TEMA 1. Concepto y Objetivos de la Bioqumica. Evolucin histrica y estado actual. Relacin con otras ciencias experimentales. Concepto de la Bioqumica.

Ciencia que estudia las bases moleculares de la vida o ciencia de la vida a nivel molecular. Parte de la qumica que estudia la composicin y transformacin de los seres vivos. (R. Academia Lengua Espaola). Ciencia que estudia los constituyentes qumicos de los seres vivos, sus funciones y transformaciones, as como los procesos que controlan stas (Herrera). Ciencia biolgica que estudia la estructura, propiedades, localizacin y funciones de las molculas en los seres vivos (MJ. Noriega). Por qu estudiar Bioqumica en la Diplomatura de Enfermera? Pilar bsico en la compresin del ser vivo. Nexo de unin entre bioqumica y otras materias de las ciencias de la salud (fisiologa, nutricin, farmacologa, etc). Muchas enfermedades se producen por disfunciones analizables bajo parmetros bioqumicos (semiologa y enfermera mdicoquirrgica). Probable evolucin futura. Compresin del proceso de desarrollo vital. Incremento del rigor y la profundidad cientfica del alumno para su futura carrera profesional. Objetivo de la Bioqumica. EXPLICAR LAS ESTRUCTURAS Y FUNCIONES BIOLGICAS EN TRMINOS QUMICOS (LEHNINGER) Divisiones y Clasificacin. BIOQUMICA ESTRUCTURAL O ESTTICA. BIOQUMICA DINMICA. BIOLOGA MOLECULAR. ENFOQUE BIOQUMICO Y MOLECULAR DE LA ENFERMEDAD. BIOQUMICA Y CIENCIAS DE LA SALUD. TEMA 2. Bioelementos. Biomolculas. Papel del agua en los seres vivos. Propiedades fsicoqumicas del agua. Disociacin del agua. Concepto de pH y pK. BIOELEMENTOS. Def.: elementos qumicos que constituyen los seres vivos. 1

Clasificacin (segn su abundancia): Primarios: H, O, C, N (99%). Secundarios: Ca, P, K, S, Na, Cl (0.7%). Oligoelementos: Mn, I, Cu, Co, Zn, F, Mo, Se, Mg, Fe, Ni (< 0.01%). Clasificacin (segn la funcin): Plstica o estructural: H, O, C, N, P, S. Esqueltica: Ca, Mg, P, F, Se. Energtica; C, O, H, P. Cataltica: Fe, Co, Cu, I. Osmtica y electroltica: Na, k, Cl. Por qu H, O, C y N? Facilidad de formar enlaces covalentes entre ellos. Disponibilidad de los t. de carbono para la formacin de esqueletos carbonados tridimensionales. Favorecer la multiplicidad de enlaces (dobles y triples) as como de la formacin de enlaces que facilitan la formacin de estructuras lineales, ramificadas, cclicas, heterocclicas, etc. Posibilidad de que con muy pocos elementos se originen una gran variedad de grupos funcionales. ENFERMEDADES CARENCIALES (Dficit de oligoelementos) Cobalto: anemia, retraso del crecimiento. Cobre: anemia, def. esquelticos, desmielinizacin, degeneracin del S.N., lesiones cardiovasculares. Flor: caries, alteraciones de la estructura sea. Manganeso: retraso del crecimiento. Molibdeno: aumento de metionina en sangre, bocio. Selenio: miocardiopatas. Yodo: bocio. Zinc: inapetencia, falta de crecimiento, alteracin en la curacin de las heridas. Tabla peridica de los elementos. BIOMOLCULAS. (Principios inmediatos). Def.: son las molculas constituyentes de los seres vivos. Los bioelementos se unen para formar las Biomolculas. Clasificacin (segn su naturaleza qumica): Inorgnica: agua, gases (O2, CO2), sales inorgnicas (fosfato, biocarbonato, amonio). Orgnicas: glcidos (glucosa, glucgeno), lpidos (triglicridos, colesterol), protenas (aminocidos), cidos nucleicos (ADN, ARN), metabolitos (piruvato, lactato). Caractersticas: no gratuidad y gran diversidad. 2

Clasificacin (segn grado creciente de complejidad): Precursores (pm < 50d): agua, C02, amonio. Intermedios metablicos o metabolitos (pm 50200 d): piruvato, oxalacetato o citrato. Unidades estructurales (pm 100300 d): Biomolculas (monosacridos, aminocidos, nucletidos, glicerol, cidos grasos). Macromolculas (pm 106109 d): ribosomas, cromatina o membranas. LA CLULA Y SUS ORGNULOS. TIPOS DE ENLACES (Fuerza del enlace). COVALENTES (> 210 KJ/mol). FUERZAS INTERMOLECULARES. interacciones inicas (480 KJ/mol). Puentes de hidrgeno (1230 KJ/mol). Fuerzas de Van der Waals (0.39 KJ/mol). Interacciones hidrfobas (312 KJ/mol). GRUPOS FUNCIONALES Las molculas ms sencillas derivadas del carbono son las construidas con carbono e hidrgeno y se denominan HIDROCARBUROS. Fotocopia Pg. 15 PAPEL DEL AGUA Biomolcula ms abundante (6570% del peso total del cuerpo). Variabilidad en la proporcin segn los tejidos. Su importancia se debe a que casi todas las reacciones bioqumicas del organismo tienen lugar en el seno del agua. Las intensas fuerzas de atraccin entre las molculas de agua son las que le confieren sus propiedades como disolvente y la dbil tendencia a ionizarse es fundamental para la estructura y funcin de la Biomolculas. ESTRUCTURA MOLECULAR DEL AGUA Carcter tetradrico. ngulo del enlace HOH: 104.5. Dipolo elctrico. La atraccin electrosttica entre el tomo de 02 y el de H constituye los puentes de hidrgeno. Esta estructura condiciona las propiedades fsicoqumicas del agua. El mayor n de enlaces ocurre cuando el H20 se encuentra en estado slido (hielo) constituyendo una estructura regular cristalina (tetrahidrol). Grfico Pg. 17. PROPIEDADES FSICOQUMICAS DEL AGUA.

 Elevada temperatura de ebullicin (100). Densidad mxima a 4C. Elevado calor especfico (1 cal/g x C) = 1516C. Elevado calor de vaporizacin (536 cal/g). Elevada conductividad calorfica: termorregulacin. Elevada constante dielctrica: buen disolvente. Capacidad de hidratacin o solvatacin de iones. Disolvente de molculas antipticas: forma micelas. Disolvente de compuestos polares no inicos: DISOLVENTE UNIVERSAL. Elevada tensin superficial: facilita emulsin grasas. Transparencia. Electrolito dbil (anfolito o sustancia anftera). FUNCIONES BIOQUMICAS Y FISIOLGICAS DEL AGUA. Componente estructural de las macromolculas, por los puentes de hidrgeno. Disolvente universal. Sustrato o producto (metabolito intermedio) en las reacciones enzimticas. Carcter termorregulador. COMPARTIMENTACIN ACUOSA CORPORAL. AGUA INTRACELULAR (70%). Agua libre. Agua ligada o asociada. AGUA EXTRACELULAR (30%). Agua plasmtica (7%): plasma y linfa. Agua intersticial (23%): sinovial, pleural, peritoneal, etc. INGESTA Y EXCRECIN DE AGUA EN LOS HUMANOS Ingesta media: 2700 ml. Bebida: 1300 ml. Alimentos: 900 ml. Oxidacin metablica: 500 ml. Excrecin: 2700 ml. Respiracin: 500 ml. Transpiracin, evaporizacin: 700 ml. Orina: 1400 ml. Heces: 100 ml. ALT. METABOLISMO HDRICO Alteracin DESHIDRATACIN Tipo ISOTNICA Causas

HIPERTNICA HIPOTNICA

Vmitos, diarrea, prdida de sangre o plasma. Aporte insuficiente de agua, prdida de agua por piel, pulmones e intestino. Aporte insuficiente o prdida de sodio (insuficiencia renal, dficit aldosterona). Infusiones isotnicas, dficit de protenas, insuficiencia cardaca. Infusiones o ingestin de soluciones hipertnicas, sd. Conn, sd. Cushing. Aporte oral excesivo de agua, infusin de soluciones sin sal.

ISOTNICA HIDRATACIN HIPERTNICA HIPOTNICA

DISOLUCIONES Disolucin: combinacin homognea de varios componentes y con composicin variable. Mezcla: sistema heterogneo, de composicin variable, formado por 2 o ms porciones diferentes, separadas por superficies netas (fases). Suspensin: mezcla heterognea que puede ser separada fcilmente por filtracin, en la que el tamao de las partculas es grande, de forma que puede sedimentar con mucha facilidad. Soluto: sustancia que se disuelve (fase discontinua). Disolvente: medio en el que se disuelve el soluto (fase continua). Clasificacin de las disoluciones (segn naturaleza fsica de los componentes): Disoluciones en estado gaseoso: Gas en gas: aire. Lquido en gas: humedad. Slido en gas: partculas de polvo en aire. Disoluciones en estado lquido: Gas en lquido: CO2 en agua. Lquido en lquido: alcohol en agua. Slido en lquido: azcar en agua. Disoluciones en estado slido (raras): Gas en slido: hidrgeno en paladio. Lquido en slido: mercurio en cobre. Slido en slido: cobalto en nquel. EXPRESIN DE LA CONCENTRACIN DE UNA DISOLUCIN Expresadas en forma de porcentaje:

 Tanto por ciento en peso. Tanto por ciento en volumen. Tanto por ciento en peso/volumen. Expresadas en forma absoluta: g/l mg/ml mg/dl Molaridad: n de moles soluto/1 L disolucin. Molalidad: n moles soluto/1 Kg disolvente. Normalidad: n equiv.gramo soluto/1L disolucin. TIPOS DE ELECTROLITOS Electrolitos: sustancias cuya disociacin inica en solucin les hace capaces de conducir la corriente elctrica. Clasificacin: CIDOS. BASES. SALES. cidas: sustancias que al disociarse dan lugar a protones libres (H+): HCL. Bsicas: sustancias que al disociarse originan iones hidroxilo (OH): NaOH. Neutras: compuestos que originan iones distintos al in H y al in hidroxilo: NaCl. TEORIAS SOBRE ACIDEZ Y BASICIDAD cido: sustancia que puede ceder protones. Base: sustancia capaz de aceptar protones. Un dador de protones y su correspondiente aceptor, forman un par cidobase conjugados. Brnsted y Lowry IONIZACIN DEL AGUA Ionizacin reversible H20 !H + + OH Kw = [H+] x [OH] = 1014 CONSTANTE DEL PRODUCTO INICO DEL AGUA [H+] = [OH] = 107 ESCALA DE pH (potencia de Hidrgeno) Def. de pH: logaritmo decimal de la concentracin molar de iones hidrgeno, hidrogeniones e iones hidrnio, 6

con el signo cambiado, pH = log [H+]. Def. de pOH: logaritmo decimal de la concentracin molar de iones hidroxilo, con el signo cambiado, pOH = log [OH]. pH + pOH = 14 Clasificacin de las disoluciones en funcin del pH: CIDAS: si el valor del pH es < 7. BASICAS: si el valor del pH es > 7. NEUTRAS: si el valor del pH es igual a 7. MEDICIN DEL pH Usando colorantes: Tornasol. Fenolftalena. Rojo fenol. pHmetro: electrodo de vidrio. La medida del pH en sangre y la orina se utiliza para diagnosticar enfermedades (pH en sangre 7.4): ACIDOSIS: si el valor del pH es < 7.4. ALCALOSIS: si el valor del pH es > 7.4. CIDOS Y BASES DBILES La gran mayora de cidos y bases que regulan el pH de nuestro cuerpo son dbiles y por tanto poco disociados. Esta disociacin o las constantes de equilibrio de las reacciones de ionizacin viene regida por la CONSTANTE DE DISOCIACIN O IONIZACIN del cido o de la base, representada como Ka o Kb. AcH (actico) ! Ac (acetato) + H+ AcH + (actico) + H2O ! Ac (acetato) + H3O+ [Ac][H3O+] Ka = [AcH] CONCEPTO DE pK Definicin de pK: logaritmo decimal de la constante de disociacin del cido y/o base, con el signo cambiado. pKa = log Ka pKb = log Kb

Cuanto ms fuerte se disocie el cido, menor es su pKa. pKa de un cido puede definirse como el valor del pH para el que el 50% se encuentra disociado. Es evidente de que a mayor fuerza del cido, ms dbil es su base conjugada y viceversa. pKa + pkb = pKw = 14 Fotocopia pH y pK Pg. 33. TEMA 3 Soluciones tampn. Ecuacin de HendersonHasselbalch. Tampones fisiolgicos. FUNDAMENTOS DE LAS DISOLUCIONES REGULADORAS Una disolucin reguladora, amortiguadora, tampn o buffer est formada por: Un cido dbil y la sal de su base conjugada (c. Actico/acetato sdico). Una base dbil y la sal de su cido conjugado (amonaco/cloruro amnico). Capacidad amortiguadora de una disolucin reguladora es la cantidad de cido o base que puede neutralizar dicha solucin, con una variacin mxima de una unidad en el pH de la disolucin. ECUACIN DE HENDERSONHANSSELBALCH AH ! A + H+ [A] [H+] [AH] Ka = [H+] = Ka [AH] [A] [AH] log [H+] = log Ka log [A] [sal] [A] pH = pKa + log pH = pKa + log [cido] [AH] [base] pH = pKb + log [sal] 8

DISOLUCIONES REGULADORAS FISIOLGICAS Amortiguador fosfato. Amortiguador bicarbonato: principal Protenas. Hemoglobina. ACIDOSIS Acidosis metablica. Causas: cetoacidosis diabtica, hipertermia, sepsis, infarto agudo miocardio, para cardiorrespiratoria, etc. Compensacin: hiperpnea respiratoria (pulmn), retencin de bicarbonato (rin). Tratamiento: infusin de bicarbonato. Acidosis respiratoria. Causas: insuficiencia ventilatoria, hipoventilacin, bronquitis crnica, enfisema pulmonar, etc. Compensacin: aumento reabsorcin bicarbonato a nivel renal. Tratamiento: oxigenoterapia o respiracin asistida. ALCALOSIS Alcalosis metablica. Causas: vmitos repetidos, sndrome de Conn (hiperladosteronismo), etc. Compensacin: hipoventilacin respiratoria (pulmn), aumento de la excrecin de bicarbonato (rin). Tratamiento: HCL diluido, cido lctico, etc. Alcalosis respiratoria. Causas: hiperventilacin pulmonar (insuficiencia cardaca, fiebre, etc.), crisis de ansiedad o histeria. Compensacin: mayor eliminacin de bicarbonato a nivel renal. Tratamiento: inspiracin del CO2 que espira por el propio paciente (bolsa de plstico). Concentraciones de iones en lquidos corporales Lquido Suero Na+ K+ Ca++ Mg++ Cl 140 4.5 5 1.5 104 Intracelular 12 160 2 34 2

HCO3 Fosfato

24 2

10 140

Alteraciones patolgicas El aumento del sodio en plasma se denomina HIPERNATREMIA. Causas: deshidratacin, sndrome de Conn (hiperladosteronismo), hiperproduccin de cortisol (sndrome de Cushing). La disminucin de la concentracin de sodio en plasma se denomina HIPONATREMIA. Causas: excesiva ingesta de agua, enfermedad de Addison (hipoaldosteronismo), quemaduras, diarreas. El aumento en la concentracin de potasio se denomina HIPERPOTASEMIA O HIPERKALIEMIA. Causas: destruccin celular, hemlisis o insuficiencia renal. El descenso de la concentracin de potasio se denomina HIPOPOTASEMIA O HIPOKALIEMIA. Causas: hiperladosteronismo (sndrome de Conn) y diurticos. E. ADDISON: hiponatremia + hiperpotasemia (hipoaldosteronismo). E. CONN: hipernatremia + hipopotasemia (hiperladosteronismo). Gasometra arterial ACIDOSIS DC pH ! 7.4 pCO2 40 ! HCO3 !! 26 ! !! 26 ! !! 40 ! !! ! 7.4 ! 7.4 ! 7.4 METABLICA DC ALCALOSIS RESPIRATORIA DC

METABLICA DC

RESPIRATORIA

pH = 7.4 pCO2 = 40 mm Hg HCO3 = 25 27 mmol/L D = descompensada C = compensada Ej. pH = 7.2 = acidosis pCO2 = 80 mm Hg pCO3= 26 mmol/ L 10

respiratoria como el problema est en el pulmn tenemos que aumentar el pH para que el rin aumente el bicarbonato evitando que lo pierda por la orina. (HCO3 !pH). TEMA 4 Protenas: concepto, clasificacin y funciones. Aminocidos: estructura y clasificacin. Propiedades de los aminocidos: esteroisomera, comportamiento cidobase y reacciones qumicas. INTRODUCCIN Protenas (protos): primero o ms importante. Son las macromolculas ms abundantes de las clulas vivas. Gran variedad y diversidad de funciones: enzimas, hormonas, anticuerpos, antibiticos, venenos, protenas de la leche, etc. Papel central: son los productos finales ms importantes de las rutas de informacin gentica. Todas las protenas estn construidas por medio de enlaces covalentes a partir de 20 aminocidos (20n). Proporcionan estructura, catalizan reacciones celulares y llevan a cabo multitud de funciones. las Biomolculas ms importantes para el desarrollo del organismo son las nitrogenadas: Unidades bsicas de las protenas (aminocidos). cidos nucleicos (bases nitrogenadas). Otras Biomolculas de inters (porfirinas y aminas biognicas). las diferencias entre pptidos y protenas son ambiguas: Longitud: pptido es aquel con < 3050 aminocidos. Si son mayores seran protenas. Existencia biolgica: si la protena es sintetizada en el laboratorio y no existe en algn organismo vivo se denomina pptido. CLASIFICACIN De acuerdo a la composicin. Simples: formadas slo por aminocidos. Conjugadas: contienen adems otro componente de distinta naturaleza qumica. Glicoprotenas: Ig, mucinas, proteoglicanos. Lipoprotenas: LDL (mala), HDL (buena). Nucleoprotenas: virus, cromosomas. Otras: metaloprotenas (ferritina), hemoprotenas, flavoprotenas. De acuerdo con su forma. Globulares: forma esfrica u ovoide y son solubles. Fibrosas o Escleroprotenas: alargadas e insolubles (tejidos estructurales). De acuerdo con su solubilidad. Albminas: solubles en agua fra. Globulinas: muy poco solubles en agua fra pero si en disolucin salinas. Glutelinas: origen vegetal. Prolaminas: origen vegetal. Protaminas: contenidas en flujos seminales, solubles en agua. 11

 Histonas: presentes en el ncleo de clulas eucariotas (ADN). Pequeas, bsicas, solubles en agua y cidos diluidos. Escleroprotenas: insolubles y son solubles por mtodos de degradacin. FUNCIN BIOLGICA Este criterio es el ms informativo aunque muy heterogneo. Enzimticas: muy variadas y especializadas. Transportadoras: Hemoglobina y lipoprotenas. Nutrientes y de reserva: ovoalbmina, lactoalbmina. Contrctiles y motiles: actina y miosina. Estructurales: colgeno, queratinas. Defensa: Inmunoglobulinas y anticuerpos, fibringeno y trombina, venenos de serpiente o toxinas bacterianas. Reguladoras: hormonas. Factores trficos: para el desarrollo embrionario. Receptoras: protenas de membrana a las que se unen las hormonas. Cromosmicas: Histonas. Toxinas: microorganismos, insectos o reptiles. ESTRUCTURA DE LOS AMINOCIDOS COOH % H2N %C %H % R (cadena lateral) ESTRUCTURA GENERAL DE LOS AMINOCIDOS PRESENTES EN LAS PROTENAS. Los aminocidos son molculas orgnicas que como indica su nombre contienen un grupo amino (NH2) y otro cido, carboxilo (COOH) unidos al mismo tomo de carbono (carbono a). La presencia de 2 grupos (cido y bsico) les confiere 2 caractersticas importantes para su funcin: Sustancias anfteras: se pueden comportar como cidos o bases. Pueden reaccionar entre ellos para dar lugar a polmeros de cualquier longitud al existir siempre un grupo reactivo libre. Fotocopia de la clasificacin de los aminocidos. Pg. 49. AMINOCIDOS PROTEICOS MINORITARIOS METILACIONES (metilhistidina). ACETILACIONES (acetillisina). HIDROXILACIONES (hidroxiprolina). FOSFORILACIONES. 12

 CARBOXILACIONES. DIMERIZACIONES. CICLACIONES. HIPERMODIFICACIONES (H. tiroideas). AMINOCIDOS NO PROTEICOS AMINOCIDOS (los ms abundantes): homoserina, mocistena (! infarto), ornitina, citrulina (estas dos ltimas ciclo urea). AMINOCIDOS: alanina que forma parte de una vitamina, cido pantotnico. AMINOCIDOS: cido aminobutrico (GABA) que acta como neurotrasmisor inhibitorio a nivel del sistema nervioso. PROPIEDADES DE LOS AMINOCIDOS ESTEROISOMERA. Debido a la forma tetradrica de los C, va a dar lugar a e compuestos: levgiro grupo amino izq., destrog, a la derecha COMPORTAMIENTO ANFTERO CIDOBASE (ZWITTERIN). ABSORCIN LUZ ULTRAVIOLETA (fenilalanina, tirosina y triptfano). REACCIONES DE IDENTIFICACIN (ninhidrina, fluorescamina, ftalaldehdo). TCNICAS PARA SEPARAR PROTENAS CROMATOGRAFA. Filtracin en gel. Cromatografa de intercambio inico. Cromatografa lquida de alta resolucin (HPLC), ms importante. Cromatografa hidrfoba. Cromatografa de afinidad. ELECTROFORESIS (Proteinograma). Disociante en geles de archilamida y/o agarosa. Isoelectroenfoque. ULTRACENTRIFUGACIN. ANTICUERPOS O INMUNOGLOBULINAS. DERIVADOS DE LOS AMINOCIDOS (interesante) CETOCIDOS: cuando un aminocido pierde el grupo amino (no son compuestos nitrogenados): cetoglutarato, piruvato, oxalacetato. AMINAS BIGENAS: cuando un aminocido pierde el grupo carboxilo: histamina y catecolaminas. POLIAMINAS: la descarboxilacin de los aminocidos ornitina y lisina da lugar a las diaminas putrescina y cadaverina. La putrescina es precursora de espermidina y espermita. Estos compuestos son importantes en la proliferacin celular al interactuar con cidos nucleicos y regular los procesos de transcripcin y traduccin. PORFIRINAS Forman parte de vitaminas y coenzimas. el anillo porfirnico esta formado por 4 anillos pentagonales nitrogenados, llamados pirrlicos unidos por puentes metilideno (CH) en las posiciones 2 y 5 para formar una estructura cclica. las porfirinas suelen unir un in metlico en su interior.

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Fotocopia de la estructura hemo, Pg. 55 En el reino vegetal: la clorofila. En el reino animal: hemoglobina (Fe, esencial para el transporte y utilizacin de O2) cuya degradacin produce bilirrubina y los citocromos van a contener grupos porfirnicos. TEMA 5 Estructura primaria de las protenas: enlace peptdico. Estructura secundaria de las protenas: hlice y conformacin . Estudio particular del colgeno. ESTRUCTURAS DE LAS PROTENAS Las protenas son macromolculas y su estructura es muy compleja. Un ser humano produce entre 50.000 y 100.000 protenas diferentes. Existen > 1.400 enfermedades genticas humanas con la produccin de protenas defectuosas. Cada protena tiene una estructura espacial tridimensional nica que se denomina estructura nativa que es fundamental para su funcin qumica o estructural especfica. En resumen: La estructura tridimensional de una protena viene determinada por la secuencia de aminocidos. La funcin de una protena depende de su estructura tridimensional. La estructura tridimensional de una protena es nica o casi nica. Las fuerzas ms importantes que estabilizan la estructura tridimensional especfica de una protena son interacciones no covalentes. Fotocopia Pg. 59. Existen 4 niveles en orden creciente de complejidad: Estructura primaria: secuencia de aminocidos unidos por enlaces peptdicos (covalentes) y la localizacin de los puentes disulfuro. Estructura secundaria: disposiciones regulares y repetitivas en el espacio de residuos adyacentes en una cadena polipeptdica. Las ms importantes son la hlice y la conformacin . Estructura terciaria: descripcin de las relaciones espaciales entre todos los aminocidos de un polipptido (estructura tridimensional completa). Estructura cuaternaria: relacin espacial de los polipptidos o subunidades en la protena global (Ej.: hemoglobina). ENLACE PEPTDICO Es el enlace covalente ms importante que une aminocidos en los pptidos y protenas. Es un enlace de los de mayor relevancia desde el punto de vista biolgico junto al enlace fosfodister. Es un enlace amida formado por la condensacin entre el grupo carboxilo de un aminocido con el grupo amino de otro, liberando una molcula de agua. Se originan dipptidos, tripptidos, oligopptidos, poliptidos y protenas. Caractersticas importantes del enlace peptdico:

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 Enlace resistente a la hidrlisis (estable). Estructura tridimensional. Puede hidrolizarse hirvindolo con agua fuerte, base y enzimas denominadas proteasas. ESTRUCTURA PRIMARIA DE LAS PROTENAS Hace referencia al orden de los aminocidos (secuencia de aminocidos) y a la localizacin de los puentes disulfuro que definen la protena. Aqu estn las claves que determina el resto de la estructura proteica. Las cadenas laterales de los aminocidos estn unidas a los carbonos alfa y son ramificaciones de la cadena principal. El esqueleto de la cadena es comn a todas las protenas y lo especfico es el orden en el que se encuentran las ramificaciones. La estructura 1 puede determinarse por varias tcnicas como la de Edman o del isotiocianato. La conformacin nativa de una protena est estabilizada por interacciones dbiles de tal forma que la protena es ms estable cuanto mayor n de interacciones dbiles. Fotocopia Pg. 62 ESTRUCTURA SECUNDARIA DE LAS PROTENAS Define las disposiciones regulares y con elementos de simetra que pueden encontrarse, al menos en parte de las cadenas polipeptdicas (relacin espacial entre aminocidos adyacentes). Debido a las restricciones de planaridad del enlace peptdico, la cadena puede adoptar 2 conformaciones estables: Disposicin espacial en zigzag donde los nicos parmetros que cambian son los ngulos de giro entre planos de enlaces peptdicos consecutivos. Las cadenas polipeptdicas se sitan extendidas, conservando su disposicin zigzag bien en sentido paralelo o antiparalelo. Fotocopia Pg. 63. ESTRUCTURA HLICE La cadena polipeptdica se enrolla sobre si misma (rosca sacacorchos). La rotacin es a derechas y las cadenas laterales de los Laminocidos se disponen hacia el exterior dando lugar a una estructura estable. Cada aminocido esta girado 100 respecto al anterior por lo que los tomos de H y O del enlace peptdico se encuentra a lados distintos del plano y pueden formar puentes de hidrgeno los cuales son la principal fuerza de estabilizacin de esta estructura helicoidal. Fotocopia Pg. 64 queratinas, cabello, piel, epitelios y uas. Protenas globulares. CONFORMACIN PLEGADA Las cadenas se sitan extendidas, conservando su disposicin zigzag bien en sentido paralelo o en antiparalelo (extremos amino y carboxilo contrapuestos). La disposicin antiparalela es ms compacta y frecuente. Las interaccin por puente de hidrgeno son intercatenarios a diferencia de la estructura en hlice que 15

son intracatenarios. Fotocopia Pg. 65 queratinas, Seda, escamas, garras y picos de aves. CONSIDERACIONES Al considerar la estructura secundaria resulta til clasificar las protenas en 2 grupos principales: Protenas fibrosas: sus largas cadenas polipeptdicas se ordenan formando largos filamentos u hojas (Ej.: colgeno y; y queratinas). Funcin estructural: proteccin, soporte y forma a la anatoma y fisiologa de vertebrados. Protenas globulares: cuyas cadenas polipeptdicas se pliegan en forma esfrica o globular. La mayor parte de enzimas y hormonas peptdicas son globulares. ESTRUCTURA DEL COLGENO Es la protena fibrosa ms importante por ser la ms abundante del cuerpo humano (> 30%). Base del tejido conjuntivo (tendones, piel) y el constituyente principal de la matriz de los tejidos calcificados (hueso, dentina, esmalte). Su estructura primaria es nica, levogira y formada en un 33% por aminocidos glicina y un 20% prolina e hidroxiprolina. Las cadenas se agrupan en trmeros (triple hlice del colgeno) denominado tropocolgeno. Tiene poco valor alimenticio. Es estable pero no inerte (Ej.: piel). Es insoluble en agua. En funcin del nmero de enlaces ser ms o menos duro el colgeno. Enf: osteognesis imperfecta y enf de EhlersDanlos. TEMA 6 Estructura terciaria de las protenas. Desnaturalizacin. Estructura cuaternaria de las protenas. Estudio particular de la hemoglobina. ESTRUCTURA TERCIARIA DE LAS PROTENAS Es la conformacin tridimensional de la cadena polipeptdica entera. Define el conjunto de todas las interacciones covalentes o de otro tipo (puentes de hidrgeno, hidrfobas, de Van der Waals, inicas) que gobiernan el plegamiento de la cadena en el espacio. Engloba todas las estructuras secundarias que pueden coexistir en diferentes partes de la protena. La estructura terciaria define siempre toda la cadena, cada una de estas zonas individualmente se denomina dominio y corresponde a un nivel de organizacin intermedio entre la estructura secundaria y terciaria. En las protenas fibrosas al tener las cadenas la misma orientacin y estructura secundaria, la estructura terciaria coincide con la secundaria. Fotocopia Pg. 69. ESTRUCTURA CUATERNARIA DE LAS PROTENAS 16

 Define las interacciones que pueden existir entre varias cadenas polipeptdicas para formar una protena (relaciones espaciales entre mltiples cadenas polipeptdicas que se encuentran fuertemente asociadas (ej: hemoglobina). Las protenas que slo tienen una cadena polipeptdica son monmeros y no tienen estructura cuaternaria. En otros casos las protenas se denominan multmeros y segn el nmero de subunidades: dmeros, trmeros, tetrmeros, etc. Es frecuente que la estructura cuaternaria de las protenas oligomricas no sea nica y existan 2 o ms estados distintos que afectan a la actividad biolgica de la protena como la hemoglobina o enzimas alostricas: tenso y relajado. Fotocopia Pg. 70 PROPIEDADES DE LAS PROTENAS EN DISOLUCIN La mayora de las protenas son globulares y se encuentran disueltas. Naturaleza polinica. Las protenas presentan un punto isoelctrico (pI) que se define como el pH en el que su carga neta es nula y esto es esencial para que la protena cumpla su funcin biolgica. El pI est comprendido entre 6 y 8 salvo la pepsina (pI de 1.5) o las Histonas (pI > 8). Debido al carcter polinico, la solubilidad de las protenas va a depender del pH y del contenido salino del medio. Naturaleza macromolecular. Las protenas forman disoluciones coloidales y por tanto no son dializables. DESNATURALIZACIN DE LAS PROTENAS Desnaturalizacin es el proceso por el cual una protena cambia su estructura nativa (estructura tridimensional) y por tanto su actividad biolgica. La desnaturalizacin ms severa no afecta nunca a la estructura primaria, ya que si ello ocurre al proceso se le denomina DEGRADACIN o DIGESTIN. La desnaturalizacin es generalmente un proceso irreversible. RECAMBIO DE LAS PROTENAS Las protenas estn siendo continuamente destruidas y resintetizadas = recambio. Los ndices de recambio se expresan en trminos de tiempo requerido para que cambie la mitad del material. Semivida del hepatocito (das), msculo (180 das), colgeno del tej. Conjuntivo (1000 das), protenas del plasma (10 das), hemates (120 das). Cambios del nitrgeno y de las protenas sricos son rpidos e indicadores tiles de procesos patolgicos. Pruebas que miden las protenas del suero: Proteinograma (albmina y globulinas), urea, creatinina y cido rico. ESTUDIO DE LA HEMOGLOBINA Es una protena que pertenece al grupo de las hemoprotenas y est constituida por un grupo prosttico (hemo) y otro proteico (globina). Supone el 33% del peso celular de la sangre.

