Objetivo.

El objetivo del prctico de hoy consiste en descubrir mediante centrifugacin los componentes de la clula aplicando el llamado Fraccionamiento celular el cual es usado para investigar la bioqumica y fisiologa de organelos fuera del ambiente complejo de la clula. Tambin aplicaremos nuestros conocimientos acerca del microscopio el cual tiene un papel fundamental en este experimento.

Resultado. 1. Observacin primer pellet. Luego de transferir el homogenizado y centrifugado por 10 minutos obtuvimos un pellet rico en ncleos del cual sacamos una parte y la llevamos al portaobjetos para su observacin con el microscopio, de esta manera nos dimos cuenta de que el pellet contena gran cantidad de ncleos los cuales posteriormente teimos observando as que solamente algunas partes de la muestra se tean y estas correspondan a los ncleos , el resto del pellet que no fue teido corresponda a bacterias, clulas enteras y cito esqueleto.

(imagen primer pellet sin tincin)

(imagen primer pellet con tincin)

Observacin segundo pellet El segundo pellet obtenido contena gran cantidad de mitocondrias, las que se vean muy diminutas en el microscopio aun ocupando un objetivo de 100x y aceite de inmersin. Esta muestra al ser teida no permita ver alguna diferencia muy significativa con la muestra sin tincin como veremos a continuacin.

(imagen 2 pellet sin tincin)

(imagen 2 pellet con tincin)

Discusin 1. En la primera parte del experimento no tuvimos ningn inconveniente obteniendo las muestras ya que estas fueron centrigugadas en conjunto con la profesora siguiendo

las indicaciones dadas, tampoco observamos algn resultado o avistamos alguna sustancia ajena a la muestra tomada lo que pudiera indicar que esta se haba contaminado al momento de ser destapada. Si tuvimos inconvenientes para poder enfocar la muestra en el microscopio, esto puede deberse a que la muestra no estaba en condiciones optimas ya que al momento de sacar la muestra del cubo con hielo esta puede haber generado un desgaste en la muestra, tambin es posible que el microscopio no haya estado en perfectas condiciones por lo que fue necesario cambiarlo y conseguirnos muestras de nuestros compaeros para comparar con las nuestras. En el caso de la fraccin mitocondrial ocurri algo similar a lo anterior, no tuvimos problemas para conseguir la muestra ni para separarla del sobrenadante, pero si para enfocarla lo cual al cambiar de microscopio con ayuda de nuestra profesora logramos, pudiendo as ver con el objetivo 100x una agrupacin de crculos en el centro de la muestra, los cuales correspondan a las mitocondrias, luego al teir esta muestra no observamos mayores diferencias solo que esta vez las mitocondrias se encontraban teidas pero el aumento del microscopio no permita ver mayores detalles.