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GUIA DOS MÉTODOS DE

REFERÊNCIA

MICROBIOLOGIA PARA COSMÉTICOS

*Disponíveis no Brasil os meios desidratados.


“BIOKAR Diagnóstico coloca o seu conhecimento à sua disposição para fornecer
soluções simples e rápidas para atender suas necessidades.

Os laboratórios de microbiologia devem obedecer os critérios regulamentares que estão


em constante evolução, e é por isso que nós oferecemos este guia de métodos de
referência para ajudá-lo diariamente na aplicação das normas aos seus produtos
cosméticos.”

SUMÁRIO:

Microrganismos totais:

Leveduras e fungos Contagem NF EN ISO 16212 T75-608 Página 4-5


Bactérias aeróbicas Contagem e detecção NF EN ISO 21149 T75-602 Página 6-7

Identificação dos Microrganismos:

Candida albicans Detecção NF EN ISO 16212 T75-608 Página 4-5


Escherichia coli Detecção NF EN ISO 16212 T75-608 Página 4-5
Pseudomonas aeruginosa Detecção NF EN ISO 16212 T75-608 Página 4-5
Staphylococcus aureus Detecção NF EN ISO 16212 T75-608 Página 4-5

ANEXOS:
Anexo A: Protocolo de preparação dos meios de referência.
Anexo B: Outras normas de microbiologia dos produtos cosméticos.
NF EN ISO 18415: 2011-08. Detecção de microrganismos específicos e não específicos.
NF EN ISO 11930: 2012-06. Avaliação da proteção antimicrobiana de um produto cosmético.
Anexo C: Lista de produtos.

Para maiores informações, entre em contato com a gente.

*Disponíveis no Brasil os meios desidratados.


NF EN ISO 16212
T75-608 Contagem de leveduras e fungos
(Agosto 2011)

Princípios: - Semeadura da amostra na superfície ou profundidade, ou filtração por


membrana e transferência para o meio de cultura (ágar).
- Incubação à 25,0 ± 2,5ºC por 3 à 5 dias. (1)
- Contagem do número de Unidades Formadoras de Colônias (UFC) e do
número de leveduras e fungos por mL ou por g de produto.

Meio de Cultura BIOKAR Diagnóstico Conformidade


Meio com peptona de caseína, - -
lecitina de soja e polissorbato 20
(caldo SCDLP20) Caldo Eugon LT 100
BK068HA – frasco 500g
Diluente BM00608 – 50 tubos 9 mL
neutralizante Caldo Eugon LT100 Total
BM17508 – 50 tubos 9 mL + contas
de vidro
BM04308 – 10 flaconetes 100 mL

Diluente lecitina polissorbato (LP)


- -
Líquido A Água Peptonada Total
BM16408 - 3 embalagens de 3L
Diluentes Solução peptona tamponada Caldo peptona tamponado NaCl
(pH 7) pH 7 Parcial (2)
BK128HA – frasco 500g
Ágar Sabouraud Dextrose Ágar Sabouraud Glicose com
Cloranfenicol (SDCA) (3) Cloranfenicol
BK025HA – frasco 500g
BM17608 – 20 unidades Ø 90 mm Total
BM17708 – 120 unidades Ø 90 mm
BM17208 – 10 flaconetes 200 mL
Meio de
Cultura Ágar Batata Dextrose com Ágar Glicose Extrato de Batata
antibiótico BK095HA – frasco 500g Total
Suplemento Seletivo
Cloranfenicol 50 mg
BS02108 – 10 flaconetes

Ágar Glicose-peptona (GP) com - -


antibiótico
Diluente para Caldo Triptona Soja
a suspensão BK046HA – frasco 500g
BM00808 – 50 tubos 9 mL Total
de levedura Solução triptona cloreto de sódio BM11408 – 10 flaconetes 90 mL
BM13508 – 3 embalagens de 3L
Ágar para Ágar Sabouraud Glicose
cultura de Ágar Sabouraud Dextrose (SDA) BK025HA – frasco 500g
BM17308 - 20 unidades Ø 90 mm Total
cepa de BM17408 – 120 unidades Ø 90 mm
referência BM05308 – 10 flaconetes 200 mL
(1) Em caso de utilização de ágar sem antibiótico, incubar à 22,5 ± 2,5ºC por 5 à 7 dias.
(2) Fórmula da Farmacopéia. Contém 1g de triptona ao invés de peptona de carne e pH 7,0 ± 0,2 ao
invés de 7,1 ± 0,2.
(3) Para produtos conhecidos e não contaminados o meio será utilizado sem cloranfenicol.
Protocolo

1g ou 1mL de amostra
diluída 1/10 (a) (b)

Caldo Eugon LT 100 (c)

0,1 mL em superfície
1 mL em profundidade
Por filtração em membrana

Ágar SABOURAUD
Cloranfenicol (e)

Incubar de 3 à 5 dias
à 25,0 ± 2,5ºC

Contagem de leveduras e
fungos (f)

(a) Quantidade mínima de amostra para análise.


