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Sangue

Hematopoiese

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SANGUE
O sangue um tipo especial de tecido conjuntivo cuja matriz extracelular se apresenta no estado lquido e flui num compartimento representado pelo sistema circulatrio, transportando oxignio e outros nutrientes (hormnios, eletrlitos, gua e resduos do metabolismo celular). A permuta dos elementos contidos no sangue com os tecidos se processa nos capilares sangneos, que so vasos de paredes mais simples, constitudos apenas de endotlio e sua membrana basal. Em alguns capilares, o endotlio apresenta pequenos poros, podendo ser atravessado pela gua, por um grande nmero de molculas hidrossolveis e pela maioria dos ons. As substncias lipossolveis, como algumas vitaminas, dissolvem-se na membrana capilar e atravessam a sua extenso sem passar pelos poros. O trnsito de substncias atravs das membranas celulares ocorre por dois mecanismos: difuso e transporte ativo. A homogeneidade do sangue apenas aparente, pois formado por duas fases: uma fase compreende os elementos figurados suspensos em outra fase lquida, o plasma sangneo com 91% de gua e 9% restantes representados pelas protenas, eletrlitos, gorduras, glicose, hormnios e numerosas outras substncias. No homem adulto, o volume total de sangue de aproximadamente 5 litros, o que corresponde a 7% do peso corporal, sendo composto pelo plasma em 55% de seu volume, sendo 2% de leuccitos e plaquetas e os 43% restantes correspondem aos eritrcitos. A regulao do fluxo sangneo nos capilares devido s necessidades locais dos tecidos, pois o sangue no flui num ritmo contnuo. Os esfncteres pr-capilares e as metarterolas contraem e relaxam alternadamente em ciclos de 5 a 10 vezes por minuto, sendo a concentrao de oxignio nos teci-

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dos o fator que determina o grau de abertura dos esfncteres. Quando a concentrao de oxignio baixa, os esfncteres pr-capilares permanecem abertos, aumentando o fluxo de sangue. Assim, quanto maior a utilizao de oxignio pelos tecidos, tanto maior o fluxo de sangue pelos seus capilares. O ritmo da contrao dos esfncteres prprio e independe dos batimentos cardacos ou da transmisso da onda de pulso do sistema arterial at a microcirculao. O sangue representa um importante sistema de defesa contra agentes invasores de diversas naturezas, incluindo-se as bactrias e os agentes qumicos, devido presena de clulas de defesa e elementos humorais. O sangue tambm desempenha outras funes como o transporte de oxignio e de outros nutrientes, como glicose, aminocidos, protenas, gorduras, gua, eletrlitos e elementos minerais at as vrias clulas do organismo, alm de remover o dixido de carbono e outros resduos do metabolismo celular para detoxicao ou eliminao. Assim, o sangue atua no processo de detoxicao, transporte e eliminao de substncias absorvidas pelo organismo, inclusive os agentes farmacolgicos, promovendo a sua eliminao atravs dos pulmes, dos rins, da pele ou mesmo pelas fezes. O sangue participa tambm do ajuste do teor de gua dos diversos compartimentos lquidos do organismo, regulando a concentrao de ons H+ mediante trocas inicas e pela ao dos sistemas tampo, fundamentais ao equilbrio cido-bsico osmtico dos lquidos teciduais, alm de manter o pH dentro de limites adequados funo das enzimas e organelas celulares. O sangue distribui os hormnios produzidos pelas glndulas endcrinas por todo o organismo e participa dos mecanismos de regulao da temperatura corporal. Para a anlise microscpica dos seus elementos necessria a confeco de distenses sangneas, onde uma gota de sangue colocada sobre uma lmina histolgica. Em seguida, com o auxlio de outra lmina, distende-se a gota de sangue sobre a lmina. Este procedimento facilita a observao dos elementos sangneos ao microscpio de luz (Fig. 5.1). Freqentemente, para visualizao de tais elementos, realiza-se a colorao das distenses sangneas com corantes especiais, com base na mistura de Romanowsky, que uma mistura de corantes como a eosina, o azul-demetileno e azures-de-metileno. Outros corantes so encontrados comercialmente, como Leishman, Wright e Giemsa (misturas do tipo Romanowsky).

C ONSTITUIO

DO

S ANGUE

Na matriz extracelular do sangue, denominada plasma, se encontram em suspenso os elementos figurados (eritrcitos ou hemcias, leuccitos ou glbulos brancos e plaquetas). A quantidade de hemcias existente no sangue um indicador de grande importncia na avaliao clnica dos indivduos. A sua expresso mais simples o hematcrito, que representa o porcentual de hemcias contido no sangue (Fig. 5.2). O volume de hemcias tem relao direta com a quantidade de hemoglobina; portanto, o hematcrito um indicador indireto da capacidade do sangue em transportar oxignio para os tecidos. O hematcrito normal para os homens varia de 40% a 42% e para as mulheres, de 38% a 42%. Segundo a tc70
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Lmina distensora

Gotcula de sangue

Fig. 5.1 Um modo de se confeccionar uma distenso sangnea.

nica de preparo do hematcrito, a centrifugao em alta velocidade de um pequeno volume de sangue dentro de um tubo graduado permite estimar o volume ocupado pelas hemcias com relao ao sangue total. Os valores normais esto representados na Tabela 5.1.

P LASMA S ANGUNEO
O plasma sangneo a fase lquida e representa a poro no-celular do sangue. um lquido viscoso, de tonalidade amarelo-plido. Ao centrifugarmos um determinado volume de sangue em um tubo de ensaio por alguns minutos, as clulas se depositam no fundo e sobre elas observamos uma camada de lquido amarelo palha ou mbar, claro, opaco e viscoso, o plasma sangneo. Em um indivduo normal, o plasma corresponde a 60% do volume de sangue, para um hematcrito de 40%, porm, quando recolhemos um volume de sangue em um tubo de vidro, aps alguns minutos forma-se um cogulo. Em seguida, o cogulo se consolida, torna-se mais firme e slido por um mecanismo conhecido como retrao. Ao se retrair, o cogulo expele a maior parte de lquido retido no seu interior e o lquido expelido denominado soro sangneo. O soro corresponde ao plasma sem as protenas do sistema de coagulao e outras retidas no cogulo.
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10 9 8 7 6 5 4 3 2 1

10 9 8 7 6 5 4 3 2

Plasma

Leuccitos

Eritrcitos
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Fig. 5.2 Tubos de hematcrito com sangue. esquerda, antes da centrifugao, e direita, aps centrifugao.

A gua, sob a forma lquida, o principal componente do plasma sangneo e corresponde a 91% do seu volume. Os 9% restantes correspondem a protenas (7%) e outros elementos dissolvidos (2%). O plasma permite o livre intercmbio de vrios componentes entre o sangue e o lquido intersticial. Este intercmbio realizado atravs dos poros da membrana da clula endotelial que constitui o capilar. Em condies habituais, devido s dimenses de sua molcula, as protenas plasmticas no atravessam a membrana do capilar, permanecendo no plasma. Entretanto, outras substncias dissolvidas no sangue e as molculas de gua podem se difundir livremente. A sada da gua do plasma atravs dos capilares controlada pela presso coloidosmtica (presso onctica) e pelo estado da permeabilidade das membranas. Em outras palavras, as protenas extraem gua dos tecidos para os capilares e dificultam a sada de gua dos capilares para os tecidos. As protenas do plasma so de trs tipos principais: a albumina, as globulinas e o fibrinognio.

