Quim. Nova, Vol. 29, No.

6, 1159-1163, 2006 DETERMINAO DE LAMIVUDINA, ESTAVUDINA E NEVIRAPINA, EM COMPRIMIDOS, POR CROMATOGRAFIA LQUIDA DE ALTA EFICINCIA Gisele Rodrigues da Silva, Gustavo Portela Lages, Gerson Antnio Pianetti, Elzria de Aguiar Nunan, Cristina Duarte Vianna Soares e Ligia Maria Moreira de Campos* Departamento de Produtos Farmacuticos, Faculdade de Farmcia, Universidade Federal de Minas Gerais, Av. Pres. Antnio Carlos, 6627, 31270-901 Belo Horizonte - MG, Brasil Recebido em 23/2/05; aceito em 24/3/06; publicado na web em 1/8/06

DETERMINATION OF LAMIVUDINE, STAVUDINE AND NEVIRAPINE IN TABLETS BY HIGH PERFORMANCE LIQUID CHROMATOGRAPHY. A high performance liquid chromatography method was developed to quantify lamivudine, stavudine and nevirapine combined in tablets. The separation was carried out in less than 10 min using a phosphate buffer of pH 3.0 and acetonitrile (75:25, v/v) as mobile phase, a LiChrospher ODS column and UV detection at 266 nm. The method was linear over the range of 15135 g/mL (lamivudine), 4-36 g/mL (stavudine) and 20-180 g/mL (nevirapine). The accuracy ranged from 98.56 to 102.04% and intra-day and inter-day precision was less than 1% for the three drugs. The method showed robustness, remaining unaffected by deliberate variations in relevant parameters. Keywords: antiretroviral; HPLC; validation.

INTRODUO O Vrus da Imunodeficincia Humana (HIV) o agente causador da Sndrome da Imunodeficincia Adquirida (SIDA/AIDS). As conseqncias clnicas da infeco pelo HIV devem-se sua capacidade em desarmar o sistema imune do hospedeiro, devido depleo dos linfcitos que expressam, superficialmente, o antgeno CD4-positivo (CD4+). A reduo progressiva dos linfcitos CD4+ em conjunto com alteraes qualitativas e quantitativas do sistema imune leva susceptibilidade do organismo s infeces oportunistas1. O principal objetivo da terapia anti-retroviral retardar a progresso da imunodeficincia, possibilitando aumento do tempo e da qualidade de vida da pessoa infectada. A terapia inicial geralmente composta por dois frmacos inibidores da transcriptase reversa anlogos de nucleosdeos (ITRN) associados a um frmaco inibidor da transcriptase reversa no-anlogo de nucleosdeo (ITRNN)2,3. A estavudina (d4T) e a lamivudina (3TC), frmacos ITRN, so, preferencialmente, recomendados para comporem a terapia antiretroviral. O uso da nevirapina (NVP), um ITRNN, representa alternativa vivel para integrar o esquema triplo2 (Figura 1). A estavudina (2',3'-didesidro-desoxitimidina) e a lamivudina ((2R-cis)-4-amino-1[2(hidroximetil)-1,3-oxatiolana-5-il]-2-(1H)-pirimidiona), anlogos de timidina e citidina, respectivamente, so fosforiladas por enzimas quinases celulares, gerando metablitos ativos que inibem a transcriptase reversa do HIV por competio com nucleosdeos de ocorrncia natural, resultando na finalizao prematura da sntese do DNA viral. A nevirapina (11-ciclopropil-5,11-diidro-4-metil-6Hdipirido[3,2-b:2,3-e][1,4]diazepin-6-ona) induz mudanas conformacionais no stio ativo da enzima transcriptase reversa do HIV, impedindo sua ao4-6. Apesar dos avanos na abordagem clnica da infeco pelo HIV, devido administrao de esquemas teraputicos potentes, ainda se constatam falhas teraputicas decorrentes de toxicidade do frmaco, resistncia viral e, principalmente, falta de adeso ao tratamento2. Um dos principais motivos que levam diminuio da
*e-mail: ligiammc@farmacia.ufmg.br

