INSULINAS Las acciones de la insulina son complejas,al igual que sus mecanismos de accin,an no completamente dilucidados.

El desarrollo de algunos de sus efectos,se lleva a cabo, en solo algunos minutos(oxidacin de la glucosa), mientras queotras acciones necesitan varias horas,como la incorporacin de la timidina al DNA, estmulo de la sntesis proteica. Las acciones de la insulina, pueden clasificarseen dos grandes grupos: a) accionesde crecimiento (estmulo de la sntesisde DNA), y b) Acciones metablicas.Tambin pueden clasificarse estas acciones,en aquellas que significan : a- Estmuloal transporte de nutrientes (am inocidos, glucosa, iones), a travs de lasmembranas celulares y b- Modulacin dela actividad de enzimas intracelulares queintervienen en los procesos metablicosms importante QUMICA La insulina es un polipptido de peso molecular5800, com puesto por dos cadenasde aminocidos, que en total tienen 51aminocidos. La cadena A, tiene 21 aminocidos,y la cadena B 30 aminocidos. Ambas cadenas se encuentran unidas por2 puentes de disulfuro ubicados entre losaminocidos A-7/ B-7, y A20/ B-19. Ademsla cadena A, tiene tambin un puenteinterno de disulfuro entre los aminocidos A-6/ A-11. La integridad de la molcula esindispensable para ejercer las accionesfarmacolgicas. Las cadenas A o B, separadasluego de la destruccin enzimticade los puentes de disulfuro, carecen completamentede acciones farmacolgicas.Los aminocidos de las posiciones B-22 yB-30, son indispensables para el mantenimientode las acciones metablicas dela insulina. Las acciones de crecimiento,se relacionan con los aminocidos A-4; A-20, A-21, B-10, B-13, y B-26. BIOSNTESIS: La sntesis de la insulina,se lleva a cabo en los islotes de Langerhans,del pncreas. En el islote, se handistinguido, por lo menos cuatro tipos celulares:clulas alfa: secretoras del glucagon pancretico (tambin es producidopor las clulas argentafines de la mucosagastrointestinal).Clulas beta: productorasde insulina, Clulas D: secretoras dela somatostatina pancretica, que inhibe ala hormona del crecimiento, la secrecinde insulina, glucagon, renina, gastrina, secretina,pepsina, y colecistoquinina. La somatostatina, tambin se produce en hipotlamo,cerebro, mdula, ganglios, ymucosa gastrointestinal. Clulas PP: secretorasdel polipptido pancretico.La insulina se sintetiza en los ribosomasdel retculo endoplsmico rugoso de lasclulas beta de los islotes, como preproinsulina, que tiene 109 a.a. Este precursorpierde enzimticamente algunosaminocidos, y se transforma en proinsulinade 83 aminocidos de cadena nicaen espiral. La proinsulina, se transformaen insulina en el aparato de Golgi de lasclulas beta, por un proceso enzimtico,dando lugar a la insulina y a un pptidoconector o pptido C, de 32 aminoc idos,que se acumula en grnulos secretoriosligados al Golgi, en el citoplasmacelular. Los grnulos que contienencantidades equimoleculares de insulina ypptido C, son liberados por emiocitosis,con participacin del calcio como activadorde los microtbulos y K, y Zn. Laproinsulina posee una serie de accionessimilares a la insulina. El pptido C, encambio carece de acciones, desconocindose su rol fisiolgico. Tanto laproinsulina (en pequeas cantidades),como el pptido C, circulan en el plasmasanguneo. La insulina circula en plasmaformando dmeros o hexmeros, los quese separan en molculas individuales paraLacatigvalurceolsraeceespteolr .secretagogo ms importantede la insulina , activa un receptor demembrana en la clula beta, glucorreceptor. En general, todos los agentes que activanel AMPc intracelular, ya sea por activacinde la adenilciclasa (glucagon, estim.beta), o por inhibicin de la fosfodiesterasa(sulfonilureas, teofilina), estimulanla secrecin de insulina. Receptores de la insulina El receptor de la insulina (R), es una glucoprotenade la membrana celular, de PM360 000, cuya funcin primaria es el reconocimientoe interaccin con la insulina. Tienen una estructura similar a las inmunoglobulinas,y estn constitudas por dossubunidades alfa (PM 125. 000) y dossubunidades beta (PM 90. 000 aproximadamente). Estas subunidades se disponenen forma simtrica. Las subunidades alfase ligan entre s por puentes de disulfuro,en tanto las subunidades beta, tambin, atravs de puentes de disulfuro, se unen acada subunidad alfa. En el R de insulina existira un componentede elevado PM, regulador de la afinidad(o dominio de la afinidad), que estaradado por la subunidad alfa y un componentede bajo PM constitudo por la subunidadbeta, responsables de la eficacia o la actividadintrnseca del complejo R- insulina. Luego de la interaccin de la insulina conlas subunidades alfa, ocurre una movilizacino desplazamiento lateral de los R, que conduce a una agregacin de losmismos, fenmeno indis pensable para eldesarrollo de la accin biolgica de la insulina. En la agregacin, se unen tambinalgunos receptores libres, no ligadosa insulina, posiblemente activados por lahormona por un contacto previo. Si no se produce la agregacin, la uninde la insulina al R, es lbil, reversible,puede ser desplazada por competicin. Encambio luego de la agregacin, la unin sevuelve irreversible. Aunque el mecanismontimo de la agregacin de R, no se conocebien, parece ser evidente que ocurre ungasto de energa. Luego de la agregacin el complejo R- insulinasufre la INTERNALIZACIN o endocitosis.