(b) Outras diluições podem ser feitas a partir da suspensão-mãe (utilizando o mesmo
solvente), dependendo do nível de contaminação da amostra.
(c) Outros solventes podem ser utilizados de acordo com o Parágrafo 5.4.
(d) Transferir para a membrana uma quantidade adequada de amostra (correspondente à
1g ou 1mL de produto) e colocá-la sobre o ágar.
(e) Outros meios de cultura podem ser utilizados de acordo com o Parágrafo 5.4.
(f) A contagem é geralmente realizada utilizando ao menos 2 unidades por diluição.

*Disponíveis no Brasil os meios desidratados.


NF EN ISO 21149
T75-602 Contagem e detecção de bactérias aeróbicas mesófilas
(Setembro 2009)

Princípios:
Para a contagem
- Semeadura da amostra na superfície ou profundidade, ou filtração por
membrana e transferência para o meio de cultura (ágar).
- Incubação à 32,5 ± 2,5ºC por 72 ± 6h.
- Contagem do número de Unidades Formadoras de Colônias (UFC) e do
número de bactérias aeróbicas mesófilas por mL ou por g de produto.

Para a detecção
- Enriquecimento em meio líquido não seletivo à 32,5 ± 2,5ºC por 20 horas.
- Semeadura em ágar não seletivo.
- Incubação à 32,5 ± 2,5ºC por 48 a 72h.

Meio de Cultura BIOKAR Diagnóstico Conformidade


Meio com peptona de caseína, - -
lecitina de soja e polissorbato 20
(caldo SCDLP20) Caldo Eugon LT 100
BK068HA – frasco 500g
Diluente BM00608 – 50 tubos 9 mL
neutralizante Caldo Eugon LT100 Total
BM17508 – 50 tubos 9 mL + contas
de vidro
BM04308 – 10 flaconetes 100 mL
Diluente lecitina polissorbato (LP) - -
Caldo Letheen modificado
- -

Líquido A Água Peptonada Total


BM16408 - 3 embalagens de 3L
Diluentes
Solução peptona tamponada Caldo peptona tamponado NaCl Parcial (1)
(pH 7) pH 7
BK128HA – frasco 500g

Ágar de peptona e caseína de soja Ágar Tripto-caseína de Soja


(SCDA) ou ágar tripto-caseína de BK026HA – frasco 500g
soja (TSA) BM05008 – 20 unidades Ø 90 mm
BM17808 – 120 unidades Ø 90 mm Total
BM01708 – 10 flaconetes 100 mL
Meio de BM04908 – 10 flaconetes 200 mL
Cultura para
Contagem Ágar Eugon LT 100 Ágar Eugon LT 100
BK096HA – frasco 500g Total
BM17008 – 20 unidades Ø 90 mm
BM04508 – 10 flaconetes 200 mL
Ágar LT 100
- -
Meio de peptona e caseína de soja
adicionado de ágar
- -
Caldo Eugon LT 100
Caldos de BK068HA – frasco 500g Total
Caldo Eugon LT100 BM00608 – 50 tubos 9 mL
enriqueci- BM17508 – 50 tubos 9 mL + contas
mento de vidro
BM04308 – 10 flaconetes 100 mL

- -
Caldo Letheen modificado
Meio líquido de peptona de - -
caseína de soja-lecitina-
polissorbato 80 (Caldo SCDLP 80)
- -
Caldo neutralizante D/E (caldo
neutralizante Dey/Engley)
Ágar Eugon LT 100
Meios para a Ágar Eugon LT 100 BK096HA – frasco 500g Total
BM17008 – 20 unidades Ø 90 mm
detecção por BM04508 – 10 flaconetes 200 mL
enriqueci- Meio líquido de peptona de
mento caseína de soja-lecitina- - -
polissorbato 80 (Caldo SCDLP 80)
Diluente para Caldo Triptona Soja
a suspensão Solução triptona cloreto de sódio BK046HA – frasco 500g Total
BM00808 – 50 tubos 9 mL
bacteriana BM11408 – 10 flaconetes 90 mL
BM13508 – 3 embalagens de 3L
Ágar para Ágar de peptona e caseína de soja Ágar Tripto-caseína de Soja
cultura de (SCDA) ou ágar tripto-caseína de BK026HA – frasco 500g
soja (TSA) BM05008 – 20 unidades Ø 90 mm
cepa de BM17808 – 120 unidades Ø 90 mm
Total
referência BM01708 – 10 flaconetes 100 mL
BM04908 – 10 flaconetes 200 mL
(1) Fórmula da Farmacopéia. Contém 1g de triptona ao invés de peptona de carne e pH 7,0 ± 0,2 ao invés
de 7,1 ± 0,2.