Figura 1. Estruturas qumicas da lamivudina (3TC), estavudina (d4T) e nevirapina (NVP)

adeso ao tratamento, pelos pacientes portadores do HIV, a alta complexidade do regime teraputico, com a administrao diria de grande nmero de comprimidos e cpsulas, utilizados por tempo indeterminado2,7. Uma alternativa para minimizar o problema da descontinuidade da terapia o desenvolvimento de formas farmacuticas contendo frmacos anti-retrovirais (ARV) associados. Recentemente, a indstria farmacutica Cipla (Mumbai Central, Mumbai, ndia) iniciou a distribuio de comprimidos contendo lamivudina, estavudina e nevirapina associadas (Triomune). Os pacientes beneficiados com este tratamento encontram-se em pases africanos8. Assim, o desenvolvimento de formas farmacuticas contendo anti-retrovirais combinados deixa de ser uma perspectiva futura e torna-se realidade. Vrios mtodos analticos para quantificao de estavudina, lamivudina e nevirapina, isoladamente ou associados, encontramse disponveis na literatura. Estes frmacos tm sido amplamente investigados em estudos clnicos, nos quais a determinao dos ARV acontece em matrizes biolgicas9-13. Porm, constatou-se a ausncia de publicaes que descrevam a quantificao destes ARV associados em comprimidos. No presente trabalho foi desenvolvido e validado um mtodo por cromatografia lquida de alta eficincia (CLAE), em modo isocrtico, para quantificao de lamivudina, estavudina e nevirapina, em comprimidos de Triomune 40 . O mtodo destinase s anlises rotineiras de controle de qualidade dessa associao em medicamentos.

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PARTE EXPERIMENTAL Materiais Medicamento Comprimidos de Triomune 40 , contendo 40 mg de estavudina, 150 mg de lamivudina e 200 mg de nevirapina (Cipla Ltd., Mumbai Central, ndia, lote G33720, fabricado em 09/2003, validade at 02/2005). Padres de trabalho Estavudina (Instituto Vital Brazil AS, Rio de Janeiro, Brasil teor 100,23%), lamivudina (Laob Bioqumicos Ltda., So Paulo, Brasil - teor 99,94%), nevirapina (Labogem S/A Qumica Fina e Tecnologia, So Paulo, Brasil - teor 99,88%). Excipientes Lactose e amido (Meggle AG, Wasserburg, Alemanha); dixido de silcio coloidal (Degussa AG, Frankfurt, Alemanha); talco, estearato de magnsio e hidroxipropilcelulose (Henrifarma Produtos Qumicos e Farmacuticos Ltda., So Paulo, Brasil); celulose microcristalina e glicolato de amido sdico (Blanver Farmoqumica Ltda., So Paulo, Brasil). Reagentes Fosfato de potssio monobsico (Reagen Quimibrs Indstrias Qumicas S.A., Rio de Janeiro, Brasil), cido fosfrico (Merck, Darmstadt, Alemanha), acetonitrila (ACN) (J. T. Baker, Phillipsburg, USA), gua ultrapura obtida por sistema Milli-Q-Plus (Millipore, USA). Equipamentos e condies cromatogrficas Cromatgrafo a lquido de alta eficincia Hewlett Packard, HP 1100, equipado com bomba quaternria HP 1100, forno de coluna, auto-injetor HP 1100, detector UV-Vis DAD HP 1100. Os dados cromatogrficos foram analisados usando-se o programa HP ChemStation. Utilizou-se coluna Merck LiChrospher C18 (5 m, 250 x 4,0 mm d.i.), mantida a 30 oC. A fase mvel era constituda de mistura de 25 partes de acetonitrila e 75 partes de tampo fosfato pH 3,0. A soluo tampo foi preparada dissolvendo-se 7,09 g de fosfato de potssio monobsico em gua ultrapura para 1000 mL e ajustando-se o pH em 3,0, com cido fosfrico. O fluxo da fase mvel foi de 0,8 mL/min, o volume de injeo de 20 L e a deteco em 266 nm. Mtodo Determinao dos ARV em comprimidos Soluo padro estoque Transferiram-se 37,5 mg de 3TC, 10 mg de d4T e 50 mg de NVP para o mesmo balo volumtrico de 50 mL. Acrescentaramse 35 mL de mistura de ACN e gua (80:20). Deixou-se em ultrasom por 20 min. Completou-se o volume com a mesma mistura de solventes. Soluo padro diluda Transferiram-se 5 mL da soluo padro estoque para balo volumtrico de 50 mL e diluiu-se para 50 mL com a fase mvel. A soluo resultante foi filtrada em membrana de 0,45 m. As concentraes finais de 75 g/mL 3TC, 20 g/mL d4T e 100 g/mL NVP foram consideradas concentraes de trabalho.

