
Onde:
Ac = Acroleína (mg/L)
C = Concentração de acroleína obtida na curva.
F = Fator de diluição.

REFERENCIA
Recueil des méthodes internationales d’analyse des boissons spiritueuses, des alcools et de la
fraction aromatique des boisssons., OIV, Juin. 1994, Paris, 311p.

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