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Hematocrito es un indicador de la cantidad de hemoglobina circulante y su valor es del 3545%. El grupo hemo est constituido por un anillo tetrapirrlico con un tomo de Fe en el centro y gracias a l se produce la unin con el oxgeno. Tipos de hemoglobina: Hemoglobina A1: . Hemoglobina A2: . Hemoglobina F: . Derivados de la HbA: HbA1c. Cadenas = 141 a.a; Cadenas , y = 146 a.a. COOPERATIVIDAD O ALOSTERISMO La hemoglobina es una protena alostrica ya que cada molcula puede unir 4 molculas de oxgeno. La unin de la 1 molcula de oxgeno facilita la unin de la 2 y las siguientes a las misma molcula de hemoglobina (cooperatividad). La hemoglobina con el oxgeno ligado se le denomina OXIHEMOGLOBINA. La unin con el oxgeno es reversible y depende de la concentracin o presin parcial de oxgeno existente en el entorno de la molcula de hemoglobina. La liberacin del oxgeno tambin presenta el fenmeno de cooperatividad. Fotocopia Pg. 76 La curva de disociacin o saturacin del la Hb adopta una forma sigmoidal que refleja el fenmeno de cooperatividad (la mioglobina no tiene fenmeno de cooperatividad aunque el O2 se une ms fcilmente a la mioglobina). La unin y liberacin cooperativas del O2 hacen de la Hb que sea el mejor transportador de O2. La razn del fenmeno de cooperatividad radica en la interaccin entre los monmeros de la molcula (interaccin hemohemo) de tal forma que la entrada de una molcula de O2 conlleva un cambio de conformacin de la cadena polipeptdica. DESOXIHEMOGLOBINA: estructura cuaternaria forma T o tensa (tejidos perifricos). OXIHEMOGLOBINA: estructura cuaternaria forma R o relajada (pulmones). FACTORES QUE AFECTAN A LA LIBERACIN DE OXGENO Presencia del metabolito 2,3bifosfoglicerato (BPG): este metabolito se sintetiza en una va derivada de la gluclisis. Disminuye la afinidad de la Hb por el O2 [ej: enfermedades pulmonares (asma, enfisema) y la adaptacin a la altura]. El BPG es el responsable de la menor afinidad por el O2 del la HbA1 con respecto a la HbF. Efecto Bohr: el aumento de la acidez y de CO2 produce un incremento de la liberacin de O2 ya que disminuye la afinidad de la Hb por el O2. Temperatura: el aumento de temperatura (fiebre) implica un aumento de la liberacin de O2 (requerimiento de O2 es mayor). Monxido de carbono (CO): este gas txico se une al tomo de O2 de la Hb con una afinidad 210 veces superior a la de O2. Se produce la muerte al impedir la liberacin de O2 a los tejidos. DIFERENCIAS ENTRE HEMOGLOBINA Y MIOGLOBINA MIOGLOBINA HEMOGLOBINA

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 Se localiza en el msculo. Es 4 veces ms pequea que la hemoglobina. Acta como reserva suplementaria de oxgeno. Facilita el movimiento de oxgeno dentro del msculo. Es un monmero. No presenta fenmeno de cooperatividad. Curva de disociacinsaturacin: hiperblica.

Se localiza en los hemates. Es 4 veces ms grande que la mioglobina. Acta como transportador y liberador de oxgeno. El oxgeno va desde los alveolos pulmonares a los tejidos. Es un tetrmero. Presenta el fenmeno de cooperatividad o alosterismo. Curva de disociacinsaturacin: sigmoidal.

ALTERACIONES PATOLGICAS DE LA HEMOGLOBINA HEMOGLOBINOPATAS. Hemoglobina S (drepanoctica). Hemoglobina M o metahemoglobina (Boston, Saskatoon, Iwate, HydePark, Milwaukee). Hemoglobinas Hammersmith o RiverdaleBronx (alteracin de la estructura terciaria). Hemoglobinas Kempsey y Kansas (alteracin de la estructura cuaternaria). TALASEMIAS. talasemia: dficit de cadenas . talasemia: dficit de cadenas . Ms frecuentes en la regin Mediterrnea. TEMA 7 Protenas plasmticas. Separacin de las protenas plasmticas: electroforesis. Caractersticas de las principales protenas plasmticas. Inmunoglobulinas. Bioqumica de la coagulacin. PROTENAS PLASMTICAS Diferencias entre suero y plasma: El plasma est constituido por la sangre exenta de elementos formes o clulas. El suero est formado por la sangre exenta de clulas, elementos formes y las protenas de la coagulacin. 2. Requisitos de las protenas plasmticas ( 50). 2.1. Ser secretadas activamente a la sangre. 2.2. No derivar de lesiones ni alteraciones de tejidos o clulas. 2.3. Ejercer su funcin fundamental en el sistema vascular. 2.4. Presentar mayor concentracin en el plasma que en cualquier otro tejido. 2. La sntesis de protenas plasmticas ocurre en el retculo endoplsmico de los hepatocitos a excepcin de las inmunoglobulinas que son sintetizadas por los linfocitos B. 3. La concentracin de protenas en plasma es de 68 g/100 mL de los cuales 35 g son albmina y de 1.53 g es una mezcla de globulinas.

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FUNCIONES GENERALES Las funciones inespecficas o generales de las protenas son: Mantenimiento de la presin onctica de la sangre. Presin osmticocoloidal o coloidosmtica es la presin osmtica (mecnica o hidrosttica) ejercida por una disolucin coloidal para mantener una disolucin en equilibrio con su disolvente puro y evitar que ste atraviese una barrera semiimpermeable. Participacin en el equilibrio hidroelectroltico. Intervencin en el proceso nutritivo. Transporte de ligandos: frmacos, hormonas, cidos grasos, etc. ELECTROFORESIS Las protenas plasmticas se clasifican en funcin de la solubilidad y la separacin electrofortica en 6 categoras: 1. Albmina (55%): 35 g/100 mL. Transporte de aniones orgnicos y presin osmtica. 2. globulinas (5%): 0.30.6 g/100 mL. Glucoprotenas y HDL. 3. globulinas (9%): 0.40.9 g/100 mL. Haptoglobina (Hb), ceruloplasmina (Cu), VLDL. 4. globulinas (13%): 0.61 g/100 mL. Transferrina (Fe), LDL. 5. globulinas (11%): 0.71.5 g/100 mL. Inmunoglobulinas. 6. Fibringeno (7%): 0.20.4 g/100 mL. Coagulacin sangunea. Las globulinas son sintetizadas por los linfocitos B mientras que el resto de protenas en el hgado. En las enf. Hepticas existe un defecto importante de estas protenas. CARACTERSTICAS DE ALGUNAS PROTENAS PLASMTICAS Albmina: es la ms abundante, sintetizndose en el retculo endoplasmtico del hgado. Acta como transportador de sustancias y mantiene el volumen vascular (carcter coloidal) ya que el 80% de la presin osmtica del plasma se debe a ella. antitripsina: inhibidor natural de la tripsina. Acta como regulador de los procesos proteolticos. No slo acta sobre la tripsina sino que tambin sobre la quimiotripsina o elastasa (proteasas). Otras globulinas: trascortina (transporta corticoides), antiquimiotripsina (antiproteasa), protena transportadora de retinol (vitamina A), lipoprotenas (HDL), etc. fetoglobulina: se encuentra en el feto y desaparece tras el nacimiento. Se eleva en algunos tumores (ej: hepatocarcinoma). Haptoglobina: se une de forma irreversible a la Hb formando complejos que no pueden ser eliminados. 25% del total de globulinas. Ceruloplasmina: transportadora de cobre. Fraccin : protrombina y plasmingeno involucrados en la coagulacin sangunea y colinesterasa srica. Trasferrina: protena fijadora de hierro. 2 microglobulina: forma parte de las membranas de los linfocitos, plaquetas y otras clulas plasmticas. Protenas pertenecientes a la fraccin : fibringeno (implicada en la coagulacin), protena C 20

reactiva (activa el sistema del complemento y promueve la fagocitosis leucocitaria y lipoprotenas (LDL). Fraccin globulnica: constituida por las diferentes inmunoglobulinas como son IgG, IgA, IgM, IgD e IgE con funcin inmunolgica. Fotocopia pg. 86 1. La sntesis de una Ig especfica se ve estimulada por un antgeno (Ag), una protena o un carbohidrato complejo ajeno al propio individuo. 2. Inmunoqumica: estudia la qumica de Ag y anticuerpos (Ac) y los mecanismos de interaccin. 3. Determinantes antignicos o eptopos son los segmentos estructurales de un Ag que pueden desencadenar la produccin de Ac especficos. 4. La reaccin del Ac contra el Ag determina una serie de complejos mecanismos inmunolgicos, celulares y humorales denominado respuesta inmunitaria. 5. Hapteno: molcula pequea que no tiene capacidad de ser Ag pero que si se une a una molcula ms grande puede convertirse en antignica (ej: penicilina). Fotocopia Pg. 87 1. La fraccin globulnica est integrada por Igs o Ac. 2. Existen 1.53 g/100 mL de globulinas. Las principales son 5. IgG (80% de las Igs totales), IgA (13%), IgM (6%), IgD (1%) e IgE (0.002%). 3. Estructura: poseen todas muchas similitudes estructurales. Todos los tipos tienen 2 cadenas polipeptdicas pequeas (ligeras) y dos grandes (pesadas) quedando unidas de forma covalente por enlaces disulfuro. 4. Las cadenas ligeras son comunes a todos los Ac. Hay 2 formas antignicamente diferentes: Kappa y lambda que pueden estar presentes en cualquiera de los tipos, mientras que les pesadas son antignica, inmunolgica y qumicamente especfica para cada tipo de Ig. Las cadenas Kappa y lambda se diferencian en la secuencia de aminocidos en la posicin 191. FUNCIONES DE LAS Igs La IgM se produce durante la respuesta inicial contra un microorganismo invasor. Es la inmunoglobulina ms grande y contiene cinco unidades en forma de Y con dos canelas ligeras y dos cadenas pesadas cada una. Las unidades se mantienen juntas mediante un componente denominado cadena J. El tamao relativamente grande de la IgM limita su presencia al torrente circulatorio. Respuesta inmunitaria primaria o inicial. Las molculas de IgG, tambin denominadas globulinas, son los anticuerpos circulantes ms abundantes. Una variante de ellas se fija a las superficies de las clulas . Las molculas de IgG estn formadas por una sola unidad en forma de Y y pueden atravesar con bastante facilidad las paredes de los vasos sanguneos, tambin atraviesan la placenta y llevan parte de la proteccin inmunitaria materna al feto en desarrollo. La IgG desencadena adems un mecanismo importante para la destruccin de las clulas extraas que se denomina sistema del complemento.

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Respuesta inmunitaria secundaria. La IgA se encuentra en las secreciones corporales, como la saliva, el sudor y las lgrimas, y a lo largo de las paredes del intestino. Es el principal anticuerpo del calostro, la secrecin inicial mamaria de la madre tras el parto, y de la leche. La IgA se encuentra en forma de monmero o de agregados de dos unidades de la molcula proteca en forma de Y. Las molculas de IgA tienden a disponerse a lo largo de la superficie de las clulas corporales y a combinarse all con los antgenos, como los situados en la superficie de una bacteria, con lo que impiden que la sustancia extraa se fije directamente a la clula corporal. La sustancia invasora puede eliminarse entonces del organismo junto con la molcula de IgA. Secreciones. Se sabe menos sobre las inmunoglobulinas IgD e IgE. Las molculas de IgD se encuentran en la superficie de las clulas B., pero no se sabe mucho sobre su funcin. La IgE se asocia con algunas respuestas alrgicas del cuerpo, y sus concentraciones estn elevadas en los individuos que sufren alergias. Las regiones constantes de las molculas de IgE pueden unirse fuertemente a los mastocitos, un tipo de clulas del tejido conjuntivo que libera histaminas como parte de la respuesta alrgica. Tanto las IgD como las IgE estn formadas por unidades sencillas en forma de Y. Alergias. Fotocopia Pg. 88. ALTERACIONES PATOLGICAS Por medio del Proteinograma conocemos cuales son las protenas plasmticas alteradas y por tanto la existencia de un proceso patolgico (DISPROTEINEMIAS). HIPOALBUMINEMIA: dficit alimentarios, malabsorcin de aminocidos, cirrosis heptica, tumores, sndrome nefrtico, etc. En estos casos al disminuir la presin onctica se produce EDEMAS. El defecto de antitripsina puede indicar hepatopata o enfisema. La Haptoglobina aumenta en infecciones, sndrome nefrtico y en procesos neoplsicos. Disminuye en hepatopatas y hemlisis. Ante situaciones como lesiones renales (proteinuria), coma y sepsis se produce un descenso global de protenas. En infecciones, alergias, leucemias linfticas y tumores malignos se produce un incremento de globulinas y en los periodos de curacin se produce un aumento de globulinas. BIOQUMICA DE LA COAGULACIN 1. Tras una hemorragia se produce la hemostasia por medio de un tapn de fibrina. A este proceso se le denomina COAGULACIN SANGUNEA y se produce a travs de una cascada de activacin de proenzimas o zimgenos. 2. El mecanismo en cascada tiene varias ventajas; * Amplificador de seal ya que la concentracin de factores es muy pequea. * La produccin de trombo de fibrina se realiza a gran velocidad (evita desangrarse). * Se produce una buena homeostasis o regulacin para impedir la produccin de una trombosis.

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3. Va intrnseca. 4. Va extrnseca. 5. Va comn. REGULACIN DE LA COAGULACIN La ANTITROMBINAIII (serpina) inhibe a la trombina, XIIa, XIa, IXa y Xa. Esta accin inhibitoria es activada por la HEPARINA. Protena C TROMBINA, TROMBOMODULINA Protena C activada. Protena S TROMBINA Protena S activada. Va y VIIa Proteolisis, Protena C/Protena S activada Inactivacin de Va y VIIIa. FIBRINOLISIS Activador del plasmingeno Activador del plasmingeno (tPA) FIBRINA ! (unido a la fibrina) (unido a la fibrina) Plasmingeno < PLASMINA (urocinasa y estreptocinasa) ! Cogulo de fibrina Fibrina degradada. El plasma contiene diversos inhibidores del tPA (inhibidor del activador tisular del plasmingeno: PAI1) y de la plasmita que frenan la disolucin del cogulo. El principal inhibidor es la antiplasmina y su dficit origina hemorragias graves. ALTERACIONES PATOLGICAS DE LA COAGULACIN Todos los factores de la coagulacin sangunea son sintetizados por el hgado. Algunos de ellos sufren modificacin mediante carboxilacin postraduccional que requieren de la vitamina K presente en hortalizas y verduras. La carboxilacin permite la fijacin eficaz del calcio por parte de dichos factores entre los que se cuentan la protrombina (II), factores VII, IX y X y las protenas C y S. Esta reaccin es inhibida por el dicumarol y warfarina (anticoagulantes). Por tanto se puede inhibir a los anticoagulantes administrando dosis altas de vitamina K. El dficit de vitamina K origina hemorragias que pueden ser graves. La hemofilia es una enfermedad hereditaria, recesiva, ligada al sexo donde las mujeres son las portadoras asintomticas. La ms conocida es por dficit de factor VIII y cursa con hemorragias graves. Hoy se le puede administrar a los pacientes el factor VIII sintetizado por medio de ADN recombinante. Tiempo de protrombina: detecta anomalas de los factores I, II, V, VII, X. el tiempo normal es de 10 a 12 sg y esta prueba es importante para el seguimiento de la teraputica anticoagulante y deteccin de 23

enf. sanguneas. Tiempo de protrombina tambin en la analtica se denomina tiempo de Quick y/o actividad de protrombina. Luego existe otro tiempo que es el de tromboplastina parcial (TPTA). INR (Internacional normalizad ratio) = (TP paciente/TP normal)ISI, corregido con la sensibilidad de la tromboplastina que se ha utilizado en el laboratorio (ISI = Internacional sensitivity index). Pacientes con trombosis venosa: INR 23. Pac con fibrilacin auricular paroxstica o prtesis biolgica: INR 1.52. Pacientes con prtesis metlicas: INR 34. FACTOR Protrombina Factor V Factor VII Factor VIII ENFERMEDAD Hipoprotrombina. Def v K Parahemofilia, Def vit K Hemofilia A (enf von W) Hemofilia clsica FACTOR Factor IX Factor X Factor XI Factor XII ENFERMEDAD Hemofilia B. Defic vit K Dficit vitamina K Hemofilia C Sndrome de Hageman

TEMA 8. ESTRUCTURA Y FUNCIN DE LOS NUCLETIDOS. BASES PURNICAS Y PIRIMIDNICAS. NUCLESIDOS Y NUCLETIDOS. INTRODUCCIN Las Biomolculas ms importantes para el desarrollo del organismo son nitrogenadas. Los nucletidos son compuestos ricos en energa que dirigen los procesos metablicos. Las bases nitrogenadas dan lugar a los nucletidos y stos a las mayores macromolculas existentes, los cidos nucleicos. Los cidos nucleicos (ADN y ARN) son los depositarios de la informacin gentica. Un segmento de ADN que contiene la informacin necesaria para la sntesis de una protena o ARN recibe el nombre de GEN. Los nucletidos estn formados por 3 componentes caractersticos: 1. Base nitrogenada. Compuesto hetrocclico. 2. Pentosa. Compuesto heterocclico. 3. Fosfato. BASES NITROGENADAS 1. Las bases nitrogenadas con propiedades bsicas se dividen en 2 grupos: a. PIRIMIDINAS. Porque derivan de la pirimidina (un ciclo hexagonal con 2 tomos de nitrgeno).

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b. PURINAS. Porque deriva de la purina (2 ciclos condensados, uno hexagonal y otro pentagonal con 4 tomos de nitrgeno). 2. Las bases nitrogenadas de importancia fisiolgica presentan grupos, amino o ceto o ambos, en diferentes posiciones de los ciclos purnico y pirimidnico. 3. Las 5 bases principales son: PURINAS: ADENINA (A) GUANINA (G) PIRIMIDINAS: CITOSINA (C) URACILO (U) TIMINA (T) Tanto ADN como ARN contienen 2 bases purnicas principales (adenina y guanina) y 2 bases primidnicas principales (citosina que est presente en ADN y ARN; timina presente slo en ADN; y uracilo presente slo en ARN). La unin de la base con el azcar (NUCLESIDO) es por medio de un enlace Nglucosdico con participacin del N1 (pirimidina) o del N9 (purina) y el carbono 1de la pentosa. Si al nuclesido se le aade 1 o ms grupos fosfatos se forma el NUCLETIDO estando el fosfato esterificado con el carbono 5. En los cidos nucleicos existen 2 tipos de pentosas: Dribosa para el ARN y 2desoxiDribosa para el ADN. Ambos tipos de pentosa se encuentran en forma furanosa (anillo cerrado de 5 miembros). ENLACE FOSFODISTER Los nucletidos o sus anlogos desoxi se unen entre s por enlaces fosfodister (EF) para formar una cadena polinucletida (cidos nucleicos). Los nucletidos sucesivos del ADN y ARN estn unidos covalentemente mediante puentes de grupos fosfatos. El grupo hidroxilo en 5 de un nucletido est unido al grupo hidroxilo en 3 del siguiente nucletido por un EF, Los esqueletos covalentes de los cidos nucleicos consisten en unidades alternas de grupos fosfato y residuos de pentosa, mientras que las bases son grupos laterales unidos al esqueleto a intervalotes regulares. Los esqueletos covalentes del ADN y ARN son hidroflicos. La representacin habitual del nucletido es pACGTA. cido nucleico de cadena corta (< 50 nucletidos) se denomina oligonucletido y si es mayor polinucletido. PROPIEDADES DE LAS BASES DE LOS NUCLETIDOS a) Las pirimidinas y purinas libres son compuestos dbilmente bsicos y altamente conjugadas.

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b) Todas las bases absorben la luz ultravioleta. c) Las purinas y pirimidinas son hidrfobas. d) las interacciones entre bases son: * Hidrofbica de apilamiento (estabilizacin de la estructura tridimensional de ac. Nuclecos). * Enlaces de hidrgeno (los patrones son AT (U) y CG: el apareamiento especfico de 2 bases complementarias permite la duplicacin de la informacin gentica por la sntesis de cadenas de cidos nucleicos complementarias a las ya existentes). * Van der Waals. * Dipolodipolo. FUNCIONES DE LOS NUCLETIDOS a. Actuar como subunidades de los cidos nucleicos. Portadores de la informacin gentica. b. Portadores de energa qumica para impulsar una amplia variedad de reacciones bioqumicas. ATP es el portador central de energa qumica de la clula. c. Componente de cofactores y coenzimas (ejemplos: CoA, NAD, FAD). d. Mensajeros qumicos. El AMPc que se forma a partir del ATP es el 2 mensajero. TEMA 9. ENZIMAS: CONCEPTO Y CARACTERSTICAS GENERALES. NOMENCLATURA Y CLASIFICACIN. CENTRO ACTIVO. CATLISIS ENZIMTICA. ISOENCIMAS Y ZIMGENOS. CONCEPTO DE ENZIMA. NATURALEZA E IMPORTANCIA COMO CATALIZADOR. Las reacciones qumicas proporcionan energa y los componentes necesarios a la clula. Estas reacciones ocurren a una velocidad y circunstancias compatibles con la vida. La Enzimologa, parte importante de la Bioqumica estudia a las ENZIMAS como protenas catalizadoras, potentes y especficos, de las reacciones qumicas de sistemas biolgicos. La medicin de la actividad enzimtica en el plasma o tejidos es importante para el diagnstico de enfermedades. En 1926, Sumner purific y cristaliz por 1 vez una enzima, la ureasa. Actualmente se conocen ms de 2000 enzimas. La actividad cataltica depende de la integridad de su conformacin proteica nativa. HOLOENZIMA = COENZIMA O COFACTOR + APOENZIMA PRINCIPALES ENZIMAS IMPLICADAS EN PROCESOS PATOLGICOS. FOTOCOPIA

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IMPORTANCIA DE LAS ENZIMAS Elevada eficacia cataltica (aumentan millones de veces la velocidad de las reacciones qumicas). Las enzimas se recuperan en su estado inicial tras cada ciclo cataltico (degradador). Son catalizadores especficos (tipo de reaccin que catalizan y compuestos sobre los que pueden actuar). La clula posee mecanismos para regular la actividad cataltica de muchas enzimas clave del metabolismo. En definitiva las enzimas son componentes esenciales para la clula ya que permiten que tenga lugar las reacciones esenciales para su desarrollo y que dichas reacciones se llevan a cabo de forma ordenada, regulada y adaptada a las necesidades metablicas del organismo. CATLISIS ENZIMTICA La velocidad de las reacciones qumicas depende de: 1. Factores termodinmicos: para que una transformacin qumica de un compuesto S (sustrato) en un compuesto P (producto) pueda transcurrir espontneamente es necesario que el cambio en la energa libre de Gibas del sistema sea negativa (es decir, la energa libre asociada de P debe ser < que la asociada a S). S ! P 2. Factores cinticos: la transformacin del sustrato S en producto P se produce a travs de un estado de transicin en el que se estn rompiendo determinados enlaces y formndose otros nuevos. Este estado de transicin se encuentra en equilibrio con el sustrato y posee siempre una energa libre superior. S !! S* ! P Las enzimas aceleran las reacciones qumicas al disminuir la energa de activacin asociada al estado de transicin. Las enzimas no modifican la naturaleza del P final de la reaccin. CLASIFICACIN Y NOMENCLATURA. 1. En un principio, las enzimas se identificaban con un nombre trivial acabado con el sufijo asa (ej: ureasa o ADN polimerazo). 2. Hoy da se utiliza 2 tipos de nomenclatura; Reaccin: glucosa + Oxgeno ! gluconato + H2O2 Nomenclatura recomendada (informativa y sencilla): indica sustrato y tipo de reaccin (ej: glucosa oxidasa). Nomenclatura sistemtica (ms especfica y rigurosa pero menos cmoda en cuanto su manejo): identifica de forma ms completa la reaccin catalizada por la enzima (Dglucosa:oxgeno osidorreductasa). 3. Las enzimas se identifican por un n de clasificacin, fijado por la Comisin de enzimas de la IUPAC (Unin Internacional de qumica pura y aplicada). El n de clasificacin tiene 4 dgitos que designan la clase, subclase, n de orden de la enzima dentro de la clasificacin internacional, etc precedidos por las siglas EC. CLASIFICACIN DE LAS ENZIMAS EC 1.1.3.4 : glucosa oxidasa CLASIFICACIN REACCIONES 27

OXIDORREDUCTASAS TRANSFERASAS HIDROLASAS LIASAS ISOMERASAS LIGASAS (SINTETASAS) CENTRO ACTIVO

Reacciones de oxidacinreduccin (transferencia de electrones) Transferencia de un grupo qumico de un donador a un aceptor Ruptura hidroltica de algn enlace del sustrato Ruptura no hidroltica de enlaces del sustrato Reacciones de isomerizacin Formacin de enlaces covalentes entre dos sustratos

Centro activo: zona bien delimitada de la enzima con capacidad de unirse al sustrato formando un complejo enzimasustrato y de catalizar su transformacin. El centro activo es el responsable de la especificidad y de la capacidad cataltica de la enzima. Isoenzimas son 2 protenas distintas que catalizan la misma reaccin. La especificidad de las enzimas se explic en un principio mediante el modelo de la llave y la cerradura propuesto por Fischer en 1890. Posteriormente en 1968, Koshland y Neet cambian este modelo por el del guante y la mano o teora del ajuste inducido. PROPIEDADES CENTRO ACTIVO 1. Las propiedades del centro activo estn relacionadas con su forma y en consecuencia con el tipo de cadenas laterales de aminocidos presentes en el mismo ya que son los puntos de unin capaces de enlazar al sustrato. 2. Los enlaces que se establece en el complejo enzimasustrato suelen ser de tipo no covalente y por tanto dbiles por lo que la unin de la enzima al sustrato es un proceso reversible. 3. Las propiedades catalticas de una enzima depende de la estructura terciaria de la enzima. Por tanto la desnaturalizacin de la protena conlleva la prdida de la actividad enzimtica. 4. Algunas enzimas son protenas complejas y el grupo prosttico de las holoenzimas se denomina coenzima o cofactor y el grupo proteico apoenzima. Normalmente el centro activo de las enzimas se localiza en las coenzimas. FACTORES QUE INTERVIENEN EN LA CATALISIS ENZIMATICA a. Factores de proximidad y orientacin: elevada afinidad del centro activo por sustratos. b. Fenmenos de superficie. c. Factores de distorsin o tensin de enlaces: la unin del sustrato al centro activo de la enzima provoca pequeos ajustes estructurales encaminados a tener una complementariedad ms perfecta. d. Presencia de grupos catalticos (grupos reactivos capaces de proporcionar mecanismos de reaccin de menor energa de activacin): * Catlisis general cidobase. * Catlisis covalente. 28

* Catlisis por iones metlicos. ISOENCIMAS Y ZIMGENOS a. Muchas enzimas se sintetizan en forma de precursores inactivos denominados proenzimas o zimgenos, de masa molecular > a la enzima activa. b. La activacin proteoltica de zimgenos es un proceso irreversible y un mecanismo comn de regulacin de muchas enzimas proteolticas (coagulacin, fibrinolisis, digestin protenas dieta). c. Pepsingeno (zimgeno) es liberado a jugo gstrico se transforma en pepsina activa. La tripsina se sintetiza en pncreas en forma de pretripsingeno que al secretarse al intestino se transformar en tripsingeno (inactivo) y una nueva rotura proteoltica en la luz intestinal por la entero cinaza lo transforma en tripsina (activo). d. Isoenzimas son distintas formas moleculares de ciertas enzimas que tienen diferentes propiedades fsicoqumicas. Ej: CK (2), FA (2) y LDH (5) TEMA 10. CINTICA ENZIMTICA. ECUACIN DE MICHAELISMENTEN. CONCEPTO DE Km Y Vmax. INHIBICIN ENZIMTICA. ENZIMAS ALOSTRICOS 1. Las enzimas son catalizadores biolgicos responsables de que las reacciones del metabolismo celular transcurran de forma ordenada y a una velocidad adecuada. 2. La Cintica enzimtica estudia la velocidad de los procesos catalizados enzimticamente, parte esencial de la enzimologa. 3. La actividad cataltica de las enzimas es sensible a cualquier modificacin de las caractersticas fisicoqumicas del medio, pH, temperatura o fuerza inica. Adems la actividad cataltica puede modularse por variaciones en la concentracin de ligandos especficos incrementando (ligandos activadores) o disminuyendo (ligandos inhibidores) la velocidad de reaccin. MEDIDAS DE ACTIVIDAD ENZIMTICA 1. Reaccin mosustrato en la que una enzima E cataliza la transformacin del sustrato S en el producto P. E S P 2. La velocidad de reaccin se define como la variacin en el tiempo de la concentracin de S o lo que es lo mismo de P. V = d [S] /d t = d [P] / d t 3. La unidad de actividad enzimtica (U) se define como la cantidad de enzima que cataliza la formacin de un mol de producto por minuto en condiciones estndares. La concentracin de la enzima se puede expresar 29

en concentracin de la enzima se puede expresar en trminos de unidades enzimticas por unidad de volumen (U/mL). Existe una medida que no se utiliza y es el Katal. MODELO DE MICHAELISMENTEN E + S !! ES E + P [E] [S] [E]T = [E] + [ES] KM = [E] = [E]T [ES] [ES] ( [E]T [ES]) [S] KM = [ES] [E]T [S] K cat [E]T [S] V = Kcat. [ES] [ES] = V = Km + [S] KM + [S] [ES] = [E]T Vmax = Kcat [E]T V max [S] V = KM + [S] CINTICA ENZIMTICA La velocidad de una reaccin enzimtica depende de [E] y [S] por una parte y de la eficacia cataltica de la enzima por otra. El efecto de la [S] sobre la velocidad de las reacciones enzimticas, a concentracin de enzima constante, vara de forma hiperblica. A medida que la [S] crece, la velocidad de reaccin aumenta hasta que a concentraciones elevadas, la velocidad de reaccin se hace prcticamente constantes (de orden cero) tendiendo asintticamente a un valor conocido como velocidad mxima (Vmax). ECUACIN MICHAELIS 1. KM se expresa en las mismas unidades de concentracin que [S]. 2. Cuando la concentracin de sustrato es grande, el valor de kM se vuelve despreciable frente a [S], por lo que V = V max.