Soluo amostra Pesaram-se 10 comprimidos, determinou-se o peso mdio e pulverizou-se finamente. Transferiu-se, para balo volumtrico de 50 mL, quantidade de p equivalente a um quarto do peso mdio, correspondendo, teoricamente, a 37,5 mg de 3TC, 10 mg de d4T e 50 mg de NVP. Acrescentaram-se 35 mL de mistura de ACN e gua (80:20). Deixou-se em ultra-som por 20 min. Completou-se o volume com a mesma mistura de solventes e filtrou-se em papel de filtro. Transferiram-se 5 mL do filtrado para balo volumtrico de 50 mL e diluiu-se com a fase mvel, obtendo-se concentraes tericas de 75 g/mL 3TC, 20 g/mL d4T e 100 g/mL NVP. A soluo resultante foi filtrada em membrana de 0,45 m. Soluo placebo Transferiram-se, para balo volumtrico de 50 mL, quantidade de p dos excipientes que compem a formulao de Triomune14, equivalente a um quarto do peso mdio, correspondendo a 18,3 mg de lactose, 0,5 mg de dixido de silcio coloidal, 0,5 mg de talco, 79,0 mg de celulose microcristalina, 4,0 mg de glicolato de amido sdico, 0,5 mg de estearato de magnsio, 2,0 mg de hidroxipropilcelulose, 10,0 mg de amido. Acrescentaram-se 35 mL de mistura de ACN e gua (80:20). Deixou-se em ultra-som por 20 min. Completou-se o volume com a mesma mistura de solventes e filtrou-se em papel de filtro. Validao Os parmetros de validao avaliados foram os designados no Guia International Conference on Harmonisation (ICH)15, para mtodos de quantificaes de frmacos em medicamentos, a saber, seletividade, linearidade, preciso intra-dia e inter-dias, exatido e robustez. Seletividade A seletividade foi demonstrada da seguinte maneira: prepararam-se 2 grupos de solues. O grupo 1 era representado por 5 solues padro diludas. O grupo 2 era representado por 5 solues padro diludas, preparadas de forma idntica das solues do grupo 1, mas adicionadas de 5 mL de soluo placebo. Tambm foi preparada uma soluo placebo diluda, diluindo-se 5 mL da soluo placebo para 50 mL com a fase mvel. As solues foram filtradas em membrana de 0,45 m e injetadas em triplicata. Calculou-se a mdia das reas dos picos de cada frmaco, em cada grupo. Realizou-se anlise estatstica de comparao de mdias (teste t de Student) com o intuito de demonstrar que os excipientes no exerciam influncia, estatisticamente significante, sobre as reas dos picos dos frmacos. Calcularam-se os parmetros cromatogrficos: resoluo, fator de reteno, fator de separao e fator de cauda. Avaliou-se a pureza dos picos dos ARV traando-se espectros no UV em cinco pontos diferentes de cada pico. Linearidade Transferiram-se alquotas adequadas de soluo padro estoque para bales volumtricos de 50 mL de modo a obter, aps diluio com a fase mvel, concentraes de 20, 60, 100, 140 e 180% da concentrao de trabalho de cada ARV. As solues foram injetadas em triplicata. Todas as solues foram preparadas em trs dias consecutivos, obtendo-se trs curvas analticas para cada ARV. Realizou-se anlise de varincia (ANOVA)16 para demonstrar que no existia diferena estatisticamente significativa entre as trs curvas analticas do frmaco. Traou-se a curva analtica comum e calcularam-se a equao de regresso linear, pelo mtodo dos mnimos quadrados, e o coeficiente de correlao.