Tabela 5.1 Hematcrito Normal Apresentando a Porcentagem dos Elementos Figurados Homem: Mulher: Criana: Recm-nascido: 40% 35% 36% 44% a a a a 54% 47% 44% 62%

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A albumina corresponde a 55% do total de protenas plasmticas, sendo o principal responsvel pela manuteno da presso coloidosmtica do plasma. As globulinas correspondem a 38% do total de protenas e so de trs tipos principais: alfaglobulinas, betaglobulinas e gamaglobulinas. As globulinas alfa e beta desempenham diversas funes auxiliando no transporte de outras substncias pelo organismo, sendo chamadas de carreadoras ou transportadoras. Elas se combinam com substncias, formando complexos conjugados que so transportados a diversos rgos para exercer suas funes. As gamaglobulinas e algumas betaglobulinas so parte fundamental do sistema de defesa do organismo, incluindo-se os mecanismos de imunidade e alergia. Essas globulinas formam os anticorpos, protegendo o organismo contra infeces. O fibrinognio, outras protenas e alguns fosfolipdeos constituem a poro plasmtica responsvel pelo fenmeno da coagulao do sangue. O fibrinognio corresponde a 7% do total de protenas do plasma, existindo entre 100 e 700mg de fibrinognio em cada 100mL de plasma. O fibrinognio sintetizado no fgado e, devido ao seu grande peso molecular, no costuma passar para o lquido intersticial. Contudo, quando a permeabilidade dos capilares aumenta, o fibrinognio pode passar ao interstcio em quantidades suficientes para permitir coagulao. No plasma tambm encontramos outras substncias dissolvidas, como os eletrlitos. Os principais eletrlitos no plasma so o potssio, sdio, cloro, clcio, fosfato, sulfato e magnsio. Estes eletrlitos so necessrios ao desenvolvimento da funo celular, difundindo-se para o lquido intersticial e depois para o lquido intracelular. O clcio, sdio e potssio so essenciais conduo dos impulsos eltricos e contrao muscular. Alm dos eletrlitos, diversas outras substncias so transportadas pelo plasma sangneo e alcanam o lquido intracelular e so fundamentais na manuteno das funes celulares como a glicose, hormnios, colesterol, uria, creatinina, aminocidos, hidratos de carbono, cidos graxos, vitaminas e outras. A glicose uma fonte essencial de energia para todos os tecidos do organismo e sua concentrao normal de 80 a 120mg%. A glicose que se encontra dissolvida na gua do plasma utilizada como fonte de energia e, junto com outros acares, penetra nas clulas por difuso, o que favorecido pela insulina, um hormnio produzido pelo pncreas.

E LEMENTOS F IGURADOS
So representados pelos eritrcitos, leuccitos e plaquetas (Fig. 5.3). Os elementos figurados apresentam diferentes dimenses e ocorrem em diferentes propores no sangue.

Eritrcitos
Os eritrcitos ou hemcias so os glbulos vermelhos do sangue. Nas distenses sangneas de sangue perifrico apresenta-se como um disco de formato bicncavo de 1,8m de espessura, variando de 7,5 a 8,7m, e suas di Direitos reservados EDITORA ATHENEU LTDA.

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Tabela 5.2 Elementos Figurados no Sangue Perifrico

Figurado
Eritrcitos

Dimenses
6,5 a 8m

Quantidade
3,9-5,5 milhes/L na mulher 4,1-6,0 milhes/L no homem 6.000-10.000/L 60-70% 2-4% 0-1% 20-30% 3-8% 200.000-400.000/L

Leuccitos Neutrfilo Eosinfilo Basfilo Linfcito Moncito Plaquetas

12-15m 12-15m 12-16m 6-18m 12-20m 2-4m

menses diminuem levemente com a idade. So estruturas anucleadas que se deformam com facilidade. A sobrevida mdia das hemcias no sangue circulante de 100 a 120 dias; ao final desse perodo as suas membranas tornamse frgeis e as hemcias mais velhas so removidas da circulao. A destruio e a produo de hemcias se equilibram, no havendo anemia ou poliglobulina. A medula ssea produz hemcias continuamente para a sua renovao no sangue circulante. As hemcias no apresentam organelas e o seu citoplasma, constitudo de material denso e granular, corresponde praticamente hemoglobina, responsvel por sua acidofilia tpica. A principal funo das hemcias conter a hemoglobina, pigmento encarregado do transporte dos gases respiratrios (oxignio e gs carbnico) para todos os tecidos, o que facilitado pela forma bicncava da hemcia. A manuteno da forma do eritrcito deve-se a elementos do seu citoesqueleto, onde filamentos da protena espectrina ancoram-se membrana celular atravs de trs protenas (protena da banda 3, anquirina e protena da banda 4). A hemoglobina produzida no interior dos precursores das hemcias localizados na medula ssea, pela utilizao do ferro captado da circulao. O ferro da circulao sangnea obtido da digesto dos alimentos ingeridos e durante o processo de renovao das hemcias envelhecidas. Quando a hemoglobina est ligada ao oxignio denominada oxiemoglobina, conferindo ao sangue a sua cor caracterstica, e quando se une ao gs carbnico denominada carboxiemoglobina apresentando tonalidade mais escura e menos brilhante. A hemoglobina apresenta maior afinidade ao CO2 do que ao O2 e, quando os eritrcitos passam pelos pulmes, suas hemoglobinas se ligam ao O2 (devido sua grande concentrao nos alvolos) e, medida que eles se aproximam das clulas que esto carregadas de CO2, suas hemoglobinas liberam o O2 para se ligarem ao CO2, distribuindo o oxignio para todas as clulas do corpo. A hemoglobina formada a partir da combinao de quatro molculas, ou radicais heme, com uma protena, a globina. O radical heme um complexo metlico que contm ferro no estado ferroso e o responsvel pela cor do pig74
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mento. As molculas do oxignio combinam-se com o ferro da hemoglobina mediante ligao qumica especial, facilmente reversvel, que favorece a sua liberao nos tecidos do organismo. A globina uma protena incolor formada por dois pares de cadeias de polipeptdeos: um par chamado de polipeptdeo alfa e outro par, o polipeptdeo beta. Portanto, a molcula da hemoglobina formada pela unio de quatro polipeptdeos e quatro radicais heme. A cadeia alfa-globina (polipeptdeo alfa) constituda por um conjunto de 141 aminocidos, enquanto a cadeia betaglobina (polipeptdeo beta) inclui 146 aminocidos. Elas se renem duas a duas formando trs tipos principais de hemoglobinas. No adulto, a hemoglobina A1 (Hb A1) a principal hemoglobina, enquanto a hemoglobina A2 (Hb A2) ocorre em menor quantidade. A hemoglobina fetal (HB F) muito vida pelo oxignio e de grande importncia na vida fetal, j que o feto no tem acesso ao ar. Nos adultos, 96% da hemoglobina so normalmente Hb A1, 2% de Hb A2 e 2% de Hb F. Alm da hemoglobina encontramos uma grande quantidade da enzima anidrase carbnica, que tem a funo de catalisar a ligao entre o gs carbnico e a gua, formando o cido carbnico. Essa molcula altamente instvel, dissociando-se naturalmente em bicarbonato e hidrognio. Desta forma, o gs carbnico, que txico para a clula, transportado tambm na forma de bicarbonato. A produo de hemoglobina pelos hemocitoblastos na medula ssea depende de uma srie de fatores, inclusive da presena do ferro, obtido principalmente dos alimentos ingeridos. O organismo absorve o ferro ao nvel do duodeno e do jejuno, principalmente sob a forma no-heme (95%), sendo transportado para a medula ssea mediante combinao com a glicoprotena transferrina. O ferro, que no imediatamente usado para a produo da hemoglobina, fica armazenado no tecido hemopoitico sob a forma de ferritina. O 2,3-difosfoglicerato (2,3-DPG) um composto qumico encontrado no interior da hemcia. O 2,3-DPG ocorre no sangue em quantidades idnticas s da hemoglobina e se encontra combinado com a hemoglobina. A principal funo do 2,3-DPG reduzir a afinidade da hemoglobina pelo oxignio, facilitando a sua liberao nos tecidos.

