1.

INTRODUCCION
Este trabajo est enfocado hacia una agricultura alternativa para las familias de nuestro pas, ya que se pretende que con el uso y asocio de este tipo de leguminosas con cultivos como arroz, disminuyan los costos de los insumos, ayuden a mejorar las condiciones fsicas y qumicas del suelo y por ende se vean beneficiados los recursos de las fincas. Este estudio tambin va dirigido a los pequeos y medianos productores los cuales, deben de saber manejar la problemtica relacionada a la germ inacin de las semillas de leguminosa que se ve afectada por este factor. Por lo que establecer un mtodo para mejorar el porcentaje de germinacin y aumentar el rendimiento en la siembra de estas leguminosas es el principal factor que se va evaluar, ya que con el resultado se ver beneficiado el cultivo con la incorporacin de nitrgeno. Al ser las semillas de Canavalia brasiliensis y Calopogonium mucunoides de testa dura, en donde el mtodo utilizado hasta el momento para la escarificacin de estas legumi nosas ha sido el cido sulfrico (H2SO4), un compuesto qumico muy corrosivo, incoloro, inodoro, denso y viscoso, que reacciona violentamente con agua y compuestos orgnicos con

desprendimiento de calor, que lo hace peligroso a la hora de manipularlo. Por esta razn se necesita investigar acerca de nuevos mtodos de escarificacin que sean eficientes, de bajo costo y fciles de emplear a nivel de finca. La funcin de escarificar las semillas es abrir o debilitar la cutcula o estructura externa de ellas, para que la radcula pueda abrirse paso e ntre ella y se pueda producir la germinacin adecuadamente. Los mtodos de escarificacin de las semillas que se realizarn y evaluarn en esta prctica se encuentran la escarificacin trmica, escarificacin mecnica, escarificacin con agua y la escarifi cacin con cido sulfrico. Uno de los mayores problemas que afectan el proceso de germinacin son las condiciones ambientales, por lo que es importante conocer y ayudar a las semillas a romper esta latencia por medio de la escarificacin.

Se entiende como germinacin el proceso que desencadena la rehidratacin de la semilla y el inicio de la expansin de la radcula para dar origen a una nueva planta. (Flores, 1999) La embriogenia y germinacin son, etapas sucesivas en el desarrollo del nuevo esporofito, separadas por un periodo de relativa inactividad metablica denominada letargo. (Flores, 1999) El metabolismo durante el desarrollo de la semilla es fundamentalmente anablico y est caracterizado por la sntesis masiva y depsito de sustancia s de reserva en los tejidos de almacenamiento y la deshidratacin de los tejidos; la germinacin se caracteriza por la movilizacin de polmeros de reserva y cambios cualitativos y cuantitativos de las enzimas catablicas, en particular, en los rganos de almacenamiento. (Flores, 1999) El proceso de germinacin involucra la transicin de las clulas de un estado deshidratado y baja actividad metablica. El agua es absorbida de manera trifsica por muchas semillas: imbibicin, germinacin sensu stricto y desarrollo del embrin. La imbibicin corresponde a la rpida absorcin de agua que conduce a un incremento paulatino de la actividad respiratoria. Germinacin sensu stricto, constituye la verdadera fase de la germinacin. Es el proceso de activacin del embrin, sin cambio morfolgico aparente. El desarrollo del embrin comienza con el inicio del desarrollo de la radcula y un cambio significativo en la fisiologa del embrin. La germinacin sensu stricto es la fase crucial de la germinacin por que el desa rrollo de la plntula depende de ella. En la mayora de los casos, la semilla germina solo si la respiracin y produccin de ATP son adecuadas, lo que requiere es oxgeno. La germinacin culmina con el desarrollo de la radcula (alargamiento celular) y su protrusin en los tejidos adyacentes. En las semillas recalcitrantes con embriones diminutos y rudimentarios o grandes con radcula rudimentaria (reducida un grupo de clulas meristemticas), el desarrollo de la radcula implica divisin celular y alargami ento. (Flores, 1999) Las semillas de todas las especies de plantas requieren como mnimo, tres condiciones externas, para que pueda producirse la germinacin: 1) agua, 2)

temperatura adecuada, y 3) oxgeno. Un cuarto factor, la luz, afecta la germinacin de las semillas de algunas especies. (Meyer, 1996)