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Preciso Preciso intra-dia Prepararam-se seis solues amostra e uma soluo padro diluda. As solues amostra foram injetadas em duplicata e a padro diluda, em triplicata. A preciso intra-dia foi expressa como o desvio padro relativo (DPR) dos seis doseamentos realizados no primeiro dia. Preciso inter-dias Prepararam-se seis solues amostra e uma soluo padro diluda. As solues amostra foram injetadas em duplicata e a padro diluda, em triplicata. Calculou-se o DPR dos seis doseamentos realizados no segundo dia. A preciso inter-dias foi expressa como o DPR dos doze doseamentos. Exatido Utilizou-se o mtodo de adio de padro. Prepararam-se trs solues amostra adicionadas de cada padro de ARV, em trs concentraes (80, 100 e 120% da concentrao de trabalho). Para tal, pesou-se quantidade do p dos comprimidos equivalente a 40, 60 e 80% da concentrao de trabalho dos ARV e adicionaram-se 40% dos padres de 3TC, d4T e NVP. Prepararam-se trs solues amostra no adicionadas de padro, em trs concentraes (40, 60 e 80% da concentrao de trabalho). Para tal, pesou-se quantidade do p dos comprimidos equivalente a 40, 60 e 80% da concentrao de trabalho dos ARV. Prepararam-se trs solues padro diludas, a 40% da concentrao de trabalho dos ARV. A exatido foi avaliada calculando-se a porcentagem de recuperao [(%)RE] de 3TC, d4T e NVP, respectivamente. Robustez Foram feitas alteraes deliberadas nos seguintes parmetros: fluxo e pH da fase mvel, temperatura, analistas e colunas. Utilizaram-se trs colunas, classificadas pela idade: coluna nova (ainda no utilizada), coluna de meia idade (utilizada no desenvolvimento do mtodo proposto) e coluna velha (utilizada no desenvolvimento de outros mtodos e em anlises rotineiras do laboratrio). Prepararam-se duas solues amostra e uma soluo padro diluda para cada modificao. As solues foram injetadas em triplicata. Calculou-se o teor de 3TC, d4T e NVP, a resoluo entre os picos e o fator de cauda dos picos em cada parmetro modificado. RESULTADOS E DISCUSSO Otimizao do mtodo de separao Como ponto de partida para o desenvolvimento do mtodo de quantificao dos ARV associados, foram utilizadas as condies cromatogrficas descritas na ref.17 para doseamento da nevirapina na matria-prima. Portanto, os constituintes da fase mvel foram tampo fosfato pH 3,0 e ACN, na proporo 60:40. Nesta condio 3TC e d4T eluram, nesta ordem, em cerca de 2,5 min, mas sem resoluo de linha de base. J a NVP eluiu em 4,17 min, com excelente resoluo. Em seguida, foram feitas alteraes das propores dos constituintes da fase mvel, aumentando-se a proporo de tampo de 5 em 5%, na tentativa de melhorar a resoluo entre 3TC e d4T. A cada alterao, a resoluo melhorava, at que, na proporo 75:25 de tampo e ACN, os picos de 3TC (2,552 min) e d4T (2,915 min) ficaram totalmente resolvidos (resoluo superior a 2,5) e o tempo de reteno da NVP no ultrapassou 10 min (Figura 2). Essa fase mvel foi considerada a mais adequada para a separao, em modo isocrtico, dos 3 ARV. A distncia entre o segundo e terceiro picos (estavudina e nevirapina) poderia ser reduzida com eluio em gradiente. Porm, o

mtodo com gradiente apresenta algumas desvantagens que limitam sua utilizao em anlises de rotina. O tempo de anlise prejudicado pela necessidade de reequlibrio da coluna e a transferncia do mtodo pode ser impossibilitada pela diferena entre equipamentos. Diante destas desvantagens, optou-se pela eluio isocrtica. Durante as etapas de desenvolvimento foram testados, para a deteco, quatro comprimentos de onda, correspondentes aos mximos de absoro da d4T (266 nm), 3TC (271 nm) e NVP (237 e 282 nm). Selecionou-se o comprimento de onda de 266 nm para a deteco, em funo das maiores intensidades de resposta obtidas para as trs substncias, em especial para a estavudina, presente em menor concentrao no medicamento.

Figura 2. Cromatogramas da soluo padro diluda (A), soluo padro diluda adicionada de placebo (B) e soluo placebo diluda (C): lamivudina (75 g/mL) (2,552 min), estavudina (20 g/mL) (2,915 min) e nevirapina (100 mg/mL) (9,334 min). Condies: coluna C18, 250 mm x 4 mm, fase mvel tampo pH 3/ACN (75:25), fluxo 1,0 ml/min, deteco em 266 nm, temperatura 30 oC, volume de injeo 20 L, cromatgrafo HP 1100

Validao do mtodo Seletividade Na Figura 2 est apresentado o cromatograma obtido com as condies estabelecidas. Observou-se a completa separao entre 3TC, d4T e NVP, mesmo na presena dos excipientes do placebo. O cromatograma do placebo apresentou picos com tempo de reteno prximos de 2,5 min, mas com intensidades muito baixas, no constituindo interferncia em potencial. Por meio da anlise estatstica realizada, pode-se aceitar a hiptese nula: a mdia das reas dos picos de cada frmaco, presentes nas solues padro diludas (grupo 1), no difere, estatisticamente, da mdia das reas dos picos de cada frmaco, presentes nas solues padro diludas adicionadas de

