Eugenia Costanzi-Strauss, Ph.D Dep.

Biologia Celular e do Desenvolvimento, ICB-USP

Nov. 2004

OBS: 1 - AS FOTOS SO SIMULAES PREPARADAS PARA FINS DIDTICOS 2 Material divulgado para os alunos da disciplina Boas Prticas de Laboratrio com autorizao da autora

Referncias
CDC http://www.cdc.gov/od/ohs/biosfty/biosfty.htm University of Wisconsin http://www2.fpm.wisc.edu/safety/ CTNBio http://www.ctnbio.gov.br/ctnbio/ NIH Guidelines for rDNA http://www4.od.nih.gov/oba/rac/guidelines/guidelines.htm l Livro: Manual de Biossegurana, M. H. Hirada & J. Mancini Filho, Ed. Manole, 2002

Boas Prticas de Laboratrio

O trabalho laboratorial executado de forma adequada e bem planejada previne a exposio indevida a agentes considerados de risco a sade e sem dvida evita acidentes. A esse procedimento denominamos boas prticas de laboratrio

Manual de Biossegurana, Hirata & Mancini Filho, 2002

Boas Prticas de Laboratrio

Manipulao de agentes considerados contaminantes regida por leis federais, estaduais e municipais. A manipulao, armazenamento e transporte de agentes de risco requerem licenas especiais que so controladas por rgos federais A construo de laboratrios tambm controlada. Por exemplo, Procedimentos Gerais de Projetos de Construo da Universidade de So Paulo (FUNDUSP, 1991
Manual de Biossegurana, Hirata & Mancini Filho, 2002

As caractersticas dos Laboratrios

Laboratrio de Ensino Acadmico

Ensino - Educao
Laboratrio de Pesquisa-Acadmico

Pesquisa - Profissional
Laboratrio de Pesquisa/Empresa-Acadmico/Privado

Pesquisa e Servio - Profissional

Laboratrio de Indstria-Privado

Servio - Profissional
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As caractersticas dos Laboratrios de Ensino

Grande rotatividade de professores e alunos. Horrio regular. Manipulao de produtos qumicos (txicos, abrasivos, volteis, inflamveis, irritantes, custicos, etc.), microorganismos, parasitas, etc. com risco de infectividade e mortalidade bastante variada. Cuidados tomados pelos usurios e administradores devem ser muito maiores e rigorosos. necessrio que os alunos sejam previamente conscientizados sobre os riscos durante as aulas prticas, assim como das medidas adotadas para a manuteno e respeito das normas de segurana
Manual de Biossegurana, Hirata & Mancini Filho, 2002

As caractersticas dos Laboratrios de Pesquisa

Grande rotatividade de pesquisadores, ps-graduandos, estagirios. Horrio irregular. Manipulao de produtos qumicos (txicos, abrasivos, volteis, inflamveis, irritantes, custicos, etc.) material biolgico (microorganismos, parasitas, linhagens celulares, amostras de origem humana, etc) com risco de infectividade e mortalidade bastante variada. Prevenir ou reduzir o risco de desenvolver doena profissional por exposio. A organizao das atividades um aspecto fundamental para segurana dos pesquisadores e para a garantia de resultados precisos e de qualidade.
Manual de Biossegurana, Hirata & Mancini Filho, 2002

Medidas de Controle e Proteo

Medidas coletivas: Descarte e remoo de lixo,
extintores de incndio, lavador de olhos, sinalizao.

Medidas individuais: Emprego de EPIs

(equipamentos de proteo individual): Luvas, mscara, avental, pr-ps, culos de proteo, entre outros.

Medidas coletivas: Descarte e remoo de lixo, extintores de incndio, lavador de olhos, sinalizao adequada

Acesso aos equipamentos de segurana coletiva

Livre Obstrudo

Coleta de lixo seletiva

Rota de lixo da cidade de So Paulo

Ordem de prioridade para retirada de rejeitos laboratoriais 1- resduos radioativos slidos 2- resduos radioativos lquidos 3- resduos qumicos 4- resduos biolgicos 5- materaila cortante

IN

OUT

Dentro do laboratrio

Fora do laboratrio

IN

OUT

Dentro do laboratrio

Fora do laboratrio

Prticas da Rotina de Segurana nos Laboratrios de Pesquisa

Limpeza das reas do laboratrio Desinfeco Descontaminao Manuseio e transporte de vidrarias, reagentes e de outros materiais Posicionamento dos equipamentos Manuseio e armazenamento adequados de produtos qumicos
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Grupos de Risco nos Laboratrios de Pesquisa

Riscos Fsicos
Equipamentos que geram calor, frio, chamas, radiao ionizante, umidade, rudos, radiao no-ionizante, ultravioleta, infravermelha, ultra-som, raios laser, ondas de rdio, campos eltrico, entre outros.

Riscos Qumicos
Contaminantes do ar (gases, fumaa incluindo cigarro, aerosis), substncias txicas, substncias explosivas, irritantes, oxidantes, corrosivas, volteis, inflamveis, cancergenas.

Riscos Biolgicos
Bactrias, parasitas, levedura, vrus, linhagens celulares, amostras humanas,etc

Riscos Ambientais
Equipamento de vidro, instrumento perfurante, equipamentos com gas comprimido, equipamentos de triturao, incndio, exploso, eletricidade.

Riscos Ergonmicos

Manual de Biossegurana, Hirata & Mancini Filho, 2002

No coma No Beba

Pipetar com a boca terminantemente proibida

Retirar as luvas antes de usar o telefone, tocar em culos, maanetas, portas de geladeiras, etc.

