Simulado AV2 – Tecnologia Genética

1) Quatro faixas são numeradas no gel acima. Qual faixa corresponde a cada descrição abaixo?

a) Esta faixa contém o fragmento de DNA mais curto ( )

b) Esta faixa contém um fragmento de DNA de 1500 pares de base ( )
c) Esta faixa contém o fragmento de DNA mais longo ( )

2) Uma técnica conhecida como reação em cadeia da polimerase (PCR) é capaz de produzir
milhões de cópias de uma molécula de DNA em apenas algumas horas. Com qual dos
seguintes processos celulares a PCR é mais parecida? Justifique a sua resposta.

a) Transcrição
b) Mitose
c) Replicação
d) Tradução
e) Splicing

Justificativa:__________________________________________________________________
____________________________________________________________________________
____________________________________________________________________________

3) Para verificar a eficácia do teste de DNA na

determinação de paternidade, cinco voluntários, dentre
eles o pai biológico de um garoto, cederam amostras
biológicas para a realização desse teste. A figura
mostra o resultado obtido após a identificação dos
fragmentos de DNA de cada um deles. Após a análise
das bandas, pode-se concluir que o pai biológico do
garoto é o: _________
4) A eletroforese em gel é frequentemente usada para estudar
as relações evolutivas das espécies. O diagrama abaixo mostra
os resultados de eletroforese em gel para quatro animais
diferentes: A, B, C e D. Qual espécie tem mais DNA em comum
com a espécie A? Justifique a sua resposta.

R: _____________________________________________

________________________________________________

________________________________________________

5) Veja o gel de eletroforese ao lado e escreva a sua

sequência 5’-3:

R: _____________________________________________

________________________________________________

________________________________________________

6) A PCR em Tempo Real também denominada qPCR, foi descrita pela primeira vez em 1993
por Higuchi e seus colaboradores. Sobre esse tema, marque V para as afirmativas verdadeiras
e F para as falsas. Atenção: as falsas deverão ser justificadas.

( ) Ela é uma variante da reação de PCR convencional, pois a amplificação e a detecção

ocorrem simultaneamente, com possibilidade de gerar resultados quantitativos com maior
precisão.

( ) Na PCR convencional, é necessária a preparação de gel de agarose para visualização; na

PCR em tempo real não ocorre manipulação pós-PCR.

( ) A quantificação na PCR em Tempo Real é mensurada pela quantidade de produto

amplificado durante cada ciclo (através da fluorescência emitida). Essa metodologia utiliza um
equipamento com sistema de monitoramento da emissão de fluorescência.
7) Microrganismos, como a bactéria Helicobacter pylori, são usados como marcadores de
migração de populações e ancestralidade de diversos povos por possuírem altas taxas de
mutação em seus HouseKeeping genes (genes essenciais). O registro dessas alterações pode
indicar o índice de ancestralidade e o padrão de migração de populações. A técnica de biologia
molecular de maior valor científico para o reconhecimento das variações genéticas nesses
microrganismos, por possibilitar a comparação entre espécies isoladas de diferentes fontes e
oferecer resultados inequívocos, é:

a) A análise de diferentes fragmentos gerados por enzimas de restrição e separados por

eletroforese (RFLP).

b) A amplificação de fragmentos de DNA de forma randômica (RAPD), para comparação dos

segmentos produzidos ao término da reação.

c) A reação em cadeia pela polimerase (PCR), que amplifica sequências passíveis de serem
confrontadas entre espécies.

d) O sequenciamento de DNA, que possibilita a identificação da sequência das bases

nitrogenadas das moléculas, favorecendo as análises comparativas. e) A citometria de fluxo, que
possibilita a separação de frações espécies específicas, facilitando a comparação entre espécies

8) O gráfico ao lado representa em A os ciclos

de amplificação do qPCR (escala log) do gene
ACTB (B-actina, constituinte do esqueleto
celular) e em B, os do gene COL1A1
(colágeno1, associado a osteogênese
imperfeita). O Ct (ciclo threshold) de ACTB é
18 e o de COL1A1 é 22. Considerando as
informações apresentadas, avalie as
afirmações a seguir.

I. O valor do Ct de COL1A1 indica que a expressão desse gene é 16 vezes maior do que a do

gene ACTB.

II. A linha do threshold indica o limiar de falsos positivos quando as amostras de DNA estão
contaminadas.

III. A inclinação horizontal no fim da curva de amplificação indica que a reação chegou na fase
de estabilização da amplificação ou na fase platô.

É correto o que se afirma em:

a) I, apenas.

b) III, apenas.

c) I e II, apenas.

d) II e III, apenas.

e) I, II e III.
9) As sequências não codificantes e
altamente polimórficas no DNA
funcionam como impressões digitais e
permitem identificar o indivíduo, bem
como sua origem. Nessa característica
de individualidade e hereditariedade
baseiam-se as provas científicas de
paternidade utilizadas no cotidiano
forense brasileiro. Esquema de
eletroforese de fragmentos de DNA
obtidos por digestão com
endonucleases de restrição e coloração
usando-se sondas. Legenda: F1, F2 e F3
- filhos. Pai - suposto pai. Com base na
interpretação da eletroforese acima,
avalie as afirmações seguintes:

I. Nessa corrida de eletroforese, é possível observar a variabilidade na sequência de DNA entre

os indivíduos.

II. O indivíduo F3 não possui parentesco com nenhum dos indivíduos testados.

III. A investigação genética pode excluir a possibilidade de paternidade, como observado em

relação ao indivíduo F1.

IV. É excluída a paternidade do suposto pai em relação ao indivíduo F2.

É correto apenas o que se afirma em:

a) I e II

b) I e III

c) III e IV

d) I, II e IV

e) II, III e IV

10) Qual a diferença entre sequenciamento de 1ª e 2ª geração?

11) Qual a diferença entre dNTP E ddNTP? Qual sua influência no sequenciamento?

12) Qual a função das beads no pirosequenciamento?

13) Explique como ocorre o sequenciamento através do Nanopore.