Este proceso ocurre solo en lugaresespeciales de la clula, llamados hoyos tapizados o revestidos (coated pits), con una protena llamada cla trina.Estos sitios de la membrana carecen decolesterol lo que disminuye la rigidez de lamembrana. En el interior, el complejo Rinsulina(complejo agregados), que inclusoincluye un trozo de membrana celular,forma una unidad citoplasmtica llamadareceptosoma, que se liga al aparato de Golgi, el que luego se convierte en lisosoma.En el proceso, la insulina desencadenasu accin fisiofarmacolgica, y es degradadapor protelisis, el R, libre de insulina,es devuelto a la membrana celular. Los R de insulina, son sintetizados en elretculo endoplsmico celular, sonorganizados en el aparato de Golgi y mediantemecanismos similares a protenasliberadas por clulas, se desplazan y ubicanen la membrana celular. Otros, comovimos, vuelven tambin a la membrana,manteniendo su nmero y funcin apropiados. Se ha postulado que las acciones de lainsulina podran desarrollarse gracias a laactivacin o participacin de un mediadorintracelular. As se sugiri que la insulinapodra causar una inhibicin de la adenilciclasa ydisminucin de AMPcintracelular.Algunas acciones de la insulina podrantener este origen. Tambin el GMPc (guanosinamonofosfatocclico), fue considerado como un posiblemediador de la insulina, y el catin Ca++,desencadenante de numerosos procesosbiolgicos por su entrada o salida de lasclulas. Pero an no fue posible demostrarcon certeza la participacin de los mediadores mencionados en el mecanismo deaccin de la insulina. Recientemente fue aislado un pptido pequeode PM 1000- 1.500, que aparece enlas clulas como un producto de la protelisisparcial del R de insulina. En los procesosde internalizacin, movilizacin yposterior reinstalacin del receptor en lamembrana, se produciran tambin la reparacindel R, con recuperacin del pptidoperdido. Este pptido sera el mediador devarias funciones intracelulares de la insulinacomo estmulo a desfosforilaciones (activacinde ciertas fosfatasas, o a fosforilaciones(activacin de kinasas) de sustratosespecficos. De cualquier manera no todos los efectosde la insulina necesitan la presencia de unmediador especfico. As por ej. el incrementodel transporte de hexosas, glucosaen particular, a travs de la membranaocurrira por estmulo de transportadoresde glucosa ubicados en el interior de lamembrana, por la insulina. La oxidacin dela glucosa tampoco necesita de un mediadorespecfico. La Insulina y el pptido C son transportados a lasuperficie celular, producindose la fusin de lamembrana del grnulo con la membrana plasmtica,la que, por exocitosis es liberada hacia el exteriorinterviniendo en el proceso, microtubulos ymicrofilamentos. La glucosa es el mayor estmulo para la liberacin deInsulina por la clula Beta, la que normalmente essecretada siguiendo un patrn bifsico caracterizado poruna fase inicial aguda, seguida por una fase sostenida, hecho importante a resaltar, ya que unode aspectos a considerar en la diabetes mellitus es la prdida temprana de este pico de liberacin aguda yuno de los enfoques del tratamiento est orientado a restituirlo. El mecanismo por el cual la glucosa estimula laliberacin de la insulina requiere de la entrada inicialde glucosa en la clula a travs de un transportadorque est asociado a la glucocinasa que fosforila laglucosa y constituye el sensor esencial para que se libereinsulina.

La Glucosa es transportada al interior de las clulasa travs de la membrana celular por una familia deprotenas denominadastransportadores de glucosaGLUT. GLUT 1: Relacionada con la captacin de glucosabasal independiente de insulina en muchasclulas. GLUT- 2: Es importante junto con la glucocinasa enlas clulas Beta para la deteccin de losniveles de glucosa. GLUT- 3: Relacionada con la captacin de Glucosaindependiente de insulina en las clulascerebrales. GLUT- 4: Responsable de la captacin de glucosaestimulada por Insulina que determina suaccin hipoglicemiante a nivel del tejidomuscular y del adiposito (1). Despus de la unin de la insulina a su receptor, elcomplejo insulina-receptor forma un endosomamediante una invaginacin de la membrana; losreceptores son reciclados hacia la superficie celular, Mientras que la insulina es degradada en los lisosomastoda la accin es respaldada por la protena Clatrina. ACCION DE LA INSULINA EN EL METABOLISMODE LA GLUCOSA Los principales blancos de accin de la Insulina en elmetabolismo de la glucosa se encuentran en : Hgado - Estimula la utilizacin de glucosa promoviendo laglucognesis.Estimula el depsito de glucgeno. - Reduce o inhibe la produccin heptica de glucosa(Glucogenolisis). - Reduce o inhibe la formacin de glucosa a partir deaminocidos (Gluconeognesis).