Protocolo

1g ou 1mL de amostra
diluída 1/10 (a) (b)

Caldo Eugon LT 100 (c)

0,1 mL em superfície
1 mL em profundidade
Por filtração em membrana

Ágar Tripto-caseína de soja (c) Caldo Eugon LT100 (c)

Incubar de 72 ± 6h Incubar de 48 à 72h


à 32,5 ± 2,5ºC à 32,5 ± 2,5ºC

Contagem (e) Presença/Ausência (e)


(a) Quantidade mínima de amostra para análise.
(b) Outras diluições podem ser feitas a partir da suspensão-mãe (utilizando o mesmo
solvente), dependendo do nível de contaminação da amostra.
(c) Outros solventes podem ser utilizados de acordo com o Parágrafo 5.4.
(d) Transferir para a membrana uma quantidade adequada de amostra (correspondente à
1g ou 1mL de produto) e colocá-la sobre o ágar.
(e) A contagem é geralmente realizada utilizando ao menos 2 unidades por diluição.

*Disponíveis no Brasil os meios desidratados.


NF EN ISO 18416
T75-607 Detecção de Candida albicans
(Setembro 2009)

Princípios: - Enriquecimento em meio líquido à 32,5 ± 2,5ºC de 20 à 72 horas.


- Isolamento em ágar à 32,5 ± 2,5ºC por 24 a 48h.
- Identificação por ensaios apropriados.

Meio de Cultura BIOKAR Diagnóstico Conformidade


Caldo Eugon LT100 Caldo Eugon LT 100
BK068HA – frasco 500g
BM00608 – 50 tubos 9 mL Total
BM17508 – 50 tubos 9 mL + contas
de vidro
BM04308 – 10 flaconetes 100 mL

Meio líquido digerido de caseína- Caldo Triptona Soja (TSB)


soja BK046HA – frasco 500g Total
Meios BM03008 – 50 tubos 10 mL
líquidos de BM00908 – 10 flaconetes 100 mL
enriqueci- BM17908 – 10 flaconetes 90 mL
mento Caldo Letheen modificado - -

Meio lecitina polissorbato 80


adicionado de dextrose e de - -
peptona (Caldo GPLP80)

Ágar Sabouraud Glicose com


Ágar seletivo Ágar Sabouraud Dextrose Cloranfenicol
Cloranfenicol BK025HA – frasco 500g
para o BM17608 – 20 unidades Ø 90 mm Total
isolamento BM17708 – 120 unidades Ø 90 mm
C. albicans BM17208 – 10 flaconetes 200 mL

Ágar Batata Dextrose com Ágar Glicose Extrato de Batata


antibiótico BK095HA – frasco 500g Total
Suplemento Seletivo
Cloranfenicol 50 mg
BS02108 – 10 flaconetes
Diluente para Caldo Triptona Soja
a suspensão Solução triptona cloreto de sódio BK046HA – frasco 500g Total
BM00808 – 50 tubos 9 mL
de levedura BM11408 – 10 flaconetes 90 mL
BM13508 – 3 embalagens de 3L
Ágar Sabouraud Glicose
BK025HA – frasco 500g Total
Ágar Sabouraud Dextrose (SDA) BM17308 - 20 unidades Ø 90 mm
Ágar para BM17408 – 120 unidades Ø 90 mm
validação BM05308 – 10 flaconetes 200 mL

Ágar Batata Dextrose Ágar Glicose Extrato de Batata


BK095HA – frasco 500g Total

Ágar de peptona e caseína de soja Ágar Tripto-caseína de Soja


(SCDA) ou ágar tripto-caseína de BK026HA – frasco 500g
soja (TSA) BM05008 – 20 unidades Ø 90 mm
BM17808 – 120 unidades Ø 90 mm Total
BM01708 – 10 flaconetes 100 mL
BM04908 – 10 flaconetes 200 mL
Protocolo

1g ou 1mL de amostra
diluída 1/10 (a) (b)
Caldo Eugon LT 100 (c)

0,1 mL em superfície
Incubar de 20 à 72 h
à 32,5 ± 2,5ºC

Ágar SABOURAUD
Cloranfenicol (d)

Incubar de 24 à 48 h
à 32,5 ± 2,5ºC

- Coloração de Gram

- Teste de produção de filamentos e


clamidosporos

- Cultura em ágar de farinha de


mandioca com 1% de polissorbato
80
(a) Quantidade mínima de amostra para análise.
(b) Outras diluições podem ser feitas a partir da suspensão-mãe (utilizando o mesmo
solvente), dependendo do nível de contaminação da amostra.
(c) Outros solventes podem ser utilizados de acordo com o Parágrafo 5.3.3.
(d) Outros meios de cultura podem ser utilizados de acordo com o Parágrafo 5.3.4.

