INMUNIDAD INNATA

Fisiologa hematolgica e Inmunologa Bsica y Aplicada CBCC6, Ao 2011 Depto. Inmunobiologa, Facultad de Medicina

(.00001-.0001mm) VIRUS (.001-.01mm) BACTERIAS (.005-.1mm) PROTOZOARIOS

Worms 5-5000mm

PREVENCIN Y CONTROL DE LAS INFECCIONES

La respuesta Inmunitaria se encuentra mediada por la inmunidad innata y adaptativa

Distribucin no clonal: receptores idnticos en todas las clulas de la misma estirpe

Distribucin clonal: los clones de linfocitos con una especificidad distinta expresan receptores diferentes

RECONOCIMIENTO
DE LOS PATGENOS POR LA INMUNIDAD INNATA

PAMPs
Pathogen Associated Molecular Pattern
1. estructuras en los patgenos NO PRESENTES en las clulas de mamfero
Motivos glucdicos

flagelina

CpG ADN

LPS Lipoprotenas Gram(-) y peptidoglicanos de membrana

ARNdc

2. estructuras CONSERVADAS en grupos particulares de organismos 3. esenciales para su SUPERVIVENCIA

DAMPs
Danger-Associated Molecular Patterns
El Sistema Inmunitario utiliza seales de peligro para distinguir MO patognicos de los comensales

DAO CELULAR Molculas liberadas por clulas daadas Acido rico ADN mamfero ATP

El reconocimiento de PAMPs:
- Facilita la captacin de MO por las clulas -Transmite cascadas de sealizacin intracelulares para activar funciones anti-microbianas, a travs de la induccin de:
- Quimioquinas - Molculas de adhesin endotelial - Citoquinas inflamatorias (IL1, TNF, IL12) - Interferones de tipo I ( y ) = anti-virales - Expresin aumentada de molculas co-estimulatorias

Cmo se reconocen los PAMPs y los DAMPs?

RECEPTORES

1. Membranarios, citoplasmticos o secretados por las clulas de la Inmunidad Innata

2. Repertorio con especificidad limitada

Pattern Recognition Receptors

PRRs

TLRs CLRs NLRs

TLRs

PROTEINAS DE MEMBRANA TIPO 1

Dominio extracelular de UNION al ligando -diverge entre diferentes TLRs y entre homlogos de diferentes especies -Dominio LRR (Repetidos ricos en Leucina)

membrana
Dominio citoplasmtico ACTIVADOR - DOMINIO TIR - Homlogo a la regin citoplasmtica del receptor de IL-1 - conservado - une protenas citoslicas - activa vas de sealizacin

citosol

ARNsc ARNdc

Motivos CpG

Flagelina

TLR5 TLR7 TLR8 TLR3 TLR9 Captacin de Protenas adaptadoras

Activacin de Protena-Quinasa Cascadas de fosforilacin
LPS

TLR4

Lipoprotenas proteoglicanos

Endosoma

TLR2/6 TLR2/1

Transcripcin de genes

Ncleo

Activacin de Factores de transcripcin

(NFkB)

zymosan

Citoquinas INFLAMATORIAS (TNF, IL1, IL12) IFN tipo I (, )

Molculas Adhesin Endotelial Quimioquinas

CLRs

Receptores tipo lectina que reconocen motivos glucdicos

- CRD: carbohydrate recognition domain

Determina la especificidad por los CH

- Endocitosis - Sealizacin
?

NLRs
PAMPs Toxinas, Flagelina dsDNA Dominios: LRR Repetidos Ricos Leu Unin al ligando NACHT oligomerizacin Efector Sealizacin
PYD: Pyrin domain CARD: caspase recruitment domain BIR baculovirus IAP repeat

Estructura de NLRs
DAMPs ATP Ac. Urico Sustancias cristalinas
(urato monosodico)

Silica UV

Inflamasomas

Dominios: LRR Repetidos Ricos Leu Unin al ligando NACHT oligomerizacin Forma de Dona Efector Sealizacin
PYD: Pyrin domain CARD: caspase recruitment domain BIR baculovirus IAP repeat

Reclutamiento de Caspasa1 Clivaje de ProIL-1 y ProIL-18 Secrecin de IL-1, IL-18 (indep.ER)

COMPONENTES
DE LA INMUNIDAD INNATA

Barreras Epiteliales

INMUNIDAD INNATA

95% de los patgenos invaden el hospedero a travs de la piel y mucosas

Tracto respiratorio Tracto gastrointestinal

Tracto genital Tracto urinario

BARRERAS EPITELIALES
EPITELIOS - barreras fsicas entre el medio interno y el medio ambiente/ patgenos
- piel y superficies mucosas (aparato digestivo y respiratorio)

- PREVENCIN de la INVASIN
- Barrera mecnica que retarda la entrada de microbios

PIEL (2 m2)
EPIDERMIS - clulas muertas (capa externa) - recambio celular

DERMIS - pH cido (cido lctico y cidos grasos de las secreciones sebceas)