Sinalizao adequada

Sinalizao adequada

X X

No circular nas reas sociais utilizando equipamentos de proteo, como luvas ou pr-ps.

Transportar reagentes qumicos ou biolgicos com segurana e de acordo com as recomendaes

Retirar as luvas antes de tocar em equipamentos comuns. Exceo: quando assinalado uso de luvas obrigatrio junto ao equipamento.

Luva: Mo protegida

Sem luva: mo desprotegida

No usar avental de bancada do laboratrio no refeitrio

Organizao Administrativa e de Gerenciamento das Boas Prticas de Laboratrio no ICB-USP

Comisso interna de biossegurana

Comits de tica animal

Comits de tica humana

Ncleo de radio proteo

Comisso de rejeitos qumicos

Ncleo de Rdio Proteo

Laboratrios que manipulam elementos radioativos devem ser construdos conforme recomendaes (ver Procedimentos Gerais de Projetos da FUNDUSP, 1991, p19). Normas CNEN-NE-3.01 Diretrizes Bsicas de Radioproteo, de julho de 1988, Resoluo CNEM n. 12/88 (www.senado.br.org.bras). Representantes de todos os Departamentos do ICB.

Laboratrios devem ser licenciados junto ao CNEN para compra e manipulao de elementos radioativos.

Comisso de Resduos Qumicos

Estimular a elaborao de planos de gerenciamento de rejeitos qumicos de cada laboratrio e uso do MSDS

Representantes de todos os Departamentos do ICB.

Responsvel pela remoo de lixo histrico.

Comisso Interna de Biossegurana

Ligada a Comisso Tcnica Nacional de Biossegurana, CTNBio Lei 8.974 de 05 e janeiro de 1995.

Relata a CTNBio procedimentos institucionais, inspeciona reas de nvel 1 e fornece licenas tambm para nvel 1. Solicitaes de licenas para nvel 2, 3 e 4 so encaminhadas para CTNBio pela CIBiossegurana e sujeitas a inspeo direta da CTNBio.

Todos os laboratrios devem solicitar licena para manipulao de OGMs, incluindo os laboratrios de nvel 1.

Comisso Tcnica Nacional de Biossegurana, CTNBio Lei 8.974 de 05 e janeiro de 1995

CTNBio regulamenta os procedimentos de segurana por meio de 19 instrues normativas, conforme o grau de periculosidade, bem como estabelece os nveis de concentrao e de tratamento dos resduos, a liberao planejada para o ambiente, transporte, importao, comercializao de organismos geneticamente modificados e intervenes genticas em humanos e animais.

Definio e Fundamento
Adota-se o termo biossegurana como a cincia voltada para o controle e a minimizao de riscos advindos da prtica de diferentes tecnologias, seja em laboratrio seja no meio ambiente.

O fundamento bsico da biossegurana assegurar o avano dos processos tecnolgios e proteger a sade humana, animal e o meio ambiente. As prticas de biossegurana baseiam-se na necessidade de proteo ao operador, seus auxiliares e a comunidade local contra riscos que possam prejudicar a sade.

Manual de Biossegurana, Hirata & Mancini Filho, 2002

OGMs e grupos de risco biolgico

OGM: Organismo Geneticamente Modificado Qualquer modificao de DNA em um organismo Grupo de risco: sistema de classificao de organismos e sua manipulao baseado na potncia de causar doena em humanos Requer cuidados para no contaminar o meio ambiente, operrios, etc.

Nveis de Biossegurana
Classe de Risco 1 Organismos que no causam doenas em humanos e animais. Classe de Risco 2 Patgeno que causa doena, mas no consiste em risco srio. Classe de Risco 3 Patgeno que geralmente causa doenas graves em humanos e animais, e pode representa srio risco para o manipular. Classe de Risco 4 Patgeno que representa grande ameaa para humanos e animais, representa grande risco para o manipulador e pode ser transmitido de um indivduo a outro.

Grupos de risco biolgico e OGM

Grupo 1
Agentes no conhecidos como causadores de doenas em humanos. E. Coli k12 Bacillus subtilis Vrus adenoassociado soro tipos 1-4 Maloney murine leukemia virus (ecotropic, <50L) No exige infra-estrutura especial No exige equipamentos de conteno Descarte: Tratado, autoclavado ou incinerado

Grupos de risco biolgico e OGM

Grupo 2
Agentes de risco moderato e com pouca probabilidade de provocar doena grave, tratamentos disponveis (vacinas) Salmonela, Hepatitis B, retrovrus (Maloney, anfotropico), adenovrus, vetores recombinantes de lentivrus rea de acesso restrito durante experimentao Uso do fluxo laminar, material no pode ser manipulado na bancada Descarte: Autoclavado antes de ser incinerado

Em caso de acidentes com material biolgico:

Pequeno volume/rea de contaminao Isolar o local, limitar rea com papel toalha Saturar com gua sanitria ou hipoclorito 1% por 30 min. Descartar o material e lavar rea de trabalho Lavar as mos Notificar colegas

Em caso de acidentes com material biolgico

Ateno: isolar e saturar o local com gua sanitria por 30 min. Antes de coletar

Tratamento de material biolgico para descarte

Tratamento
Cndida (hipoclorito 1%) por 30 min. e enxaguar exaustivamente Autoclave:121C, 15 min. mnimo (grandes volumes podem precisar de mais tempo) Lixeiras com saco branco (lixo hospitalar) Incinerao

Nem tudo que perigoso vm marcado