*Disponíveis no Brasil os meios desidratados.


NF EN ISO 21150
T75-604 Detecção de Escherichia coli
(Setembro 2009)

Princípios: - Enriquecimento em meio não seletivo à 32,5 ± 2,5ºC de 20 à 72 horas.


- Isolamento em ágar à 32,5 ± 2,5ºC por 24 a 48h.
- Identificação por meio de ensaios apropriados.

Meio de Cultura BIOKAR Diagnóstico Conformidade


Caldo Eugon LT 100
BK068HA – frasco 500g
Caldo Eugon LT100 BM00608 – 50 tubos 9 mL Total
BM17508 – 50 tubos 9 mL + contas
de vidro
BM04308 – 10 flaconetes 100 mL
Meio líquido de lactose, contendo
neutralizantes e agentes - -
dispersantes
Meios
líquidos de Meio líquido lactose Caldo Nutritivo Lactose Total
enriqueci- BK082HA – frasco 500g
mento
Meio líquido de triptona-soja-
lecitina-polissorbato 80 (Caldo - -
SCDLP 80)

Caldo neutralizante D/E (caldo


neutralizante Dey/Engley) - -

Caldo Letheen modificado - -


Ágar seletivo
para o Ágar MacCONKEY
Ágar MacConkey BK050HA – frasco 500g Total
isolamento BM18008 – 10 flaconetes 100 mL
E.coli

Ágar seletivo
para Ágar de Levine eosina e azul de Ágar EMB (Levine)
metileno (EMB) BK046HA – frasco de 500g Total
confirmação

Diluente para Caldo Triptona Soja


a suspensão Solução triptona cloreto de sódio BK046HA – frasco 500g Total
BM00808 – 50 tubos 9 mL
Bacteriana BM11408 – 10 flaconetes 90 mL
BM13508 – 3 embalagens de 3L
Ágar para Ágar de peptona e caseína de soja Ágar Tripto-caseína de Soja
validação (SCDA) ou ágar tripto-caseína de BK026HA – frasco 500g
soja (TSA) BM05008 – 20 unidades Ø 90 mm Total
BM17808 – 120 unidades Ø 90 mm
BM01708 – 10 flaconetes 100 mL
BM04908 – 10 flaconetes 200 mL
Protocolo

1g ou 1mL de amostra
diluída 1/10 (a) (b)

Caldo Eugon LT 100 (c)

0,1 mL em superfície

Incubar de 20 à 72 h
à 32,5 ± 2,5ºC

Ágar MacCONKEY

Incubar de 24 à 48 h
à 32,5 ± 2,5ºC

- Coloração de Gram

- Cultura em Ágar de Levine eosina e


azul de metileno (EMB)

(a) Quantidade mínima de amostra para análise.


(b) Outras diluições podem ser feitas a partir da suspensão-mãe (utilizando o mesmo
solvente), dependendo do nível de contaminação da amostra.
(c) Outros solventes podem ser utilizados de acordo com o Parágrafo 5.3.3.

*Disponíveis no Brasil os meios desidratados.


NF EN ISO 22717
T75-603 Detecção de Pseudomonas aeruginosa
(Setembro 2009)

Princípios: - Enriquecimento em meio não seletivo à 32,5 ± 2,5ºC de 20 à 72 horas.


- Isolamento em ágar à 32,5 ± 2,5ºC por 24 a 48h.
- Identificação por meio de ensaios apropriados.

Meio de Cultura BIOKAR Diagnóstico Conformidad


e
Caldo Eugon LT 100
BK068HA – frasco 500g
Caldo Eugon LT100 BM00608 – 50 tubos 9 mL Total
BM17508 – 50 tubos 9 mL + contas
de vidro
BM04308 – 10 flaconetes 100 mL
Meios Meio líquido de triptona-soja-
líquidos de lecitina-polissorbato 80 (Caldo - -
SCDLP 80)
enriqueci-
mento Caldo neutralizante D/E (caldo
neutralizante Dey/Engley) - -

Caldo Letheen modificado


- -

Ágar seletivo
para o
Ágar Cetrimida Ágar Cetrimida Total
isolamento BK049HA – frasco 500g