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3. Cuando V = Vmax/2, la ecuacin de velocidad en funcin de la concentracin de sustrato se simplifica a [S] = KM . Por tanto, la constante de Michaelis coincide con la concentracin de sustrato para lo que se alcanza la mitad de la velocidad mxima. 4. KM se relaciona con la afinidad de una enzima por un sustrato determinado que es tanto mayor cuanto menor es la constante de Michaelis (KM es la constante de disociacin del complejo enzimasustrato). INHIBICIN ENZIMTICA Aunque pH y temperatura pueden aumentar o disminuir la velocidad de reacciones enzimticas se reserva el trmino de activador o inhibidor para molculas capaces de unirse especficamente a alguna de las especies enzimticas implicadas en la catlisis. a. INHIBIDORES REVERSIBLES: se unen a la enzima por enlaces no covalentes y pueden ser desplazados de la misma recuperando su funcin. Son los ms frecuentes. * Competitivos: el inhibidor tiene una estructura similar al sustrato y compite con l por la unin con la enzima en el centro activo (ej: metanol y formaldehdo). Aumentan la KM pero no modifican la Vmax. * No competitivos: se unen a sitios de unin especficos en la molcula de enzima distintos del centro activo. Disminuyen la Vmax sin alterar la KM * Acompetitivos: se unen al complejo enzimasustrato formando un complejo ternario enzimasustratoinhibidor careciendo de afinidad por la enzima libre. Disminuyen la Vmax y KM b. INHIBIDORES IRREVERSIBLES: se unen a la enzima por enlacer covalentes con lo que sta queda inhibida permanentemente. Son muy comunes en farmacologa (penicilinas y compuestos organofosforados). ALOSTERISMO I Muchas enzimas presentan curvas de saturacin sigmoidales en vez de hiperblicas tpicas de la cintica michaelina (enzimas alostricas). El incremento en la pendiente de la curva de velocidad indica cooperatividad en la unin del sustrato al centro activo. Para hablar del grado de saturacin de la enzima no se habla de KM sino ms bien de concentracin de sustrato al 50% de saturacin. El modelo concertado propuesto por Monod, Wyman y Changeux postula que en la protena oligomrica, cada monmero puede existir en 2 estados conformacionales: tenso (T) incapaz de unir al sustrato y relajado con afinidad elevada por ste. Los 2 estados conformacionales estn en equilibrio pero en ausencia de sustrato el equilibrio se encuentra muy desplazado hacia la forma tensa. Los inhibidores alostricos desplazan el equilibrio de la enzima hacia la forma T al unirse a sta exclusivamente. El resultado es una disminucin de la afinidad de la enzima por su sustrato que se manifiesta por desplazamiento de la curva hacia la derecha. Los activadores alostricos se unen a la forma R, desplazando la curva de saturacin en el sentido de una mayor afinidad. Por tanto el SO,5 disminuye en presencia de los activadores y aumenta en presencia de los 31

inhibidores. REGULACIN ACTIVIDAD ENZIMTICA 1. REGULACIN POR EFECTOS: la velocidad de una reaccin enzimtica puede ajustarse a la concentracin de sustrato (ej: regulacin por retroalimentacin o feedback A B C D). 2. MODIFICACIN COVALENTE: los efectores del apartado anterior se unen a la enzimas que regulan por enlaces no covalentes. Sin embargo existen reacciones de fosforilacin, catalizadas por enzimas especficas denominadas cinasas y fosfatasas, que son las modificaciones covalentes de mayor importancia en la regulacin de la actividad enzimtica. 3. ACTIVACIN DE ZIMGENOS: ya comentado. ENZIMAS Y BIOQUIMICA ANALTICA. La medida de las enzimas presentes en el suero con valor diagnstico supone el 5 al 15% del total de los anlisis bioqumicos en hospitales. El mtodo usado es la ESPECTOFOTOMETRA: mide la concentracin de un sustrato por medio de cambios de absorbancia. Algunas enzimas de inters clnico Enzimas Alteracin Elevada en la pancreatitis aguda, y en la insuficiencia crnica. Amilasa Disminuida en casos de prdida importante de funcin pancretica, como la fibrosis qustica Elevada en el infarto de miocardio (isoenzima MB), y en las afecciones musculares (isoenzima MM) Relativamente inespecfica debido a su obicuidad. Elevada en patologas musculares, cardacas, renales y hepticas, y en las anemias hemolticas. Elevadas en enfermedades hepticas, como la hepatitis o la cirrosis, y en alcoholismo. Elevada en enfermedades hepatobiliares y en el alcoholismo Elevada en hepatopatas Elevada su isoenzima prosttica en el cncer de prstata Elevada en el cncer de pulmn Disminucin en hepatopatas y en el infarto de miocardio. Acetilcolinesterasa Disminuida tras la intoxicacin por insecticidas organofosforados. USO TERAPUTICO DE LAS ENZIMAS 1. VA DE ADMINISTRACIN: al ser una protena la nica va de administracin es endovenosa (aunque existe alguna que se administra por va oral). Dentro de la circulacin resulta difcil dirigir la enzima hacia el 32

Creatina quinasa Lactato deshidrogenasa (LDH) Aminotransferasas (transaminasas) Glutamiltraosferasa (GT) Fosfatasa alcalina Fosfatasa cida Enzima convertidota de angiotensina

rgano en el que tiene que actuar a excepcin de las patologas vasculares. 2. PREPARACIN DE LA ENZIMA: supone la preparacin de grandes cantidades de protena con un grado elevado de purificacin (complejo y de alto coste) para extraer las enzimas. Debe recurrirse a fuentes animales con el consiguiente problema de respuesta inmunitaria. 3. DESARROLLO DE UNA RESPUESTA ALRGICA EN EL PACIENTE: la inyeccin de una protena procedente de una especie animal (antgeno) provoca el desarrollo de anticuerpos (respuesta alrgica al cabo de cierto tiempo de tratamiento). Las enzimas estn ms indicadas para tratamientos cortos que para tratamientos crnicos. Algunas de ellas han encontrado utilidad teraputica: estreptocinasa y urocinasa (disolucin de trombos); asparraginasa en el tratamiento de la leucemia linfoctica aguda; tratamiento antiedematoso (enzimas proteolticas). TEMA 11. COFACTORES ENZIMTICOS. COENZIMAS: CONCEPTO Y CLASIFICACIN. VITAMINAS HIDROSOLUBLES Y COENZIMAS REALIZACIONADAS. VITAMINAS LIPOSOLUBLES: ESTRUCTURA, PROPIEDADES Y FUNCIONES. COENZIMAS Y COFACTORES 1. Muchas enzimas son protenas conjugadas (contienen en su composicin algn componente no proteico, COFACTOR). 2. COFACTOR + APOENZIMA = HOLOENZIMA. 3. La naturaleza qumica del cofactor es variada: * In metlico: COFACTOR. * Molcula orgnica: COENZIMA. Si la coenzima se encuentra unida fuertemente al apoenzima por medio de un enlace covalente se denomina: GRUPO PROSTTICO. 4. La presencia de cofactores en la estructura de las enzimas aumenta el nmero y variedad de grupos qumicos y por tanto su capacidad cataltica. 5. El n de coenzimas es reducido frente al de enzimas que las utilizan ya que una misma coenzima puede ser compartida por varias enzimas diferentes. 6. En la clula existen ms de un millar de enzimas diferentes y slo una docena de coenzimas (ej: NAD acta como coenzima en aproximadamente un centenar de enzimas). 7. A veces la coenzima se modifica netamente durante el proceso cataltico, por lo que se le suele denominar COSUSTRATO. 8. CH3CH2OH+NAD+ CH3CHO + NADH + H+ Etanol Alcohol deshidrogenasa Acetaldehdio 33

CH3CHCOOH + NADH + H+ CH3CH(OH) + NAD+ Piruvato Lactato deshidrogenasa lactate Esta dualidad de formas de la coenzimas, aceptoras o dadoras de electrones, tomos o grupos funcionales, no es exclusiva del NAD+ sino que tambin del NADP, FAD, Coenzima A y FMN, coenzimas tpicas de oxidorreductasas. COENZIMA O COFACTOR Nicotinamidoadenindinucletido (NAD) fosfato (NADP) Flavinadenindinucletido (FAD) Flavoenzimas Flavinmononucletido (FMN) cetocido deshidrogenasa Pirofosfato de tiamina (TPP) Transcetolasas Aminocido descarboxilasas Fosfato de piridoxal (PAL) Tetrahidrofolato (THF) Coenzima A (CoA) Biocitina Coenzima B12 Fe, Cu, Zn, Mn, Mg, Ca, Ni, Mo, K, etc. Complejo piruvato deshidrogenasa Piruvato carboxilasas Mutasas. MetilmalonilCoAmutasa Metaloenzimas, catalasa, peroxidasa (Fe), citocromooxidasas, tirosinasa, carboxipeptidasa, anhidrasa carbnica (Zn), xantina oxidasa (Mo), ureasa (Ni), ATPasas (Ca, Mg, K), etc. Transaminasas Timidilato sintetasa Complejo cido graso sintetasa ENZIMA Deshidrogenasas

La naturaleza qumica de las coenzimas es muy variada, aunque algunas de ellas comparte el poseer como parte de su estructura el nuclesido adenosina. Las coenzimas se sintetizan a partir de molculas ms sencillas por medio de una serie de reacciones diferentes. Para la sntesis de la mayor parte de las coenzimas se necesita de una molcula orgnica que no puede ser sintetizada por el organismo y que se aporta con los alimentos (VITAMINAS hidrosolubles). Junto a las coenzimas existen ciertos metabolitos celulares con funciones que se solapan con las de las coenzimas como son los nucleticos o sus derivados ATP, Sadenosilmetionina, piruvato, aminocidos aromticos. La existencia de difentes coenzimas actuando de manera coordinada permita llevar a cabo de manera precisa y eficaz una determinada transformacin bioqumica como el complejo piruvato deshidrogenasa. CLASIFICACIN COENZIMAS 1. COENZIMAS OXIDORREDUCTASAS: NAD, NADP, FAD, FMN, transfieren electrones, protones, iones hidruro o tomos de hidrgeno.

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2. PIROFOSFATO DE TIAMINA (TPP). Ruptura de enlaces carbonocarbono en cetocidos o hidroxiacetonas (decarboxilacin). 3. BIOCITINA: participa en reacciones de carboxilaciones. 4. TETRAHIDROFOLATO: reacciones de transferencia de fragmentos de un tomo de carbono. 5. COENZIMA A: reacciones de transferencia de grupos acilo. 6. CIDO LIPOICO: transferencia de grupos acilo y electrones. 7. FOSFATO DE PIRIDOXAL: participa en el metabolismo de aminocidos, transfiriendo grupos nitrogenados (amino) entre aminocidos y cetocidos (transaminasas) o descarboxilando aminocidos para producir aminas (aminocido descarboxilasa). 8. COENZIMA B12: participa en reacciones relacionadas con el metabolismo de aminocidos. VITAMINAS 1. Compuestos esenciales para la salud del hombre y otros vertebrados que no pueden ser sintetizados por ellos (o son sintetizadas en una proporcin inferior a la necesaria para una buena salud) y por tanto deben ser obtenidos de la dieta. 2. Grupo de micronutrientes orgnicos muy variados desde el punto de vista qumico, necesarios para la sntesis de la mayor parte de las coenzimas. 3. Aunque no tenga el valor energtico propio, son indispensables para el desarrollo y buen funcionamiento del organismo. 4. Los requerimientos son mnimos en comparacin con otros nutrientes como son los hidratos de carbono, grasas o protenas. 5. Se identificaron por primera vez en el primer tercio del siglo XX y fue de importante foco de investigacin humana. CLASIFICACIN DE LAS VITAMINAS 1. HIDROSOLUBLES: se disuelven en agua. Destacan las vitaminas B (B1, B2, ETC.) y vitamina C. 2. LIPOSOLUBLES: se disuelven en disolventes orgnicos apolares (grasas). Son las vitaminas A, D, E, K. A diferencia de las hidrosolubles, no son utilizadas para la sntesis de coenzimas. VITAMINAS LIPOSOLUBLES 1.VITAMINA A o RETINOL: pigmento que se incorpora a la protena opsina para formar rodopsina, que es esencial en el proceso de visin. Otras funciones: estabilidad de membranas, regulacin de la expresin gnica, diferenciacin tisular, desarrollo seo, crecimiento celular y sntesis de mucopolisacridos. Fuente: plantas (en forma de carotenoides, pigmento naranja, que se transforman en retinol) como zanahorias, boniatos, etc. Tambin se encuentra en el hgado.

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2. VITAMINA D3 o COLECALCIFEROL (inactiva): precursora de una hormona, 1,25dihidroxicalciferol tras pasar por el hgado y rin. Funciones: metabolismo del calcio y fosfato (calcificacin del hueso). El colecalciferol se produce en la piel por medio de una reaccin fotoqumica a partir del 7dehidrocolesterol (metabolito del colesterol) y la luz ultravioleta. Fuente: aceites de hgado de pescado, se aade a la leche comercial como suplemento nutritivo. 3. VITAMINA E o TOCOFEROL: grupo de componentes lipdicos con efecto antioxidante. Funciones: inhibidor de la destruccin oxidativa (peroxidacin) de los lpidos de las membranas celulares, normaliza la funcin reproductora, integridad muscular y resistencia de los eritrocitos a la hemlisis. Los tocoferoles reaccionan con las formas ms reactivas del oxgeno destruyndolas y protegiendo a los cidos grasos de la oxidacin (enranciamiento de los alimentos). Fuente: huevos, grasas, aceite animales y vegetales; y germen del trigo. 4. VITAMINA K: existen 2 formas. La vit K1, de origen vegetal y la vit K2, sintetizada por microorganismos (flora bacteriana intestinal). Funciones: coagulacin sangunea y por tanto responsable de la transformacin de protrombina a trombina para formar la fibrina. Agente antihemorrgico. Fuente: Vegetales de hoja verde. LA OBSTRUCCIN BILIAR CONDUCE A UN DFICIT DE VITAMINAS LIPOSOLUBLES (ICTERICIA OBSTRUCTIVA) VITAMINAS HIDROSOLUBLES La funcin de estas vitaminas est mejor definida que las de las vitaminas liposolubles. Sirven, a excepcin de la vitamina C, para sintetizar y formar parte de los diferentes coenzimas, por lo que su funcin est relacionada con las funciones enzimticas celulares, claves para los procesos de obtencin de energa y crecimiento celular. Se clasifican en: 1. VITAMINAS LIBERADORAS DE ENERGA: Incluye a las que participan en la formacin de coenzimas y por tanto en el metabolismo energtico. 2. Vitaminas relacionadas con los procesos biosintticos necesarios para la proliferacin celular (VITAMINAS HEMATOPOYETICAS). 1. VITAMINA B1 o TIAMINA: da lugar a la formacin de pirofosfato de tiamina (TPP) que forma parte de las enzimas piruvato deshidrogenasa y cetoflutarato deshidrogenasa (implicados en la glucolisis anaerobia y ciclo de Krebs) e interviene en la descarboxilacin oxidativa del piruvato. Tambin esta vitamina es importante en la ruta de la pentosa fosfato para producir ribosa necesaria para la sntesis de cidos nucleicos y de NADPH para diferentes rutas biosintticas. Fuente: carne (cerdo), levadura, cscara de cereales y nueces. 2. VITAMINA B2 o RIBOFLAVINA: forma parte de las coenzimas FAD y FMN participan en muchas reacciones de xidoreduccin. Fuente: carne, leche, productos vegetales, bacterias intestinales (por esto es raro su dficit en el hombre). 3. NIACINA: necesaria para la formacin de las coenzimas NAD Y NADP que a su vez participan en los procesos oxidacinreduccin y en la respiracin celular. Puede ser sintetizada por el organismo a partir del 36

aminocido triptfano, pero es insuficiente para tener un buen estado de salud por lo que es necesario consumirla con la dieta. 4. CIDO PANTOTNICO: componente esencial de la coenzima A, necesario para el catabolismo de hidratos de carbono, cidos grasos y aminocidos por medio del ciclo de Krebs. Fuente: aislado por 1 vez del hgado y la levadura aunque est presente en muchos tejidos. 5. BIOTINA: forma la biocitina necesaria para las reacciones de carboxilacin (piruvato carboxilasa y acetilCoA carboxilasa, reacciones claves en la gluconeognesis y sntesis de cidos grasos, respectivamente). 6. VITAMINA B6, de las que existen 3 formas (piridoxina, piridoxal y piridoxamina). Sirven para la sntesis de la coenzima fosfato de piridoxal que desempea un papel fundamental en el metabolismo de los aminocidos ( es importante en el metabolismo energtico y en el funcionamiento del sistema nervioso). 7. CIDO FLICO: constituido por c. Glutmico, c. Paraaminobenzoico y pteridina). Da lugar por reduccin al tetrahidrofolato que participa en la sntesis de bases purnicas y de TMP (necesario para la sntesis de ADN) y aminocidos (serina, glicina, metionina) y colina. Fuente: carne y verduras sobre todo de hoja verde. El dficit de folato produce ANEMIA. 8. VITAMINA B12 o COBALAMINA: participa en la sntesis de metionina y en el catabolismo de aminocidos ramificados. Su dficit afecta indirectamente al metabolismo del folato y por ello a la sntesis de ADN y a la sntesis de cidos grasos, con la consiguientes repercusiones hematopoyticas y neurolgicas (sntesis de mielina). Fuente; alimentos de origen animal como la carne, especialmente en el hgado y el rin. Es til administrar suplementos de vitamina B12 a las personas sometidas a una dieta vegetariana estricta. 9. VITAMINA C o CIDO ASCRBICO: agente reductor en diversas reacciones de hidroxilacin, sobre todo de prolina y lisina. Es necesario para la sntesis de colgeno (tejido conjuntivo) y en el mantenimiento del estado reducido de algunas vitaminas liposolubles. Fuente: verduras y fruta fresca. REQUERIMIENTOS VITAMNICOS. 1. La principales fuentes de vitaminas para el organismo humano son los VEGETALES (frutas, verduras, cereales, etc.) y sus derivados, si bien determinadas carnes y pescados as como los huevos y la leche, son ricos en determinados tipos de vitaminas. 2. Cantidad ptima de vitaminas en la dieta: tema bastante polmico (dieta variada y equilibrada es lo ideal). 3. Determinados grupos de poblacin (embarazo, lactancia, nios y adolescentes, ancianos) tienen necesidad de un aporte vitamnico superior a la media. 4. Los alcohlicos crnicos, fumadores y personas en rgimen de adelgazamiento estricto (< 1200 caloras/da) suelen requerir un aporte extra de vitaminas. 5. Las personas expuestas a determinados frmacos pueden tener dficit vitamnico (anticonvulsiones y 37

antibiticos). AVITAMINOSIS, HIPO E HIPERVITAMINOSIS 1. La carencia grave de una vitamina o grupo de vitaminas denominada AVITAMINOSIS es rara y lo frecuente es que existan carencia de vitaminas inferior al aporte requerido HIPOVITAMINOSIS en pases subdesarrollados que van asociadas a problemas de desnutricin o con una alimentacin incompleta. 2. El dficit de VITAMINA A produce diversos sntomas: piel reseca, xeroftalmia (ojos secos), retraso del desarrollo y crecimiento, esterilidad y CEGUERA NOCTURNA. 3. La carencia de TIAMINA produce el BERIBERI (produce afectacin del sistema nervioso, circulatorio, caquexia y edemas). 4. El dficit de NIACINA se denomina PELAGRA (dermatitis, diarrea y demencia). 5. El dficit de cido ascrbico produce el ESCORBUTO (hemorragias por fragilidad de los vasos en dientes, encas, dficit de cicatrizacin de heridas y ulceracin). 6. El dficit de vitamina D se denomina RAQUITISMO en nios y OSTEOMALACIA en adultos (problemas seos). 7. El dficit de cido flico produce ANEMIA MACROCTICA o MEGALOBLSTICA ya que los hemates son grandes y frgiles. 8. El dficit de vitamina B12 produce ANEMIA PERNICIOSA (anemia megaloblstica) con sintomatologa neurolgica. 9. Las situaciones de hipervitaminosis o acumulacin excesiva de una determinada vitamina son raros y solo se producen en el caso de las vitaminas liposolubles ya que las hidrosolubles son excretadas fcilmente sin acumularse en ningn tejido. 10. La ingesta excesiva de vitamina A o D, puede ser txica dando lugar a problemas de tipo heptico, seo, etc. 11. El equilibrio del calcio y fsforo puede verse afectado por concentraciones elevadas de vitamina D y favorecer la produccin de litiasis (clculos) renales u otros tejidos. 12. La intoxicacin por vitaminas A produce letargo, dolor abdominal, cefalea, sudacin y uas quebradizas. TEMA 12. FUNDAMENTOS TERMODINMICOS DE LOS PROCESOS BIOQUMICOS. REACCIONES DE XIDOREDUCCIN. POTENCIAL REDOX. COMPUESTOS RICOS EN ENERGA FUNDAMENTOS TERMODINMICOS DE LOS PROCESOS BIOQUMICOS. 1. Las clulas y los organismos vivos han de desarrollar trabajo (transformaciones energticas) para permanecer vivos, crecer y reproducirse.