Agua Un bajo contenido de agua es uno de los caracteres ms importantes de las semillas aletargadas de la mayora de las especies, aunque algunas se deterioran y pierden su capacidad germinativa si el contenido del agua desciende a niveles bajos. (Meyer, 1996) La cantidad de agua absorbida durante la germinacin, por semillas de diferentes especies e incluso por variedades de una misma especie, vara dentro de amplios lmites. (Meyer, 1996) Igual que el lquido, tambin el vapor de agua puede embeber las semillas. Muchas semillas pueden pasar las primeras etapas de la germinacin en una atmsfera saturada o casi saturada, pero si la presin de vapor de la atmsfera est muy por debajo del vapor de satur acin, la germinacin puede daarse o inhibirse. (Meyer, 1996)

Oxgeno La respiracin de las semillas en germinacin, se produce a elevado ritmo, especialmente durante las primeras etapas del proceso. Las semillas de muchas plantas terrestres pueden germinar bajo el agua, durante la presin parcial del oxgeno a menudo corresponde a un valor mucho menor que el de la atmsfera. (Meyer, 1996)

Temperatura adecuada Si no actan otros factores limitantes, las semillas de cada especie germinaran dentro de una determinada gama de temperaturas, por encima o por debajo de las cuales no se produce germinacin. Como regla las semillas de especies originarias de regiones templadas, germinan dentro de cifras de temperaturas ms bajas que las semillas de especies nativ as de regiones tropicales y subtropicales. No es posible sealar ninguna temperatura exacta como el ptimo de germinacin, debido a que vara con los otros factores ambientales prevalecientes, y tambin con el criterio seleccionado como ndice de germinacin. La temperatura ms favorable, por ejemplo, para el alargamiento 3

de la raz primaria, no siempre corresponde a la temperatura ms favorable para el desarrollo de la plmula. (Meyer, 1996)

Luz Muchas clases de semillas expuestas a la luz germinan mejor que mantenidas en completa oscuridad, por lo que la germinacin de las semillas de algunas especies parece retardarse o inhibirse en presencia de la luz. El efecto de la luz sobre la geminacin de las semillas est profundamente influido por otros factores ambientales. (Meyer, 1996) Sin embargo, el estado de crecimiento inhibido de las semillas o de otros rganos vegetales, resultante de causas internas, se le denomina

generalmente letargo, pero a veces suele llamrsele periodo de reposo. (Meyer, 1966) La simple falla en la germinacin de las semillas, no significa que estas estn en letargo: las condiciones ambientales pueden ser desfavorables. (Meyer, 1966) El trmino letargo, aplicado a semillas, es realmente restringido a aquellas que fallan en su ge rminacin debido a causas internas. Por conveniencia, emplearemos el trmino reposo para designar el estado en que la falta de crecimiento de la semilla u otro rgano vegetal, resulta de las condiciones ambientales. En la prctica, es a menudo difcil esta blecer, sin efectuar ensayos experimentales, si semillas u otros rganos vegetales, en condiciones naturales estn realmente en letargo o simplemente en reposo. (Meyer, 1996)

Por otra parte es importante mencionar las funciones que tienen en general las leguminosas principalmente Canavalia brasiliensis e Calopogonium

mucunoides, en el desarrollo y el aporte que estas brindan en la agricultura, como lo son la implementacin de alimentacin de animales. Existen diferentes usos como las leguminosas forrajeras para uso en alimentacin animal, tambin como fuente de alimento para consumo humano. Tambin en la parte agroindustrial son usados la soya y el man, mientras que en la medicina vegetal los usos de ellas son mltiples . (Montiel, 1983) abonos verdes, cobertura natural,