Ágar seletivo
para Ágar de Pseudomonas para a
pesquisa de piocianina (Ágar - -
confirmação Pseudomonas P)

Diluente para Caldo Triptona Soja


a suspensão Solução triptona cloreto de sódio BK046HA – frasco 500g Total
BM00808 – 50 tubos 9 mL
Bacteriana BM11408 – 10 flaconetes 90 mL
BM13508 – 3 embalagens de 3L
Ágar para Ágar de peptona e caseína de soja Ágar Tripto-caseína de Soja
validação (SCDA) ou ágar tripto-caseína de BK026HA – frasco 500g Total
soja (TSA) BM05008 – 20 unidades Ø 90 mm
BM17808 – 120 unidades Ø 90 mm
BM01708 – 10 flaconetes 100 mL
BM04908 – 10 flaconetes 200 mL
Protocolo

1g ou 1mL de amostra
diluída 1/10 (a) (b)

Caldo Eugon LT 100 (c)

0,1 mL em superfície

Incubar de 20 à 72 h
à 32,5 ± 2,5ºC

Ágar Cetrimida

Incubar de 24 à 48 h
à 32,5 ± 2,5ºC

- Coloração de Gram

- Pesquisa de oxidase

- Cultura em Ágar de Pseudomonas


para pesquisa de piocianina

(a) Quantidade mínima de amostra para análise.


(b) Outras diluições podem ser feitas a partir da suspensão-mãe (utilizando o mesmo
solvente), dependendo do nível de contaminação da amostra.
(c) Outros solventes podem ser utilizados de acordo com o Parágrafo 5.3.3.

*Disponíveis no Brasil os meios desidratados.


NF EN ISO 22718
T75-605 Detecção de Staphylococcus aureus
(Setembro 2009)

Princípios: - Enriquecimento em meio não seletivo à 32,5 ± 2,5ºC de 20 à 72 horas.


- Isolamento em ágar à 32,5 ± 2,5ºC por 24 a 48h.
- Identificação por meio de ensaios apropriados.

Meio de Cultura BIOKAR Diagnóstico Conformidade


Caldo Eugon LT 100
BK068HA – frasco 500g
Caldo Eugon LT100 BM00608 – 50 tubos 9 mL Total
BM17508 – 50 tubos 9 mL + contas
de vidro
BM04308 – 10 flaconetes 100 mL
Meios Meio líquido hidrolisado de
líquidos de caseína-soja - -
enriqueci- Caldo neutralizante D/E (caldo
mento neutralizante Dey/Engley) - -

Caldo Letheen modificado


- -

Ágar Baird Parker Ágar Baird Parker


BK055HA – frasco 500g
Solução de telurito de potássio BM01808 - 20 unidades Ø 90 mm Total
BM09108 - 120 unidades Ø 90 mm
Ágar seletivo Emulsão de gema de ovo
para o
isolamento
Ágar Manitol (Ágar Chapman) Ágar de CHAPMAN Manitol Total
BK030HA – frasco 500g

Ágar Vogel-Johnson - -

Diluente para Caldo Triptona Soja


a suspensão Solução triptona cloreto de sódio BK046HA – frasco 500g Total
BM00808 – 50 tubos 9 mL
bacteriana BM11408 – 10 flaconetes 90 mL
BM13508 – 3 embalagens de 3L
Ágar para Ágar de peptona e caseína de soja Ágar Tripto-caseína de Soja
validação (SCDA) ou ágar tripto-caseína de BK026HA – frasco 500g Total
soja (TSA) BM05008 – 20 unidades Ø 90 mm
BM17808 – 120 unidades Ø 90 mm
BM01708 – 10 flaconetes 100 mL
BM04908 – 10 flaconetes 200 mL
Protocolo

1g ou 1mL de amostra
diluída 1/10 (a) (b)

Caldo Eugon LT 100 (c)

Incubar de 20 à 72 h
à 32,5 ± 2,5ºC

Ágar BAIRD-PARKER (d)

Incubar de 24 à 48 h
à 32,5 ± 2,5ºC

- Coloração de Gram

- Pesquisa de catalase

- Pesquisa de oxidase

(a) Quantidade mínima de amostra para análise.


(b) Outras diluições podem ser feitas a partir da suspensão-mãe (utilizando o mesmo
solvente), dependendo do nível de contaminação da amostra.
(c) Outros solventes podem ser utilizados de acordo com o Parágrafo 5.3.3.
(d) Outros meios de cultura podem ser utilizados de acordo com o Parágrafo 5.3.4.

*Disponíveis no Brasil os meios desidratados.


Anexo A: Protocolo de preparação para cepa de referência.