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2. Utilizan la energa qumica de los combustibles para conseguir la biosntesis de molculas complejas a partir de precursores sencillos produciendo macromolculas. 3. Los procesos metablicos, que siguen las leyes de la fsica y de la qumica, estn sometidos a los principios de la termodinmica o bioenergtica = estudio cuantitativo de la forma en que los organismos adquieren y utilizan la energa. 4. Aunque si bien la termodinmica clsica estudia la evolucin de los sistemas desde el punto de vista esttico, en el ser humano o sistemas vivos el equilibrio que se alcanza es dinmico y por tanto lo que hacemos es extrapolar los datos termodinmicos sirvindonos de gua para conocer como transcurrira un proceso in vitro para aproximarnos a su evolucin in vivo. 5. El primer principio de la termodinmica se puede expresar de forma simplificada como que la energa no se crea ni se destruye, sino que se transforma. U = calor + trabajo. 6. Lo normal de las reacciones bioqumicas es que se realicen a presin constante (atmosfrica). En estas situaciones, el cambio calorfico se le denomina cambio de entalpa (H) que si es negativo, la transformacin es EXOTRMICA (se desprende calor del medio) y si es positivo, la transformacin es ENDOTRMICA (capta calor del medio). Si es 0: ISOTRMICA. 7. Entalpa (H) = contenido calrico del sistema reaccionante o cambio de calor en una reaccin a presin constante. Entropa (S) = expresin cuantitativa del desorden (azar) de un sistema. 8. En las condiciones existentes en los sistemas biolgicos (temperatura y presin constantes) las variaciones en energa libre, entalpa y entropa estn relacionadas entre s por la ecuacin: G = H T.S. G = variacin de energa libre de Gibas del sistema reaccionante; H = variacin en entalpa del sistema; T = temperatura absoluta; S = variacin en entropa del sistema reaccionante. 9. El segundo principio de la termodinmica establece que una transformacin se produce espontneamente en un sistema si globalmente tiene lugar un incremento de entropa en el universo. Los organismos vivos conservan su orden interno tomando de su entorno energa libre en forma de nutrientes o de luz solar volviendo al entorno una cantidad igual de energa en forma de calor y entropa. 10. El cambio de energa libre de Gibas (G) expresa la cantidad de energa capaz de realizar trabajo durante una reaccin a temperatura y presin constante que si es negativo la transformacin es EXERGNICA (la reaccin se desarrolla de forma espontnea de izquierda a derecha) y si es positivo la transformacin es ENDERGNICA (no se desarrolla de forma espontnea, sino que la reaccin inversa es la espontnea). Si su valor es cero, no existe cambio energtico (equilibrio). 11. La variacin de la energa libre es la fuerza impulsora de todas las reacciones qumicas. REACCIONES DE XIDOREDUCCIN 1. El ATP es la fuente de energa ya que la variacin de energa libre en la hidrlisis del ATP es grande y negativa (30,5 KJ/mol). Adems el ATP aporta energa para el transporte activo a travs de las membranas y es la fuente de energa para la contraccin muscular. 2. Las reacciones de transferencia electrnica metablicas son de importancia crucial ya que en estas reacciones de oxidacinreduccin (redox) interviene la prdida de electrones por una especie qumica, que es 39

as oxidada y ganancia por otra, que es reducida. 3. Fe 2+ (reductor) Fe3+ e (oxidante). La molcula dadora de electrones en una reaccin redox se denomina agente reductor, la molcula aceptora de electrones es el agente oxidante. En muchos organismos, la oxidacin de la glucosa suministra la energa para la produccin de ATP. Para la oxidacin de la glucosa: C 6H12 O6 + 6O 2 6 C O2 + 6 H2 O 4. Las clulas no convierten la glucosa en CO2 en una sola reaccin muy energtica, sino que lo hacen en una serie de reacciones, algunas de las cuales son oxidaciones. 5. Los electrones eliminados en estos pasos oxidativos se transfieren a coenzimas hidrosolubles especializados, en el transporte de electrones como el NAD+ , NADP+ , FAD Y FMN que van a experimentar oxidacin y reduccin reversibles en muchas de las reacciones de transferencia de electrones del metabolismo. Su reduccin en los procesos catablicos permite la conservacin de la energa libre que se produce en la oxidacin de los sustratos. NAD+ (oxidada) +2 e + 2 H+ NADH (reducida) + H+ NADP+ (oxidada) + 2 e + 2 H+ NADPH (reducida) + H+ Se conocen > 200 enzimas que catalizan reacciones en las que el NAD/NADH o el NADP/NADPH intervienen por lo que se denominan oxidorreductasas o deshidrogenasas (ej: alcohol deshidrogenasa). CH3CH2OH (etanol) + NAD+ CH3CHO (acetaldehdo) + NADH + H+ COMPUESTOS RICOS EN ENERGA DE HIDRLISIS 1. Cuando tienen lugar la transformacin exergnica, una parte de la energa liberada puede quedar disponible en forma de energa qumica, mediante la formacin de unos compuestos intermediarios denominados compuestos ricos en energa de hidrlisis, con unos enlaces muy inestables en disolucin acuosa, como los fosfosteres. La enega qumica almacenada por estos compuestos es liberada en su hidrlisis. La transferencia de grupos fosfato es una de las caractersticas centrales del metabolismo. 2. Entre los compuestos ricos en energa de hidrlisis de mayor inters fisiolgico, se encuentran: ATP, fosfoenolpiruvato, acil fosfatos y acetilCoA. El caso ms usual es el ATP (moneda energtica) cuya energa libre de hidrlisis es de 31 KJ/mol cuando se hidroliza a ADP y fosfato. Fotocopia Pg. 149 TEMA 13. CADENA RESPIRATORIA: FUNCIN Y LOCALIZACIN CELULAR. COMPONENTES DE LA CADENA RESPIRATORIA. FOSFORILACIN OXIDATIVA: CONCEPTO Y LOCALIZACIN CELULAR. 40

INTRODUCCIN 1. Los organismos aerobios (hombre) obtienen la energa mediante la transformacin oxidativa de nutrientes y metabolitos hasta dixido de carbono (CO2) y agua. 2. En la mayor parte de las clulas, al menos un 90% del oxgeno molecular consumido se utiliza para la fosforilacin oxidativa. El resto se emplea en otras reacciones metablicas especializadas. 3. las 2/3 partes del O2 que inspiramos se utiliza en los procesos oxidativos mitocondriales (ciclo de Krebs). Por cada acetilCoA que entra en el ciclo se obtiene 3 NADH, 1 FADH2 Y 1 GTP que con el concurso de los componentes de la cadena respiratoria localizados en la membrana interna mitocondrial, el oxgeno reoxidar las coenzimas previamente reducidos (proceso muy exergnico) y con la participacin de la fosforilacin oxidativa va hacer que se logre la fosforilacin de molculas de ADP hasta ATP (moneda energtica) y se obtenga el equivalente a 12 ATP. 4. El catabolismo de los hidratos de carbono, lpidos y protenas concluye en el esquema unificador constituido por el ciclo de Krebs, cadena respiratoria y fosforilacin oxidativa, cuya funcin bsica es la obtencin oxidativa de energa metablica en forma de compuestos de alta energa de hidrlisis (ATP). 5. La fosforilacin oxidativa (sntesis de ATP impulsada por la transferencia de electrones al oxgeno) y la fotofosforilacin son las 2 transducciones de energa ms importantes de la biosfera. 6. La fosforilacin oxidativa, que ocurre en la mitocondria, es la culminacin del metabolismo productor de energa en los organismos aerbicos. Es decir todos los pasos enzimticos de la degradacin oxidativa de glcidos, grasas y aminocidos en la clula aerbica converge en esta etapa final de la respiracin celular en la que los electrones fluyen desde intermedios catablicos al O2 produciendo energa para la generacin de ATP a partir de ADP y el P. fotocopia Pg. 153 VISIN GRAL. METABOLISMO. FOTOCOPIA PG. 154 ESTRUCTURA DE LA MITOCONDRIA. 1. Membrana externa: contiene un conjunto de enzimas y una reserva de coenzimas entre los que se encuentra el NAD+ y la CoA. Estas coenzimas no se mezclan con las de una reserva similar existente en la matriz. 2. Matriz: es la parte de la mitocondria contenida dentro de la membrana interna. Alberga las enzimas del ciclo de Krebs, excepto la succinato deshidrogenasa, firmemente unida a la propia membrana interna. 3. Membrana interna: contiene las cadenas respiratorias y numerosos sistemas transferidores que regulan el flujo de sustrato e iones inorgnicos dentro y fuera de la matriz. El lado de la membrana interna que mira hacia la matriz contiene la estructura sistentizadora de ATP, la ATP sintasa. CADENA RESPIRATORIA. La cadena respiratoria est constituida por 4 grandes complejos enzimticos localizados en la membrana mitocondrial interna. Una vez reducidos los coenzimas en el ciclo de Krebs debe desoxidarse inmediatamente merded al O2 para no bloquear los procesos catablicos. 41

El cambio de energa estndar es del orden de 200 kJ/mol (muy exergnico) y el proceso redox se lleva a cabo a saltos agrupndose en complejos. El ensamblado de tales enzimas se conoce como cadena respiratoria o cadena transportadora de e (respiracin celular). 1. Complejo I: NADHubiquinona reductasa. 2. Complejo II: Succinatoubiquinona reductasa. 3. Complejo III: Ubiquinocitocromo C reductasa. 4. Complejo IV: Citocromo C oxidasa. Fotocopia cadena respiratoria. Fotocopia complejos cadena respiratoria. Complejo I: Recoge los equivalentes de reduccin procedentes de las deshidrogenasas NAD+ / HADH+. Participan diversas protenas y al final el potencial redox es lo suficiente para la sntesis de 1 ATP. Complejo II: Recoge los equivalentes de reduccin procedentes de la FADH2. Contiene sulfoferroprotenas y un citocromo. No hay sntesis de ATP al no alcanzar un potencial redox suficiente. Complejo III: Multiproteico con varios citocromos y una diferencia de potencial redox suficiente para 1 ATP. Complejo IV: Tambin tiene suficiente potencial para 1 ATP. CITOCROMOS MICROSOMALES 1. Los citocromos son protenas que transfieren electrones y contienen hierro unido a un anillo de profirrina, similar al grupo hemo de la hemoglobina. 2. En el retculo endoplsmico existen cadenas respiratorias NO fosforilativas que estn ubicadas en los microsomas. La funcin de las cadenas respiratorias mitocondriales es acoplar la oxidacin del sustrato a la generacin de ATP. Sin embargo las microsomales hidroxilan diversas molculas orgnicas. 3. Las cadenas respiratorias microsomales contiene al citocromo P450 (absorbe luz a 450 nm). Existen hasta 8 formas de citocromo P450 cada una de ellas con especificidad para la hidroxilacin de una clase de compuestos. Los sistemas de citocromos P450, fundamentalemente a nivel heptico, participan en una gran gama de reacciones: expoxidacin, peroxidacin, desulfuracin, dealquilacin, deaminacin y desjalogenacin. Muchos frmacos siguen esta va de metabolizacin (ej: anticomiciales, barbitricos, etc.) FOSFORILACIN OXIDATIVA. Fotocopia Pg. 159. La hiptesis ms aceptada fue de la Meter Mitchell expuesta a principios de los aos 60 denominada TEORA QUIMIOSMTICA. 1. La membrana interna mitocondrial es impermeable a iones y ello es fundamental para que se cree la fuerza protonmotriz capaz de originar ATP. 2. Se produce un flujo de protones al operar la cadena respiratoria que se va a traducer en un potencial 42

elctrico y ello es lo que constituye el llamado potencia protonmotriz suficiente para la sntesis de molculas de ATP. 3. Por cada pareja de electrones, el funcionamiento de los complejos III y IV supone la salida de la mitocondria de 4 protones, cifra que se reduce a 3 en el caso del complejo I. 4. la ATP sintasa (ATPasa) utiliza la fuerza protonmotriz para llevar a cabo la fosforilacin del ADP por mecanismo desconocidos y sintetizar ATP. CONTROL DEL PROCESO Y RENDIMIENTO GLOBAL. La fosforilacin oxidativa se regula de forma muy precisa a travs de la relacin NADH/NAD+ , presin parcial de oxgeno y del gradiente de pH ya que al aumentar estos valores aumenta la velocidad del proceso. La relacin ADP/ATP tambin es un elemento regulador. 1. Se sabe que para sintetizarse 1 ATP se necesita de 3 o 4 protones. 2. La oxidacin de un NADH mitocondrial vendr acompaada por la produccin de 2 ATP (requiere de al menos 9 protones). 3. La oxidacin de una flavina tipo FADH2 tan solo rendir 2 ATP. 4. La oxidacin de un NADH citoslico produce 2 ATP. 5. Ejemplo: la oxidacin de 1 AcetilCoA por el ciclo de Krebs produce lo siguiente: 3 NADH + 1 FADH2 + 1 GTP. Resultado: 3 NADH x 3 = 9 ATP 1 FADH2 x 2 = 2 ATP 12 ATP 1 GTP = 1 ATP DESACOPLADORES E INHIBIDORES 1. Los inhibidores de la cadena respiratoria bloquean su funcionamiento en lugares especficos y no se produce la fosforilacin oxidativa. 2. La utilizacin de inhibidores es til para diluir los componentes y el funcionamiento de la cadena respiratoria. Compuestos como el insecticida rotenona (bloquea complejo I), antibitico antimicina (bloquea complejo II) y cianuro, azida sdica, cido sulfhdrico y monxido de carbono (bloquean a la citocromo oxidasa). 3. Los desacopladores son sustancias que disminuyen el rendimiento de ATP (disipan la fuerza protonmotriz o permeabilizan la membrana interna mitocondrial para los protones) pero incrementa la velocidad de la cadena respiratoria disipndose una mayor cantidad de energa en forma de calor. A nivel fisiolgico es lo que ocurre en el tejido adiposo pardo rico en mitocondrias deacopladas (periodo de hibernacin del oso pardo). Algunos componentes de dietas adelgazantes poco controladas llevan compuestos de estos como son las hormonas tiroideas. En los pacientes oncolgicos, las clulas malignas tambin incrementan el desacoplamiento.

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Existen 3 tipos de inhibidores de fosforilacin oxidativa: 1. Inhibidores especficos de lugar: bloquean las reacciones especficas asociadas a los complejos I, II y IV. En ocasiones son utilizados como frmacos. 2. Inhibidores no especficos de lugar: actan indistintamente y no inhiben a complejos especficos. Bloquean directamente la fosforilacin oxidativa y por tanto la oxidacin. Ej: Antibiticos como oligomicina, aureovertina y glucsidos vegetales txicos. 3. Desacopladores de la fosforilacin oxidativa: debilitan o destruyen el acoplamiento entre oxidacin y fosforilacin aumentando las velocidades de oxidacin. El resultado es la produccin de calor extra que se puede manifestar como fiebre. AGENTES DESACOPLADORES: dicumarol, salicilato libre, bilirrubina, cidos grasos libres, tiroxina, toxina microbianas. OXIDACIONES NO LIGADAS A LA CADENA RESPIRATORIA. RACIALES LIBRES. Un cierto porcentaje del consumo de O2 de las clulas eucariotas aerbicas no se realiza por la cadena respiratoria y se van a producir una serie de sustancias denominadas radicales libres oxigenados que participan en mecanismos de defensa celulares. Sin embargo la produccin y acumulacin de especies tan agresivas provoca problemas por su reactividad y toxicidad. Los radicales hidroxilo son extremadamente reactivos y constituyen el agente mutgeno ms activo obtenido de las radiaciones ionizantes. Es paradjico que el O2 es esencial para la vida pero tambin una de las sustancias ms txicas reaccionando con toda clase de macromolculas celulares e implicndose en determinadas enfermedades como la arterosclerosis, ictus, cncer, enfisema y envejecimiento. Uno de los mecanismos de defensa de los radicales libre es la actuacin de la enzima superxido dismutosa que transforma al anin superxido en O2 y perxido de hidrgeno. Los lactantes prematuros tienen dficit de esta enzima y pueden desarrollar fibroplasia retrolenticular (ceguera) si se les administra grandes cantidades de O2 en las incubadoras. Se piensa que el efecto saludable y antienvejecimiento de las dietas ricas en antioxidantes (Vitamina C, E, carotenos) se debe a la capacidad para descender los niveles de radicales libres oxigenados. TEMA 14. INTRODUCCIN AL METABOLISMO. CATABOLISMO Y ANABOLISMO. VISIN GENERAL DEL METABOLISMO. FUNCIONES DEL METABOLISMO 1. Obtener energa qumica a partir de la captura de energa solar o degradando nutrientes ricos en energa obtenidos del ambiente. 2. Convertir molculas nutrientes en las molculas caractersticas de la propia clula, incluidos los precursores 44

macromoleculares. 3. Polimerizar precursores monomricos a protenas, cidos nucleicos, lpidos, polisacridos y otros componentes celulares. 4. Sintetizar y degradar Biomolculas requeridas en funciones celulares especializadas. DIVISIN SEGN FORMA QUMICA DE LOS SERES VIVOS. 1. AUTTROFOS (autoalimentados como las bacterias fotosintticas y plantas superiores). Utilizan el CO2 de la atmsfera como fuente nica de carbono a partir de la cual construyen todas sus molculas. Muchos organismos son fotosintticos y obtienen la energa a partir de la luz solar. 2. HETERTROFOS (alimentados a partir de otros, como las clulas de los animales superiores y la mayora de los microorganismos). No pueden utilizar el CO2 por lo que han de obtener el carbono del ambiente en forma de molculas orgnicas relativamente complejas (ej: glucosa). Obtienen la energa por degradacin de nutrientes orgnicos fabricados por los auttrofos. METABOLISMO: DIVISIN METABOLISMO: suma de todas las transformaciones qumicas que se producen en una clula u organismo que tienen lugar en una serie de reacciones catalizadas por enzimas que constituyen las rutas metablicas. Segn sea su naturaleza, los procesos metablicos son: 1. CATABLICOS o DEGRADANTES: a partir de un n muy amplio de macromolculas diferentes, se va pasando a un n menor de sus unidades constituyentes que a su vez se transforman en un n inferior de intermedios metablicos y al final y en condiciones aerobias se produce CO2, agua y energa. Por tanto las rutas catablicas liberan energa libre, parte de la cual se conserva en la formacin de ATP y transporatadores electrnicos reducidos (NADH y NADPH). 2. ANABLICOS o CONSTRUCTIVOS (tambin denominado BIOSNTESIS): son caminos contrarios a los previos por vas metablicas diferentes lo que garantiza un control ms eficaz y simultneo de ambos procesos. Precursores sencillos se integran en molculas mayores y complejas entre las que se encuentran los lpidos, glcidos, protenas y cidos nucleicos. Las reacciones anablicas requieren del aporte de energa en forma de energa libre de hidrlisis del ATP y del poder reductor del NADH y NADPH. 3. ANFIBLICOS: interconversiones de molculas, normalmente intermedios metablicos. REGULACIN DE LAS RUTAS METABLICAS Las rutas metablicas a veces son lineales y a veces ramificadas. Existen algunas que son cclicas. Por otra parte las rutas catablicas son convergentes mientras que las anablicas son divergentes. Las rutas estn reguladas por: 1. ENZIMAS ALOSTRICOS: son capaces de cambiar la actividad cataltica en respuesta a moduladores o inhibidores. 2. REGULACIN HORMONAL: el proceso de transmisin de estos mensajes y la realizacin de los cambios metablicos se denomina transduccin de seal. Los mensajeros extracelulares son fundamentalemente hormonas (mensajeros qumicos liberados por un tejido que estimulan o inhiben algunos procesos que tienen lugar en otro tejido). La otra respuesta es la que utiliza la sntesis de segundo mensajeros intracelulares que controlan las reacciones metablicas (AMPc) 45

3. CONTROL DE VELOCIDAD de un paso metablico por regulacin de la concentracin de su enzima en la clula. Fotocopia 169 TEMA 15 GLCIDOS: CONCEPTO, CLASIFICACIN Y FUNCIONES. MONOSACRIDOS Y DISACRIDOS. POLISACRIDOS Y MUCOPOLISACRIDOS. CONCEPTO Y PROPIEDADES GENERALES. 1. Los glcidos constituyen el grupo de Biomolculas ms abundante (75% de la materia orgnica total) y excepto el cido ascrbico (vit C) no son esenciales ya que tras la gluconeognesis el organismo puede sintetizarlos. 2. Los glcidos son los principales compuestos desde el punto de vista nutricional/energtico. Adems los glcidos forman parte de sustancias ms complejas por la unin con otras unidades (polisacridos, Glucoprotenas, glicolpidos, cidos nucleicos, etc). 3. Los glcidos, azcares, sacridos (sak karon: azcar), carbohidratos o hidratos de carbono, denominaciones que hacen referencia al sabor dulce, tienen una composicin C:H:O (1:2:1); Cn(H2O)n son carbonos hidratados (ej: glucosa C6H12O6). 4 No todos los glcidos son dulcer ni poseen esa compasin y adems otros como el cido actico C2H4O2 es una grasa. 5. Los glcidos son polihidroxialdehidos o polihidroxiacetonas o bien sustancias que originan estos compuestos despus de hidrlisis. Desde el punto de vista de qumica orgnica, un glcido es una cadena hidrocarbonada polialcohlica, que contiene en uno de sus tomos de carbono una funcin ms oxidada, el grupo carbonilo. 6. Si el grupo carbonilo se sita en el extremo de la cadena (aldehdo) recibe el nombre de ALDOSA y si est en el interior (cetonas) se denomina CETOSA. Grupo Carbonilo C H O 7. Funciones biolgicas principales: * Reserva energtica en frutos y tejidos animales como el hgado o el msculo. * Papel estructural en vegetales y tejidos animales. * Fuente inmediata de energa para la inmesa mayora de clulas. * Suministradores de tomos para formar otras molculas en rutas anapletricas.

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CLASIFICACIN DE LOS GLCIDOS Abarcan gran variedad de tamaos moleculares y segn su tamao se clasifican en: 1. MONOSACRIDOS o UNIDADES BSICAS: son azcares que contienen de 3 a 7 tomos de carbono y por hidrlisis no dan azcares ms sencillos. 2. OLIGOSACRIDOS: compuestos formados por la unin de algunos monosacridos en nmero de 2 a 10. Los ms importantes son los disacridos. 3. POLISACRIDOS: constituidos por > 10 unidades de monosacridos y pueden contener miles. Dan lugar a cadenas, lineales o ramificadas. Los formados por la misma unidad se denominan HOMOPOLISACRIDOS y si lo forman varias unidades diferentes, se llaman HETEROPOLISACRIDOS. MONOSACRIDOS Son slidos, incoloros y cristalinos, solubles en agua e insolubles en disolventes no polares, la mayora de sabor dulce y se clasifican segn 3 criterios: 1. N de tomos de carbono: oscila entre 3 y 7. Se nombra con un prefijo que hace referencia al n de tomos de carbono y el sufijo osa (triosas, terrosas, pentosas, hexosas y heptosas). Los ms importantes son las hexosas seguido de las pentosas. 2. Naturaleza, aldehdo o cetona del monosacrido. Existen 2 grandes grupos principales: ALDOSAS Y CETOSAS. De esta forma una hexosa puede existir en forma de aldohexosa (glucosa) y cetohexosa (fructosa). 3. Estereoisomera: debido a la existencia de carbonos asimtricos en los distintos monosacridos se puede producir una gran diversidad de monosacridos. ESTEREOISOMERA Cuando en un compuesto orgnico un tomo de carbono tiene unido 4 sustituyentes distintos se denomina QUIRAL o Asimtrico. El carbono quiral confiere actividad ptica, es decir, confiere la propiedad de desviar un cierto ngulo cualquier haz de luz polarizada que pase a travs de una disolucin de la sustancia y se mide con un POLARIMETRO. Si se cambian las posiciones relativas de 2 sustituyentes sobre ese carbono se obtiene 2 compuestos denominados ismeros pticos que van a presentar propiedades fsicas diferentes. El compuesto ms sencillo con actividad ptica es el gliceraldehido (aldotriosa) con un carbono quiral y si se proyecta su estructura tetradrica en el plano se conoce como FORMULA DE FISCHER. Por convenio, la familia de azcares designada como D (dextrgira) es aquella que tiene el grupo hidroxilo en el carbono quiral ms alejado del grupo reductor en el lado derecho de la cadena carbonada y L (levgira) cuando el grupo hidroxilo est en el lado izquierdo. Fotocopia pg 175 En los monosacridos con ms tomos de carbono que las triosas, el n de carbonos quirales aumenta y con ello el n de ismeros pticos. Casi todos los monosacridos presentes en la naturaleza son de la serie D. en caso de las cetosas todas tienen el grupo carbonilo enc arbono 2. E estereoismeros que tengan todos los carbonos asimtricos con configuracin opuesta de denominan ENANTIMEROS. 47

 2 estereoismeros que no sean enantimeros se denominan diastereoismeros. Dentro de stos, las parejas que slo se diferencia en la configuracin de un carbono asimtrico se denominan EPIMEROS. Los compuestos de importancia metablica son: (fotocopia pag 176) ENLACE HEMIACETLICO Cuando una pentosa y una hexosa se disuelven en agua, la estructura abierta de los monosacridos no es estable y el grupo carbonilo tiene tendencia a formar un enlace denominado hemiacetlico dando lugar a una estructura cclica denominada PIRANSIDO o FURANSIDO, segn tenga 6 o 5 tomos vrtice, respectivamente. Estas estructuras son la representacin en el plano de la estructura real y se denomina representacin de HAWORTH, donde el tomo de oxgeno se encuentra en el vrtice superior derecho y el grupo CH2OH terminal hacia arriba del plano que contiene el ciclo mientras que los grupos hidroxilos se sitan hacia abajo los orientados a la derecha y hacia arriba los orientados hacia la izquierda. Cuando se forma el enlace hemiacetlico, el carbono carbonlico (anomrico) se transforma en nuevo centro asimtrico introduciendo 2 nuevos estereoismeros (anmeros): y . Es imposible mantener en disolucin un anmero en estado puro. El establecimiento del equilibrio lleva consigo un cambio en el poder rotatorio de la disolucin, que se conoce con el nombre de MUTARROTACIN de manera que las formas y se interconvierten a travs de la estructura abierta. Fotocopia 177 DERIVADOS MONOSACRIDOS. Los monosacridos pueden sufrir transformaciones para dar compuestos de importancia fisiolgica que no responden a la estequiometra de carbohidrato Cn(H2O)n. Segn el tipo de modificacin qumica tenemos a: REDUCCIN: Alditoles y los desoxiazcares. La reduccin del grupo carbonilo a un nuevo grupo alcohol da lugar los alditoles o azcaresalcoholes que se denominan con el nombre de azcar terminado en itol (Dmanosa: Dmanitol; Dribosa: Dribitol; Dglucosa: Dsorbitol). Otra reduccin diferente implica la prdida de algn grupo hidroxilo, dando lugar a los desoxiazcares (ej: 2desoxiDribosa: ADN). AMINOAZCARES: se obtiene por la sustitucin de algn grupo hidroxilo por un grupo amino generalmente en el C2 y el grupo amino a su vez se encuentra acetilado en la mayor parte de los derivados proteoglicanos (2Dglucosamina, 2Dmanosamina y 2Dgalactosamina y sus Nacetilderivados NHCOCH3). OXIDACIN: azcares cidos. Los carbonos terminales de las aldosas pueden oxidarse a grupo carboxilo. Existen 3 tipos: cidos urnicos (ej: cido Dglucornico derivado de la Dglucosa); cidos aldnicos (ej: cido Dglucnico); cido aldricos (ej: cido Dglucrico). Existen otros derivados de cidos con modificaciones ms importantes como el cido ascrbico, murmico y neuramnico (silico). ESTERFICACIN: azcares fosfato y sulfato. Se producen por esterificacin de algn grupo hidroxilo del azcar con cido fosfrico o sulfrico. Pg fotocopia 178 ENLACE GLICOSDICO. Los hemiacetales pueden reaccionar a travs del carbono anomrico con el grupo hidroxilo de otro alcohol para dar lugar a un enlace acetlico. En el caso de los glcidos, el enlace se denomina 48

glicosdico, y el compuesto GLICSIDO (ej: glicsidos cardacos como la ouabana). Si el alcohol que se une al carbono anomrico pertenece a otro monosacrido, el compuesto es un azcar que contiene ms de una unidad de monosacrido y se denomina DISACRIDO. El enlace glicosdico y puede producirse entre ms de 2 monosacridos, dando lugar a oligosacridos y polisacridos. Debido a que el carbono anomrico tiene 2 configuraciones distintas, el enlace glicosdico puede tambin ser de 2 tipos, y . El enlace glicosdico no es exclusivo del tomo de oxgeno ya que en algunos casos se produce con el nitrgeno (ej: nucletidos: enlace entre la pentosa y el N1 o N9 de la base nitrogenada). Este enlace es siempre de configuracin . Fotocopia 179 DISACRIDOS Entre los oligosacridos, los nicos con importancia fisiolgica son los DISACRIDOS y dentro de ellos solo 3: maltosa (azcar de malta), lactosa (azcar de la leche) y sacarosa (azcar comn o de mesa obtenido de la caa y la remolacha). Frmula estequimtrica: C12H22O11 y el tipo de enlace es el glicosdico. La maltosa es un azcar reductor ( producto principal de la accin de la amilasa sobre el almidn o el glucgeno) y la lactosa (disacrido reductor de la leche). Sin embargo la sacarosa no es reductor y no tiene 2 ismeros ( y ) como le ocurre a los otros disacridos. Fotocopia 180 CLASIFICACIN POLISACRIDOS Los polisacridos o glicanos constituidos por > 10 unidades de monosacridos estn unidos por enlaces glucosdicos formando cadenas en ocasiones de varios miles de unidades. Tienen pesos moleculares grandes y son insolubles en agua o forman disoluciones coloidales. Los enlaces ms usuales se producen entre el carbono anomrico y los hidroxilos situados sobre el C4, C6 y C3, en ese orden, dando origen a cadenas lineales o ramificadas. Segn su composicin, se clasifican en: 1. HOMOPOLISACRIDOS: son ms simples y abundantes. Se nombra con el nombre del monosacrido acabado en ano (glucano, fructano, manano, galactano, etc). Los principales son los glucanos e incluyen el almidn, glucgeno, celulosa o quitina. Tienen un nico tipo de unidad monomrica. Funciones de reserva energtica y como elemento estructurales. 2. HETEROPOLISACRIDOS: son menos abundantes pero mucho ms variados y comprenden una larga serie de polisacridos estructurales componentes de mucosas, tejido conjuntivo, lquido sinovial, humor vtreo, cartlago, crnea, hueso, etc. contiene 2 o ms tipos de diferentes unidades de monosacridos. HOMOPOLISACRIDOS. Los homopolisacridos van a tener funciones de reserva energtica en vegetales (almidn) y animales (glucgeno) as como funcin estructural como integrantes de la madera (celulosa) o exoesqueleto de insectos y crustceos (quitina). 1. ALMIDN: masa molecular entre 104 y 106 d. Tiene 2 componentes: Amilasa (cadenas lineales de Dglucosa unidas por enlaces (14) que adoptan una estructura helicoidal y se colorean de azul con el yodo siendo el componente principal de los almidones) y Amilopectina (cadenas ramificadas con enlaces (14) en la lineal y (16) en los puntos de ramificacin que con el yodo dan color violeta a marrn). 49