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placebo (grupo 2). Assim, confirmou-se que os excipientes no apresentaram efeito estatisticamente significativo sobre as reas dos picos dos ARV, o que permitiu demonstrar a seletividade do mtodo. Na Tabela 1 esto indicadas as mdias das reas dos picos dos ARV, bem como os valores de t calculado e t tabelado (p < 0,05). Tabela 1. Anlise estatstica para avaliar a seletividade: mdia das reas (n = 5) dos picos dos anti-retrovirais nos grupos 1 e 2, comparao entre mdias (valores de t calculado e t tabelado) Lamivudina (3TC) Grupo 1 Grupo 2 t calculado t tabelado 8; 0,05 4224,9 4230,1 0,168 2,306 Estavudina (d4T) 1243,3 1250,6 0,639 Nevirapina (NVP) 3724,3 3745,4 0,762

cuperaes variaram entre 98,56 e 102,04% para os trs ARV, nas trs concentraes, o que possibilitou demonstrar a exatido do mtodo (Tabela 5). Tabela 3. Anlise estatstica (ANOVA) para avaliar a linearidade: dados obtidos a partir das trs curvas analticas da lamivudina (3TC), estavudina (d4T) e nevirapina (NVP); intervalo linear, equao da reta comum e coeficiente de correlao (r) Fator de Variao Reta comum 3TC d4T NVP Diferena entre retas Resduos retas individuais Dentro dos grupos F calculado 3TC d4T NVP 3TC d4T NVP 3TC d4T NVP 3TC d4T NVP Soma dos Quadrados 247539584 22168210 200190744 679 394 2500 29743 3464 26523 247570005 22172068 200219767 0,445 2,217 1,838 Graus de liberdade 1 1 1 2 2 2 39 39 39 42 42 42 F tabelado Quadrado Mdio 247539584 22168210 200190744 339 197 1250 763 89 680 5894524 527906 4767137 3,238 (p < 0,05) 21,047 + 55,282x r = 0,9999 -0,232 + 62,037 x r = 0,9999 5,405 + 37,311x r = 0,9999

Os parmetros cromatogrficos calculados esto indicados na Tabela 2. Os fatores de reteno variaram entre 0,5 e 2018, demonstrando que os picos dos frmacos esto resolvidos, devido adequada fora de eluio da fase mvel. Os valores de resoluo calculados foram superiores a 2,0, o que mostra a total separao entre os picos dos frmacos, em nvel de linha de base, e consequentemente, a qualidade da separao cromatogrfica. Os valores de fator de cauda, prximos da unidade, so ideais, pois indicam a simetria dos picos. Picos simtricos minimizam erros na quantificao dos frmacos. Tabela 2. Parmetros cromatogrficos para avaliar a seletividade: fator de reteno, fator de separao, resoluo e fator de cauda Parmetro Fator de reteno Fator de separao Resoluo Fator de cauda Lamivudina (3TC) 0,93 1,2 Estavudina (d4T) 1,21 1,30 2,7 1,2 Nevirapina (NVP) 6,11 5,05 28,2 1,2

Intervalo

3TC 15-135 g/mL d4T 4-36 g/mL

Equao da reta Coeficiente de correlao

NVP 20-180 g/mL

(r)

Foram traados os espectros no UV do pico do frmaco, em cinco pontos diferentes. Todos os espectros se sobrepuseram, demonstrando a pureza dos picos e seletividade do mtodo. Linearidade Mediante a anlise de varincia (ANOVA) das inclinaes das trs curvas analticas obtidas para cada frmaco, constatou-se que no h diferena estatisticamente significativa entre estas inclinaes (p < 0,05), o que permitiu estabelecer uma curva analtica comum para cada ARV. Os coeficientes de correlao (r) das curvas analticas comuns foram superiores a 0,999, indicando forte correlao linear entre as concentraes e as reas (Tabela 3). Preciso As precises intra-dia e inter-dias do mtodo foram determinadas pelo doseamento dos comprimidos, em sextuplicata, em dois dias consecutivos, e expressas em DPR. Os valores de DPR obtidos no doseamento de cada ARV esto abaixo de 1%, o que demonstra a preciso do mtodo (Tabela 4). Exatido A exatido foi avaliada por meio da (%)RE dos frmacos, nas concentraes 80, 100 e 120% da concentrao de trabalho. As re-