BARRERAS EPITELIALES
MUCOSAS - (400 m2) presentes tractos respiratorio, gastrointestinal, urinario y genital
Epitelio estratificado (cavidad oral, esfago) Epitelio simple/pseudoestratificado (intestino, vas areas) - El mucus atrapa MO extraos - Las cilias del aparato respiratorio expulsan los MO

Cilias

Uniones ocluyentes Mucus

Glicoclix

BARRERAS FISIOLGICAS
- TEMPERATURA: La temp. normal de algunas especies inhibe el crecimiento de patgenos (ej. pollos son resistentes al anthrax) - pH BAJO: acidez del estmago mata a MO ingeridos - componentes anti-microbianos en secreciones y lgrimas: lisozima (cliva peptidoglicano de la pared celular de bacterias) - barrera MICROBIOLGICA - Flora normal - competencia por nicho y nutrientes
- produccin de sustancias inhibidoras (ej. bacteriocinas)

- DEFENSINAS Y CATELICIDINAS

- pptidos anti-microbianos, activos contra bacterias y hongos

- Prod por cel. epiteliales, neutrfilos

-CITOQUINAS - mensajeros qumicos

- comunicacin con otros componentes de la inmunidad innata - TNF, IL1, quimioquinas inflamacin - Interferones de tipo I (IFN, IFN) propiedades anti-virales - IFN: activacin de Macrfagos - IL12: produccin de IFN por clulas NK y linfocitos T

Citoquinas y quimioquinas

BARRERAS FISIOLGICAS

Clulas
Macrfagos

INMUNIDAD INNATA

Neutrfilos

Fagocitos profesionales

Clulas Natural killer

Clulas dendrticas

Mastocitos

Eventos en la respuesta inflamatoria

FAGOCITOS
MACRFAGOS Y NEUTRFILOS
- reconocimiento, ingestin y destruccin de patgenos

Hematopoyesis

NEUTRFILOS
- leucocitos polimorfonucleares (12 a 15 m) - poblacin de glbulos blancos ms abundante en la sangre (50 70%) - adulto 1 x 1011 N/da 6 h de vida - FASE TEMPRANA de la respuesta innata (primeros en llegar al sitio de inflamacin)

- ncleo segmentado - citoplasma granular

2arios- lisozima, colagenasa, lactoferrina 1arios- lisozima, peroxidasa y otras enzimas hidrolticas ( ~lisozoma)

MONOCITOS

MACRFAGOS

3-8% de glbulos blancos clulas circulantes en la sangre de vida larga 10 15 m en los tejidos se diferencian a macrfagos

Fagocitos Mononucleares

5-10 veces ms grande que monocito clulas residentes de tejidos participacin ms tarda y persistente Organelos ms grandes y numerosos vida media larga Aumenta la capacidad fagoctica Capacidad de proliferacin

SISTEMA MONONUCLEAR FAGOCTICO

Poblacin heterognea

Estratgicamente localizados

- puertas de entrada (intestino y pulmn) - zonas de paso de patgenos (hgado, bazo, ganglios)

FAGOCITOSIS
Eritrocito

E. coli

Monocito

Macrfago

Micrografa electrnica

FAGOCITOSIS

Intermediarios reactivos del oxgeno y nitrgeno tienen actividad microbicida muy potente

MECANISMOS MICROBICIDAS
Molculas microbicidas en los fagolisosomas:
- enzimas proteolticas digestin - lisozima, lactoferrina - defensinas - dao a las membrana - agentes oxidantes

Hematopoyesis

CLULAS:

NATURAL KILLER NK

- linfocitos de la inmunidad innata - no expresan los receptores de linfo B y T - grandes y granulares - 5-20% de las clulas de la sangre - Productores de IFN, el cul activa macrfagos - reconocimiento de clulas infectadas y tumorales - actividad citotxica

Reconocimiento y activacin:
Clula normal OK

- contacto con las clulas blanco - activacin/inhibicin

MHC I Seal negativa NO activacin Receptor Inhibidor (KIR, ILT, CD94/NKG2A)

Clula alterada

MICA MICB ULBP (RAE-1)

Receptor Activador (CD16, NCR, NKG2D) Seal positiva Activacin

- contacto con las clulas blanco - activacin - polarizacin/degranulacin - apoptosis de la clula blanco
Perforina poros en la superficie de la clula blanco Eliminacin de los reservorios de infeccin Granzimas serin proteasas induce apoptosis

Apoptosis

Activacin

INMUNIDAD INNATA

Sistema del complemento y otros mediadores solubles

SISTEMA DEL COMPLEMENTO:

- grupo de protenas que circulan en la sangre de forma inactiva (proenzimas/zimgenos) - expresin constitutiva - una vez activadas destruyen a patgenos - distribuidas por todos los tejidos - sintetizadas por las clulas hepticas, macrfagos, fibroblastos, cl. epiteliales y endoteliales
Va clsica (inmunidad adaptativa)

Va de las lectinas
ACTIVACIN Convertasa de C3

Va alternativa

Convertasa de C3

Clivaje de C3

Inflamacin

Opsonizacin
FUNCIN

Lisis

VIAS DE ACTIVACIN DEL COMPLEMENTO

Componentes de la superficie celular de MO

Manosa en superficie de MO (Salmonella, Listeria, Neisseria, Candida albicans)