2. GLUCGENO: peso molecular de hasta 4.106 d. Se asemeja a la amilopectina pero con ms ramificaciones, un enlace (16) cada 813 unidades de Dglucosa. Se almacena en el hgado y el msculo esquelctico cuando existe excedente de aporte de glucosa. Es el polisacrido de reserva ms importante en las clulas animales puediendo representar un 7% del peso total del hgado. Fotocopia pg 183 3. CELULOSA: constituye la Biomolcula ms abundante de la naturaleza y contiene el 50% del carbono orgnico de la biosfera (constituye el 50% de la madera y casi el 100% del algodn). Formado por cadenas lineales de masa molecular entre 2 y 4.105 d compuestas por unidades de Dglucosa unidas por enlaces (14). Estos enlaces no se hidrolizan por las enzimas digestivas humanas lo que explica que la celulosa no sea digerible. Sus steres acticos y ntricos tienen importantes aplicaciones industriales como papel, plsticos. 4. QUITINA: muy semejante a la celulosa, con enlaces glicosdicos (14) y cadenas lineales, pero las unidades que se repiten son de Nacetil2glucosamina. Fotocopias 184 HETEROPOLISACRIDOS. Estn compuestos por unidades de aminoazcares y de cidos urnicos alternantes y con frecuencia se unen de forma covalente a una cadena proteica por lo que tambin se denominan PROTEOCLICANOS o MUCOPOLISACRIDOS. 1. CIDOS HIALURNICO: el nico que no se une a cadenas polipeptdicas y se encuentra en todas las clulas. Formando por unidades de un disacrido compuesto por cido Dglucurnico y Nacetil2glucosamina unido por enlaces (13). Forma parte del lquido sinovial, mucosas y humor vtreo del ojo. Proporciona resistencia y flexibilidad a cartlagos y tendones. 2. SULFATO DE CONDROITINA: forma parte de los tejidos ms duros como la crnea, hueso y cartlago. Las cadenas son parecidas a las del cido hialurnico pero el aminoazcar es la Nacetil2Dgalactosamina. Existen varios tipos condroitn sulfato A, C, etc. Parecido a estos compuestos estn los queratn, dermatn y heparn sulfatos con mayor grado de heterogeneidad en su composicin. La heparina y sus sulfatos tienen propiedades anticoagulantes y se encuentran en los vasos sanguneos y las vlvulas cardacas. Otros heteropolisacridos que a veces forman agregados de gran tamao con protenas (PROTEOGLICANOS) son los responsables de la elevada viscosidad y propiedades lubricantes de alguna secrecin. IMPORTANCIA GLCIDOS EN BIOQUMICA CLNICA. La Dglucosa es el nutriente universal de las clulas humanas y en algunos tejidos casi el nico. Es capaz de proporcionar algo de energa incluso en condiciones anaerbicas. La determinacin de sus niveles en sangre y orina es uno de los parmetros ms medidos en bioqumica clnica y de los ms importantes para fines diagnsticos, dietticos y teraputicos. La concentracin plasmtica de glucosa en ayunas es de 1g/L, mediante una regulacin hormonal muy eficaz con insulina y glucagn. El aumento de los niveles basales de glucosa > 126 mg/dl (2 determinanciones) o tras sobrecarga oral de 75 gr de azcar y glucemia a las 2 horas > 200 mg/dl define a un paciente con DIABETES. Otros azcares que tambin se determinan en clnica son: galactosa (galactosemia: enfermedad hereditaria que origina cataratas y daos hepticos irreversibles) y fructosa (intolerancia a la fructosa y fructosuria esencia, tambin 2 enfermedades hereditarias). 50

 Hoy da se determina la concentracin de glucosa por mtodos colormetricosenzimticos como es la glucosa oxidasa. TEMA 16 DIGESTIN Y ABSORCIN DE LOS GLCIDOS DE LA DIETA. GLUCLISIS: REACCIONES, BALANCE ENERGTICO Y REGULACIN. FORMACIN DE LACTATO. INCORPORACIN DE OTROS MONOSACRIDOS A LA VA GLUCOLTICA. INTRODUCCIN. 1. El ser humano necesita del aporte continuado de una serie de compuestos orgnicos para el nomal desarrollo y funcionamiento de sus rganos y tejidos. 2. Los alimentos de la dieta proporcionan las protenas, hidratos de carbono, grasas, minerales y vitaminas que el conjunto de clulas del organismo precisan para satisfacer sus requerimientos energticos y de crecimiento. 3. Una dieta equilibrada va a estar compuesta por un 5560% de hidratos de carbono (4.2 Kcal/g), 30% de grasas (9.5 Kcal/g) y 15 % de protenas (4.3 Kcal/g). Los 2 primeros van a suministrar parte de la energa que el individuo consume. Sin embargo, las protenas que aunque tenga un valor energtico similar a los carbohidratos, su participacin energtica solo es del 15% ya que su funcin es fundamentalmente plstica. 4. Los requerimientos energticos de un individuo van a depender de factores como son: peso, edad, gnero, circunstancias particulares (tipo de actividad, embarazo, convalecencia, etc). 5. Los hidratos de carbono solo pueden absorberse de forma monomrica. Los monosacridos (glucosa, fructosa, galactosa, etc) son un porcentaje perqueo de los azcares presentes en los alimentos siendo su forma mayoritaria las formas polimricas de la glucosa tales como el almidn o el glucgeno o los disacridos sacarosa y lactosa. Por tanto deben ser transformados en monosacridos en un proceso previo a la absorcin. La celulosa, pectinas, etc que no puede ser degradadas por el aparato digestivo se eliminan por las heces (fibra vegetal). 6. Las protenas debe ser transformadas en sus componentes unitarios, los aminocidos, que son absorbibles por el intestino. Las protenas que no pueden ser degradadas no se absorben y aparecen en las heces. 7. Los lpidos forman un grupo complejo de nutrientes en el que predominan los triacilgliceroles que constituyen el 90% de las grasas. Fosfolpidos, colesterol y steres de colesterol, cidos grasos y vitaminas liposolubles completan la fraccin lipdica de los alimentos. Para la absorcin de los lpidos es necesaria la secrecin biliar debido a su insolubilidad en agua. 8. En el ser humano es obligatorio ingerir nutrientes esenciales: la mitad de los aminocidos protecos, algunos cidos grasos poliinsaturados, vitaminas y minerales. DIGESTIN 1. La gran mayora de compuestos ingeridos sufren reacciones de transformacin que consisten en la conversin de Biomolculas de tipo polimrico en otras monomricas ms sencillas que pueden ser transportadas a la sangre por las clulas intestinales. 51

2. El conjunto de reacciones de degradacin son procesos hidrolticos exergnicos que se producen extracelularmente en la luz del aparato digestivo y se conoce con el nombre de DIGESTIN. 3. La digestin corre a cargo de: * ENZIMAS DIGESTIVAS: aceleran la velocidad de degradacin de los materiales polimricos en monomricos. Estas enzimas son sintetizados en clulas y glndulas especializadas en forma de zimgenos digestivos. * COMPONENTES NO ENZIMTICOS: presentes en las secreciones de diferentes glndulas digestivas que suministran los iones y pH adecuados para la actuacin de las enzimas o que ayudan como es la bilis a solubilizar los lpidos para favorecer su digestin y absorcin. * PROCESOS FSICOS: masticacin o trituracin de los alimentos y los movimientos de contraccin del tubo digestivo. * SISTEMA NERVIOSO Y ENDOCRINO: coordinacin entre tiempo de residencia del bolo alimenticio y el aporte de secreciones digestivas en tiempo y cantidad adecuado para llevar a cabo la degradacin de los alimentos. 1. SALIVA (agua, ClNa, amilasa) SECRECIN GSTRICA (ClH, Pepsingeno) SECRECIN PANCRETICA (Bicarbonato, proteasas, amilasa, lipasas, nucleasa) SECRECIN BILIAR (Bilis) SECRECIN INTESTINAL (Oligosacridos, aminopeptidasas). 2. La digestin de los polisacridos almidn y gucgeno comienza en la boca por medio de la amilasa salival que produce la degradacin parcial de las cadenas lineales de amilasa y amilopectina. Esta hidrlisis es breve ya que la enzima no es activa al pH cido del estmago por lo que la digestin de estos compuestos contina en el duodeno por medio de la AMILASA PANCRETICA que transforma a estos azcares en oligosacridos (maltosa, maltotriosa y dextrina). La hidrlisis final de los oligosacridos y disacridos de la dieta hasta monosacridos se llevan a cabo por medio de disacaridasas y oligosacaridasas localizadas en la mucosa intestinal (amilasa, insomaltosa, maltasa, sacarosa, lactasa). ALTERACIONES DIGESTIN. 1. Alteracin de la funcin pancretica (pancreatitis) produce problemas de maldigestin. 2. Alteracin de las clulas de la mucosa duodenal, ricas en enzimas digestiva produce problemas de malabsorcin, especialmente de oligosacridos. * Enfermedad celaca = atrofia de clulas intestinales en respuesta a la ingestin de gluten (protena del trigo). * Intolerancia a la lactosa (ausencia de lactasa). * Otras. ABSORCIN DE GLCIDOS Una vez digeridas, es necesario que las Biomolculas pasen a travs de la membrana luminar del entericito (absorcin). Factores que favorecen la absorcin: compuestos parecidos a los componentes de membrana, menor tamao, ms hidrfoba. Sin embargo, no tenemos problemas de absorcin para 52

molculas ms hidrfilas como los glcidos al disponer de sistemas de transporte (transportadores, translocasas o permeasas) diseados para absorber con total eficacia e incluso en contra de gradientes de concentracin. Slo se absorben los glcidos si estn en forma de monosacridos con diferencias entre ellos. La absorcin de las hexosas tras la comida se hace al principio por medio de un transporte mediado pasivo (no requiere energa) mientras que las pentosas parecen pasar por difusin simple. Al final de la digestin es necesario un transporte activo que depende de energa y de la bomba ATPasa Na/K para asegurar que hasta las pequeas concentraciones de azcar llegan al entericito. GLUCLISIS: INTRODUCCIN Los glcidos son la principal fuente de energa para los seres humanos. Los monosacridos ingresan en la circulacin portal y llegan al hgado, donde en su mayor parte (60%) son metabolizados para realizar el trabajo biolgico. La Dglucosa es el principal combustible y rico en energa potencial ya que su oxidacin completa a CO2 y agua transcurre con una variacin de energa libre estndar de 2840 kJ/mol. Almacenando la glucosa en forma de polmero de elevada masa molecular (glucgeno), una clula puede apilar grandes cantidades de glcidos sin que modifique la osmolaridad puedindose liberar rpidamente la glucosa a partir de estos polmeros de almacenamiento. La glucosa no es slo combustible sino tambin un precursor capaz de suministrar intermedios metablicos (ej: e. Coli puede obtener a partir de la glucosa los esqueletos carbonados de todos los aminocidos, nucletidos, coenzimas, cidos grasos, etc. necesarios para el crecimiento). HIGADO = Principal regulador de la homeostasis de la glucosa. DESTINOS Y TRANSFORMACIONES METABLICAS DE LOS GLCIDOS La glucosa tiene 3 destinos: 1. Almacenada en forma de polisacrido o sacarosa. 2. Oxidasa a un compuesto de 3 carbonos (piruvato) via gluclisis. 3. Oxidada a pentosas, va de las pentosasfosfato. Entre las transformaciones metablicas de los glcidos, se encuentran: GLUCLISIS ANAEROBIA (Citoplasmtica). GLICLISIS AEROBIA (Mitocondrial). VIAS CATABLICAS ALTERNATIVAS (Va de las pentosasfosfato o del fosfogluconato): es anaerbico y citoplasmtica. GLUCONEOGNESIS (Mitocondrial y Citoplasmtica). GLUCGENOSNTESIS y GLUCOGENLISIS (Citoplasmtica). RESUMEN 1. GLUCLISIS ANAEROBIA: Si partimos de la glucosa u otro monosacridos, en condiciones anaerobias, obtenemos piruvato o mejor an lactato, acompaado de la obtencin de una cantidad limitada de ATP. Proceso evolutivo ms antiguo que se conserva en todas las clulas vivas. 53

2. GLUCLISIS AEROBIA: En las clulas eucariotas, es una va de degradacin por la que la Dglucosa u otro monosacrido se oxida a piruvato el cual se introduce en la mitocondria y a travs de su conversin en AcetilCoA y su entrada en el ciclo de Krebs, el oxgeno molecular facilita su oxidacin hasta la obtencin de CO2 y agua con una importante produccin de ATP por medio de la fosforilacin oxidativa. Hay clulas que no tienen esta va. 3. VA PENTOSASFOSFATO o DEL FOSFOGLUCONATO: sirve para producir NADPH necesario para la biosntesis de cidos grasos y esteroides. Tambin permite la interconversin de hexosas y pentosas imprescindibles para la sntesis de cidos nucleicos. La va del fosfogluconato produce cido ascrbico en otras especies que no es la humana y cido Dglucurnico necesario para la detoxificacin. 4. GLUCONEOGNESIS o NEOGLUCOGNESIS: ocurre en los hepatocitos fundamentalmente y consiste en la obtencin de glucosa a partir de derivados no glucdicos. Controla el nivel de glucosa en sangre perifrica. Es un proceso opuesto a la gluclisis y necesita de energa en forma de ATP. 5. GLUCGENOSNTESIS y GLUCOGENLISIS : Ambos procesos son contrapuestos entre s utilizando rutas enzimticas diferentes. GLUCLISIS ANAEOBIA 1. La palabra gluclisis deriva del griego glycos (azcar) y lisis (rotura) y consiste en la degradacin de 1 molcula de glucosa, por medio de una serie de reacciones catalizadas enzimticamente, dando lugar a 2 molculas de piruvato, liberndose energa libre en forma de ATP. 2. Fue la primera ruta metablica descubierta y la que mejor se conoce: Va de EmbdenMeyerhofHarden. La gluclisis opera en todos las clulas como un recuerdo metablico de la poca evolutiva en la que los organismos vivos se desarrollaban en una atmsfera sin O2. 3. Es una ruta central, casi universal del catabolismo de la glucosa. En ciertos tejidos mamferos y tipos de clulas (eritrocitos, mdula renal, cerebro y esperma) la glucosa es la nica fuente de energa metablica a travs de la gluclisis. 4. Por otra parte, FERMENTACIN indica degradacin anaerbica de la glucosa u otros nutrientes orgnicas a diversos productos para obtener energa en forma de ATP. 5. Durante el parto, es muy importante la gluclisis anaerobia en el recin nacido ya que el acceso de O2 es pobre excepto en el cerebro. En los adultos esta ruta funciona en clulas con pocas mitocondrias (msculo blanco, testculos, crnea, cristalino y eritrocitos). 1. Ocurren 10 transformaciones: en la gluclisis anaerobia que catalizadas enzimticamente producen la rotura de 1 molcula de glucosa con 6 carbonos en 2 molculas de piruvato de 3 carbonos con la posibilidad final de conversin de piruvato a lactato. 2. Fase preparatoria: no se obtiene energa y se necesita la energa de hidrlisis de 2 ATP. Seran las 5 primeras transformaciones. Todo ello es debido a que es necesario fosforilar a los monosacridos para hacerlo impermeables a la membrana plasmtica. 3. Fase de beneficios: los ltimos 5 pasos y es donde se obtiene la energa mediante fosforilaciones y se obtiene 4 ATP. 4. Rendimiento neto: 2 molculas de ATP por molcula de glucosa utilizada. Tambin se conserva energa en la fase de beneficios mediante la formacin de 2 molculas de NADH por molculas de glucosa. Pero en 54

condiciones anaerbicas el piruvato se reduce a lactato para regenerar el NAD. FOTOCOPIA 198 FOTOCOPIA 199 El piruvato formado en la gluclisis puede tomar 3 rutas catablicas alternativas: Organismos aerbicos y en condiciones aerbicas. Degradacin completa de la glucosa impulsando sntesis de ATP. Reduccin a lactato va fermentacin del cido lctico. Ciertos tejidos (retina, cerebro, eritrocitos) convierten la glucosa en lactato o un msculo tras una contraccin vigorosa. La tercera ruta principal del catabolismo del piruvato conduce a la produccin de etanol (fermentacin alcohlica). Fotocopia pag 200 RENDIMIENTO NETO DE LA GLUCOLISIS ANAEROBIA La nica posibilidad para que el lactato se metabolice es a travs de su reconversin hasta piruvato mediante la lactato deshidrogenasa. Podemos considerar, para simplificar, que el piruvato es el producto final de la gluclisis anaerobia, por lo que el rendimiento global ser por cada glucosa el de: 2 ATP Y 2 NADH Si consideramos que cada NADH citoslico equivale a 23 ATP (el entrenamiento fsico hace que las clulas musculares en los atletas intensifiquen el rendimiento energtico), todo este paso supone la generacin de: 6 u 8 ATP (7 ATP) ENZIMOLOGA DE LA RUTA. 1. El ajuste necesario de la velocidad de gluclisis se consigue mediante la regulacin por 2 enzimas glucolticos: 6FOSFOFRUCTOQUINASA y PIRUVATO QUINASA. 2. La reaccin de glucosa a glucosa6fosfato es un proceso muy exergnico y poco reversible catalizado por la hexocinasa o la glucocinasa. 3. El paso 4 est catalizado por la enzima reguladora ms importante de la gliclisis anaerobia, la 6FOSFOFRUCTOCINASA. Este proceso es bastante irreversible al igual que el anterior. 4. La Piruvato cinasa es la enzima que cataliza el paso de fosfoenolpiruvato a piruvato. Tambin es una reaccin enormemente exergnica lo que provoca irreversibilidad. 5. El resto de etapas catalizadas enzimticamente poseen caractersticas de reversibilidad. El arsenato ( parecido al fosfato) bloquea la gluclisis. Un ismero del 1,3bifosfoglicerato es el 23bifosfoglicerato, factor alostrico de gran importancia en la asociacin de O2 con la hemoglobina. La enolasa deshidrata la molcula de 2fosfoglicerato en fosfoenolpiruvato y es muy sensible al ion fluoruro inhibiendo la gluclisis 55

de ciertos microorganismos bucales que favorecen la caries. FERMENTACIN LCTICA 1. El concurso de la enzima lactato deshidrogenasa encargada del paso del piruvato a cido lctico es necesario para que las clulas con metabolismo anaerobio no se acumule rpidamente el HADH y con ello se consuma totalmente el NAD+ , en cuyo caso quedara interrumpida la va glucoltica. 2. Por ello, la conversin de piruvato a lactato hace recuperar los niveles de la coenzima oxidada y posibilita que la reaccin global glucosa a lactato se realice con gran rapidez. 3. Existe muy poco rendimiento energtico en forma de ATP por unidad de glucosa catabolizada. El rendimiento en ATP de la gluclisis en condiciones anaerobias (2 ATP por molcula de glucosa) es mucho menor que el de la oxidacin completa de la glucosa a CO2 en condiciones anaerobias (36 o 38 ATP). GLUCLISIS DE OTROS MONOSACRIDOS La fructosa constituye el 50% de la sacarosa y por tanto la mitad de nuestra ingesta de carbohidratos. Metabolismo es heptico con una fructoquinasa (el dficit de est enzima produce la fructosuria esencial) que la convierte en fructosa1fosfato que tras la accin de la aldosa 2 heptica (su dficit provoca la intolerancia hereditaria a la fructosa) y la gliceral dehido quinasa se transforma en gliceraldehido3fosfato. De esta forma entra en la glucolisis anaerobia. La galactosa es transformada en el hepatocito en galactosa1fostato (G1P) mediante la galactocinasa. La G1P con el concurso de UDPglucosa y la enzima galactosa1fosfatouridil transferasa (su dficit produce la galactosemia congnita) produce glucosa1fosfato y se integra en la gluclisis anaerobina en G6P. GLUCOLISIS ANAEROBIA HASTA PIRUVATO = 7 ATP FOTOCOPIA PAG 204 FOTOCOPIA PAG 205 TEMA 17. DESCARBOXILACIN OXIDATIVA DEL PIRUVATO. COMPLEJO PIRUVATO DESHIDROGENASA. CICLO DEL CIDO CTRICO: REACCIONES, BALANCE ENERGTICO Y REGULACIN. EL CICLO DEL CIDO CTRICO COMO FUENTE DE PRECURSORES BIOSINTTICO. FERMENTACIONES 1. El piruvato representa un importante punto de unin en el catabolismo de los glcidos: a) En condiciones aerbicas el piruvato se oxida a acetato el cual entra en el ciclo de Krebs siendo oxidado a CO2 y H2O. El NADH formado en la deshidrogenacin del gliceraldehido3fosfato se reoxida a NAD+ mediante el paso de sus electrones al O2 en el proceso de la respiracin mitocondrial. b) En condiciones anaerbicas (Ej: msculos esquelticos muy activos), el NADH generado en la gluclisis no puede ser reoxidado por el O2. La incapacidad para regenerar NAD+ dejara a la clula sin aceptor electrnico para la oxidacin del gliceraldehdo3fosfato, con lo que se detendran las reacciones de la gluclisis que producen energa. Por tanto el NAD+ ha de ser regenerado por otra reaccin, transfiriendo los 56

electrones desde el NADH para formar un producto final reducido como es el LACTATO o el ETANOL. 2. El piruvato es el aceptor electrnico terminal en la fermentacin lctica: Ciertos tejidos y tipos celulares (retina, cerebro, eritrocitos) producen lactacto a partir de la glucosa en condiciones anaerbicas y al no poseer mitocondrias. Si no se puede administrar O2 suficiente para mantener la oxidacin aerbica del piruvato y del NADH producidos en mantener la oxidacin aerbica del piruvato y del NADH producidos en la gluclisis, el NAD+ y el NADH se interconvierten de forma continua sin ganancia ni prdida del uno o del otro. El lactato formado por los msculos activos puede reciclarse ya que se trasporta por la sangre al hgado en donde se convierte en glucosa. Muchos microorganismos fermentan la glucosa y otras hexosas (lactosa) a lactato producindose el cuajo, queso o el yogur. Piruvato Lactato NADH NAD+ 3. El etanol es el producto reducido en la fermentacin alcohlica: Levadura y otros microorganismos fermentan la glucosa a etanol y CO2 (no lactato). La glucosa se convierte en piruvato y ste se transforma en etanol y CO2 en un proceso de 2 pasos: a) Piruvato se descarboxila en acetaldehdo en la reaccin irreversible de la piruvato descarboxilasa (presente en levadura de cerveza y de panificacin). Esta enzima necesita de Mg2+ y tiene una coenzima, tiamina pirofosfato. El CO2 producido por la piruvato descarboxilasa en la levadura de cerveza es el responsable de la gasificacin del champn. b) El acetaldehdo se reduce a etanol con la alcohol deshidrogenasa y NADH proveniente de la deshidrogenacin del gliceraldehdo3fosfato glucosa + 2 ADP + 2P 2 etanol + 2CO2 + 2 ATP + 2 H2O PIRUVATO Piruvato Mg, + tiamina Descarboxilasa pirofosfato CO2 ACETALDEHIDO Alcohol NADH Deshidrogenasa NAD+ ETANOL

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DESCARBOXILACIN OXIDATIVA DEL PIRUVATO * La mayor parte de las clulas eucariotas y un gran nmero de bacterias oxidan sus nutrientes completamente a CO2 y agua en la fase aerbica del catabolismo por medio de la respiracin celular y por tanto el piruvato no es reducido a lactato, etano u otra sustancia. Para ello se necesita de O2 y mitocondrias en las mismas clulas donde ha tenido lugar la gluclisis anaerobia a nivel citoplasmtico. * La respiracin celular tiene lugar en 3 fases principales: a) 1 fase: las molculas de combustible orgnico (glucosa, cidos grasos y algunos aminocidos) se oxidan para dar lugar a fragmentos de 2 tomos de carbono en forma de acetilCoA, b) 2 fase: el acetilCoA se incorpora al ciclo de Krebs donde son oxidados hasta CO2. La energa liberada de esta oxidacin se conserva en los portadores de electrones reducidos NADPH y FADH2. c) 3 fase: estos cofactores reducidos son a su vez oxidados, liberando protones y electrones. A continuacin se produce la transferencia de electrones a lo largo de la cadena respiratoria hacia el O2 que al reducirse da lugar a H2O. Durante este proceso de transferencia de electronica se libera una gran cantidad de energa que se conserva en forma de ATP gracias a la fosforilacin oxidativa. * Produccin de acetato: una vez que el piruvato se encuentra en la matriz mitrocondrial existe un complejo enzimtico denominado COMPLEJO PIRUVATO DESHIDROGENASA que cataliza la DESCARBOXILACIN OXIDATIVA DEL PIRUVATO hasta acetilCoA. CH3COCOOH + HSCoA + NAD+ CH3COSCoA + CO2+NADH+H (PIRUVATO) (ACETILCoA) * En los seres aerbicos, la glcidos, cidos grasos y la mayor parte de los aminocidos son oxidados finalmente a CO2 y agua a travs del ciclo de Krebs. Antes de poder entrar en el ciclo, los esqueletos carbonados deben de sufrir un proceso de degradacin para dar lugar al acetilCoA, forma en que el ciclo de Krebs acepta la mayor parte del combustible aportado. * El piruvato, procedente de la gluclisis, se oxida para dar lugar a acetilCoA y CO2 a consecuencia del complejo piruvato deshidrogenasa que est formada por 3 enzimas y localizada en las mitocondrias. En este complejo participan las formas activas de varias vitaminas: tiamina (B1, en forma de pirofosfato de tiamina), riboflavina (B2, como FAD), nicotinamida (B3, como NADH), cido pantotnico (B5, como CoA) RENDIMIENTO ENERGTICO: 1 NADH mitocondrial (3 ATP); 6 ATP por molcula de glucosa. La reaccin global llevada a cabo por el complejo piruvato deshidrogenasa es la descarboxilacin oxidativa, proceso de oxidacin irreversible en el que el piruvato pierde un grupo carboxilo en forma de molcula de CO2 y los 2 carbonos restantes se transforman en el grupo acetilo del acetilCoA. Para que ocurra la deshidrogenacin combinada con la descarboxilacin del piruvato hasta acetilCoA se necesita de 3 enzimas diferentes y 5 coenzimas distintos procedentes de 4 vitaminas. Mutaciones o dficit de tiamina en la dieta van a tener consecuencias graves sobre el organismo por alteracin de la piruvato deshidrogenasa (beriberi o sndrome de WernickeKorsakoff). PIRUVATO (3C)

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HSCoA NAD+ Complejo Piruvato Deshidrogenasa NADH CO2 AcetilCoA (2C) CICLO DE KREBS * En la poca dorada de la enzimologa y gracias a las aportaciones de cientficos como los Premios Nobeles Severo Ochoa y sobre todo Hans Krebs, desde 1948 se conoce el funcionamiento de este ciclo, las enzimas que participan y su localizacin en la matriz mitocondrial, excepto la succinato deshidrogenasa que forma parte de la membrana interna mitocondrial. * El ciclo de Krebs fue denominado tambin ciclo del cido ctrico o de los cidos tricarboxlicos ya que despus de ser postulado por Krebs durante algunos aos no se conoca con seguridad si era el citrato o algn otro cido tricarboxlico, el primer producto formado en la reaccin del oxalacetato y piruvato. * El ciclo de Krebs es la va principal de oxidacin de los glcidos en el msculo y en casi la totalidad de tejidos aerbicos de animales y plantas. * A diferencia de la gluclisis (secuencia lineal), la secuencia de reaccin en este caso es cclica. El ciclo del cido ctrico tiene 8 pasos: 1. FORMACIN DE CITRATO (6C). La primera reaccin del ciclo es la condensacin del acetilCoA (2C) con oxalacetato (4C) para dar origen al citrato (6C) catalizado por la citrato sintasa. El CoA se recicla y sirve para una nueva descarboxilacin oxidativa de otra molcula de piruvato por el complejo piruvato deshidrogenasa donde se generar otra molcula de acetilCoA que podr entrar en el ciclo. 2. FORMACIN DE ISOCITRATO (6C). Por medio de la enzima aconitasa se cataliza la transformacin reversible de citrato en isocitrato. 3. OXIDACIN DEL ISOCITRATO A CETOGLUTARATO (5C) Y CO2. Por la accin de la isocitrato deshidrogenasa se cataliza la descarboxilacin oxidativa del isocitrato con prdido de CO2 y originando cetoglutarato. El NAD + acta como aceptor de electrones. 4. OXIDACIN DEL CETOGLUTARATO A SUCCINILCoA (4C) Y CO2. Nueva descarboxilacin oxidativa por la que el cetoglutarato se convierte en succinilCoA y prdida de la 2 molcula de CO2 por accin del complejo cetoglutarato deshidrogenasa (similar al complejo piruvato deshidrogenasa); el NAD+ actua de aceptor de electrones. El arsnico inhibe al complejo. 5. CONVERSIN DE SUCCINILCoA EN SUCCINATO (4C). El succinilCoA se transforma en succinato por medio de la enzima succinilCoA sintetasa y la energa liberada se utiliza para la sntesis de un enlace fosfoanhdrido de GTP o ATP. 6. OXIDACIN DEL SUCCINATO A FUMARATO (4C). El succinato es oxidado a fumarato por accin de 59

la flavoprotena succinato deshidrogenasa que en las clulas eucariotas se encuentra fuertemente unida a la membrana interna mitocondrial. El malonato, anlogo del succinato, es un fuerte inhibidor competitivo de la succinato deshidrogenasa. El FAD+ acta como aceptor de electrones. 7. HIDRATACIN DEL FUMARATO Y PRODUCCIN DE MALATO (4C). Esta reaccin est catalizada por la fumarasa. 8. OXIDACIN DEL MALATO A OXALACETATO (4C). Es la ltima reaccin del ciclo de Krebs y es catalizada por la malato deshidrogenasa. El NAD+ acta como aceptor de electrones. Grfico Pg. 216. * Una vez producido el oxalacetato est listo para reaccionar con otra molcula de acetilCoA y dar comienzo a una 2 vuelta. * En cada vuelta del ciclo se produce la entrada de un grupo acetilo (2C) en forma de acetilCoA y la salida de 2 molculas de CO2 adems se utiliza una molcula de oxalacetato para formar citrato que luego se regenera y por tanto no se produce prdida de oxalacetato. * 4 de los pasos de este proceso son oxidaciones en las que la energa de oxidacin se conserva con gran eficiencia, mediante la formacin de cofactores reducidos (NADH y FADH2) y aunque se genere slo 1 molcula de ATP directamente por cada vuelta, estas oxidaciones van a posibilitar la formacin de muchas molculas de ATP mediante la fosforilacin oxidativa. Grfico Pg 218. Rendimiento energtico de la gluclisis (generacin lactato): 2 ATP. Rendimiento energtico de la gluclisis aerbica: 38 ATP por cada molcula glucosa. Ello supone el 40% de la mxima energa terica que se puede obtener de la oxidacin completa de la glucosa (38 x 30.5 = 1160 de los 2840 kJ/mol). Rendimiento del ciclo de Krebs: por cada acetilCoA = 12 ATP. Observaciones. * Las reacciones catalizadas por la citrato sintasa y la cetoglutarato deshidrogenasa constituyen las etapas ms irreversibles del ciclo. * la reaccin catalizada por la succinilCoA sintetasa proporciona suficiente energa para que se aproveche en la fosforilacin de un GDP a GTP. * Prescindiendo de esa fosforilacin a nivel de sustrato, la ecuacin global de una vuelta de ciclo sera: 1 CH3COSCoA + 3H20 + 3NAD+ + 1 FAD 2 CO2 + HSCoA + 3 NADH + 3 H+ + 1 FAH2. * El factor ms limitante en los seres humanos es su cantidad de oxalacetato, el cual opera unas 100 veces por minuto. * Las grasas (glicerol y c. Grasos), cuerpos cetnicos, glcidos y aminocidos se convierten en acetilCoA directamente o a travs del piruvato. Por ello se considera al ciclo como una especie de HORNO METABLICO, capaz de quemar y producir energa usando como combustible a la mayor parte de los metabolitos. 60

* Diversas sustancias pueden inhibir el funcionamiento del ciclo. Fluorcitrato y fluorcetato bloquean a la aconitasa. Sales de arsnico, veneno, inhiben al complejo cetoglutarato deshidrogenasa. El malonato, potente inhibidor de la respiracin celular, bloquea la succinato deshidrogenasa por su semejanza con el sustrato. * Existe una va neoglucognica en la que el oxalacetato se convierte en fosfoenolpiruvato y por ende en piruvato capaz de pasar a acetilCoA lo que significa que el ciclo desempea un papel catablico hacia cualquier metabolito siguiendo la ruta: metabolitointermedio del ciclo oxalacetatopiruvatoacetilCoA cicloCO2. * De modo anlogo, un metabolito transformable en intermedio del ciclo puede ser el punto de partida de procesos biosintticos que partan de otro de los intermedios, lo que significa que el ciclo participa en procesos de BIOSNTESIS. Ello es til en el caso de dficit de hidratos de carbono o aminocidos. * Existen mecanismos que permiten reponer los intermedios del ciclo a partir de precursores, lo que ayuda a un mejor funcionamiento del ciclo, sobre todo en situaciones catablicas (las reacciones se denominan ANAPLETRICAS). * El ciclo est sometido a control, retrorregulacin por medio de NADH Y ATP, que inhiben tanto a la isocitrato deshidrogenasa como a la cetoglutarato deshidrogenasa. El oxalacetato tambin bloquea el paso de succinilCoA a succinato y de succinato a fumarato y la citrato sintasa se inhibe de forma alostrica por citrato y ATP mientras que el acetilCoA incrementa la KM hacia ese sustrato. IMPORTANCIA * Un proceso cclico de 8 pasos para la oxidacin de un simple grupo acetilo de 2 tomos de carbono a CO2 puede parecer innecesariamente complicado y contradictorio con el principio de mxima economa de la lgica molecular de las clulas vivas. * El papel del ciclo de Krebs no se reduce a la oxidacin exclusiva del acetato. Esta va constituye el ncleo central del metabolismo intermedio. Es decir muchos productos finales de procesos catablicos de 4 y 5 tomos de carbono entran en el ciclo y sirven como combustible. * La versin de esta va presente en organismos modernos es producto de la evolucin, la mayor parte de la cual tuvo lugar antes de la aparicin de los organismos aerbicos. * En organismos aerbicos, el ciclo de Krebs es una va anfiblica (es decir, se usa tanto en procesos anablicos como catablicos). Es decir, funciona no tan slo en el catabolismo oxidativo de glcidos, cidos grasos y aminocidos, sino que tambin genera precursores de muchas vas biosintticas. * Para finalizar decir que esta va metablica tiene una importancia que excede a su funcin en el metabolismo energtico visto el n de productos biosintticos derivados de los intermediarios del ciclo de Krebs. Regulacin * El ciclo est regulado a 2 niveles: a) Conversin del piruvato en acetilCoA (complejo piruvato deshidrogenasa) y entrada de acetilCoA en el ciclo (citrato sintasa). El piruvato no es la nica fuente de acetilCoA ya que se puede obtener de la oxidacin de c. Grasos y ciertos aminocidos.