Msculo Esqueltico - Mejora la disponibilidad, almacenaje y oxidacin de la glucosa. - Estimula la traslocacin del transportador GLUT-4 delcitoplasma a la membrana celular muscular. Adiposito - Disminuye la liplisis en el adiposito y con ello ladisponibilidad de glicerol para la gluconeognesis. Normalmente la glicemia se mantiene dentro delmites estrechos por el balance entre la entrada deglucosa a la sangre desde el hgado y como consecuenciade la absorcin intestinal despus de las comidas y lacaptacin de glucosa por los tejidos perifricos como elmsculo. La insulina es secretada a un nivel basal bajoentre comidas y a un nivel estimulado ms elevadodurante las mismas. As mismo, existe un perfilinsulnico variable en las 24 horas del da; en lasmaanas y en la primera parte de la tarde existe mayorsensibilidad insulnica, y por lo tanto menor necesidadbasal de insulina, en la segunda parte de la tarde haymenor sensibilidad insulnica lo que indica mayornecesidad basal de insulina. En la primera parte de lanoche la sensibilidad vuelve a aumentar, disminuyendola necesidad basal de insulina y en la segunda parte dela noche se invierte la situacin.
La secrecin de insulina est regulada por la interaccin de sustratos, del sistema nerviosoautnomo, de hormonas y de seales intercelulares (paracrinas). La glucosa, aminocidos (arginina y leucina), cetocidos y cidos grasos constituyen losestmulos primarios. Al metabolizarse, incrementan la concentracin de ATP, inhiben los canales depotasio ATP sensibles y favorecen el influjo de calcio al citosol, al abrir sus canales electrosensibles. Elcalcio se une a una protena - la calmomodulina - la que interacta con otras protenas como la proteinkinasa C, que a su vez activa el citoesqueleto promoviendo la sntesis de miosina para formar los cilioscontrctiles. Los agentes potenciadores como el glucagn, el glucagonlike peptide-1 (GLP-1), secretina,pancreozimina, el pptido inhibidor gstrico (GIP) y la acetilcolina, estimulan la adenilciclasa y asincrementan la concentracin de AMP cclico que a su vez activa proteinkinasas AMP dependientes. Los neurotransmisores: adrenalina, noradrenalina y somatostatina, que actan comoinhibidores, ejercen su efecto modulando el metabolismo del inositol en la membrana, generando diacylglicerol, que regula la activacin de las proteinkinasas. El sistema nervioso autnomo es un importantemodulador de la secrecin insulnica. El parasimptico la estimula y el simptico la inhibe. El efectoadrenrgico es complejo, pues la estimulacin de los 2 receptores inhibe la secrecin, mientras laestimulacin crnica de los receptores la incrementa. Las enterohormonas llamadas incretinas entre las que destaca el GLP-1 y el GIPsecretados en las clulas L del ileon y K del yeyuno respectivamente, luego de la ingestin de alimentos,estimulan la secrecin de insulina mediada por los niveles de la glicemia. Son importantes reguladores dela hiperglicemia postprandial. La interregulacin entre glucosa e insulina es capaz de mantener los niveles de glicemia enun estrecho margen fisiolgico. La clula beta tiene la sensibilidad de percibir pequeos cambios de laglicemia, respondiendo de inmediato con una secrecin insulnica proporcional. En condiciones normales,si existe mayor demanda por una elevacin mantenida de la glucosa, aumenta la sensibilidad a ella yluego es capaz de estimular la replicacin de las clulas beta. Estos efectos tienen una distinta secuenciatemporal: en segundos responde a los cambios de la glicemia, en minutos aumenta la sensibilidad y ensemanas se adapta incrementando la masa celular. La respuesta de la insulina a secretagogos es bifsica: una fase precoz y rpida que dura 10minutos y otra ms tarda, menos intensa y sostenida. La primera presumiblemente se debe a secrecin degrnulos preformados y la segunda, a biosntesis de novo. Se ha demostrado que esta respuesta bifsicaes indispensable para obtener la homeostasis de la glucosa. Secrecin:
y y y y

La insulina se libera desde las clulas beta del pncreas. La mayora de protenas de secrecin se sintetizan en forma de proporteinas o prohormonas. Una endoproteasa elimina el pptido C(zona inactiva de la protena). Al final quedan los extremos N y C unidos por puentes disulfuros. La secrecin puede darse por dos mecanismos: o Secrecin regulada: las celulasalmacenan las protenas en vesculas y las secretan cuando llega un estmulo. o Secrecin constitutiva: se da la exocitosis, independientemente de que haya o no estimulo. o Las clulas las distingue por el tipo de vesicula que forman:  Regulada: cubiertas de clatrina.

Constitutiva: cubiertas de CPO-1