Este documento descreve um experimento para extrair DNA de células de kiwi. O experimento envolveu esmagar as células de kiwi para quebrar as paredes celulares, usar detergente para solubilizar as membranas celulares e nucleares, e filtrar para isolar o DNA. O DNA foi então precipitado adicionando álcool 96%, resultando na extração bem-sucedida de DNA de células de kiwi, como mostrado na figura 1.
Este documento descreve um experimento para extrair DNA de células de kiwi. O experimento envolveu esmagar as células de kiwi para quebrar as paredes celulares, usar detergente para solubilizar as membranas celulares e nucleares, e filtrar para isolar o DNA. O DNA foi então precipitado adicionando álcool 96%, resultando na extração bem-sucedida de DNA de células de kiwi, como mostrado na figura 1.
Este documento descreve um experimento para extrair DNA de células de kiwi. O experimento envolveu esmagar as células de kiwi para quebrar as paredes celulares, usar detergente para solubilizar as membranas celulares e nucleares, e filtrar para isolar o DNA. O DNA foi então precipitado adicionando álcool 96%, resultando na extração bem-sucedida de DNA de células de kiwi, como mostrado na figura 1.
Questão-Problema Princípios Teóricos Discussão e Conclusão
Nesta experiencia realizou-se a extração de DNA de
Todas a células, sejam elas procarióticas ou células de kiwi, o qual apresenta células eucarióticas eucarióticas, apresentam a sua informação genética vegetais, estando o DNA concentrado no núcleo. codificada na molécula de DNA, a qual permite o Tendo em conta os resultados representados na controlo do metabolismo celular. Figura 1, é possível verificar que a extração e visualização Esta biomolécula apresenta-se dispersa no Metodologia do DNA total foi possível, o que significa que o protocolo foi citoplasma no caso das células procarióticas, ou bem conseguido. concentrada no núcleo, estando associada a histonas Inicialmente, realizou-se a técnica de esmagamento, o (DNA nuclear), mitocôndrias (DNA mitocondrial) e que permitiu fragmentar e degradar as paredes celulares cloroplastos (DNA cloroplastidial) no caso das células das células do kiwi. Posteriormente, recorreu-se à utilização eucarióticas. de detergente, o qual permite a solubilização e dissolução O DNA é um polímero constituído por um conjunto de das membranas celular e nuclear. Utilizou-se também água nucleótidos, os quais constituem uma cadeia dupla destilada, a qual sendo uma solução hipotônica, permite a enrolada em hélice. Nesta cadeia, estabelecem-se entrada na célula auxiliando na sua lise. Estes processos ligações fosfodiéster entre nucleótidos da mesma em conjunto, permitem ter acesso ao conteúdo celular cadeia, e ligações por pontes de hidrogénio entre incluindo o DNA. bases azotadas de cadeias complementares. Estas A utilização em simultâneo de uma solução de NaCl, bases azotadas são adenina que estabelece ligação permite que os iões Na+ se liguem ao DNA (molécula dupla com a timina, e a guanina que estabelece carregada negativamente), neutralizando-o de modo a que ligação tripla com a citosina. Além disso, um este estabilize através da sua agregação. nucleótido de DNA apresenta a desoxirribose como O processo de filtração, permitiu que fragmentos pentose. maiores do kiwi, ficassem retidos no filtro, e apenas as No caso das células vegetais, a extração de DNA biomoléculas atravessassem o filtro. pode ser dificultada pela presença de parede celular, a qual é constituída por celulose, sendo bastante rígida, e por isso é necessário recorrer a técnicas que Resultados permitam fragmentar a parede celular.
Conceitos-chave
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Professor: Susana Cruz Ano lectivo 2019/2020 Página 2 de 2 Figura 1 –
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Por fim, a adição de álcool a 96% e a 4°C permite um choque térmico com o DNA pré-aquecido em banho maria, o que provoca a formação de bolhas de ar e a ascensão do DNA, uma vez que este se torna menos denso. O recurso ao etanol a 96% é um passo fundamental, pois permite a precipitação do DNA, uma vez que este é insolúvel neste álcool, e por isso separa-se de todos os outros elementos celulares que se encontrem no filtrado realizado, nomeadamente proteínas. Assim, perante o presente trabalho experimental podemos concluir que este foi realizado com sucesso. Além disso, se em vez de células eucarióticas vegetais fossem utilizadas células eucarióticas animais, o procedimento em si seria exatamente o mesmo, com exceção do primeiro passo, o esmagamente, uma vez que este tipo de células não apresenta parede celular.
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