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b) Reacciones de la isocitrato deshidrogenasa y de la cetoglutarato deshidrogenasa. * 3 enzimas del ciclo de Krebs estn sometidos a regulacin: citrato sintasa, isocitrato deshidrogenasa y la cetoglutarato deshidrogenasa. Cada uno de ellos puede actuar como paso limitante de la velocidad dependiendo de las circunstancias. Grfico Pg. 223 Grfico Pg. 224 Grfico Pg. 225 TEMA 18. VA DE LAS PENTOSAS FOSFATO: FUNCIONES Y LOCALIZACIN CELULAR. REACCIONES ENZIMTICAS IMPLICADAS EN ESTA VA. INTRODUCCIN * Hacia 1950 existan suficientes evidencias de que los carbohidratos, en concreto la glucosa, podan ser catabolizados hasta CO2 por una ruta diferente a la gluclisis. En los tejidos animales la mayor parte de la glucosa consumida se cataboliza va gluclisis a piruvato para despus oxidarse a travs del ciclo de Krebs para obtener energa en forma de ATP. * Estas otras rutas catablicas seguidas por la glucosa que conducen a productos especializados necesarios para la clula, constituyen parte del metabolismo secundario de la glucosa. a) VA DE LAS PENTOSASFOSFATO. b) RUTA DEL GLUCURONATO (producen cido urnico y ascrbico). VA DE LAS PENTOSASFOSFATO * Tambin denominada va de las hexosasmonofosfato o del fosfogluconato. * Produce NADPH y ribosa5 fosfato. El NADPH es un transportador de energa qumica en forma de poder reductor. En los mamferos esta funcin es prominente en tejidos que llevan a cabo activamente la biosntesis de cidos grasos y esteroides. Una segunda funcin de la ruta es generar pentosas esenciales (Dribosa) utilizada en la biosntesis de los cidos nucleicos. * La ruta comienza con la fosforilacin de la glucosa hasta glucosa6fosfato. La 2 etapas siguientes son deshidrogenantes catalizadas por la glucosa6fosfato deshidrogenasa y la 6fosfogluconato deshidrogenasa obtenindose en el inmediato paso de descarboxilacin irreversible, la ribulosa5fosfato. A continuacin una serie de enzimas catalizan de forma reversible diferentes intermedios metablicos: triosas, terrosas, pentosas, heptulosa y la ribosa5fosfato cuya sntesis es fundamental para la formacin de nucletidos y cidos nucleicos. Grfico Pg. 229. * Aparte de la reaccin con la hexocinasa, la nica transformacin considerada como irreversible es la de la descarboxilacin. * Resultado neto: produccin de NADPH (reacciones biosintticas reductoras) y ribosa5fosfato (precursor de la sntesis de nucletidos). En los tejidos en los que se requiere principalmente NADPH ms que 62

ribosa5fosfato, las pentosas fosfato se reciclan a glucosa6fosfato. * El inters principal de la produccin de NADPH no es de tipo energtico sino para que sea utilizado en las condiciones en que es preciso su aporte: biosntesis de cidos grasos, de esteroides, etc. * Diversos fallos (> 100) en la glucosa6fosfato deshidrogenasa se traducen en carencias eritrocitarias de NADPH productoras de patologas ms o menos graves acompaadas de ANEMIAS HEMOLTICAS (fabismo). * En el hepatocito, la ruta de las pentosasfosfato llega a alcanzar un 35% del catabolismo total de la glucosa y por su complementariedad con la sntesis de cidos grasos, esteroides y cidos nucleicos juega un protagonismo notable en el tejido adiposo, testculos, corteza adrenal, glndula mamaria, etc. siendo su actividad casi nula en tejidos muy aerobios como el msculo cardaco o el esqueltico. RUTA DEL GLUCURONATO (Otra ruta secundaria de la glucosa) * Esta ruta lleva a 2 productos especializados: Dglucuronato, importante en la detoxificacin y excrecin de compuestos orgnicos forneos y cido ascrbico o vitamina C, * La ruta del glucuronato es una nueva posibilidad para el catabolismo de la glucosa a travs de su conversin en cido glucurnico. A partir de uno de los intermedios, el Lgulonato, muchos seres vivos (pero no el hombre, los primates ni algunos otros animales), sintetizan el cido ascrbico o vitamina C. En la ruta existe una etapa descarboxilativa sobre el 3cetogulonato y al final se llega hasta xilulosa5fosfato, que era uno de los intermedios de la va de las pentosasfosfato, por lo que utilizando esta ltima va se puede cerrar el ciclo llegando al punto de partida, la glucosa. * Aunque la cantidad de glucosa que se desva hacia esta ruta secundaria es muy pequea en comparacin con la de la gluclisis y ciclo de Krebs, los productos son vitales para el organismo. * Su principal importancia en la especie humana radica en la capacidad de producir UDPglucuronato que es el precursor de heteropolisacridos como condroitn sultafo, cido hialurnico y heparina adems de UDPglucuronato mediante la enzima UDPglucuronil transferasa se transforma en cido glucurnico (sustancia que interviene en la solubilizacin y salida urinaria de sustancias como la bilirrubina, diversos catabolitos esteroides, morfina, cido saliclico. Tambin acta sobre toxinas ambientales y carcingenos). La glucosa1fosfato se convierte en UDPglucosa por reaccin UTP. La UDPglucosa se deshidrogena y da lugar al UDPglucuronato. La conjugacin con cido glucurnico (glucuronidacin) hace que los compuestos sean fcilmente eliminados de la sangre por los riones al ser excretados por la orina. El UDPglucuronato es el precursor de los polisacridos hialurnico y condroitn. El hombre, conejillo de indias, mono, peces y pjaros no pueden producir a partir del UDPglucuronato, el cido ascrbico por dficit de la enzima gulonolactona oxidasa y por tanto requieren su ingestin con la dieta en forma de vitamina C. El dficit de vitamina C produce el escorbuto (scorbutus) con importantes trastornos del colgeno. TEMA 19. GLUCONEOGNESIS: IMPORTANCIA FISIOLGICA Y LOCALIZACIN CELULAR. BIOSNTESIS DE GLUCOSA A PARTIR DE PIRUVATO. REGULACIN. GLUCONEOGNESIS. (RUTA PARA LA SNTESIS DE GLUCOSA) 63

* Las rutas anablicas utilizan la energa qumica en forma de ATP y NADH o NADPH para sintetizar componentes celulares a partir de molculas precursoras sencillas (son rutas divergentes y reductoras). * 1 principio: la ruta utilizada en la sntesis de una Biomolcula es diferente de la ruta seguida en su degradacin. Aunque puedan las 2 rutas opuestas compartir muchas reacciones reversibles simpre hay al menos un paso enzimtico distintivo de cada ruta. Si las reacciones catablicas y anablicas estuviesen catalizadas por los mismos enzimas actuando de forma reversible, el flujo de carbonos estara dictado slo por la ley de accin de masas y no por las necesidades cambiantes de la clula con respecto a energa, precursores o macromolculas. * 2 principio: las correspondientes rutas anablicas y catablicas estn controladas por enzimas reguladores diferentes. Estas rutas opuestas estn reguladas de forma coordinada y recproca de modo que la estimulacin de la ruta biosinttica va acompaada de la inhibicin de la ruta degradativa y viceversa. * 3 principio: los procesos energticos que requiere energa estn acomplados a rotura productora de energa del ATP de tal forma que el proceso global es prcticamente irreversible in vivo. * La gluconeognesis (formacin nueva de azucar) conduce a la formacin de diferentes glcidos a partir de precursores no glucdicos en tejidos animales * Muchas clulas utilizan la glucosa como sustrato primario: cerebro, eritrocitos, mdula suprarrenal, cristalino, crnea, testculos, etc. el cerebro consume 120 gr/da de glucosa y la glucemia tiene un valor de 1 gr/L. Las reservas hepticas de glucgeno destinadas a regular la glucemia tienen una capacidad de unos 100 gr, lo cual supondra un grave problema tras un periodo de varias horas de ayuno si no existiesen mecanismos apropiados de sntesis de los mismos a partir de precursores. * La gluconeognesis es una ruta universal que se encuentra en todos los animales, plantas y microorganismos y se puede efectuar desde diversos intermedios. En un ayuno prolongado de varios das, la cantidad mnima de glucosa consumida es de unos 50 gr/da que se originan por gluconeognesis, la mitad a partir del glicerol de las grasas (los cidos grasos no son neoglucognicos) y la otra mitad de los aminocidos protenicos glucognicos. * Los precursores importantes de la glucosa en los animales son: LACTATO, PIRUVATO, GLICEROL y la mayora de AMINOCIDOS. * la gluconeognesis tiene lugar en el HGADO y en menor extensin en la CORTEZA RENAL. * Si la conversin glucoltica de la glucosa en piruvato es la ruta cental del catabolismo glucdico, la conversin del piruvato en glucosa es una ruta central en la biosntesis de glcidos. NO son idnticas ambas rutas, aunque comparten 7 de las 10 reacciones, en sentido inverso de las reacciones glucolticas. Por tanto, gluclisis y gluconeognesis son procesos irrevesibles en las clulas estando reguladas independientemente. * Existen 3 pasos de la gluclisis que son irreversibles in vivo y que no puede utilizar la gluconeognesis por lo que es necesario los rodeos: a) Conversin de glucosa en glucosa6fosfato (hexoquinasa). b) Fosforilacin de la fructosa6fosfato a fructosa1,6bifosfato por la fosfofructocinasa. c) Conversin del fosfoenolpiruvato en piruvato por la piruvato cinasa. 1 RODEO 64

* La primera reaccin de rodeo es la conversin de piruvato en fosfoenolpiruvato y no puede ser por inversin de la reaccin de piruvato cinasa al ser irreversible. * Requiere de la participacin de enzimas tanto del citosol como de las mitocondrias. * PRECURSOR GLUCONEOGNESIS: Piruvato, alanina o lactato. * El piruvato es transportando desde el citosol a la mitocondria o se genera dentro de ella por desaminacin de alanina. * A continuacin, la PIRUVATO CARBOSILASA, enzima mitocondrial que requiere biotina, convierte el piruvato en oxalacetato. La actividad de la piruvato carboxilasa, 1 enzima regular de la gluconeognesis, es intensa en los rganos neoglucognicos, fundamentalmente hgado y rin. El acetilCoA es un efector positivo. FOSFOENOLPIRUVATO CO2 GDP Fosfoenolpiruvato Carboxicinasa GTP Mg++ OXALACETATO Malato Deshidrogenasa NADH Citoslica NAD+ MALATO Citoplasma MALATO Malato Deshidrogenasa NAD NADH OXALACETATO Piruvato ADP Carboxilasa AcetilCoA ATP 65

CO2 PIRUVATO Alanina Alanina PIRUVATO * El oxalacetato formado a partir del piruvato en la mitocondria se reduce reversiblemente a malato mediante la malato deshidrogenasa mitocondrial a expensas de NADH. * A continuacin el malato abandona la membrana interna mitocondrial va transportador de malatocetoglutarato (lanzadera mitocondrial del malato). * En el citosol el malato se reoxida a oxalacetato con produccin de NADH citoslico. * El oxalacetato se convierte en fosfoenolpiruvato por medio de la fosfoenolpiruvato carboxiquinasa, reaccin dependiente de magnesio en la que el GTP es el dador de fosfato. Esta reaccin es reversible en las condiciones intracelulares. Se va a producir una descarboxilacin del oxalacetato. * El hecho de que el oxalacetato sea un intermedio neoglucognico significa que el resto de intermedios del ciclo de Krebs tambin son neoglucognicos ya que se pueden convertir todos en oxalacetato. Cuando el lactato es el precursor gluconeognico predomina un 2 rodeo, ms corto, del piruvato a fosfoenolpiruvato. Esta ruta utiliza el lactato producido en la gluclisis en los eritrocitos o msculo. La conversin del lactato en piruvato en le citosol de los hepatocitos produce NADH, por lo que la exportacin de malato desde la mitocondria ya no es necearia. Una vez transportado el piruvato producido por la reaccin de la lactato deshidrogenasa a la mitocondria, se convierte en oxalacetato por la piruvato carboxilasa. No obstante, este oxalacetato se convierte directamente en fosfoenolpiruvato por una forma mitocondrial de la fosfoenolpiruvato carboxiquinasa. A continuacin se transporta el fosfoenolpiruvato fuera de la mitocondria continuando en la ruta gluconeognica. 2 RODEO * La conversin de fructosa1,6bifosfato en fructosa6fosfato constituye el 2 rodeo ya que la reaccin catalizada por la enzima fosfofructoquinasa de la gluclisis era irreversible. * La generacin de la fructosa6fosfato a partir de la fructosa bifosfato est catalizada por una enzima diferente llamada FRUCTOSA1,6BIFOSFATASA, dependiente de magnesio y por tanto promueve la hidrlisis prcticamente irreversible del fosfato. FRUCTOSA6FOSFATO Pi ATP ADP FRUCTOSA1,6BIFOSFATO 66

3 RODEO * La conversin de la glucosa6fosfato en la glucosa libre constituye el 3 rodeo y es la reaccin final de la gluconeognesis, la desfoforilacin de la glucosa6fosfato para dar glucosa libre ya que la reaccin de la hexoquinasa de la gluclisis es irreversible. * La generacin de la glucosa est catalizada por otra enzima diferente que es la GLUCOSA6FOSFATASA, dependiente de magnesio y que se encuentra en el retculo endoplsmico de los hepatocitos. La glucosa6fosfatasa no se encuentra en msculo o cerebro por lo que la gluconeognesis no se da en estos tejidos. Por ello la glucosa producida por la gluconeognesis en el hgado o ingerida con la dieta se enva al cerebro y al msculo a travs de la sangre. GLUCOSA Pi ATP ADP GLUCOSA6FOSFATO Por cada molcula de glucosa formada a partir de 2 piruvatos o lactatos se requiere de 2 ATP (piruvato carboxilasa), 2 GTP (fosfoenolpiruvato carboxicinasa) y 2 ATP (fosfoglicerato cinasa) = 6 ATP, aparte del consumo de 2 NADH para la reduccin de 2 molculas de 1,3bifosfoglicerato que en el caso de lactato se gana 2 NADH. Grfico Pg 242. * La ruta biosinttica de la glucosa permite la sntesis neta de glucosa no slo desde piruvato sino tambin desde los intermedios del ciclo de Krebs ya que todos se pueden oxidar dando oxalacetato. Slo 3 tomos de carbono del oxalacetato se convierte en glucosa ya que el cuarto se libera en forma de CO2 en la conversin de oxalacetato en fosfoenolpiruvato por la fosfoenolpiruvato carboxiquinasa. * Los aminocidos glucognicos (18 de los 20) pueden experimentar una conversin neta en glucosa a travs del ciclo de Krebs. * No hay conversin neta de los c. Grasos en glucosa debido a que tales cidos slo dan acetilCoA al ser degradados y de acetiCoA no se produce deshidrogensa. Sin embargo la oxidacin de los c. Grasos aportan ATP y NADH a la gluconeognesis. Grfico Pg. 243 REGULACIN. * La gluclisis y la gluconeognesis ofrecen posibilidades de control a fin de garantizar eficazmente en cada momento que se realice la ruta necesaria en la cuanta precisa. * Las mejores posibilidades reguladoras corresponden a 3 enzimas que catalizan las reacciones glicolticas ms irreversibles as como a las enzimas gluconeognicas que se utilizan para efectuar el camino inverso, lo que constituye, en cada caso, un llamado ciclo de sustrato o ciclo ftil, estas 3 combinaciones:

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a. Hexocinasa /glucosa6fosfatasa. b. 6fosfotructocinasa /fructosa1,6bifosfatasa. c. Piruvato cinasa/piruvato caboxilasa + fosfoenolpiruvato carboxicinasa. Grfico Pg 244. REGULACIN GLICLISIS Y NEOGLUCOGNESIS Principales enzimas protagonistas de la regulacin de la gliclisis y la neoglucognesis: Hexocinasa. Existen 4 isoenzimas de la cual la hexocinsa IV o glucocinasa a diferencia de las otras es slo heptica siendo su Km para glucosa muy alta y es inducida por insulina. Fosfofructocinasa Piruvato cinasa Lactato deshidrogenasa Piruvato carboxilasa Fosfoenolpiruvato carboxicinasa Fosfoenolpiruvato carboxicinasa Fructosa1,6bifosfatasa Glucosa6fosfatasa TEMA 20. METABOLISMO DEL GLUCGENO. DEGRADACIN DEL GLUCGENO: GLUCGENO FOSFORILASA. BIOSNTESIS DEL GLUCGENO: GLUCGENO SINTASA. REGULACIN. GLUCGENO: RESERVA METABLICA ENERGTICA * Debido a que las clulas musculares no poseen actividad glucosa6fosfatasa impide que desempeen un papel significativo en el mantenimiento de la glucemia, siendo el glucgeno muscular menos dependiente que el heptico respecto a las variaciones en la ingesta de glcidos. * Por qu no se guarda la glucosa como tal, en el interior de la clula, en lugar de convertirla en glucgeno? Hemos comentado que la reserva heptica de glucgeno es de 100 gramos con un comportamiento inerte. Lo mismo, en forma de glucosa, equivale a una concentracin 60.000 veces superior a la de glucgeno y 100 veces mayor que la glucemia normal lo que equivaldra a una actividad osmtica inviable para la clula. * Cules son las ventajas de las reservas de glucgeno? 1. La glucosa pierde muy poca capacidad energtica al almacenarse como polisacrido (consume 2 ATP, un 5% del potencial global energtico). 2. A cambio de esa pequea prdida energtica, las ventajas son obvias: Las grasas no son adecuadas para controlar la glucemia (catabolismo lento inadecuado para las urgencias) Ciertas clulas, como las neuronas, consumen y metabolizan glucosa preferentemente. En condiciones de limitacin de disponibilidad de O2, las grasas no puede ser catabolizadas ni suministrar energa. GLUCGENOSNTESIS Y GLUCGENOLSIS 68

Los nucletidosazcar son los sustratos para la polimerizacin a disacridos, glucgeno, almidn, celulosa, etc. El papel de los nucletidosazcar (en especial de la UDPglucosa) en la biosntesis de glucgeno fue descubierto por Luis Leloir. Punto de inicio de la sntesis de glucgeno es la glucosa6fosfato (puede provenir de la glucosa libre por la reaccin de la (hexoquinasa en el hgado o glucocinasa en el msculo) con el consumo de 1 ATP o la glucosa es captada por el eritrocito convirtindola en lactato que a su vez es captado por el hgado y convertido en glucosa6fosfato mediante la gluconeognesis. Para iniciar la sntesis de glucgeno, la glucosa6fosfato se convierte de forma reversible en glucosa1fosfato por la fosfoglucomutasa. Grfico Pg 250 La formacin de UDPglucosa (UDPG) por accin de la UDPGpirofosforilasa es una reaccin clave en la biosntesis de glucgeno. UDPG es un intermedio en la conversin de galactosa en glucosa. Es el dador inmediato de restos de glucosa en la formacin enzimtica del glucgeno por accin de la glucgeno sintasa. La glucgeno sintasa no puede formar los enlaces (6) que se encuentra en los puntos de ramificacin del glucgeno por lo que es preciso la enzima ramificante (amilo transglucosilasa). La glucgeno sintasa y la glucgeno fosforilasa estn reguladas de forma recproca por el cclo fosforilacindesfosforilacin: cuando se estimula una se inhibe a la otra. ENZIMAS DEL METABOLISMO DEL GLUCGENO 1. GLUCGENO FOSFORILASA: en presencia de fosfato, hidroliza un enlace flicosdico y libera la glucosa en forma de glucosa1fosfato. Reaccin muy reversible. El hecho de que se forme un compuesto fosforilado ayuda a su atrapamiento intracelular. A la molcula resultante del glucgeno tras la actuacin de la glucgenos fosforilasa se le denomina dextrina lmite. 2. ENZIMA DESRAMIFICANTE: AMILO1,6GLUCOSIDASA. Esta enzima posee 2 centros catalticos y por tanto cataliza 2 reacciones diferentes cuando acta sobre molculas tipo dextrina lmite. 1 exhibe una funcin glusosiltransferasa y la 2 reaccin es hidroltica. 3. GLUCGENO SINTASA: esta enzima aade molculas individuales de glucosa activadas previamente en forma de uridn difosfatoDglucosa o UDPG. El UDPG se forma a partir de glucosa1fosfato (que puede derivar de la glucosa6fosfato, mediante la fosfoglucomutasa) y UTP, en una reaccin catalizada por la enzima UDPGpirofosforilasa. 4. ENZIMA RAMIFICANTE: para conseguir la ramificacin final del glucgeno existe esta enzima que ejerce su funcin sobre una cadena glicosdica de al menos 9 unidades de glucosa de longitud. METABOLISMO DEL GLUCGENO * Las 2 principales enzimas del metabolismo del glucgeno (glucgeno fosforilasa y sintasa) se caracterizan por poseer varias subunidades, ser modificables alostricamente, as como sufrir fosforilaciones/desfosforilaciones regulables por va hormonal. Los papeles del glucgeno muscular y 69

heptico son diferentes (en el hgado, control de los niveles de glucemia y en el msculo, lo relativo con la energa). Tabla: Moduladores del metabolismo del glucgeno en el hgado y msculo. HGADO Glucosa Adrenalina (receptor 1 adrenrgico) Glucagn, insulina MSCULO ATP, AMP, G6P, glucgeno Calmodulina Adrenalina, insulina

Efectores Calcio Hormonas

* Mientras que la forma fosforilada de la glucgeno fosforilasa es la activa, en el caso del glucgeno sintasa sucede lo contrario, por lo que, de este modo, a travs de la modulacin de la fosforilacin/desfosforilacin, lo que favorezca a una de las vas tender a desfavorecer a la otra. Si se favorece (desfavorece) la fosforilacin de las enzimas glucgeno fosforilasa y glucgeno sintasa se dificulta (facilita) globalmente su desfosforilacin, a travs del sistema del inhibor, el resultado final es que aumenta (disminuye) la glucgenolisis y se detiene (incrementa) la glucgenosntesis. Grfico Pg 254 * El equilibrio entre sntesis y degradacin de glucgeno en el hgado est controlado por las hormonas glucagn e insulina. La adrenalina tiene efectos similares a los del glucagn, pero su diana es principalmente el msculo mientras que la accin primaria del glucagn es sobre el hgado. Efectos del gucagn, adrenalina e insulina sobre metabolismo glucdico en mamferos. GLUCAGN Cl. pancretica Hgado ADRENALINA Mdula adrenal Msculo > Hgado INSULINA Cl pancretica Msculo, hgado, tejido adiposo ! ! !

FUENTE DIANA PRIMARIA EFECTOS SOBRE EL: AMPc GLUCONEOGNESIS GLUCLISIS

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UNIDAD VI: ESTRUCTURA Y METABOLISMO DE LOS LPIDOS TEMA 21. LPIDOS: CONCEPTO, CLASIFICACIN Y FUNCIONES. CIDOS GRASOS: ESTRUCTURA Y PROPIEDADES FSICOQUMICAS. TRIACILGLICEROLES, GLICEROFOSFOLPIDOS Y ESFINFOLPIDOS: ESTRUCTURA, PROPIEDADES Y SIGNIFICACIN BIOLGICA. CONCEPTO Y FUNCIONES GENERALES.