Suspensão bacteriana Suspensão bacteriana Suspensão bacteriana

TSA SDA PDA


(Repique da cultura em (Repique da cultura em (Repique da cultura em
tubos inclinados ou placas) tubos inclinados ou placas) placas)

Incubar de 18 à 24h
à 32,5 ± 2,5ºC
7 à 11 dias à
Segunda subcultura (3º possível) 32,5 ± 2,5ºC

Triptona Cloreto de Sódio Triptona Cloreto de Sódio Triptona Cloreto de Sódio


Suspensão titulada Suspensão titulada Suspensão titulada
107 à 108 ufc/mL (a) 107 à 108 ufc/mL (a) 107 à 108 ufc/mL (a)

Controle de titulação da suspensão

PDA
TSA SDA (Repique da cultura em
placas)

Incubar de 18 à 24h 7 à 11 dias à


à 32,5 ± 2,5ºC 32,5 ± 2,5ºC

Contagem de Contagem de Contagem de


bactérias totais (b) Candida albicans (b) Aspergillus brasiliensis (b)

(a) Utilizar a suspensão até duas horas após seu preparo.


(b) Para cada suspensão, dobrar a contagem por mL repicado.

*Disponíveis no Brasil os meios desidratados.


Anexo B: outras normas para a Microbiologia de Produtos Cosméticos.

Diretrizes para a avaliação de riscos e identificação microbiológica de baixo risco – NF EN


ISO 29621 – T75-609

Avaliação da proteção antimicrobiana de um produto cosmético – NF EN ISO 11930 –


T75-600

Instruções gerais para as análises microbiológicas – NF EN ISO 21148 – T75-601

Detecção dos microorganismos específicos e não específicos – NF EN ISO 18415 – T75-


606
NF EN ISO 18415
T75-606 Detecção de microrganismos específicos e não específicos
(Agosto 2011)

Princípios: - 1ª etapa: enriquecimento em meio líquido não específico.


- 2ª etapa: isolamento e identificação em função das necessidades e
seguindo as instruções das normas correspondentes.

Meio de Cultura BIOKAR Diagnóstico Conformidade


Caldo Triptona Soja
Diluente Solução triptona cloreto de sódio BK046HA – frasco 500g Total
BM00808 – 50 tubos 9 mL
BM11408 – 10 flaconetes 90 mL
BM13508 – 3 embalagens de 3L
Caldo Eugon LT 100
BK068HA – frasco 500g
Caldo Eugon LT100 BM00608 – 50 tubos 9 mL Total
BM17508 – 50 tubos 9 mL + contas
Meio líquido de vidro
de enriqueci- BM04308 – 10 flaconetes 100 mL
mento Meio líquido de caseína-soja-
lecitina-polissorbato 20 (FCDLP 20) - -

Meio líquido de caseína-soja-


lecitina-polissorbato 80 (FCDLP 80) - -

Caldo neutralizante D/E (caldo


neutralizante Dey/Engley) - -

Caldo Letheen modificado


- -
Ágar não Ágar Triptona Soja (TSA)
específico BK026HA – frasco 500g Total
Ágar de peptona e caseína de soja BM05008 – 20 unidades Ø 90 mm
(SCDA) ou ágar tripto-caseína de BM17808 – 120 unidades Ø 90 mm
soja (TSA) BM01708 – 10 flaconetes 100 mL
BM04908 – 10 flaconetes 200 mL

Caldo Triptona Soja (TSB)


BK046HA – frasco 500g
Meio de peptona e caseína de soja BM03008 – 50 tubos 10 mL Total
adicionado de ágar (Caldo SCD BM00908 – 10 flaconetes 100 mL
adicionado de ágar) BM17908 – 10 flaconetes 90 mL
Ágar Bacteriológico tipo A
A1010HA – Flaconete 500g
A1010GC – Balde 5kg
Ágar Bacteriológico tipo E
A1012HA – Flaconete 500g
A1010GC – Balde 5kg
Protocolo

1g ou 1mL de amostra
diluída 1/10 (a) (b)

Caldo Eugon LT 100 (c)

Incubar de 20 à 72 h
à 32,5 ± 2,5ºC

Ágar TSA (d)

Incubar de 24 à 48 h
à 32,5 ± 2,5ºC

Identificação dos microorganismos (e):

- Escherichia coli

- Pseudomonas aeruginosa

- Staphylococcus aureus

- Candida albicans

- Microrganismos não específicos

(a) Quantidade mínima de amostra para análise.