Para el alimento del ganado las leguminosas de grano han sido muy importantes como harina de soya y de man. Las leguminosas arbreas son maderas preciosas como el cenzaro, gaviln, cocobolo, etc. (Montiel, 1983) Adems para que un suelo sea frtil, sus condiciones fsicas deben ser tales que favorezcan la continuidad en el suministro de agua y aire y el adecuado equilibrio entre ambos, siempre que exista una cantidad suficiente de lluvias o riesgos en forma asimilable, de todos los nutrientes esenciales, bastante para facilitar el mantenimiento de la produccin en el nivel que permitan las condiciones climticas y econmicas. Esos factores estn estrechamente ligados con la existencia de nitrgeno asimilable, cuando ste escasea se restringen las actividades de la vida microscpica y macroscpica del suelo, se reduce la meteorizacin del suelo maduro y disminuye la materia orgnica, que es indispensable para que existan buenas condiciones fsicas. (Whyte, 1956) Los abonos verdes es una prctica agrcola programada que consiste en la incorporacin de la masa verde o semideshidratada de las plantas de cobertura con la finalidad primordial de mantener o aumentar el contenido de materia orgnica del suelo y mejorar sus condiciones fsicas, qu micas, biolgicas, para favorecer el crecimiento y rendimiento de los cultivos de importancia econmica. (Monegat, 1991) La necesidad de proteger el suelo contra los efectos erosivos de las precipitaciones intensas y de contribuir al mantenimiento de la fe rtilidad fue causa de que la agricultura de plantacin introdujera el sistema de sembrar un cultivo de proteccin de leguminosas perennes de crecimiento rpido entre las hileras del cultivo principal de la plantacin. Dicho cultivo, adems de proteger el suelo, aumentaba la fertilidad mediante la mineralizacin de la hoja de las leguminosas cada anualmente y la acumulacin de nitrgeno combinado por la fijacin simbitica de ste por los ndulos que crecen en las races de las leguminosas. (Sherman, 1991) Una vez conociendo un poco las virtudes que tiene la incorporacin de leguminosas al suelo para mejorar las caractersticas fsicas, qumicas y biolgicas del suelo, es importante conocer y desarrollar una tcnica que tiene como principal objetivo evaluar diferentes mtodos de escarificacin para las semillas de leguminosa, que puedan ser aplicado a nivel de finca y que promueva un aumento significativo en la germinacin de las semillas de 5

Canavalia brasiliensis

y Calopogonium mucunoides; y como objetivos

especficos buscar un mtodo de escarificacin eficiente, fcil y con un precio razonable para que los y las productoras puedan realizarlo; as como validar y evaluar mtodos de tratamiento para las semillas de leguminosa s, y establecer una pequea prctica a nivel de finca con pequeos productores de arroz.

2. METODOLOGIA
Esta prctica dirigida se llevar a cabo principalmente en las instalaciones de la Estacin Experimental Fabio Baudrit Moreno, ubicada en La Garita de Laboratorio

Alajuela. Los anlisis de laboratorio se realizarn en el Fitopatologa del INTA;

institucin adscrita al Ministerio de Agricultura y

Ganadera, localizado el cantn de Matarredonda, distrito la Sabana. El trabajo de investigacin est dividido en dos experimentos Experimento 1. Se realizar una investigacin sobre los mtodos de Se

escarificacin y los resultados obtenidos por otros investigadores.

consultarn fuentes primarias y se realizarn entrevistas a investigadores, tcnicos, adems de consultar diferentes instituciones con experiencia en este campo. Tambin se consultarn libros, revistas cientficas e internet sobre mtodos de escarificacin realizados en otro tipo de semillas , principalmente de leguminosas. Posteriormente se proceder a adaptar algunos mtodos de escarificacin a las caractersticas de las semillas Canavalia brasiliensis y Calopogonium mucunoides. Primero se seleccionarn semillas de ambas especies libres de patgenos, de un tamao uniforme, sin deformaciones o perforaciones. Se proceder a realizar una prueba de laboratorio sobre la respuesta de semillas de a los siguientes tratamientos:

1. Inmercin de las semillas en agua caliente a . C por xxxx tiempo. 2. Desgaste de la cutcula por medio de una lima 3. Inmercin por 15 minutos en H2SO4 concentrado. 4. Inmersin en agua a temperatura ambiente por 12, 24 y 36 h 6

Para los primeros 3 tratamientos se utilizar un diseo completamente aleatorizado (DCA) y las medias de los tratamientos se compararn utilizando la prueba de Duncan ( Still y Torrie, 1990) Para el tratamiento 4, se utilizar tambin un diseo completamente aleatorizado (DCA) con 3 tratamientos que consistirn en las 12, 24 y 48 horas de sumersin en agua temperada.

Para todos los 5 tratamientos se realizar el conteo de semillas germinadas, considerndose una semilla germinada aquella que ha liberado la plmula y la radcula. Tambin se contarn las semillas muertas y las anormales para ajustar el porcentaje de germinacin para que no exista sesgo debido a este factor.

Experimento 2 : Se seleccionarn 10 fincas de pequeos productores en la zona de Caas, se seleccio esta zona debido a las gran actividad arrocera de la zona y bla, bla, bla.

Las fincas seleccionadas pertenecern a pequeos productores de la zona ( fincas menores de xxx Ha) que en la zona representan el xx%. En cada una de las fincas se proceder a validar el mtodo o mtodo de ecarificain que produjo mejo germinacin para las especies estudiadas. La validacin consistir en que cada productor realice el mtodo de

escarificacin sugerido y lo valore segn su criterio y de acuerdo a un cuestionario que se llenar para cada uno de ellos para medir el porcentaje de adopcin de la tcnica as como su f actibilidad a nivel de finca. Y por ltimo se proceder a establecer una prctica con diez pequeos productores de arroz de la zona de Caas, Guanacaste; esto con el fin de validar un mtodo de escarificacin, donde se evaluarn algunos criterios como el procedimiento, tiempo, eficacia, entre otros.

A continuacin se describ e los mtodos de escarificacin que se utilizaran para evaluar en esta prctica; 7

1. Mtodo de escarificacin trmica

Entre los principales mtodos de escarificacin se encuentran la trmica, la cual ayuda a romper la latencia por medio del calor que se le suministra a las semillas, este mtodo consiste en la inmersin de cada variedad de semillas en agua caliente al inicio de ebullicin (lOOC) no expuesta al fuego por cinco minutos, agitndose frecuentemente; segundo, la inmersin de semillas en agua hirviendo, contenidas dentro de un colador, mantenindose el conjunto sobre el fuego, por cinco minutos (Sanabria, 1997)

2. Mtodo de escarificacin mecnica

El mtodo mecnico consiste en raspar y golpear un punto de la testa de la semilla, ya que provocan aberturas pequeas que facilitan la entrada del agua, lo que permite la ayuda de la germinacin. En este caso las semillas de leguminosas se colocaran dentro de una caja forrada de lija, y posteriormente se proceder a instalarlas sobre un agitador horizontal el cual, estara a una velocidad constante de 300 revoluciones por minuto. Esto con duraciones controladas de 10, 20 y 30 min.

3. Mtodo de escarificacin con agua

El tercer mtodo es la utilizacin de agua ambiente en donde las semillas se sumergen y se dejan reposar por 12, 24 y 36 horas.

4. Mtodo de escarificacin con cido sulfrico

El cuarto mtodo de escarificacin es la utilizacin del cido sulfrico a una concentracin del 66%, utilizado y comprobado como hasta ahora, ya que el porcentaje de germinacin es del 80% de las semillas. Este consta en su mergir cada tipo de semilla en cido sulfrico por 15 min, luego con mucho cuidado lavarlas con suficiente agua y dejarlas secar bien antes se sembrar.