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* Los lpidos son un grupo heterogneo de Biomolculas cuya caracterstica comn es que son hidrofobos lo cual hace insoluble en agua y solubles en solventes orgnicos como cloroformo, acetona, etc. * En muchos organismos, las grasas y los aceites son las formas principales de almacenamiento energtico mientras que los fosfolpidos y esteroles constituyen parte de la estructura de las membranas celulares. * Las funciones biolgicas de los lpidos son muy variadas debido a su heterogeneidad estructural. Van a jugar papeles cruciales como cofactores enzimticos, transportadores electrnicos, agentes emulsionantes, hormonas y mensajeros intracelulares. De un modo simplificado, entre sus funciones estn: a. Reserva energtica. b. Componentes de membranas y aislantes. c. Lubricantes y protectoras. d. Hormonales. e. Emulsionantes. f. Reguladores del metabolismo celular y de funciones celulares especficas. CLASIFICACIN * LOZANO los clasifica en 4 grandes grupos: a) LPIDOS SIMPLES: formado por las unidades (cidas o alcohlicas) estructurales, los steres simples de stas y los derivados relacionados con las unidades cidas: Unidades no esterificadas: cidos y alcoholes grasos. steres de las unidades anteriores: mono, di y triacilgliceroles o grasas neutras. Derivados cidos de importancia funcional: prostanglandinas, tromboxanos y leucotrienos (ICOSANOIDES). b) LPIDOS COMPLEJOS: formado por steres en los que participan otros elementos adems de las unidades bsicas. Fosfolpidos: presencia de un grupo fosfato. Segn el alcohol que contenga, se clasifica en 2 grupos: fosfoacilglicrido y esfingomielina. Glicolpidos: poseen esfongosina (alcohol comn) adems contienen carbohidratos ms o menos complejos. Existen 3 tipos principales: cerebrsidos, globsicos y ganglisidos. Lpidos conjugados con macromolculas: lipoprotenas y lipopolisacridos. c) LPIDOS ISOPRENOIDES O INSAPONIFICABLES. El isopreno es un hidrocarburo con tendencia a polimerizar para dar una gran variedad de compuestos ms o menos hidrfobos y sin enlaces ster. Estos lpidos son: terpenos, esteroides, tocoferoles, poliprenilquinonas y retinoles y carotenoides. d) OTROS LPIDOS: grupo formado por lpidos generalmente saponificables. Entre ellos: steres de 71

colesterol, de vitamina A y vitamina D; plasmalgenos y teres glicridos; e hidrocarburpos alifticos (existentes en hgados grasos). UNIDADES BSICAS: CIDOS GRASOS. * Las grasas y aceites, utilizados como formas de almacenamiento de energa en los organismos vivos, son compuestos muy reducidos derivados de los cidos grasos. * Los cidos grasos son derivados hidrocarbonados a un nivel de oxidacin tan bajo como el de los hidrocarburos de los combustibles fsiles, por ello, la oxidacin completa de los cidos grasos a CO2 y H2O en las clulas, es muy exergnica (como la oxidacin explosiva de los carburantes de motor). * Los cidos grasos (lpidos, ms sencillos) son cidos orgnicos monocarboxlicos de cadena lineal, con un n de tomos de carbono entre 2 y 26. Existen ms de 100 diferentes, pero los ms importantes que suponen > 95% del total encontrado en grasas vegetales y animales, son solamente 9: 4 saturados y 5 insaturados. Los ms abundantes son el cido PALMTICO y el cido OLEICO. * Los cidos grasos pueden ser: a) SATURADOS (SAFA): cuando la cadena no contiene ningn doble enlace. b) INSATURADOS: cuando poseen 1 o ms dobles enlaces. MONOINSATURADOS (MUFA): si solo presentan 1 slo doble enlace. POLIINSATURADOS (PUFA): los que contienen 2 ms dobles enlaces. * Segn la longitud de la cadena se dividen en: a. Cadena corta: de 2 a 4 tomos de carbono. b. Cadena media: de 6 a 10 tomos de carbono. c. Cadena larga: de 12 a 26 tomos de carbono. * Los cidos grasos se abrevian con la notacin (i,j) C m n . La letra griega es opcional e indica que el cido es insaturado; los superndices indican las posiciones de las instauraciones (existen tantos superndices como dobles enlaces). Los subndices m:n sealan el n total de carbono y de insaturados. Los tomos de carbono de un cido graso se numeran desde el grupo carboxilo (delta: ) o desde el tomo de carbono ms alejado del grupo carboxilo (omega: ). Grfico Pg 260. * cido grasos saturados (SAFA): actico 2:0; butrico 4:0; capricho 10:0; lurico 12:0; mirstico; palmtico; esterico; araqudico; behnico 22:0; lignocrico 24:0 y certico 26:0. * cidos grasos poliinsaturados (PUFA): palmitoleico; oleico; linoleico; linolnico y araquidnico. Tambin tenemos 2 PUFA que son aceites de pescado: EPA (eicosapentaenoico; 20:5) y el DHA (docosahexaenoico; 22:6) que son representantes junto al linolnico de los omega3 * La oxidacin de los enlaces insaturados de los cidos grasos por el O2 se conoce con el nombre de peroxidacin lipdica. 72

* Las propiedades ms importantes y comunes de los cidos grasos son: a. N de carbonos siempre es par (ello es debido a su sntesis). b. Cuando son PUFA, los dobles enlaces nunca son conjugados sino que se sitan alejados tres eslabones de la cadena. Adems los dobles enlaces siempre tiene la configuracin CIS existiendo solo trozos de los ismeros TRANS. Los trans (Ej: cido eladico es el trans del oelico) tiene efectos perjudiciales sobre la salud. c. A igualdad de tomos de carbono, los insaturados cis tienen temperaturas de fusin menores que los trans y stos ligeramente menores que los saturados (por ello las grasas animales suelen ser slidas y los aceites y grasas vegetales, ms ricas en insaturados, con lquidas a temperaturas ambiente). R COO H COO C=CC=C HHRH CIS TRANS * Segn numeracin omega, hay 4 clases de cidos grasos insaturados: a. Omega7: palmitoleico. b. Omega9: oleico. c. Omega6: linoleico, araquidnico. d. Omega3: linolnico, EPA, DHA (aceites de pescado) * Un cido graso de una clase no puede transformarse biolgicamente en otra clase, es decir, el cido araquidnico se sintetiza a partir del parenteral de la clase omega6, cido linoleico. Sin embargo ningn miembro de la clase del cido linoleico (omega6) puede convertirse en otro miembro de la clase omega3. * Los 2 cidos grasos esenciales que no puede biosintetizar el organismo son poliinsaturados: LINOLEICO,(omega6, que se encuentra principalmente en las plantas) y LINOLNICO (omega3, que se encuentra en el pescado). * Cuanto ms larga sea la cadena grasa y menor n de dobles enlaces, menor es la solubilidad en agua. A temperatura ambiente, los SAFA desde 12:0 a 24:0 tienen una consistencia crea mientras que los PUFA son lquidos oleosos. Los insaturados tienen puntos de fusin ms bajos que los saturados. Los cidos grasos libres circulan en sangre unidos a la albmina. * Los alcoholes grasos son cadenas orgnicas de longitud variable que contiene 1 o ms funciones de alcohol y no tienen tanta variedad como los cidos grasos. * Segn su abundancia se clasifican en 2 grupos: a. Alcoholes de gran ubicuidad en lpidos: glicerol o glicerina que es el alcohol bsico estructural de los acilglicridos y los fosfoacilglicridos y la esfongosina, alcohol bsico estructural de las esfingomielinas y los glicolpidos.

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b. Alcoholes de abundancia relativa en lpidos: son alcoholes de cadena larga y que se encuentra normalmente en las ceras entre los cuales destaca el alcohol cetlico, saturado y de 16 tomos de carbono. Otros son inositol, colina, etanolamina y el aminocido serina que se encuentran habitualmente en los fosfoacilglicridos. Grfico Pg. 264 STERES DE CIDOS GRASOS: ACILGLICRIDOS (TRIGLICRIDOS) * Este grupo de compuestos, tambin denominados aceites o grasas neutras, son steres del glicerol con cidos grasos. Son las principales molculas de reserva energtica y su poder calorfico es muy superior al de cabohidratos y protenas (ms del doble). * Como la glicerina tiene 3 grupos hidroxilos, puede esterificarse con 1,2 o 3 cidos grasos, dando lugar a monoacilglicridos (MAG), diacilglicridos (DAG) y triacilglicridos (TAG). En las grasas naturales, ms del 99% son TAG. Por tanto, los lpidos ms sencillos obtenidos a partir de los cidos grasos son los triacilgliceroles, tambin denominados triglicridos, grasas o grasas neutras. * Los triglicridos estn compuestos por 3 cidos grasos en enlace ster con un solo glicerol. Los que tienen el mismo tipo de cido graso en las 3 posiciones se denominan triglicridos simples (trioleina, tripalmitina). Los triglicridos mixtos son los que contienen 2 o ms cidos grasos diferentes y de esta forma es como habitualmente estn en la naturaleza (Ej: 1estearoil2oleil3palmitoil.glicerol). * Los triacilgliceroles son molculas apolares, hidrofbicas prcticamente insolubles en agua. * Los triglicridos sirven como depsito de combustible metablico y se localizan en los adipositos en forma de gotitas de grasa que casi no ocupan toda la clula. Tienen 3 funciones distintas: a. Produccin de energa: la grasa se oxida para generar ATP que impulse los procesos metablicos. b. Produccin de calor: la grasa parda de los animales homeostermos (osos) oxidan los triglicridos para producir calor en vez de ATP. c. Aislamiento: animales que viven en entorno fro (focas), la capa de clulas adiposas bajo la piel sirven de aislante trmico. * El pundo de fusin de los triglicridos naturales disminuye cuando aumenta su contenido en cidos grasos insaturados. Las olenas son lquidas a temperatura ambiente y se les denomina ACEITES mientras que las palmitinas son slidas y se les denomina GRASAS. Todas son insolubles en agua y su densidad es < de 1, por ello flotan en solucin acuosa. * La hidrogenacin parcial de los aceites se utiliza comercialmente para producir grasas ms slidas como la margarina. Plantas y animales de sangre fra tiene TAG ms ricos en cidos grasos insaturados que los animales de sangre caliente para que sus tejidos sean ms fluidos. En los seres humanos, los TAG subcutneos son ms lquidos que los protectores que recubren las vsceras. * Los TAG tiene 2 ventajas significativas sobre polisacridos: a. La oxidacin de los TAG proporciona ms de doble de energa.

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b. Los TAG son hidrofbicos y se almacenan sin hidratar. * El tejido graso se encuentra bajo la piel, cavidad abdominal y glndula mamarias. Las personas obesas pueden tener de 15 a 20 Kg de TAG depositados en sus adipositos, lo que es sufienciente para cubrir las necesidades energticas de varios meses (a diferencia de la de glucgeno que dura 1 da). * Las ventajas de los glcidos son: a. Fuentes rpidas de energa metablica. b. Fcil solubilidad en agua. * La exposicin al oxgeno del aire de los alimentos ricos en grasas hace que se peroxiden (se enrancie) con un gusto y olor desagradable debido a la rotura oxidativa de los dobles enlaces de cidos grasos insaturados. Los ms insaturados se enrancian con ms facilidad. * Los enlaces ster de los TAG pueden hidrolizarse, bien por lipasas (cidos) o por lcalis (NaOH y KOH: sosa y potasa) para dar lugar a sus constituyentes y a esta reaccin se le denomina SAPONIFICACIN (contraria a la esterificacin) produciendo glicerol y las sales de Na y K de los cidos grasos conocidas como jabones. * Los jabones actan como detergentes por su gran tendencia a formar micelas. Los detergentes sintticos como el SDS (dodecil sulfato sdico) tiene menos tendencia a la precipitacin en agua dura por lo que han reemplazado a los jabones naturales en la industria. * Las lipasas catalizan la hidrlisis enzimtica de los TAG a pH neutro y las lipasas intestinales colaboran en la digestin y absorcin de las grasas de la dieta * Las ceras sirven como almacn de energa y como cubiertas impermeables al agua. Las ceras biolgicas son steres de cidos grasos de cadena larga saturados e insaturados (de 14 a 26 tomos de carbono) con alcoholes de cadena larga (de 16 a 30 tomos de carbono). Sus puntos de fusin (60 a 100C) son generalmente ms elevados que los de los TAG. * Las ceras tambin realizan diversas funciones que estn relacionadas con sus propiedades repelentes del agua y con su consitencia firme. Ciertas glndulas de la piel secretan ceras para proteger el pelo y la piel mantenindolos flexibles, lubricados e impermeables (pjaros y sobre todo aves acuticas mantienen su repelencia al agua de sus plumas). * Las ceras biolgicas tienen diversas aplicaciones en las industrias farmacuticas y cosmticas. La lanolina (de la lana de oveja), la cera de abeja, la cera de carnauba (plamera brasilea) y el aceite de espemaceti (de las ballenas) se utilizan para fabricar lociones, ungentos y pulimentos. CLASIFICACIN LPIDOS COMPLEJOS a. FOSFOLPIDOS: la caracterstica comn es que tienen un grupo fosfato. Son los lpidos con fuerte carcter antiptico y diseados para formar la bicapa lipdica de las membranas biolgicas constituyendo una barrera al paso de molculas polares e iones. Dependiendo del alcohol presente en el fosfolpido existen 2 clases: 1. Fosfoacilglicridos (glicerafosfolpidos): contienen glicerol esterificado en las posiciones 1 y 2 por 2 cadenas de cidos grasos, un grupo fosfato esterificando la posicin 3 y un alcohol unido a ese fosfato por un 75

enlace fosfodister. Por tanto, son steres de cido Lfosfatdico. 2. Esfingomielinas (esfingolpidos): contienen como alcohol esfingosina en lugar de glicerol, adems de un cido graso, fosfato y colina. Es el nico tipo de compuesto que contienen a la vez esfingosina y fosfato, por lo que pueden considerarse fosfolpidos. La uninnde esfingosina y cido graso en el C2 se denomina ceramida y es la unidad estructural de las esfingomielinas y todos los glucolpidos. Son abundantes en vainas mielina. b. GLICOLPIDOS: comparten con las esfingomielinas la unidad ceramida, pero carecen de fosfato y tiene el hidroxilo del C1 de la esfingosina unido por enlace glicosdico a un carbohidrato complejo. Son muy abundantes en las membranas del sistema nervioso central, sobre todo en la sustancia blanca. FOSFOACILGLICRIDOS 1. LECITINAS: abundantes en la yema de huevo con fines dietticos y cosmticos. Algunas como la dipalmitolillecitina es el componente del agente tensoactivo pulmonar y su ausencia produce sndrome de distress respiratorio del recin nacido. Si la lecitina pierde el cido graso del C2 se obtiene la lisolecitina que es un poderoso agente hemoltico (veneno de serpientes y araas). 2. CEFALINAS: se obtuvieron de la masa enceflica por neuroqumico cataln FolchPi y existe tambin en otros tejidos como hgado. Las de etanolamina son ms abundantes que las de serina. 3. CARDIOLIPINAS: son muy abundantes en la membrana mitocondrial del msculo cardaco. Ricas en PUFA. Contiene 2 molculas de c. Fosfatdico unidas a la molcula de glicerol. 4. FOSFATIDILINOSITOLES: funcin reguladora hormonal y menos abundante en las membranas biolgicas. Grficos Pg. 270 ESFINGOMIELINAS * La unin de esfingosina y cido graso en el C2 se denomina ceramida y es la unidad estructural de las esfingomielinas y todos los glucolpidos. * Las esfingomielinas son especialmente abundantes en las vainas de mielina que recubren y aislan las clulas de Schwann en el sistema nervioso. * Contienen como alcohol esfingosina en lugar de glicerol, adems de un cido graso, fosfato y colina. Por tanto, es el nico tipo de compuesto que contienen a la vez esfingosina y fosfato, por lo que pueden considerarse fosfolpidos. * El C1 est esterificado con el grupo fosfato, que a su vez est esterificado por colina, como las lecitinas. Grfico Pg 271 GLICOLPIDOS De acuerdo con la naturaleza del carbohidrato, se clasifican en: a. CEREBRSIDOS: contienen slo 1 monosacrido, generalmente Dgalactosa.

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b. GLOBSIDOS: contienen un oligosacrido simple; el ms abundante contiene simplemente lactosa. c. GANGLISIDOS: contienen un oligosacrido complejo y ramificado, con enlaces glicosdicos diversos y siempre existe 1 o varias unidades de un azcar cido, el cido Nacetilneuramnico. d. SULFTICOS o SULFOLPIDOS: son los glicolpidos en los que el carbohidrato contiene a su vez steres sulfato. TEMA 22. ESTEROIDES: ESTRUCTURA, PROPIEDADES Y FUNCIONES. PROSTANGLANDINAS, TROMBOXANOS Y LEUCOTRIENOS: ESTRUCTURA Y ACCIONES FISIOLGICAS. LPIDOS DERIVADOS DEL ISOPRENO El isopreno es el 2metilbutadieno. El polmero mayor formado por unidades de isopreno es el caucho o ltex, procedente de rboles como Hevea y algunos Picus. Adems derivan del isopreno los: A. TERPENOS: oligmeros lineales o cclicos, formados por varias unidades de isopreno. Son hidrocarburos. El olor que presentan constituye el aroma de las plantas o frutos que los contiene. Su n de tomos de carbono es siempre mltiplo de 5. Los ms simples, los monoterpenos tienen 2 unidades isoprenoides como el geraniol o limoneno. Los diterpenos con 20 tomos de carbono y el ms importante es el fitol (alcohol de clorofila). Entre los triterpenos se encuentra el escualeno (hidrocarburo obtenido del hgado de los esculidos) y precursores del colesterol. Finalmente citar los dolicoles que tienen entre 80 y 100 carbonos (16 a 20 unidades de isopreno) y sirven de transportador de Glicoprotenas. Grfico Pg. 275 B. ESTEROIDES: Es el ms importante de los lpidos isoprenoides. Su estructura bsica es tetracclica y est formado por un anillo llamado ciclo pentanoperhidrofenantreno ya que es un ciclo pentano adosado a un ncleo de 3 anillos bencnicos (fenantreno) totalmente hidrogenado. El ncleo esteroide es casi plano y rgido. En una estructura esteroide existen varios carbonos asimtricos por lo que el n de estereismeros es muy grande (Ej: en el colesterol 2 estereismeros posibles). El colesterol es el principal esterol en los animales, antiptico, con un grupo de cabeza polar y un cuerpo apolar hidrocarbonato. Es la molcula pequea ms condecorada de la biologa con 13 premios nobeles, aislndose por 1 vez en 1784 de los clculos biliares. Grfico Pg 276 El ltimo Premio Nobel fue en 1985 por descubierto Brown y Goldstein el receptor de LDL por el cual se metaboliza el colesterol. Los esteroides se clasifican segn la estructura y funcin en: 1. Esteroles: contienen siempre un grupo alcohol al que deben su nombre. El ms importante es el colesterol con un hidroxilo en posicin 3, un doble enlace en posicin 5 y una cadena hidocarbonada de 8 carbonos en posicin 17. constituyente de todas las clulas y precursor de cidos biliares, vitamina D (el precursor, 7deshidrocolesterol, se encuentra en la piel), costicosteroides y hormonas sexuales. Niveles elevados en sangre (hipercolesterolemia) se relaciona con la arteriosclerosis. El ergosterol y sitosterol son esteroles de las 77

plantas y ligeramente diferentes del colesterol. Grfico Pg 277 2. Familia vitamina D: se forman por accin de la luz UV sobre los esteroles. La vitamina D3 (colecalciferol) se forma a partir del 7deshidrocolesterol en la piel. De ella se forman otros derivados hidroxilados en posiciones C1 y C25 (vitamina activa). Regulan el metabolismo del calcio y el fosfato (formacin y reabsorcin sea) por lo que su carencia ocasiona el RAQUITISMO con desmineralizacin de huesos y dientes. 3. cidos biliares: son una familia de 4 elementos que contienen como principal caracterstica la existencia de un n variable de grupos hidroxilo que le confiere su carcter antiptico. Grfico Pg 278 cidos biliares, su funcin es la de emulsionar las grasas para facilitar la accin hidroltica de enzimas digestivas como lipasas y esterasas, acelerando la digestin intestinal. El cido clico es el ms soluble por contener ms grupos hidroxilo y el litoclico es el ms insoluble y el que con ms facilidad forma clculos en la vescula biliar. Los otros cidos son el quenodesoxiclicos y desoxiclico. 4. Corticosteroides o adrenocoticoides que se forman en la corteza suprarrenal, a excepcin de la progesterona que se forma en el cuerpo lteo. 5. Hormonas sexuales: son de 2 tipos, masculinas o andrgenos y las femeninas o estrgenos. En ambos casos no existe cadena lateral sobre el C17. Representantes son la testosterona y el estradiol, respectivamente. Grfico Pg 279 C. OTROS LPIDOS ISOPRENOIDES: * Retinoles y carotenoides: caracterizados por la existencia de un anillo no aromtico. Son los pigmentos principales de muchos frutos y hortalizas, sirviendo de fuente para los retinoles. Tienen 20C, existiendo retinoles (vitamina A), retinales y cidos retinoicos. Se encuentran en el hgado, yema de huevo y la leche. Accin antioxidante, antineoplsica, participan en la visin y formacin del tejido epitelial y son reguladores del crecimiento y la diferenciacin celular. * Tocoferoles: destaca el tocoferol o vitamina E. Son lpidos de accin antioxidante, neutralizan radicales libres y facilitan la respiracin celular. Su carencia produce esterilidad y fragilidad de membranas, principalmente del sistema nervioso y los eritrocitos. * Poliprenilquinonas: contienen un anillo quinnico, a lo que deben sus caractersticas redox. Pertenecen a esta familia las plastoquinonas (plantas), ubiquinona o coenzima Q, de la cadena de electrones mitocondrial y la vitamina K que se encuentra en vereduras o carne de pescado necesaria para la coagulacin. PROSTANGLANDINAS, TROMBOXANOS Y LEUCOTRIENOS Los ixosanoides son derivados de cidos grasos con una diversidad de acciones de tipo hormonal (no son hormonas ya que no son transportados por la sangre sino que actan sobre el tejido en el que se producen) extremadamente potentes. Intervienen en: inflamacin, fiebre, funcin reproductiva, dolor, formacin de cogulos de sangre, regulacin de la presin arterial y en la secrecin gstrica. Todos los icosanoides provienen del cido araquidnico, cido graso poliinsaturado de 20C del que toman su 78

nombre general. Hay 3 clases de icosanoides: PROSTANGLANDINAS, TROMBOXANOS Y LEUCOTRIENOS. Grfico Pg 281 PROSTANGLANDINAS * Fueron aisladas por 1 vez de la prstata y actualmente son importantes en Medicina por su ubicuidad y por sus mltiples efectos: Contraccin del msculo liso (sobre todo tero). Disminucin de la presin arterial. Participacin en procesos como la inflamacin. Inductores del parto. Inhibidores de la secrecin gstrica en tratamiento de lcera. Los AINES (aspirina) y esterorideos (cortisona) inhiben su sntesis y por tanto las prostanglandinas elevan la temperatura corporal dando fiebre e inflamacin consiguiente. * La cantidad diaria sintetizada de prostanglandinas es de 1 mg teniendo efecto a muy bajas concentraciones y su Inactivacin es muy rpida en el pulmn. * Todas las prostanglandinas son derivadas del cido araquidnico y la familia de prostanglandinas se diferencian en los sustituyentes oxigenados sobre el anillo de ciclopentano. Existen 4 familias. PGE, PGF, PGA y PGB. TROMBOXANOS * Relacionadas con las prostanglandinas, en los vasos sanguneos se producen unos derivados, las PROSTACICLINAS o PGI, que inhiben la agregacin plaquetaria. * Por otra parte, en las plaquetas se producen otros derivados, los endoperxidos PGG y PGH, que conducen a los tromboxanos, los cuales estimulan la agregacin plaquetaria y la formacin de trombos. * Los tromboxanos se aislaron por 1 vez de las plaquetas (llamadas tambin trombocitos). Son producidos por las plaquetas y actan en la formacin de cogulos sanguneos y en la reduccin del flujo sanguneo hacia el sitio del cogulo. * El ms activo de los tromboxanos es el TXA2 que rpidamente pierde un puente de oxgeno para transformarse en el TXB2 inactivo. LEUCOTRIENOS * Encontrados por 1 vez en los leucocitos. En Basfilos, Neutrfilos y macrfagos, el cido araquidnico sufre otra transformacin y origina los hidroperoxicidos. Principal modificacin se produce en posicin 5 formando 5HPETE (cido 5hidroperoxieicosatetraenoico). Este compuesto evoluciona a epxido y constituye el 1 leucotrieno y precursor de los restantes, el LTA4. Los restantes: LTB4, LTC4, LTD4 y LTE4. 79

* Los leucotrienos se nombran con las iniciales LT seguido de una letra mayscula en orden alfabtico y un subndice indicando el n de dobles enlaces (llama la antencin que se denomine genricamente trieno y todos tienen 4 dobles enlaces y lo que indica es que los 3 dobles enlaces conjugados son los absolutamente esenciales para la actividad biolgica). * El LTB4 tienen propiedades quimiotxicas sobre los leucocitos y a la vez facilita la infiltracin de estas clulas en las reacciones inflamatorias, estimula la adenilato ciclasa y la liberacin de enzimas lisosomales. * Los LTC, D y E se denominan mediadores de hipersensibilidad inmediata, por su poderoso efecto constrictor del msculo liso en pulmn, trquea e intestino y por el aumento de la permeabilidad vascular. Su reaccin alrgica o anafiltica es superior a histamina. * Los LT inducen la contraccin del msculo que recubre las vas areas del pulmn y la sobreproduccin de leucotrienos produce ataque asmticos. La broncoconstriccin severa que se produce en el shock anafiltico tras picadura de abeja o frmacos es mediada por estos compuestos SEPARACIN Y ANLISIS DE LPIDOS. 1. Debido a la insolubilidad en agua del los lpidos para su extraccin se requiere de la utilizacin de disolventes orgnicos como ter etlico, cloroformo o benceno. Los lpidos de membrana se extraen mejor con disolventes orgnicos ms polares como etanol o metanol. Una solucin extractiva muy utilizada es una mezcla de cloroformo, metanol y agua y los lpidos permanecen en el cloroformo y las molculas ms polares (protenas, glcidos) se sitan en la fase polar de metano/agua. 2. Cromatrografa de absorcin separa los lpidos de polaridad diferente. 3. Cromatrografa en capa fina sobre cido silcico. 4. Cromatografa gaslquido: separa las mezclas de derivados lipdicos voltiles. Se pueden separar mezclas de cidos grasos con diferentes longitudes de cadenas y diversos grados de instauracin. 5. Hidrlisis especfica por medio de fosfolipasas. Combinacin de hidrlisis especfica con cromatografa en capas fina o gaslquido permite a menudo la determinacin de la estructura de un lpido. 6. Espectrofotometra de masas de los lpidos o de sus derivados voltiles es la tcnica ms exacta para conocer la longitud de una cadena hidrocarbonada o la posicin de los dobles enlaces. TEMA 23. DIGESTIN Y ABSORCIN DE LOS LPIDOS DE LA DIETA. FORMACIN DE QUILOMICRONES. TRANSPORTE DE LPIDOS EN EL PLASMA: LIPOPROTENAS. INTRODUCCIN 1. El ser humano necesita del aporte continuado de una serie de compuestos orgnicos para el normal desarrollo y funcionamiento de sus tejidos. 2. Los alimentos de la dieta proporcionan protenas, hidratos de carbono, grasas, minerales y vitaminas que el conjunto de clulas del organismo precisan para satisfacer sus requerimientos energticos y de crecimiento. 80