Leuccitos
Os leuccitos ou glbulos brancos do sangue encontram-se engajados com a defesa do organismo. A denominao glbulos brancos deve-se observao macroscpica do sangue aps sua coagulao em um tubo de ensaio, devido a uma camada branca observada acima dos eritrcitos (Fig. 5.2). A vida mdia dos leuccitos circulantes de seis a oito horas; permanecendo nos tecidos cerca de dois a trs dias. So clulas nucleadas, podendo ser divididos em dois grandes grupos: Granulcitos, tambm chamados de polimorfonucleares, apresentam ncleo com vrios lbulos e contm grnulos especficos no citoplasma; Agranulcitos ou mononucleares, so clulas que no apresentam grnulos especficos citoplasmticos.
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Granulcitos
Os granulcitos apresentam ncleo com formato irregular e, de acordo com a afinidade tintorial de seus grnulos citoplasmtico, podem ser classificados de trs tipos: os neutrfilos, os eosinfilos e os basfilos.

Neutrfilos
Os neutrfilos so os leuccitos mais numerosos; possuem forma arredondada, com um ncleo que apresenta de trs a cinco lbulos unidos por pontes de cromatina (Fig. 5.3). Quando jovem, o ncleo no lobulado e a lobulao nuclear aumenta medida que a clula envelhece. Em pessoas do sexo feminino nota-se freqentemente um apndice nuclear em forma de raquete (corpsculo de Barr) que contm a cromatina sexual constituda por um cromossoma X heterocromtico (Fig. 5.4). Os neutrfilos so dotados de capacidade fagocitria e possuem numerosos grnulos no seu citoplasma. Os primeiros grnulos produzidos so os grnulos primrios ou azurfilos; depois se inicia a sntese dos grnulos especficos ou secundrios. Os grnulos azurfilos so lisossomos que contm peroxidases e enzimas hidrolticas, atuando na degradao dos componentes fagocitados. Os grnulos secundrios so menores e mais numerosos que os primeiros, contm fosfatase alcalina, lactoferrina (uma protena vida por ferro), lisozima (ataca os peptidoglicanos da parede das bactrias Gram-positivas) e outras substncias de ao bactericida capazes de formar poros na membrana das bactrias causando sua morte; e um agente bacteriosttico que impede a proliferao de bactrias. Um terceiro grnulo, o grnulo tercirio, possui a enzima colagenase, responsvel pela degradao da matriz do tecido conjuntivo permitindo o deslocamento do neutrfilo para o local de inflamao. Na circulao sangnea, os neutrfilos podem estar suspensos no plasma e circulando nos vasos sangneos (compartimento circulante) ou ligados ao endotlio, no sendo levados pela corrente sangnea (compartimento marginal).

Eosinfilos
Os eosinfilos so clulas com 12-17m de dimetro; possuem um ncleo bilobulado, sendo facilmente reconhecidos nas distenses sangneas pela presena de grnulos fortemente acidfilos (Fig. 5.3). So clulas dotadas da capacidade fagocitria com afinidade pelo complexo antgeno-anticorpo, mas a atividade microbicida menor que dos neutrfilos. Os grnulos dos eosinfilos so ovides (0,15-1,5m de comprimento e 0,31,0m de espessura) e contm um cristalide central eletrondenso circundado por uma matriz eletronluscente. No homem, o cristalide consiste em uma protena bsica principal, enzimas hidrolticas e peroxidase. Grnulos menores (0,15-1,5m) contm fosfatase cida e aril sulfatase. H evidncias de que os eosinfilos produzem substncias que inativam leucotrienos e histamina. A aril sulfatase neutraliza a ao da substncia de reao lenta (SRL), e a 76
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Neutrfilo

Eosinfilo

Basfilo

Linfcito

Moncito Fig. 5.3 Elementos figurados do sangue perifrico.

Eritrcito

histaminase atua sobre a histamina. Desta forma, os grnulos dos eosinfilos, quando liberados, impedem a vasodilatao diminuindo a reao inflamatria.

Basfilos
Os basfilos so os leuccitos menos numerosos; possuem um ncleo bilobulado, normalmente de difcil visualizao devido grande quantidade de grnulos citoplasmticos (Fig. 5.3).
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Neutrfilo jovem

Neutrfilo de meia-idade

Neutrfilo maduro

raquete

Fig. 5.4 Tipos de neutrfilos.

Os grnulos possuem enzimas hidrolticas, heparina, histamina e a substncia de reao lenta (SRL). A histamina e a SRL so agentes vasodilatadores que permitem a sada de leuccitos do sangue para o tecido conjuntivo durante a reao inflamatria. A heparina um anticoagulante que age localmente e, junto com a histamina e a SRL, auxilia a sada desses leuccitos do sangue. Na membrana dos basfilos encontramos receptores para a frao Fc da IgE produzida em resposta presena de substncias alrgicas. A ligao aos antgenos especficos da membrana promove degranulao da clula, liberando histamina e outros vasoativos, tendo como resultado a reao de hipersensibilidade imediata (anafiltica), como em algumas formas de asma, urticria e anafilaxia.

Agranulcitos
Encontramos no sangue dois tipos agranulcitos: os moncitos e os linfcitos.

Moncitos
Os moncitos so os maiores leuccitos, possuindo ncleo irregular com uma pequena reentrncia, citoplasma com numerosos grnulos pequenos e densos (lisossomos) (Fig. 5.3). Os moncitos so clulas circulantes, utilizando o sangue como veculo de transporte. Ao deixarem a medula ssea, onde so produzidos, permane78
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cem no sangue apenas por alguns dias, atravessando a parede de vasos sangneos e ganhando o tecido conjuntivo, dando origem aos macrfagos. O conjunto de clulas representado por precursores da medula ssea, moncitos circulantes e macrfagos presentes em diversos tecidos, constitui o sistema macrofgico-monocitrio (sistema mononuclear fagocitrio, SMF).

Linfcitos
Os linfcitos so as principais clulas do sistema imune. Possuem ncleos esfricos, ligeiramente endentados, que ocupam quase todo o citoplasma da clula (Fig. 5.3). Nesse citoplasma encontramos principalmente polirribossomas livres e poucas mitocndrias. Eventualmente, podem ser identificados lisossomas pequenos e densos que correspondem aos grnulos azurfilos. Existem dois tipos funcionais de leuccitos: os linfcitos T e os linfcitos B. Os linfcitos B so assim denominados porque foram descritos pela primeira vez na bolsa de Fabrcio das aves. Ambos podem ser produzidos nos tecidos linfides e na medula ssea. Os linfcitos B tm um tempo varivel de vida e, quando diferenciados em plasmcitos, participam na produo de anticorpos. Os linfcitos T so assim denominados porque completam a sua maturao no timo. So de vida longa e participam ativamente dos mecanismos relacionados com a imunidade celular. Receptores existentes na sua superfcie so capazes de identificar antgenos especficos. Ao reconhecer um antgeno, os linfcitos T estimulam a diferenciao dos linfcitos B visando produo de anticorpos especficos para aquele antgeno.