Tabela 4. Teores, em porcentagem, dos anti-retrovirais nos comprimidos, calculados em dois dias diferentes, para avaliar a preciso intra-dia e inter-dias Lamivudina (3TC) Mdia dos teores T(%) (dia 1) (n = 6) DPR intra-dia 1 Mdia dos teores T(%) (dia 2) (n = 6) DPR intra-dia 2 DPR inter-dias 1 e 2 101,70 0,27 102,43 0,25 0,45 Estavudina (d4T) 91,56 0,23 91,55 0,50 0,37 Nevirapina (NVP) 103,30 0,64 102,25 0,83 0,88

DPR desvio padro relativo; T(%) teores dos anti-retrovirais nos comprimidos, em porcentagem

Robustez Calcularam-se os teores dos ARV nos comprimidos a cada parmetro modificado. Estes teores no apresentaram variaes significativas em relao aos teores obtidos aplicando-se o mtodo

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Tabela 5. Porcentagens de recuperao dos anti-retrovirais, nas concentraes 80, 100 e 120%, para avaliar a exatido Porcentagem de recuperao Lamivudina Estavudina Nevirapina (3TC) (d4T) (NVP) 80% 100,41 101,47 102,04 98,61 101,99 99,86 100,58 101,95 101,45 99,34 101,61 101,83 98,56 101,87 100,71 99,64 101,97 101,42 100,32 101,52 101,19 101,26 101,99 101,89 101,67 99,99 100,68

nas condies estabelecidas (ver mdia dos teores de cada ARV obtidos no item Preciso). Calcularam-se os valores de resoluo, que foram superiores a 2, indicando adequada separao dos picos, e os valores de fator de cauda, que ficaram prximos da unidade, indicando simetria dos picos (Tabela 6). Diante dos resultados obtidos, concluiu-se que o mtodo robusto. CONCLUSO Um mtodo por cromatografia lquida de alta eficincia para determinao de lamivudina, estavudina e nevirapina, em comprimidos foi desenvolvido e validado. O mtodo, em fase reversa e modo isocrtico, demonstrou ser seletivo, linear, preciso, exato e robusto, alm de simples e rpido, podendo ser aplicado a anlises rotineiras de controle de qualidade.

100%

120%

Tabela 6. Parmetros modificados para demonstrar robustez, teores dos anti-retrovirais nos comprimidos aps cada modificao, resoluo e fator de cauda dos picos dos anti-retrovirais Parmetro Fluxo 0,7 mL/min 0,9 mL/min Temperatura 26 oC 35 oC pH tampo 2,8 3,2 analistas coluna nova meia idade velha
1

Lamivudina (3TC) T(%) R T 102,451 102,082 102,41 102,22 101,84 101,49 102,59 100,96 100,57 100,79 100,24 100,47 102,86 102,70 101,03 101,24 101,90 100,88 101,35 100,91 1,2 1,3 1,2 1,2 1,2 1,2 1,3 1,3 1,3 1,3 1,3 1,3 1,2 1,3 1,2 1,2 1,3 1,3 1,3 1,3

Estavudina (d4T) T(%) R T 91,091 89,172 90,71 89,72 89,42 89,08 89,77 89,94 89,74 89,16 89,96 89,60 91,36 89,14 89,46 90,21 90,21 89,77 89,55 90,05 2,9 2,9 2,6 2,6 2,6 2,7 2,8 2,7 2,7 2,7 2,4 2,4 2,7 2,7 2,7 2,7 2,7 2,7 2,6 2,6 1,2 1,2 1,2 1,2 1,2 1,2 1,2 1,2 1,2 1,2 1,0 1,2 1,2 1,2 1,1 1,1 1,2 1,2 1,2 1,2

Nevirapina (NVP) T(%) R T 102,011 101,692 102,52 103,36 102,22 102,31 102,34 102,34 101,40 102,17 101,04 101,49 102,96 102,63 101,62 101,89 102,11 102,19 102,05 101,93 29,4 29,1 27,4 27,5 27,9 28,1 27,9 27,8 28,3 28,0 28,3 28,1 27,7 27,6 27,3 27,2 28,4 28,3 28,0 28,0 1,1 1,1 1,1 1,1 1,1 1,1 1,1 1,1 1,2 1,1 1,1 1,1 1,1 1,1 1,0 1,0 1,2 1,2 1,1 1,1

soluo amostra 1; 2 soluo amostra 2; T(%) Teor dos anti-retrovirais nos comprimidos, em porcentagem; R Resoluo; T Fator de cauda
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