Diseo experimental

Se estudiar el efecto de los tratamientos descritos anteriormente en un diseo completamente aleatorizado, con 9 tratamientos y un testigo absoluto (semillas no tratadas), cinco repeticiones, para un total de 5 0 cajas petri (unidades experimentales). Los resultados sern analizados estadsticamente por medio de regresin, determinado la ecuacin para la variable an alizada.

Una vez realizados los mtodos de escarificacin se proceder a evaluar las semillas por medio de pruebas de germinacin para lo cual, se utilizarn cajas petri desinfectadas con una solucin clorada al 1% y esterilizadas en autoclave, adems cubiertas de papel toalla absorbente.

En total se realizarn 10 tratamientos y de cada tratamiento se realizarn cinco repeticiones con 10 semillas cada uno, las cuales se colocarn en las cajas petri anteriormente dichas y cubiertas de papel toalla, ste debe encontrarse siempre hmedo, esto para mantener hidratada la semilla y estimular la germinacin.

El proceso de germinacin se realizar en una incubadora en donde la humedad relativa y la temperatura es controlada en los 10 tratamientos, luego se cuantificarn las semillas germinadas a los 5 das y se considerarn nicamente aquellas plntulas normales donde el embrin ha salido al exterior.

Los datos se analizarn mediante un anlisis de varianza, para determinar si hay diferencias entre los tratamientos que mejoran la calidad de la semilla.

Los datos obtenidos sern codificados y analizados utilizando un modelo de regresin logstica, para calcular las probabilidades de adopcin de sta tecnologa.

Por ltimo se realizar una prctica sencilla con los productores de arroz, para as conocer que creen cada uno de ellos, acerca del proceso que conlleva la escarificacin de estas semillas.

Con los resultados de esta investigacin se elaborar un brochure informativo, este con el fin de recordar las prcticas a utilizar cuando se cultiven leguminosas.

3. CRONOGRAMA DE ACTIVIDADES
Actividades Ene- Feb- Mar- Abr- May- Jun- Jul- Ago- Sepprogramadas 11 11 11 11 11 11 11 11 11 Elaboracin del anteproyecto e investigacin Aprobacin del anteproyecto Inicio de la investigacin, recoleccin de datos Elaboracin del trabajo de la prctica dirigida Defensa de la practica dirigida Elaboracin del artculo cientfico

4. PRESUPUESTO

RUBROS Artculos de oficina Utensilios de laboratorio Alimentacin Transporte Salario del profesional TOTAL

MONTO 200.000 60.000

100.000 100.000 1.700.000

2.160.000

5. BIBLIOGRAFIA

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Flores, E., 1999. La planta, estructura y funcin. Regional. Cartago, Costa Rica. 2 v, capitulo XX, 861 p.

Libro Universitario

Meyer, B.; Anderson, D.; Bhning,R.; 1996. Introduccin a la Fisiologa Vegetal. Editorial Universitaria de Buenos Aires. Impreso en Argentina. 579 p.

Monegat, C., 1991. Plantas de Cobertura de Suelo, Caractersticas y manejo en pequeas propiedades. Chapec (SC) Ed. De Autor. 336 p Montiel, M., 1983. Principios Bsicos de Gramneas y Legumino sas Forrajeras. 1. Ed. Editorial Universidad de Costa Rica. San Jos, Costa Rica. 98 p Sanabria, D.; Silva, R.; Alfaro, C.; Oliveros, M., 1997. Escarificacin trmica de semillas de accesiones de Leucaena leucocephala. FONAIAP. Centro de Investigaciones Agropecuarias del Edo. Monagas. Estado Monagas, Venezuela. Zootecnia Tropical, Nota Tcnica 15(1): 67-80 p. Sherman, P.J., 1991. Leguminosas forrajeras tropicales. Coleccin

FAO: Produccin y proteccin vegetal, N 2. O rganizacin de las Naciones Unidas para la Agricultura y la Alimentacin. Roma, Italia. 707 p. Whyte R.O., 1955. Las Leguminosas en la Agricultura. FAO Estudios Agropecuarios N 21. Organizacin de las Naciones Unidas para la Agricultura y la Alimentacin. Roma, Italia. 405 p

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