Plaquetas
As plaquetas, tambm chamadas trombcitos, no so clulas, mas sim corpsculos ou fragmentos celulares, formados a partir de uma clula gigante chamada megacaricito residente na medula ssea. A fragmentao do citoplasma de megacaricitos resulta na formao das plaquetas, que so lanadas na circulao sangnea sob a forma de corpsculos ligeiramente arredondados (Fig. 5.5). As plaquetas no contm grnulos no seu interior e seu dimetro mdio de 1,5 a 4m, com espessura de 0,5 a 1m. Quando ativadas, as plaquetas intumescem substancialmente e podem atingir dimetros entre 25 e 50m. A estrutura interna das plaquetas bastante complexa e adaptada s funes que exercem. Envolvendo as plaquetas existe uma camada mais externa chamada glicoclice, rica em glicoprotenas. Esta camada contm receptores para diversos agentes capazes de ativar as plaquetas. Algumas desta glicoprotenas so importantes para as funes de adesividade e agregao plaquetria. Abaixo da camada glicoprotica existe a membrana plaquetria. Internamente existe um conjunto de filamentos especializados, prximos de um sistema canalicular, com diversos canalculos que penetram no interior das plaquetas, chamado sistema canalicular aberto. O sistema canalicular aberto aumenta bastante a superfcie da plaqueta e permite a expulso de
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produtos secretados por suas organelas para o plasma, permitindo ainda a fcil penetrao de substncias do plasma para o interior das plaquetas. O citoplasma das plaquetas de consistncia viscosa, contendo numerosas organelas e grnulos. Microfilamentos e tbulos densos, que contm actina e miosina, contribuem para manter a forma discide, alm de participar na contrao das plaquetas quando estimuladas pelo aumento do clcio no seu interior. A contrao das plaquetas o resultado da movimentao dos microfilamentos, comprimindo as organelas e grnulos citoplasmticos, liberando seu contedo para o plasma atravs do sistema canalicular aberto. Este processo representa um sofisticado mecanismo de liberao de substncias produzidas pelas plaquetas. As organelas e os grnulos no interior do citoplasma so de vrios tipos; as principais so as mitocndrias, os grnulos densos e os grnulos alfa. Os grnulos alfa contm o fator plaquetrio IV, que participa dos fenmenos da coagulao do sangue e contm ainda betatromboglobulina e fibrinognio. Os grnulos densos so reservas de difosfato de adenosina (ADP), trifosfato de adenosina (ATP), clcio e serotonina. Outros grnulos do citoplasma contm ainda catalase, fosfatase cida e outras enzimas. O sistema tubular denso contm ciclooxigenase, enzima que converte o cido araquidnico da membrana em prostaglandinas e em tromboxano A2, que a substncia vasoconstritora mais potente do organismo, cujo metablito o tromboxano B2. A mitocndria a organela responsvel pela produo e pelo armazenamento de energia da plaqueta, onde o ATP (trifosfato de adenosina) produzido e armazenado. Outros grnulos do citoplasma contm diversas enzimas, como a fosfatase cida e a glicuronidase. As plaquetas so fundamentais aos processos de interrupo da perda sangnea (hemostasia), na formao e na retrao do cogulo. Sua atuao depende das propriedades de adeso e agregao. Os autores fornecem vrias explicaes sobre o mecanismo de agregao, adeso plaquetria e a coagulao sangnea. A superfcie externa das plaquetas tem cargas eltricas negativas, iguais s do endotlio dos vasos. As cargas eltricas iguais tendem a se repelir; por esta razo, as plaquetas tendem a permanecer intacta na circulao, sem aderirem ao endotlio. Quando esse equilbrio eltrico se rompe, por leso do endotlio ou por contato com qual-

Megacaricito Plaquetas Fig. 5.5 Megacaricito e a formao de plaquetas.

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quer superfcie diferente do endotlio vascular, as plaquetas imediatamente aderem superfcie com que entram em contato. Esta a propriedade de adesividade. No estado normal. o endotlio intacto tambm produz certas substncias que inibem a agregao plaquetria, como a prostaciclina e o xido ntrico (NO2). O endotlio tambm bloqueia a coagulao pela presena de trombomodulina e uma substncia semelhante heparina presente na membrana das clulas endoteliais, que inativam fatores especficos da coagulao. Quando um vaso sangneo seccionado, ou sua superfcie endotelial lesada ou alterada, as plaquetas aderem ao ponto danificado. Ao contato com superfcies no-endoteliais as plaquetas intumescem, criam diversos prolongamentos na sua superfcie e aderem entre si, atraindo novas plaquetas prximas para aderir ao grupo inicial, alm de aprisionar hemcias e leuccitos, formando-se o chamado grumo plaquetrio, que originaro o futuro cogulo. Esta a propriedade de agregao. Existem diversas substncias que estimulam a agregao das plaquetas, como: ADP (difosfato de adenosina), adrenalina, vasopressina, serotonina, cido araquidnico, tromboxano A2. Algumas dessas substncias so liberadas pelas prprias plaquetas, para favorecer a agregao das demais. A ativao das plaquetas tambm pode ocorrer em resposta a estmulos fsicos. Uma vez ativadas, a seqncia de fenmenos (adesividade, aglutinao e formao de grumos) a mesma, qualquer que seja a natureza do estmulo inicial. O processo de coagulao se inicia com a leso das clulas endoteliais, que leva liberao de substncias (fator de Von Willebrand e tromboplastina tissular) e a interrupo da produo de inibidores da coagulao e da agregao plaquetria. A clula endotelial tambm produz a endotelina, um potente vasoconstritor que, ao reduzir o calibre do vaso, impede a perda de sangue. As plaquetas aderem ao colgeno subendotelial e, na presena do fator de Willebrand, liberam o contedo de seus grnulos, aderindo-se umas s outras. Ao conjunto destes eventos denomina-se ativao plaquetria. A liberao de ADP e tromboplastina estimula a aderncia de plaquetas circulantes s plaquetas associadas ao colgeno e degranulao. O cido araquidnico, que formado na membrana da plaqueta ativada, convertido a tromboxano A2. As plaquetas agregadas formam um pequeno trombo que impede a sada de sangue do vaso. Tanto a tromboplastina tissular, produzida pelo endotlio, quanto a tromboplastina plaquetria agem sobre a protrombina circulante, convertendo-a em trombina. Na presena de Ca2+, a trombina converte o fibrinognio em fibrina. Na malha de fibrina, os elementos figurados do sangue ficam retidos e este conjunto de elementos forma o cogulo (trombo) (Fig. 5.6). A serotonina liberada tambm pelas plaquetas estimula a adesividade e a agregao, alm de produzir vasodilatao local. A vasodilatao acentua a difuso das plaquetas para as regies onde formaro os grumos. Atravs dos fatores III e IV liberados do seu interior, as plaquetas participam das modificaes das protenas da cascata da coagulao, para a formao do cogulo e, posteriormente, para a sua retrao com expulso do soro do seu interior. A ao de outros estmulos desencadeia um processo de alterao do estado de diversas protenas do plasma sangneo, que resulta na trans Direitos reservados EDITORA ATHENEU LTDA.

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Leso Aderncia ao colgeno subendotelial Liberao de endotelina (vaso constritor) Ativao plaquetria Tromboplastina plaquetria Clula endotelial ADP Liberao de trombosplatina tissular pelo endotlio Protrombina circulante

Plaqueta ativada cido araquidnico (membrana)

Trombina Fibrinognio Fibrina + elementos figurados

Tromboxano A 2 (vasoconstritor) Agregao plaquetria

Cogulo

Fig. 5.6 Seqncia de eventos associados coagulao sangnea.

formao do fibrinognio em fibrina. Este fenmeno da coagulao do sangue ou formao do cogulo sangneo o papel fundamental das plaquetas. Existe um grande interesse no estudo de substncias capazes de inibir temporariamente, e por curto prazo, a atividade das plaquetas, com o objetivo de impedir a ativao, adeso e agregao. A aspirina e o dipiridamol so substncias que tm um efeito inibidor da agregao plaquetria no ser humano. Uma substncia que tem sido experimentada recentemente com essa finalidade a aprotinina. Diversos estudos tm demonstrado inibio temporria e curta da adesividade plaquetria pela aprotinina, preservando um nmero maior de plaquetas, principalmente durante certos procedimentos de cirurgia cardaca com circulao extracorprea. Contudo, essa substncia produz efeitos colaterais importantes, como hipotenso arterial, alm de ser destruda muito rapidamente no sangue.