Va alternativa: activacin
En presencia de agentes extraos: OH S-C=O

C3 con grupo
tioster no expuesto

Hidrlisis de la cadena serina-esterasas del suero

S-C=O

C3b con
grupo tioster expuesto
Hidrlisis del grupo tioster y acoplamiento del Factor H

HS C=O O

C3a

HS C=O OH
Catabolismo

Factor H
(cls propias)

C3b se une de forma covalente a la

superficie bacteriana

Factor I

C3bi (inactivo)

Inicio de la cascada

Va alternativa: cascada proteoltica

C3

C3b

C3a
Factor B C3b B
O

AMPLIFICACIN

Factor D
Properdina

Ba

C3b Bb
O

Convertasa de C3 C3bBb
M
- C3bBb vida de 1 min - C3bBb-properdina v 5 min

Va ltica:
C3

LISIS CELULAR

C3b

C3a
C3b B
O

AMPLIFICACIN

Ba

C3b Bb 3b
O

Convertasa de C3 C5 C3bBb3b C3bBb

C5

C5a

COMPLEJO DE ATAQUE DE MEMBRANA C9 C9 C9 C C9C9 C6

C5b
C7
8

Va de las lectinas:
MBL (mannose-binding lectin)
MASPs serina-proteasas

C4

C4b C2

C4a
MASPs C3

Convertasa de C3
C4b2b
C3b

C4b 2b

C2a

C3a

Convertasa de C5 C4b 2b
C4b2b3b

C3b

COMPLEJO DE ATAQUE DE MEMBRANA

MBL, C4b y C3b - OPSONINAS

Funciones del sistema complemento

1 2 3

1- LISIS

Complejo de ataque de membrana (MAC)

- Estructura macromolecular formada por C5b, C6, C7, C8, y C9 - C9 es una molcula tipo-perforina - El complejo final tiene forma tubular y consiste en un complejo C5b678 rodeado de un complejo poli-C9 - Se inserta en la membrana celular y genera poros - Muerte celular por inestabilidad osmtica

1- LISIS

Lisis mediada por complemento

Micrografa electrnica de barrido

2- Opsonizacin
C3b, C4b y iC3b son opsoninas (recubren el MO) Fagocitos expresan receptores para estas protenas (CR1, CR3, CR4) El MO recubierto de las opsoninas se une a las clulas que expresan los receptores especficos para stas Aumenta la capacidad fagocitosis

3- Activacin de la Respuesta Inflamatoria

Los fragmentos menores luego del clivado de algunos componentes del complemento tienen actividad anafilatoxina (C3a, C4a, y C5a) Se unen a receptores en mastocitos y basfilos e inducen degranulacin (liberacin de histamina) C3a, C4a, y C5a son vasoactivas y quimiotcticas inducen contraccin muscular y permeabilidad vascular
reclutamiento de clulas fagocticas en el sitio de entrada del antgeno

C3a y C5a inducen la adherencia de monocitos y neutrfilos a las clulas endotieliales vasculares, aumentando la extravasacin

Eventos en la respuesta inflamatoria

LAS CLULAS DENDRTICAS SON CLAVE PARA LA INSTRUCCIN DE LA INMUNIDAD ADAPTATIVA

Clula dendrtica inmadura

- TEJIDOS PERIFRICOS - RECONOCIMIENTO e INCORPORACIN DEL ANTGENO
- diferentes tipos langerhans e intersticiales - receptores de reconocimiento - fagocitosis - MHC II intracelular / presentacin del antgeno - co-estimulacin

Clula dendrtica madura

- GANGLIOS LINFTICOS - PRESENTACIN DEL ANTGENO A LOS LINFOCITOS T
- fagocitosis - MHC II en la superficie - co-estimulacin

Clulas dendrticas plasmacitoides

grandes productoras de IFN tipo I

Inicio de la inmunidad adaptativa:

La inflamacin dirige el trnsito de las clulas y molculas de las defensas innatas desde el lugar del dao hacia los ganglios linfticos que drenan la zona. En los ganglios se encuentran los linfocitos T y B: respuesta adaptativa Los componentes de la respuesta innata van a instruir a los componentes de la inmunidad adaptativa para generar una respuesta adecuada para la eliminacin del patgeno

La activacin de los linfocitos T requiere el reconocimiento del Ag y de molculas co-estimuladoras

Receptor

Molculas coestimuladoras

Linfocito T APC TCR

citoquinas

Antgeno

La activacin de los linfocitos T est influenciada por citoquinas producidas en la respuesta innata

Palabras claves: PAMPs, DAMPs Receptores (PRRs Citoquinas Fagocitosis Apoptosis Lisis celular por complemento Opsonizacin Inflamacin

Barreras anatmicas Clulas

Macrfagos

INMUNIDAD INNATA

Neutrfilos

Fagocitos profesionales

Clulas Natural killer

Clulas dendrticas

Sistema del complemento y otros mediadores solubles