(b) Outras diluições podem ser feitas a partir da suspensão-mãe (utilizando o mesmo
solvente), dependendo do nível de contaminação da amostra.
(c) Outros solventes podem ser utilizados de acordo com o Parágrafo 5.3.2.
(d) Outros meios de cultura podem ser utilizados de acordo com o Parágrafo 5.3.3.
(e) Estabelecer os testes de identificação necessários para cada microrganismo.
*Disponíveis no Brasil os meios desidratados.
NF EN ISO 11930
T75-600 Avaliação da proteção antimicrobiana de um produto cosmético
(Junho 2012)

Princípios: - Inoculação da formulação com inócuo calibrado.


- Determinação do número de microorganismos sobreviventes aos intervalos
de tempo pré definidos durante 28 dias.

Meio de Cultura BIOKAR Diagnóstico Conformidade


Caldo Triptona Soja
Diluente Solução triptona cloreto de sódio BK046HA – frasco 500g Total
BM00808 – 50 tubos 9 mL
BM11408 – 10 flaconetes 90 mL
BM13508 – 3 embalagens de 3L
Caldo Eugon LT 100
BK068HA – frasco 500g
Caldo Eugon LT100 BM00608 – 50 tubos 9 mL Total
Neutralizante BM17508 – 50 tubos 9 mL + contas
de vidro
BM04308 – 10 flaconetes 100 mL

Ágar Sabouraud Glicose


Ágar Sabouraud Dextrose (SDA) BK025HA – frasco 500g Total
BM17308 - 20 unidades Ø 90 mm
BM17408 – 120 unidades Ø 90 mm
BM05308 – 10 flaconetes 200 mL
Meios de
Equivalente (1)
cultura Ágar Batata Dextrose Ágar Glicose Extrato de Batata
BK095HA – flaconete 500g

Ágar de peptona e caseína de soja Ágar Tripto-caseína de soja


(SCDA) ou ágar tripto-caseína de BK026HA – frasco 500g
soja (TSA) BM05008 – 20 unidades Ø 90 mm Total
BM17808 – 120 unidades Ø 90 mm
BM01708 – 10 flaconetes 100 mL
BM04908 – 10 flaconetes 200 mL

(1) o meio contém 4g de extrato de batata ao invés de 200g de infusão de batata preconizada.

*Disponíveis no Brasil os meios desidratados.


Protocolo

1) Demonstração da eficácia do neutralizante:

1g ou 1 mL da formulação em 9 mL de Caldo Eugon LT 100

30 ± 15 min à temperatura ambiente

Adicionar 1 mL de solução calibrada de micro-organismos (b) (c)

TSA SDA PDA

Incubar de 48 à 72h 3 à 5 dias à


à 32,5 ± 2,5ºC 32,5 ± 2,5ºC
Contagem de Contagem de Contagem de
bactérias totais (a) Candida albicans (a) Aspergillus brasiliensis (a)

*Disponíveis no Brasil os meios desidratados.

2) Demonstração da eficácia da proteção antimicrobiana da formulação:

20g ou 20 mL da formulação + 0,2 mL de inócuo calibrado (b)

Em um intervalo de tempo regular, retirar 1 mL ou 1g da formulação inoculada

7 dias: T7 14 dias: T14 28 dias: T28

Para cada amostragem, fazer a contagem dos microrganimos (seguindo o protocolo


descritivo da etapa “Demonstração da eficácia da etapa de neutralização”).

(a) Contar em dobro, 1 mL de cada mistura inoculada.


(b) O inócuo calibrado contém entre 10 5 e 106 UFC/mL para Candida albicans e
Aspergillus brasiliensis.
(c) Fazer um tubo controle, com 1 mL de inócuo em 10 mL de diluente.

*Disponíveis no Brasil os meios desidratados.