T EMPO

DE

V IDA

DOS

E LEMENTOS S ANGNEOS

As hemcias vivem em mdia 120 dias, sendo posteriormente fagocitadas pelos macrfagos presentes no bao e no fgado ou na prpria medula ssea. Os granulcitos vivem cerca de dois a trs dias e, aps exercerem suas funes no compartimento extravascular, so fagocitados por macrfagos teciduais. Os linfcitos B vivem cerca de trs a quatro meses, enquanto os linfcitos T podem durar cerca de 20 a 30 anos. As plaquetas tm uma sobrevida mdia de dez dias. 82
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H EMATOPOIESE
Hemopoiese, hematopoese ou hematopoiese so termos utilizados para denotar a formao (gnese, poiese) dos elementos figurados do sangue (hemo), isto , clulas (leuccitos) e corpsculos sangneos (hemcias e plaquetas). A maioria das clulas sangneas tem vida relativamente curta e incapaz de realizar a diviso celular; por esta razo precisam ser constantemente produzidas. A hematopoiese se inicia no embrio por volta do segundo ms, prolongando-se por toda a vida do indivduo. Durante o desenvolvimento intrauterino (fase intra-uternica da hematopoiese), no mesnquima da parede do saco vitelino, inicia a produo das clulas sangneas e, medida que os rgos vo se definindo estruturalmente, a hematopoiese passa a ocorre no fgado, no bao, no timo e, por ltimo, na medula ssea. O tecido hematopoitico, derivado do mesnquima, dividido em tecido mielide, que constitui a medula ssea vermelha e em tecido linfide, encontrado nos ndulos linfides, linfonodos, tonsilas, bao e timo. O tecido mielide responsvel pela produo da maioria dos elementos figurados do sangue, produo e destruio de hemcias (hemocaterese) e armazenamento de ferro. O tecido linfide responsvel pela proliferao de linfcitos B e T. Os linfcitos B so produzidos na medula ssea e migram para os rgos linfides perifricos, onde proliferam sob estmulo antignico. Linfcitos ainda no-diferenciados, ao penetrarem no timo, se diferenciam em linfcitos T e, como os linfcitos B, ocuparo stios especficos nos rgos linfides. Assim, a hematopoiese compreende uma seqncia de eventos em vrios compartimentos e subcompartimentos com estgios definidos na maturao dos elementos figurados do sangue. Nos compartimentos mitticos notamse clulas jovens em ativa mitose; enquanto nos compartimentos psmitticos (ou de distribuio) as clulas maduras no sofrem mais diviso celular. O tempo de gerao para um determinado tipo celular igual em sucessivos compartimentos, havendo uma correlao entre o compartimento de produo e o compartimento de distribuio; ou seja, a circulao sangnea reflete a produo medular.

Fases da Hematopoiese
Considerando as fases de formao de clulas sangneas, a hematopoiese pode ser dividida em fase pr-natal e fase ps-natal. Ambas as fases podem ocorre em rgos linfides, no fgado (hematopoiese extramedular) e na medula ssea vermelha (hematopoiese medular).

Fase Extramedular da Hematopoiese


Durante a terceira semana da vida embrionria ocorre a formao dos vasos sangneos (angiognese). Os angioblastos (clulas formadoras de vasos derivadas das clulas mesenquimais) se agregam formando grupos de clulas
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as ilhotas sangneas no mesnquima intra-embrionrio do saco vitelino (fase mesoblstica ou pr-heptica ou primordial). No interior destas ilhotas, formam-se pequenos espaos que confluem para formar pequenas cavidades. Os angioblastos voltados para a cavidade se achatam e originam as clulas endoteliais. As cavidades com revestimento de clulas endoteliais se fundem, formando os primrdios dos vasos sangneos. Ao final da terceira semana, a partir das clulas endoteliais, formam-se as primeiras clulas sangneas (hemocitoblastos), consideradas as primeiras clulas-fonte hemopoitica (stem cells, no ingls). No final do primeiro ms, o embrio possui um sistema vascular e um corao rudimentar; mas, neste perodo o sangue ainda no contm nem leuccitos nem plaquetas. Na fase mesoblstica da hematopoiese, quase todas as clulas formadas so eritrcitos nucleados. Durante o segundo ms de vida, algumas clulas migram para o fgado, que passa a ser o principal local de formao eritropoitica fetal (fase heptica da hematopoiese: do segundo ao sexto ms). No segundo ms tambm surgem os leuccitos granulcitos e os megacaricitos ao longo dos sinusides do fgado. A partir do terceiro ms, alm do fgado, os linfonodos, o timo e o bao passam a contribuir na formao de clulas do sangue (fase hepato-esplnica-tmica da hematopoiese). Por volta da quarta e quinta semana, com o aparecimento dos centros de ossificao na cartilagem dos ossos longos, se inicia a fase medular-linfide (ou definitiva), que se sobrepe fase anteriormente citada. A clavcula o primeiro osso a revelar atividade hemopoitica e sua medula inicia sua atividade entre o segundo e o terceiro ms de vida fetal; mas no quarto ms de vida intra-uterina esta atividade torna-se bastante significativa. A hematopoiese no fgado e bao diminui medida que na medula ssea se estabelece e elabora a maior parte das clulas do sangue. Em vertebrados no-mamferos, outros rgos apresentam tecido hematopoitico, como o bao, a bursa de Fabricius das aves (um divertculo que se estende dorsalmente a partir da cloaca e que produz linfcitos B), o tifilosolo das lampreias (um dobramento do mesentrio na poro ventral do tubo digestivo), as gnadas em elasmobrnquios e peixes pulmonados (onde ocorre a granulopoiese), o fgado de telesteos, de anfbios e de rpteis (granulopoiese) e os rins de alguns peixes telesteos (hemopoiese).

Fase Medular da Hematopoiese


Em torno do quinto ms do perodo fetal, com o incio da formao dos ossos, os espaos medulares tornam-se importantes fontes de elementos sangneos e a medula ssea fetal inicia a produo dos leuccitos (granulopoiese) e das plaquetas (megacariopoiese); enquanto a produo de eritrcitos pela medula ssea se inicia por volta do stimo ms. Assim, a fase medular se inicia no sexto ms e propaga-se at a idade adulta. Na puberdade, os principais ossos a apresentar medula hematognica (medula vermelha) so os ossos da base do crnio, o esterno, as vrtebras, os ilacos, as costelas, as cabeas do mero e do fmur. Contudo, 50% dos espaos so ocupados por medula amarela, isto , no-hematognica. 84
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A medula ssea pode ser considerada um rgo constitudo por diferentes tecidos, estando dividida em compartimentos: compartimento vascular (representada pelas artrias, veias e capilares sinusides) e compartimento hematopoitico (com estroma de tecido reticular e clulas livres, alm de clulas adiposas). Distinguem-se dois tipos de medula: a medula ssea amarela, constituda principalmente por tecido adiposo; e a medula ssea vermelha ativa na hematopoiese. A medula ssea vermelha formada por material com consistncia semelhante a uma gelia e est localizada entre as trabculas sseas do osso esponjoso e sustentada por rede de fibras e clulas reticulares, sendo suprida por uma artria nutridora principal e arterolas terminais. O sangue chega medula atravs de capilares sinusides dirigindo-se a um sinuside central que contm uma lmina basal permevel e clulas reticulares adventiciais, cujos prolongamentos formam uma malha sobre a qual repousam as clulas sangneas. Na organizao tecidual da medula observa-se que clulas da linhagem eritroctica (ilhotas eritroblsticas) ocupam os espaos centrais da medula, estando circundadas por um histicito central a clula auxiliar, que fagocita o material nuclear extrusado pelos normoblastos em maturao, reciclando o ferro necessrio estabilizao da hemoglobina. As clulas das linhagens leucocticas (granuloctica, monoctica, linfoctica) tm uma distribuio mais difusa; sua produo se inicia nas proximidades do limite entre o osso recm-formado e o tecido medular (juno osteide-medula). A linhagem megacarioctica se desenvolve junto aos sinusides, liberando as plaquetas diretamente no interior da corrente sangnea. O primeiro grupo de animais a apresentar tecido mielide envolvido com a produo de clulas leucocticas foi os anuros (sapos, rs e pererecas). Depois nos amniotas, o tecido mielide est envolvido com a granulopoiese e a eritropoiese. No adulto, se algum estresse afetar o componente medular, a hematopoiese extramedular poder funcionar como um mecanismo compensatrio.

Teorias da Hematopoiese
Existem trs teorias. A Teoria Monofiltica a mais aceita, e admite que o precursor mais jovem capaz de se diferenciar em qualquer tipo de elemento figurado do sangue uma clula-fonte comum nica o hemocitoblasto. A Teoria Difiltica (ou Polifiltica Dualista) admite a existncia de dois tipos de clulas precursoras: um leuccito primitivo capaz de produzir granulcitos (linfcitos e moncitos); e uma clula endotelial que reveste sinusides colapsado, capaz de produzir eritrcitos e megacaricitos. A Teoria Polifiltica ou Polifiltica Completa reconhece uma clula-fonte capaz de auto-replicao e/ou diferenciao, mas sendo diferente para cada tipo de elemento figurado. Com base na Teoria Monofiltica, as ilhotas de clulas sangneas em formao (CFU= Unidades Formadoras de Colnias) e em diferenciao podem ser agrupadas em categorias gerais:
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Clula-fonte (Stem cell) Pluripotencial ou Totipotencial


A clula-fonte (hemocitoblasto), localizada na medula ssea, tem a capacidade de se diferenciar em qualquer tipo de elemento figurado do sangue. Em humanos adultos, a primeira clula-fonte reportada foi a hematopoitica (HSC = clula fonte hematopoitica). Esta clula lembra linfcitos grandes, possuindo ncleo indiferenciado com cromatina densa e citoplasma basfilo devido presena de muitos ribossomas. de vida longa, capaz de auto-renovao ilimitada ou prolongada, de extensiva proliferao por diviso mittica, originando clulas-fonte semelhantes (PHSC = clula-fonte hemopoitica pluripotentes) que garantiro a sua prpria manuteno; e clulas multipotenciais (MHSC = clulas-fonte hemopoiticas multipotentes), fonte de elementos figurados do sangue. H duas populaes de clulas hematopoticas multipotentes (MHSC): clulas que constituem a unidade formadora de colnia no bao (CFU-S) e clulas que constituem a unidade formadora de colnia linfide (CFU-L). As clulas CFU-S so precursoras das clulas mielides (eritrcito, granulcitos, moncitos e plaquetas), enquanto as clulas CFU-L so precursoras das clulas linfides (clulas T e clulas B) (Fig. 5.7).

Clulas Progenitoras Restritas


O destino de vrios progenitores celulares restrito e as clulas no so auto-renovveis, formando-se clulas progenitoras da linhagem mielide (CFU-HC) e clulas progenitoras da linhagem linfide (CFU-L); depois surgem as clulas progenitoras uni ou bipotentes e, finalmente, as clulas precursoras especficas, as primeiras clulas a apresentar morfologia distinta para cada clula sangnea (eritroblasto, megacarioblasto, monoblasto, pr-mielcito). A proliferao e a diferenciao de clulas progenitoras restritas esto sob controle de fatores reguladores especficos para cada linhagem celular.

Clula-fonte multipotentes (auto-renovveis) Clulas progenitoras em diferenciao

CFU-S (precursores das culas mielides)

CFU-L (precursores das culas linfides)

Eritrcito

Granulcito

Moncito

Plaqueta

Linfcito T

Linfcito B

Elementos funcionais

Fig. 5.7 Diferenciao dos elementos do sangue a partir de clulas-fonte.

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E LEMENTOS F IGURADOS
Nos mamferos, os elementos figurados encontrados no sangue incluem clulas maduras, representadas pelos granulcitos (neutrfilos, eosinfilos e basfilos) e pelos agranulcitos (moncitos e linfcitos), incluindo os corpsculos (hemcias e plaquetas). Nos vertebrados no-mamferos, os corpsculos so verdadeiras clulas possuidoras de ncleo, sendo nomeados trombcitos.

Citocinas Hematopoiticas
Citocinas so fatores solveis de pequeno peso molecular, liberadas por clulas, que atuam na comunicao celular, alm de influenciarem a funo de outras clulas atravs de receptores especficos de superfcie, cuja produo regulada e no constitutiva. Cada citocina produz vrios efeitos em diferentes clulas, sendo esta propriedade denominada pleiotropia. As citocinas podem agir em conjunto para alcanar um efeito maior do que a soma de suas aes individuais, sendo esta propriedade conhecida como sinergismo. As citocinas tambm podem apresentar um efeito autcrino, parcrino ou mesmo endcrino, podendo induzir a liberao de outras citocinas. Aps a ligao da citocina ao seu receptor da superfcie da clula, o conjunto internalizado. A internalizao do complexo receptor-citocina atua como um mecanismo de feedback. H uma rede multignica de citocinas incluindo reguladores positivos (CSF = factor estimulador de colnia), interleucinas (IL) e reguladores negativos (TGF = fator de crescimento tumoral). Citocinas hemopoiticas ou linfopoiticas foram identificadas quimicamente e seus genes clonados e seqenciados. A maioria das citocinas produzida por clulas do estroma medular, como clulas endoteliais, fibroblastos, macrfagos, linfcitos T ativados e pelo mesngio extraglomerular peritubular (eritropoetina).

Linhagens Hematopoiticas Eritropoiese


Corresponde formao das hemcias ou eritrcitos do sangue, que, no homem adulto, ocorre exclusivamente na medula ssea. Durante este processo verifica-se reduo do tamanho das clulas, reduo da basofilia (devido diminuio de ribossomas livres) e aumento da acidofilia citoplasmtica (em face da sntese de hemoglobina), condensao da cromatina e eventual perda de material nuclear e organelas, alm da perda da capacidade de proliferao. As clulas-fonte pluripotenciais precursoras dos eritrcitos apresentam dois tipos de clulas progenitoras unipotenciais: BFU-E (Burst-Forming Units = unidade de exploso de formao de eritrcitos) e CFU-E (Cell Forming Units = unidades formadoras de colnias para eritrcitos), que necessitam da presena de fatores de crescimento para a sua proliferao e diferenciao.
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Os progenitores finais e os precursores celulares das hemcias so estimulados pelo hormnio eritropoetina. A eritropoetina uma glicoprotena produzida e liberada por clulas encontradas nos rins, que estimula a remoo de hemcias envelhecidas e diferenciao dos precursores em hemcias. A diferenciao e maturao da linhagem eritroctica necessita cerca de seis dias, mas sob estresse a medula pode reduzir esse tempo para dois a trs dias.