Anexo C: Lista dos principais produtos da Microbiologia Cosmética

PRODUTO APRESENTAÇÃO
BK055HA – frasco 500g
Ágar BAIRD-PARKER BM01808 – 20 placas de Ø 90 mm
BM09108 – 120 placas de Ø 90 mm
Ágar Cetrimida BK049HA – frasco 500g
Ágar Sal Manitol BK030HA – frasco 500g
Caldo peptona tamponado com NaCl pH BK128HA – frasco 500g
7,0 BM16408 – 3 embalagens de 3L
Ágar EMB (LEVINE) BK046HA – frasco 500g
BK068HA – frasco 500g
Caldo Eugon LT 100 BM00608 – 50 tubos 9 mL
BM17508 – 50 tubos 9 mL + contas de vidro
BM04308 – 10 frascos 100 mL
Ágar Eugon LT 100 BK096HA – frasco 500g
BM17008 - 20 placas de Ø 90 mm
BM04508 – 10 frascos 200 mL
BK095HA – frasco 500g
Ágar Batata Dextrose (com antibiótico) Suplemento Seletivo Cloranfenicol 50 mg
BS02108 – 10 frascos
Ágar MacCONKEY BK050HA – frasco 500g
BM18008 – 10 frascos 100 mL
Caldo Lactose BK082HA – frasco 500g
BK025HA – frasco 500g
Ágar SABOURAUD Glicose BM17308 - 20 unidades Ø 90 mm
BM17408 – 120 unidades Ø 90 mm
BM05308 – 10 flaconetes 200 mL
Ágar SABOURAUD Glicose com BK025HA – frasco 500g
Cloranfenicol BM17608 – 20 unidades Ø 90 mm
BM17708 – 120 unidades Ø 90 mm
BM17208 – 10 flaconetes 200 mL
BK046HA – frasco 500g
Caldo Triptona Soja (TSB) BM03008 – 50 tubos 10 mL
BM00908 – 10 embalagens 100 mL
BM17908 – 10 embalagens 90 mL
BK046HA – frasco 500g
Ágar Triptona Soja (TSA) BM05008 – 20 placas de Ø 90 mm
BM17808 – 120 placas de Ø 90 mm
BM01708 – 10 embalagens 100 mL
BM04908 – 10 embalagens 200 mL
BM02208 – 10 flaconetes 110 mL
Ágar Glicose Oxitetraciclina (OGA) BK053HA – frasco 500g
BK053GC – embalagem 5 Kg
Suplemento Seletivo Oxitetraciclina 50 mg
BS00808 – embalagem com 10 frascos
Suplemento Seletivo Gentamicina 25 mg
BS00908 – embalagem com 10 frascos
Suplemento Seletivo Cloranfenicol 50 mg
BS02108 – embalagem com 10 frascos
Ágar Schaedler BK063HA – frasco 500g
Caldo Tetrationato BK083HA – frasco 500g
Ágar Verde Brilhante BK091HA – frasco 500g
BM10608 – 50 flaconetes 10 mL
BK135HA – frasco 500g
Caldo Müller-Kauffmann Suplemeto Seletivo Novobiocina 10 mg
BS03308 – embalagem com 10 frascos
Suplemeto Seletivo Novobiocina 40 mg
BS05608 – embalagem com 8 frascos
BM01508 – 10 flaconetes 100 mL
Ágar Contagem de Placas (PCA) BM03308 – 10 flaconetes 200 mL
BK144HA – frasco 500g
BK144GC – embalagem 5 Kg
Caldo Lecitina Polissorbato Triton X BM00608 – 50 tubos 9 mL
BM04308 – 10 frascos 100 mL
BK137HA – frasco 500g
Ágar Lecitina Polissorbato Triton X BM04508 – 10 flaconetes 200 mL
BK138HA – frasco 500g

*Disponíveis no Brasil os meios desidratados.


Apresentações

A) Ágar:

PRONTO:

Placas de Petri (ainda não


disponíveis no Brasil):
- Pacote com 120 unidades de
Ø 90 mm;
- Pacote com 20 unidades de
Ø 90 mm.

PRONTO PARA SOLUBILIZAR:

Flaconetes (ainda não


disponíveis no Brasil):

- 10 flaconetes de 100 mL;

- 10 flaconetes de 200 mL.

DESIDRATADO:

Frascos:

- Embalagem de 500g;

- Embalagem de 5 Kg.

*Disponíveis no Brasil os meios desidratados.


Apresentações

B) Caldos:

PRONTO PARA USO:

Frascos (ainda não Tubos (ainda não Embalagens flexíveis


disponíveis no Brasil): disponíveis no Brasil): (ainda não disponíveis no
- 10 frascos de 90 mL; - 50 tubos de 9 mL; Brasil):
- 10 frascos de 100 mL; - 50 tubos de 10 mL. - 3 embalagens de 3L;
- 10 frascos de 200 mL. - 2 embalagens de 5L.

DESIDRATADO:

Frascos:

- Embalagem de 500g;

- Embalagem de 5 Kg.

*Disponíveis no Brasil os meios desidratados.


BIOKAR Diagnostics Qualidade

O Controle de Qualidade da Biokar Diagnostics certifica o desempenho de seus


produtos em conformidade com os padrões ISO:

– Testes de desempenho;
– Condições de transporte;
– Testes de esterilidade;
– Testes de neutralização;
– Análises das características físico-químicas (pH, aspecto...).

BIOKAR Diagnostics é certificada


de acordo com as normas padrão
de gerenciamento ISO 9001:2008.

A Biokar Diagnostics propõe um acesso direto à documentação técnica de seus


produtos nos sites:

– Ficha Técnica;
– Ficha de Segurança;
– Laudo de Análise.

*Disponíveis no Brasil os meios desidratados.

Acesse nossos sites:

www.biokar-diagnostics.com

OU

www.solabia.com.br

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