Estgios da Eritropoiese
Ao longo do processo de diferenciao, as clulas progenitoras de eritrcitos passam por modificaes morfolgicas que caracterizam diferentes tipos celulares (Fig. 5.8). Proeritroblasto: uma clula grande (14-20m de dimetro) com ncleo esfrico e volumoso, apresentando cromatina frouxa e uniformemente distribuda, que contm dois ou mais nuclolo proeminentes. A evidente basofilia citoplasmtica devido riqueza de ribossomas livres. Eritroblasto basfilo: uma clula um pouco menor (10-18m de dimetro) com ncleo esfrico, relativamente pequeno com cromatina densa, porm o nuclolo no evidente. A basofilia citoplasmtica ainda observada; apesar de j se iniciar a sntese de hemoglobina. Eritroblasto policromatfilo: uma clula com 8-15m de dimetro, possuindo um ncleo esfrico com cromatina mais densa que ocupa cerca de 5060% da rea celular. No citoplasma observam-se reas basfilas (devido aos ribossomas) e reas acidfilas (hemoglobina). Nestes trs primeiros estgios, as clulas so capazes de proliferao, enquanto nos prximos estgios as clulas apenas se diferenciam. Eritroblasto ortocromtico, eritroblasto acidfilo ou normoblasto: uma clula com 8-12m de dimetro; o ncleo pequeno com heterocromatina em

Maturao de Precursores Eritrocticos


Proeritroblasto Eritroblasto basfilo Eritroblasto policromatfilo Eritroblasto ortocromtico Medula ssea

Reticulcito Sangue perifrico Eritrcito Fig. 5.8 Estgios da eritropoiese.

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flocos grosseiros, sendo intensamente corado. Nota-se acentuada acidofilia citoplasmtica com traos de basofilia. Neste estgio verifica-se o processo de extruso nuclear. Reticulcito (eritrcito policromatfilo): um corpsculo com 8-9m de dimetro, anucleado, que permanece na medula ssea cerca de trs dias at a sua maturao, e a sua sobrevida na circulao cerca de um dia. Verifica-se acidofilia citoplasmtica, alm de alguma basofilia remanescente devido presena de ribossomos residuais. Hemcia (eritrcito maduro): Nos humanos, como na maioria dos mamferos, so corpsculos bicncavos de 7,3-8m de dimetro, de citoplasma intensamente acidfilo apresentando uma rea central plida. Em vertebrados no-mamferos so nucleadas, de forma discide ou elptica, variando entre 2,5m e 80m de dimetro.

Granulopoiese
Refere-se formao de clulas das linhagens granuloctica. Neste processo ocorre uma reduo relativa das dimenses das clulas, acompanhado por um aumento da condensao e alterao da forma e lobulao do ncleo, com acmulo de grnulos especficos e reduo relativa de grnulos azurfilos, que so destacados pelas coloraes a base da mistura de Romanovsky. Os precursores se sucedem num processo de maturao, que dura cerca de 14 ou mais dias, apresentando mecanismo de feedback negativo, capaz de regular a liberao de granulcitos da medula, que pode envolver o hormnio leucopoietina. Nos precursores h condensao nuclear e atrofia nucleolar com segmentao do ncleo. No citoplasma ocorre a sntese de grnulos. Os grnulos primrios, azurfilos ou no-especficos (com cerca de 1m de dimetro) contm hidrolases cidas semelhantes aos lisossomas; mieloperoxidase, enzima que medeia a morte de microrganismos oxigenodependentes; defensinas, uma famlia de protenas catinicas que mediam a morte de microrganismos nooxigenodependentes. Os grnulos secundrios ou especficos (0,5m de dimetro) contm receptores de adeso, receptores quimiotticos e receptores do complemento. O contedo dos grnulos varia de acordo com o tipo celular, podendo conter grnulos de gelatinase (uma enzima colagenoltica) e vesculas de secreo (com fosfatase alcalina, receptores para peptdios quimiotticos, protenas de adeso Mac-1). Em resposta a um processo inflamatrio, os grnulos de gelatinase e as vesculas secretoras se fundem membrana, e seu contedo liberado, ou pelo menos exposto, ao meio externo e a enzima atua em elementos da matriz extracelular. Durante os processos de fagocitose o contedo dos grnulos azurfilos e dos grnulos especficos exocitado.

Estgios da Granulopoise
A clula precursora passa por diferentes estgios de diferenciao (Fig. 5.9).
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Mieloblasto: uma clula esfrica (15-21m de dimetro), ncleo esfrico com dois ou mais nuclolos, com delicada rede de cromatina que se cora no tom de azul-avermelhado e ocupa a maior parte da clula; o citoplasma desprovido de grnulos cora-se em azul-plido. Promielcito: apresenta dimenses prximas s do mieloblasto. uma clula esfrica ou oval (18-30m de dimetro) com ncleo oval ou reniforme, nuclolo ainda visvel e cromatina condensada; o citoplasma mais abundante e apresenta alguns grnulos azurfilos (grnulos primrios de 0,1 a 0,25m de dimetro); Mielcito: uma clula com 16-25m de dimetro, com ncleo oval ou achatado em uma face, que ocupa cerca de 50% da clula, apresentando cromatina densa em grumos que se cora em prpura-avermelhada; citoplasma cinzaazulado plido encontra-se repleto por grnulos especficos (grnulos secundrios: neutrfilos, eosinfilos ou basfilos). Metamielcito (neutrfilo, eosinfilo e basfilo): uma clula com 10-16m de dimetro com ncleo reniforme (endentado) ou oval, cromatina grosseira, densamente compactada e nuclolo ausente; grnulos especficos predominam no citoplasma. Formas em basto ou bastonete (neutrfilo, eosinfilo e basfilo): so clulas ligeiramente menores (10-15m de dimetro) com ncleo em forma de U, curvado ou enrolado exibindo grosseiros grumos de cromatina; o citoplasma preenchido por grnulos especficos. Formas segmentadas ou granulcitos maduros (neutrfilos, eosinfilos e basfilos): a forma funcional da clula (com 8-15m de dimetro) com ncleo nico que pode apresentar duas a cinco lobulaes interligadas por filamentos de cromatina; o citoplasma repleto de grnulos especficos.

Maturao de Precursores Granulocticos


Mieloblasto Pr-mielcito Mielcito Medula ssea Metamielcito Fase de proliferao

Formas em basto

Granulcitos maduros Sangue perifrico Neutrfilo Eosinfilo Basfilo

Fig. 5.9 Clulas da linhagem granuloctica.

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Polimorfonuclear neutrfilo: o ncleo polissegmentado, com citoplasma cinza-rosado devido presena de grnulos especficos extremamente pequenos e de difcil individualizao ao microscpio de luz. Segmentado eosinfilo: apresenta dois a trs lbulos nucleares, com citoplasma laranja-brilhante devido riqueza de grandes grnulos acidfilos. Segmentado basfilo: com dois a trs lbulos nucleares, apresenta citoplasma prpura-azulado em face dos grandes grnulos basfilos. Os neutrfilos so os granulcitos mais abundantes, localizando-se em diversos compartimentos anatmicos e funcionais denominados compartimento de formao, de reserva, circulante e marginal. O compartimento medular de formao onde novos neutrfilos so produzidos e sofrem seu processo de maturao. O compartimento medular de reserva contm clulas maduras que so mantidas por intervalos de tempo varivel antes de ganharem a circulao perifrica. O compartimento circulante representado pelos neutrfilos suspensos no sangue perifrico. H ainda o compartimento marginal representado pelos neutrfilos que, apesar de se encontrarem na corrente sangnea, no circulam, encontrando-se aderidos ao endotlio.

Monocitopoiese
Refere-se formao de clulas da linhagem monoctica (Fig. 5.10). Os moncitos so derivados de clulas-fonte restritas bipotenciais (CFU-NM = Unidades Formadoras de Colnias de Neutrfilos e Moncitos), do mesmo pool dos neutrfilos. Os precursores (monoblastos, promoncitos) so estimulados pelo M-CSF (Fator eStimulante de Colnias de Moncitos), no sendo normalmente observados na medula ssea. Em condies especiais, como em culturas de clulas, podem ser reconhecidos por meio dos marcadores de proliferao. A monocitopoiese dura cerca de 55 horas e, durante este tempo, notamse algumas alteraes, como a reduo de volume e a formao da endentao nuclear, ocorrendo ainda uma intensa formao de grnulos azurfilos (lisos-

Maturao de Precursores Moncitos

Monoblasto Medula ssea Pr-moncito

Moncito

Sangue perifrico

Fig. 5.10 Clulas da linhagem monoctica.

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somas). A clula madura capaz de proliferar quando exposta a fatores de crescimento; mas, aparentemente, esta proliferao no contribui para aumento significativo da populao tecidual em condies fisiolgicas.

Estgios da Monocitopoiese
As clulas passam por diversos estgios de diferenciao, apresentando diferentes morfologias e que esto listadas abaixo. Monoblasto: de difcil caracterizao na medula ssea e sua existncia ainda um assunto controverso. Promoncito: apresenta cerca de 20m de dimetro, ncleo com cromatina frouxa e o citoplasma basfilo. Moncito: uma grande clula com 10-20m de dimetro, apresentando ncleo em forma de ferradura ou de rim com cromatina uniforme, porm menos densa que a do linfcito, porm nenhum nuclolo visvel; citoplasma abundante de colorao cinza-azulado plido com numerosos e delicados grnulos azurfilos, que so lisossomas.

Linfocitopoiese
a formao de clulas da linhagem linfoctica. Os linfcitos originam-se nos rgos linfides a partir de clulas oriundas da medula ssea (clula-tronco multipotencial), que originam duas clulas progenitoras: os progenitores CFU-TL (originam os linfcitos T: T1 e T2), CFU-TB (originam os linfcitos B) e CFU-NK (originam as clulas natural killer, capazes de lisar clulas infectadas por vrus e clulas tumoriais). O linfoblasto a maior clula da linhagem linfoctica, apresentando citoplasma basfilo sem granulaes azurfilas. As citocinas IL-1 regulam linfcitos T; e neste processo as evidncias morfolgicas na diferenciao no so marcantes, ocorrendo reduo em tamanho e condensao da cromatina nuclear. A inverso na relao ncleo-citoplasma torna o ncleo proeminente e o citoplasma como um delgado halo em torno do mesmo. No se observa distino morfolgica entre o linfcito T e o linfcito B. A formao, a diferenciao e a maturao de linfcitos B ocorrem na medula ssea, porm a diferenciao e a maturao de linfcitos T se realiza no timo; depois, as clulas migram para rgos linfides secundrios como o bao, os linfonodos, os ndulos isolados e, nas aves, para a bursa de Fabricius. Nos mamferos adultos, a maioria dos linfcitos oriunda de linfcitos preexistentes no interior do tecido linfide, os quais respondem invaso de antgenos estranhos.

Estgios da Linfopoiese
At se formar o linfcito maduro, sua clula precursora passa por estgios morfologicamente caracterizados pelos linfoblastos, prolinfcito e linfcitos. O linfoblasto a maior clula da linhagem; o prolinfcito, menor que a anterior e os linfcitos, onde pode se observar dois tipos: 92
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Linfcito no-ativado apresenta ncleo esfrico ou oval ou levemente endentado, com cromatina densa e nuclolo raramente distinto; o citoplasma de colorao azul-plida e translcido, podendo conter grnulos azurfilos (prpura). Este tipo celular pode ser observado como um pequeno linfcito, com 7,3-10m de dimetro, com citoplasma muito escasso, visvel apenas como um delegado anel perifrico; ou como um linfcito mdio ou um linfcito grande, com 10-14m de dimetro e citoplasma muito abundante; Linfcito ativado ou reativo pouco freqente em pessoas sadias, mas ocasionalmente pode ser observado como uma clula volumosa (10-20m de dimetro); o ncleo apresenta cromatina frouxa de aspecto reticulado e o citoplasma exibe intensa basofilia (retculo endoplasmtico granular muito desenvolvido).

Megacariocitopoiese ou Trombopoiese
Compreende a formao de clulas da linhagem megacarioctica ou tromboctica. Os progenitores da linhagem so BFU-Mk (Burst-Forming Units = unidade de exploso de formao de Megacaricitos) e CFU-Mk (Cell Forming Units = unidades formadoras de colnias para Megacaricitos), que so regulados pela citocina trombopoietina. Neste processo, geralmente ocorre a maturao das clulas aps completa amplificao (Mk-1), que representada marcadamente pela lobulao nuclear. No h correlao entre o nmero de lbulos e a ploidia, e nem h clara distino entre o tamanho e a maturao celular, uma vez que clulas 8N, 16N, 32N podem formar plaquetas.

Estgios da Trombopoiese
Os precursores das plaquetas seguem o seguinte estadiamento: Megacarioblasto: no usualmente encontrado. uma clula com 15-30m de dimetro, ncleo nico com delicado padro cromatnico e diversos nuclolos; o citoplasma basfilo de aspecto vtreo. Mk 1, megacaricito basfilo, megacaricito linfide ou promegacaricito: representa 15% das clulas do pool, sendo clulas gigantes poliplides (4N-64N) com 20-40m de dimetro capaz de sofrer mltiplas divises mitticas sem diviso citoplasmtica (endomitose); o ncleo bilobulado com nuclolos visveis; o citoplasma basfilo claro de difusa aparncia granular devido ao grande nmero de ribossomas; o nmero de centrolos correspondente ploidia celular. Mk 2 ou megacaricito granuloso: 65% das clulas do pool so clulas gigantes com 50-80m de dimetro, apresentando ncleo endentado de forma irregular com 4 a 16 lobulaes, cromatina densa perifrica e nuclolos pequenos; o citoplasma exibe granulaes secundrias vermelho-vinhosa, em face da reduo do nmero de ribossomas. Invaginaes da membrana plasmtica na periferia celular podem ser visualizadas. Mk 3 ou megacaricito formador de plaquetas ou megacaricito tardio: representa 20% das clulas do pool com 50-100m de dimetro, apresentando complexa lobulao nuclear (8-16 lbulos) e ncleo denso de pequenas
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dimenses. H uma evidente demarcao do sistema de membranas, onde invaginaes da membrana do megacaricito formam delicados canais preenchidos por glicoprotenas, com aspecto de grnulos, que se anastomosam e dividem o citoplasma do megacaricito em territrios citoplasmticos. O resultado desta anastomose a fragmentao que ocorre ao longo desses canais, com eliminao de material citoplasmtico como plaquetas. No citoplasma h abundantes monmeros de tubulina e actinomiosina, na proporo de 100:1 de actina/miosina. O megacaricito formador de plaquetas libera suas plaquetas dentro de poucas horas (menos que 12 horas). A clula se aproxima do sinuside central, alinhando-se ao endotlio, e emite expanses citoplasmticas em fita que representam plaquetas conectadas, sendo lanadas individualizadas no interior da corrente sangnea. Plaqueta: corpsculo com dimetro que varia de 2,5 a 4m, sendo anucleado nos mamferos, contm grnulos azurfilos e grnulos secundrios. Os grnulos secundrios podem ser do tipo alfa (fatores de coagulao e fator mitognico), beta (serotonina, um potente vasoconstritor) e denso (ADP e clcio). O bao acumula, em condies normais, 1/3 do total de plaquetas do sangue. O trombcito a denominao conferida s plaquetas nucleadas de outros vertebrados, apresentando-se nucleado.

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