3. Una dieta equilibrada va a estar compuesta por un 5560% hidratos de carbono (4.2 kcal/g), 30% grasas (9.5 kcal/g) y 15% protenas (4.3 kcal/g). Los 2 primeros van a suministrar molculas que en su mayor parte tras ser catabolizadas van a suministrar parte de la energa en que el individup consume. Sin embargo, las protenas que aunque tenga un valor energtico similar a los carbohidratos, su participacin energtica solo es del 15% ya que su funcin es fundamentalmente plstica. Slo con el 1% de la ingesta de energa en forma de cidos grasos esenciales sera suficiente para el requerimiento lipdico absoluto de la dieta. 4. Los requerimientos energticos de un individuo van a depender de factores como son: peso, edad, gnero, circunstancias particulares (tipo de actividad, embarazo, convalecencia, etc). 5. Los hidratos de carbono solo pueden absorberse de forma monomrica. Los monosacridos (glucosa, fructosa, galactosa, etc) son un porcentaje pequeo de los azcares presentes en los alimentos siendo su forma mayoritaria las formas polimricas de la glucosa tales como el almidn o el glucgeno o los disacridos sacarosa y lactosa. Por tanto deben ser transformados en monosacridos en un proceso previo a la absorcin. La celulosa, pectinas, etc. que no puede ser degradadas por el aparato digestivo se eliminan por las heces (fibra vegetal). 6. Las protenas deben ser transformadas en sus componentes unitarios, los aminocidos, que son absorbibles por el intestino. Las protenas que no pueden ser degradas no se absorben y aparecen en las heces. 7. Los lpidos forman un grupo complejo de nutrientes en el que predominan los triacilgliceroles que constituyen el 90% de las grasas. Fosfolpidos, colesterol y steres de colesterol, cidos grasos y vitaminas liposolubles completan la fraccin lipdica de los alimentos. Para la absorcin de los lpidos es necesaria la secrecin biliar debido a su insolubilidad en agua. 8. En el ser humano es obligatorio ingerir nutrientes esenciales: la mitad de los aminocidos protecos, algunos cidos grasos poliinsaturados, vitaminas y minerales. DIGESTIN 1. La gran mayora de compuestos ingeridos sufren reacciones de transformacin que consisten en la conversin de Biomolculas de tipo polimrico en otras monomricas ms sencillas que pueden ser transportadas a la sangre por las clulas intestinales. 2. El conjunto de reacciones de degradacin son procesos hidrolticos exergnicos que se producen extracelularmente en la luz del aparato digestivo y se conoce con el nombre de DIGESTIN. 3. La digestin corre a cargo de: * ENZIMAS DIGESTIVAS: aceleran la velocidad de degradacin de los materiales polimricos en monomricos. Estas enzimas son sintetizadas en clulas y glndulas especializadas en forma de zimgenos digestivos. * COMPONENTES NO ENZIMTICOS: presentes en las secreciones de diferentes glndulas digestivas que suministran los iones y pH adecuados para la actuacin de las enzimas o que ayudan como es la bilis a solubilizar los lpidos para favorecer su digestin y absorcin. * PROCESOS FSICOS: masticacin o trituracin de los alimentos y los movimientos de contraccin del tubo digestivo. * SISTEMA NERVIOSO Y ENDOCRINO: coordinacin entre tiempo de residencia del bolo alimenticio y el aporte de secreciones digestivas en tiempo y cantidad adecuado para llevar a cabo la degradacin de los 81

alimentos. * La digestin de los lpidos presenta una dificultad debido a la insolubilidad en agua, lo que hace difcil el ataque por sus enzimas de degradacin que en general son hidrosolubles. * La digestin de los lpidos comienza en el duodeno donde los triacilgliceroles se transforma en diacilgliceroles, monoacilgliceroles y cidos grasos mediante la LIPASA PANCREATICA. * El aumento de la superficie de contacto entre las gotitas lipdicas y la lipasa de la fase acuosa se produce por la accin emulsionante de las sales biliares presentes en la bilis, la cual facilita la digestin de los triacilgliceroles. * La accin de la lipasa se ve favorecida por la presencia de una protena pancretica denominada COLIPASA. La secrecin pancretica contiene otras esterasas que contribuyen a la degradacin de los fosfolpidos y steres de colesterol en el intestino delgado. * La transformacin de los fosfolpidos en lisofosfolpidos y cidos grasos es catalizada por la FOSFOLIPASA A2 sintetizada en el pncreas y activada por la tripsina. La COLESTEROL ESTERASA lleva a cabo la hidrlisis de los steres de colesterol en colesterol y cidos grasos. ABSORCIN DE LPIDOS * Una vez digeridas, es necesario que las Biomolculas pasen a travs de la membrana luminal del enterocito (absorcin). Factores que favorecen la absorcin: compuestos parecidos a los componentes de membrana, menor tamao, ms hidrfoba. * La absorcin de los productos de la hidrlisis de los lpidos procedentes de las micelas mixtas hacia las clulas de la mucosa del yeyuno y del leon es un proceso pasivo que tiene lugar por DIFUSIN, a favor de un gradiente de concentracin. * Gracias a la bilis y en concreto a los cidos biliares, que contribuyen a emulsionar los lpidos, van hacer que se absorban unos compuestos insolubles en agua. Su principal contribucin a la asimilacin de los lpidos la constituye la capacidad para formar micelas lo cual va a permitir superar la capa de agua y llegar a las paredes del intestino. Gracias a ello, la captacin de cidos grasos y monoacilgliceroles es muy eficaz y la capacidad de absorcin de los mismos es muy alta (casi el 100%). Tambin las vitaminas liposolubles (A,D, E, K) aprovechan este vehculo. * Las micelas cuando llegan a las paredes enterocticas, descargan su contenido graso que es muy semejante a la membrana y la atraviesan por difusin. Los cidos biliares de las micelas pueden volver de nuevo a la luz intestinal, recargar y volver a iniciar el ciclo hasta que termine toda la absorcin. Cuando esto ha ocurrido, los propios cidos biliares son absorbidos en ileon por medio de un transporte activo especializado (circulacin enteroheptica de cidos biliares) que es muy eficaz ya que consigue que el 95% de los cidos biliares vuelvan al hgado y se almacenen en la vescula biliar hasta el momento de volver a salir al intestino. * La bilis resulta fundamental no tanto para la digestin como para la absorcin de los lpidos de la dieta. Contribuye a la emulsin de las grasas y a la produccin de micelas una vez alcanzada la concentracin micelar crtica de cidos biliares. * Si no se producen las micelas, no se absorben grasas ni vitaminas liposolubles con lo cual aparecen como tales en las heces. La presencia masiva de lpidos digeridos en las heces se denomina ESTEATORREA. * Una de las causas ms frencuentes de esteatorrea es la produccin de una bilis rica en colesterol, bilis 82

litognica. El exceso de colesterol tiende a cristalizar dando origen a los clculos de colesterol en la vescula biliar (colelitiasis) o en el coldoco (coledocolitiasis). * Los triglicridos de la diera tras la accin de la lipasa pancretica y emulsin se escinden en 2 cidos grasos libres y 2monoglicridos que se absorben por la mucosa intestinal. Las clulas de la mucosa intestinal resintetizan triglicridos a partir de los productos absorbidos y de esta forma los cidos grasos procedentes de la dieta pueden incorporarse al organismo. Se trata de un proceso dependiente de energa ya que necesita 2 ATP por cada mol de triglicridos sintetizados. Estos triglicridos pasan a la linfa en forma de quilomicrones y de la linfa a la sangre que tras un proceso de liplisis llevado a cabo por la lipoprotena lipasa, se producen cidos grasos que se acumulan en el tejido adiposo. UTILIZACIN DE LOS TRIGLICRIDOS DE LA DIETA. Grfico Pg 293. Se puede escanear. LIPOPROTENAS * El problema de la llegada de los lpidos recin absorbidos por el entericito a los tejidos no est an resuelto debido a su insolubilidad en agua. Para ello los lpidos son ensamblados en un vehculo (lipoprotenas) y de esta forma se pueden transportar a los tejidos por el entorno acuoso. * Las lipoprotenas son compuestos esferoidales, asociacin no covalente de lpidos y protenas y cuya estructura est diseada para que haya un ncleo hidrfobo (formado por los lpidos ms insolubles como triglicridos, steres de colesterol y vitaminas liposolubles) rodeado por una zona externa en la que predominan las protenas denominadas apoprotenas y los lpidos de naturaleza ms polar como fosfolpidos y colesterol libre. * Los quilomicrones formados por triglicridos y en menor medida colesterol son el tipo de lipoprotena encargada de transportar los lpidos absorbidos desde el entericito a la linfa. Son las lipoprotenas de menor densidad y mayor tamao (se llaman as porque tienen el dimetro de 1 micra), abandonan la clula por exocitosis y no pueden ser captados por los capilares por lo que llegan a la circulacin linftica. Del conducto linftico se vierten a las grandes venas o se llevan los quilomicrones directamente a los tejidos perifricos consumidores de grasa (tejido adiposo o muscular) antes de llegar al hgado donde llegan prcticamente descargados de triglicridos por medio de la enzima lipoprotena lipasa (LPL) en forma de unas partculas denominadas REMANENTES DE QUILOMICRONES. * Esta forma de transportar la grasa es la manera que tiene el hgado de una eventual llegada masiva de grasa que conllevara una esteatosis heptica severa. Los nicos compuestos que llegan directamente al hgado es la molcula de glicerina que formaba parte de los triglicridos despus de su hidrlisis y los cidos grasos de cadena corta. El colesterol y sus steres as como los triglicridos y fosfolpidos son insolubles en agua y se han de transportar desde el tejido de origen (hgado, donde es sintetizado o intestino donde son absorbidos) hasta los tejidos donde se almacena o consumen por medio de lipoprotenas. Grfico Pg 295 * La alteracin en la concentracin de las lipoprotenas se denomina hiperlipoproteinemia o dislipemia y ello a su vez condiciona arteriosclerosis. * Las lipoprotenas varan en cuanto a su tamao y su composicin, continan denominndose con su nombre anglosajn y cuando aumenta la densidad disminuye el tamao as como el contenido general de lpidos, en 83

particular de triglicridos. Las HDL llegan a contener hasta un 50% de protenas, mientras que los quilomicrones apenas contienen un 2%.. * Cuando la dieta contiene ms cidos grasos de los necesarios o exceso de glcidos, stos se convierten en triglicridos en el hgado y forman las VLDL. Estas lipoprotenas se transportan por la sangre desde el hgado hasta el msculo o el tejido adiposo donde sern escindidos por la LPL liberando cidos grasos libres de los triglicridos de las VLDL y estos TG se almacenan en el tejido adiposo o se oxidan en el msculo para suministrar energa. El resto de las VLDL vuelve al hgado (captacin mediada por receptor). * Las IDL circulan durante muy poco tiempo y proceden de las VLDL. Contienen apo B100 y estn enriquecidas en steres de colesterol. * La prdida de TG convierte parte de las VLDL en LDL, ms ricas en colesterol y conteniendo apo B100 como principal apoprotenas (70% del colesterol plasmtico, seguido de las HDL con un 17%) y se metabolizan por medio de los receptores de Goldstein y Brown que reconocen a la apo B y E. Un nivel elevado de LDLcolesterol es mejor ndice de riesgo de arteriosclerosis (a ms LDLcolesterol ms posibilidad de infarto cardaco). * Lipoprotena (a) es una partcula de LDL unida por medio de puente disulfuro a la apo(a). Se asemeja al plasmingeno y se ha relacionado unos niveles elevados con un mayor riesgo de enfermedad cardiovascular. * La ltima lipoprotena es la HDL que son ricas en protenas (apo A). Est implicada en el transporte reverso de colesterol al higado y parte de este colesterol se convierte en sales biliares. Es un factor predictor de disminucin de riesgo de arteriosclerosis, es decir, niveles elevados de HDLcolesterol se correlaciona con una menor posibilidad de eventos cardacos. * Los componentes proteicos de las lipoprotenas se denominan apoprotenas y se distribuyen en proporciones bastantes fijas en funcin del tipo de lipoprotenas. As las HDL tienen apo A como componente proteico principal mientras que las HDL tienen apo B. Las apo C, D y E existen en proporciones menores. Actan como punto de reconocimiento especfico por parte de receptores de membrana celulares. Grfico Pg 297 ABSORCIN DE TG DE LA DIETA * Si se determinan las concentraciones de triglicridos plasmticos en una persona sana como ayuno nocturno y que posteriormente ingiere una comida que contiene 50100 gr de triglicridos se observa una relacin similar a la mostrada en la figura. * Antes de la comida, la concentracin plasmatica de triglicridos suele ser normal (< 150 mg/dl). Despus de la comida aumenta hasta alcanzar un valor mximo a las 36 horas y de forma gradual, vuelven a su valor normal al cabo de 810 horas. La elevacin de la concentracin plasmtica de triglicridos se denomina HIPERTRIGLICERIDEMIA. El aumento de triglicridos en ayunas se debe principalmente a los quilomicrones absorbidos. La hipertrigliceridemia es normal despus de una comida grasa pero si es excesiva y prolongada es patolgica y se asocia a pancreatitis y con menor frecuencia a eventos cardacos, sobre todo porque los pacientes suelen tener HDLcolesterol bajos. * En el caso de hipertriglicerdemia las dietas con triglicridos de cadena media suele ser efectivas. Grfico Pg. 298 TEMA 24. 84

LIPLISIS. OXIDACIN DE LOS CIDOS GRASOS: CARACTERSTICAS GENERALES Y LOCALIZACIN CELULAR. ACTIVACIN DE LOS CIDOS GRASOS Y TRANSPORTE AL INTERIOR DE LA MITOCONDRIA. ETAPAS DE LA OXIDACIN Y BALANCE ENEGTICO. INTRODUCCIN 1. Las grasas (cidos grasos) obtenidas de la dieta o sintetizadas por el organismo, tienen como principal funcin, la cesin de la energa que acumulan, o su almacenamiento en tejidos especializados como el adiposo para afrontar eventuales etapas de carencia alimentica. 2. Otras funciones de las grasas sern: proteccin mecnica, o contra el fro, de los tejidos y formar parte de membranas celulares (fosfolpidos). 3. La oxidacin de c. Grasos de cadena larga hasta acetilCoA es una ruta cental del metabolismo energtico en animales y bacterias. Los electrones cedidos durante la oxidacin de c. Grasos en el ciclo de Krebs pasan a la cadena respiratoria mitocondrial y se sintetiza ATP. 4. En algunos organismos, el acetilCoA producido en la oxidacin de los cidos grasos puede seguir rutas alternativas (Ej: en el hgado, a partir del acetilCoA y tras ayuno prolongado se produce cuerpos cetnicos). 5. La naturaleza de la ruta mediante la cual se oxidan los cidos grasos fue descubierta por Franz Knoop (alemn) en 1904. OXIDACIN DE C. GRASOS. * Los c. Grasos son una fuente importante de energa y cuando el organismo necesita ATP son uno de los combustibles ms empleados. * Los c. Grasos se encuentran esterificados con glicerina formando los triglicridos, de los que suele haber depsitos en todas las clulas, pero son ms abundantes en tejido adiposo (almacn de grasas). * Un individuo con 70 kg de peso tiene aproximadamente 11Kg de grasa lo que supone 100.000 kcal. * Cuando se produce un dficit calrico (ayuno) se movilizan estos depsitos de triacilgliceroles (TAG o TG), fenmeno que junto al contrario (depsito de grasas) estn muy controlado por la accin de hormonas lipolticas (ACTH, GH, glucagn y, adrenalina) en el caso de la movilizacin y lipognicas (insulina) en el caso de reserva. * La accin de hormonas lipolticas produce la hidrlisis masiva de los TG del tejido, en general adiposo, y la movilizacin de c. Grasos libres, los cuales se transportan por la sangre unidos a la albmina. De esta forma llegan a los tejidos que consumen c. Grasos (combustible). * Cuando la situacin de dficit calrico desaparece, dejan de producirse hormonas lipolticas y el pncreas secreta insulina con lo cual deja de producirse AMPc detenindose la movilizacin de grasas. * Cuando las hormonas lipolticas se unen a sus receptores celulares producen una hidrlisis masiva de los TG del tejido (movilizacin de las grasas). * Este proceso es un tpico caso de activacin en cascada, donde la unin hormonareceptor, en la membrana, 85

produce la activacin de la adenilato ciclasa, que produce cantidades de AMPc que a su vez activa a una batera de Protenas Kinasas reguladoras una de las cuales es la enzima encargada de la hidrlisis de TG, la TAG lipasa sensible a la accin hormonal, comenzando la liplisis. * La TAG lipasa cataliza la hidrlisis de los enlaces ster de los TAG y los transforma en MAG y luego una MAG lipasa completa la hidrlisis total a c. Graso y glicerina. Grfico Pg 302. * Aproximadamente el 95% de la energa biolgicamente disponible de los TAG en el tejido adiposo reside en sus 3 c. Grasos de cadena larga; la parte de glicerol slo contribuye en un 5%. * El glicerol liberado por la accin de la lipasa es fosforilado por la glicerol quinasa y el glicerol3fosfato resultante es oxidado a dihidroxiacetona fosfato. El enzima glucoltico triosa fosfato isomerasa convierte este compuesto en gliceraldehido3fosfato, que se oxida en la gluclisis. Grfico Pg 303 * La ruta fundamental por la que los c. Grasos son degradados para obtener energa es la denominada oxidacin, ubicada en las mitocondrias, aunque hay otra oxidacin complementaria en los Peroxisomas. Los cidos grasos se oxidan de una forma escalonada, con un ataque inicial en el carbono 3 (el carbono con respecto al grupo carbonilo) de ah el nombre. * Para que un c. Graso pueda oxidarse debe llegar a la mitocondria activado, listo para ser reconocido por las enzimas correspondientes. * Los c. Grasos libres que penetran en el citosol procedentes de la sangre no pueden pasar directamente a travs de la membrana mitocondrial sin sufrir una serie de reacciones enzimticas. La reaccin est catalizada por Isoenzimas presentes en la membrana mitocondrial externa y citoplasma, las acilCoA sintetasas ya que la forma activa de un c. Graso es como acilCoA y debido a que el enlace ster tiene una alta energa de hidrlisis, el proceso de activacin implica un gasto de energa en forma de ATP. Grfico Pg 304 * Antes de que el c. Graso est en condiciones de ser oxidado debe entrar en la mitocondria, organela que es impermeable al paso de cualquier sustancia. Los acilCoA no son permeables y se localizan en la membrana mitocondrial externa, no disponen de transportador entre los que existen en la membrana interna mitocondrial. Existe la necesidad de recurrir a un sistema de lanzadera para hecer posible dicho paso. * El colaborador en este proceso es una molcula para la que s existe transportador en la membrana interna mitocondrial: carnitina. Se pone en marcha un complicado complejo funcional formado por 2 isoenzimas, uno citoplasmtico y otro mitocondrial y el transportador de carnitina para lograr superar la barrera mitocondrial. * Las Isoenzimas palmitoil cantina tansferasa I (citoplasmtica) y II (mitocondrial), catalizan la misma reaccin, aunque cada una con el equilibrio desplazado en sentido contrario. Funcionando juntas consiguen la entrada de los grupos acilo a la mitocondria por lo que todo est preparado para la oxidacin de c. Grasos. La carencia de carnitina o la disfuncin de las transferasas puede suponer un grave problema (tendencia a presentar una acumulacin de TAG en el msculo: dolores musculares, colapso y/ o muerte). Tambin se ha utilizado la carnitina en medicina deportiva. Grfico Pg 305

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La oxidacin mitocondrial de c. Grasos se produce en 3 fases: 1 FASE (oxidacin): los c. Grasos sufren la eliminacin oxidativa de unidades sucesivas de 2 tomos de carbono en forma de acetilCoA, a partir del extremo carboxilo de la cadena de c. Graso. Por ejemplo, el c. Palmtico (C16:0), se somete 7 veces a esta secuencia oxidativa, perdiendo en cada uno de los pasos 2 tomos de carbono en forma de acetilCoA. Al final de los 7 ciclos, los 2 ltimos tomos de carbono (C15 y C16) quedan en forma de acetilCoA por lo que el resultado global es la conversin de 8 molculas de acetilCoA. 2 FASE: los residuos acetilo del acetilCoA se oxidan a CO2 por la va del ciclo de Krebs que tambin tiene lugar en la matriz mitocondrial. Este acetilCoA entra en una ruta oxidativa final comn junto con el procedente dela glucosa va gluclisis y oxidacin del piruvato. Las 2 primeras fases de la oxidacin de c. Gasos reducen los transportadores electrnicos a NADH y FADH2. 3 FASE: donacin por parte del HAPH y FADH2 de sus electrones a la cadena respiratoria mitocondrial y fosforilacin de ADP a ATP. De este modo, la energa liberada por la oxidacin de los c. Grasos se conserva en forma de ATP. Grfico Pg. 306 Grfico Pg. 307 1 paso: deshidrogenacin dando lugar a una transenoilCoA. El nuevo enlace doble tiene la configuracin trans en contra de lo habitual que es cis. El encima responsable, acilCoA deshidrogenasa, tiene un grupo prosttico de FAD. Los electrones eliminados del acilCoA son transferidos al FAD (c. respir). 2 paso: se adiciona agua al enlace doble del transenoilCoA para formar el hidroxiacilCoA (tambin denominado 3hidroxiacilCoA). Esta reaccin es catalizada por la enoilCoA hidratasa. 3 paso: deshidrogenacin del hidroxiacilCoA para formar cetoacilCoA por accin de la hidroxiacilCoA deshidrogenasa; en esta reaccin el NAD acta como aceptor de electrones. El NADH formado en esta reaccin dona sus electrones al NADH de la cadena respiratoria. 4 paso: catalizado por la acilCoA acetiltransferasa (tambin denominada tiolasa) que promueve la reaccin entre cetoacilCoA y una molcula de CoA libre y da lugar a miristoilCoA + acetilCoA. Grfico Pg. 307 Los 4 pasos se repiten para generar acetilCoA y ATP. La ecuacin correspondiente a un solo paso y comenzando con el ster del CoA de nuestro ejemplo, el palmitato es: PalmitoilCoA + CoA + FAD+ NAD +H2O MiristoilCoA + AcetilCoA + FADH2+ NADH* H+ * Despus de la eliminacin de una unidad de acetilCoA del palmitoilCoA queda el tioster de CoA del c. Graso de cadena acortada, en este caso el miristato de 14 carbonos. * El miristoilCoA est en disposicin de entrar en la secuencia de la oxidacin y someterse a otra serie de 4 reacciones, anlogas a las primeras, para generar una 2 molcula de AcetilCoA y lauroilCoA, el tioster de CoA y el cido graso de 12 tomos de carbono laurato. * En total se requiere de 7 pasos a travs de la secuencia de la oxidacin para oxidar una molcula de palmitoilCoA a 8 molculas de acetilCoA.

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* Reaccin global: PalmitoilCoA + 7 CoA + 7 FAD + 7 NAD + 7 H2O 8 AcetilCoA + 7 FADH2 + 7 NADH + 7 H. En este proceso se produce agua (esto es esencial en los camellos). * Ecuacin global de la oxidacin del palmitoilCoA a 8 AcetilCoA, incluyendo la transferencia electrnica y la fosforilacin oxidativa: PalmitoilCoA + 7CoA + 7 O2+ 35 P + 35 ADP 8 AcetilCoA+ 35 ATP+42 H2O * El acetilCoA puede continuar oxidndose va ciclo de Krebs a CO2 y H20. La ecuacin de ahora es el balance de la 2 fase de la oxidacin del palmitoilCoA junto con las fosforilaciones acopladas de la 3 fase: 8 AcetilCoA + 16 O2+ 96 Pi+ 96 ADP 8 CoA+96 ATP+ 104 H2O+ 16 Co2 * Combinado las ecuaciones anteriores obtenemos la ECUACIN GLOBAL para la oxidacin completa de palmitoilCoA a CO2 y H2O: PalmitoilCoA + 23 O 2 + 131 Pi+131 ADP CoA+ 131 ATP+16 CO2 +146 H2O. Grfico Pg. 310 El oleato (C18:1) se convierte en oleoilCoA que es transportado en forma de oleoilcarnitina a travs de la membrana mitocondrial, convirtindose de nuevo en oleoilCoA en la matriz. A continuacin el oleoilCoA pasa por 3 veces a travs del ciclo de oxidacin de c. Grasos para generar 3 molculas de acetilCoA y el ster del CoA de un c. Graso insaturado de 12 carbonos, el cisdodecenoilCoA. Sobre este producto no puede actuar la enoilCoA hidratasa que acta nicamente sobre enlaces trans por lo que otra enzima la enoilCoAisomerasa va a transformar el cisdodecenoilCoA en transdodecenoilCoA que a su vez es convertido por la accin de la enoilCoA en el correspondiente hidroxdecanoilCoA. Sobre este incremento actan ahora los restantes enzimas de la oxidacion para generar acetilCoA y un c. Graso saturado de 10 C en forma de ster de CoA (decanoilCoA). Este ltimo sufre 4 pases ms con lo que al final se producen 9 molculas de acetilCoA a partir de una molcula de oleato. El otro auxiliar (una reductasa) acta en la oxidacin de c. Grasos poliinsaturados. La accin combinada de la enoilCoA isomerasa y la 2,4dienoiolCoA reductasa permite la produccin de un sustrato que es la transenoilCoA necesaria para que se produzca la oxidacin. El resultado global es la conversin del linoleato en 9 molculas de acetilCoA. En el hgado, las molculas de acilCoA formadas en el citosol pueden seguir 2 rutas: oxidacin a cargo de enzimas mitocondriales. Conversin a TAG y fosfolpidos a cargo de enzimas citoslicos. El proceso de 3 pasos por el que se transportan grupos acilo de los acilCoA citoslicos a la matriz mitocondrial constituye el factor limitante de la oxidacin de c. Grasos. Una vez en el interior de la mitocondria siguen el proceso de oxidacin hasta acetilCoA. 88

La concentracin de malonilCoA, primer intermedio de la biosntesis citoslica de c. Grasos de cadena larga a partir de acetilCoA, aumenta cuando se recibe un suministro abundante de glcidos: el exceso de glucosa que no puede ser oxidado o almacenado en forma de glucgeno se convierte en c. Grasos en el citosol para su almacenamiento como TAG. El mecanismo de inhibicin de la carnitina aciltransferasa I por el malonilCoA garantiza la inhibicin de la oxidacin de c. Grasos siempre que el hgado reciba un suministro abundante de glucosa como fuente de energa y fabrique activamente TAG a partir del exceso de glucosa. Es decir, la ingesta de grandes cantidades de glcidos suprime la oxidacin de c. Grasos y favorece su biosntesis. 2 de los enzimas de la oxidacin estn tambin regulados: cuando la relacin NADH/NAD+ es elevada, la hidroxiacilCoA deshidrogenasa est inhibida, adems concentraciones elevadas de acetilCoA inhiben a la tiolasa. Existe una oxidacin realizada en los peroxisomas que parece especialmente activa para los denominados c. Grasos de cadena muy larga entre 20 y 26 tomos de carbono. El balance energtico de esta ruta es diferente del de la mitocondrial. La oxidacin en los peroxisomas del palmtico produce 121 molculas de ATP frente a las 129 de la oxidacin mitocondrial. No se trata de una ruta marginal. Supone el 30% de la oxidacin total de palmtico por el hgado y adems su disfuncin ocasiona una grave enfermedad congnita, la ADRENOLEUCODISTROFIA, que afecta a 1 de cada 20.000 varones y se desarrolla entre los 5 y 12 aos. Origina una grave insuficiencia adrenal y sntomas neurolgicos graves por desmielinizacin. Condiciona la muerte del paciente y el tratamiento consiste en una dieta con restriccin de c. Grasos de cadena muy larga as como el ACEITE DE LORENZO formado por una mezcla de cidos insaturados oleico y ercico. TEMA 25. FORMACIN, METABOLISMO Y UTILIZACIN DE LOS CUERPOS CETNICOS. IMPORTANCIA FISIOLGICA. ASPECTOS PATOLGICOS. INTRODUCCIN Hay circunstancias como el ayuno o la diabetes no tratada en la que se produce una movilizacin masiva de las grasas del tejido adiposo generndose gran cantidad de cidos grasos no esterificados (AGNE) que unidos a la albmina llegan a los tejidos perifricos pero tambin al hgado en cantidades que pudiera existir el peligro de colapso de este tejido (hgado graso). Para evitarlo, el hgado acelera la sntesis de unos compuestos denominados cuerpos cetnicos (CC), lo que provoca una salida abundante de los mismos a la sangre, muy superior a las pequeas cantidades que lo hacen en circunstancias normales. Los cuerpos cetnicos, metabolitos de origen lipdico, no se tratan de productos marginales ya que incrementan su concentracin de 0.07 mM tras una comida a casi 8 mM tras 1 mes de ayuno y alcanzan valores > 20 mM en situacin de cetoacidosis diabtica. Cuando se habla de CC se hace referencia a 2 compuestos de 4 tomos de carbono (acetoacetato y hidroxibutirato) de carcter cido y solubles en agua (lo que es raro en los lpidos) por lo que pueden ser excretados por la orina. El 3 de los CC es minoritario, la acetona.. FORMACIN DE LOS C.CETNICOS. En los seres humanos y en la mayora de los mamferos, el acetilCoA formado en el hgado durante la 89

oxidacin de los c. Grasos puede entrar en el ciclo de Krebs o ser convertido en los cuerpos cetnicos (CC) y ser exportados a otros tejidos. Estos CC se sintetizan, en el hgado, por la condensacin de hasta 3 molculas de AcetilCoA, que abunda en el hgado en situacin de ayuno por la activacin de la oxidacin, produciendo acetoacetato por medio de la accin de la enzima acetoacetilCoA sintasa. A continuacin, el acetoacetilCoA se condensa con acetilCoA para formar HMGCoA por medio de la HMGCoA sintasa. Finalmente la HMGCoA liasa escinde a la HMGCoA en AcetilCoA y acetoacetato, el primero de los CC. Este CC podra salir del hepatocito a la sangre pero lo habitual es transformarlo en otro CC, hidroxibutirato que es el ms abundante de los 2 en sangre en cualquier circunstancia, gracias a la actividad de la enzima mitocondrial hidroxibutirato deshidrogenasa. Los CC son solubles en agua y orina salvo la acetona que se exhala por va respiratoria. Grfico Pg 317 METABOLISMO Y UTILIZACIN DE LOS CUERPOS CETNICOS. Acetoacetato y hidroxibutirato son transportados por la sangre a tej. Extrahepticos impidiendo un posible colapso graso del hgado. Son compuestos ricos en energa potencial ya que sufren oxidacin a travs del ciclo de Krebs. Liberan gran parte de la energa necesaria para tejidos como msculo esqueltico, cardaco y la corteza renal. Adems, el cerebro que normalmente prefiere glucosa como combustible, puede adaptarse al uso de los CC en condiciones de ayuno, cuando no es posible disponer de glucosa, es decir son usados como combustible alternativos de la glucosa y los cidos grasos prolongando el periodo en el que un mamfero puede sobrevivir en ayuno (generan el 50% de ATP que precisa el cerebro). Su uso como combustible se debe a su catabolismo, que tiene lugar en los rganos perifricos, entre ellos el cerebro, donde existe una actividad enzimtica que no acta en hgado, la tioforasa, que puede integrar los CC en el metabolismo degradativo, originando acetoacetilCoA que luego es sustrato de la ltima de las actividades enzimticas de las de la oxidacin (tiolasa) que lo escinde en 2 molculas de acetilCoA listo para integrarse en el ciclo de Krebs y la cadena transportadora de electrones y, por tanto, para producir ATP. Grfico Pg. 320 ASPECTOS PATOLGICOS DE LOS CUERPOS CETNICOS Y REGULACIN. En circunstancias especiales como ayuno prolongado o diabetes descontrolada puede producirse una sobreproduccin de CC que desborde la capacidad de los rganos consumidores para retirarlos de la sangre. En esas condiciones se produce acumulacin de CC en sangre que debido a su carcter cido produce descenso del pH conocido con el nombre de CETOSIS o CETOACIDOSIS. Si es severa puede producir coma y la muerte del paciente. El cuerpo reacciona aumentando la excrecin de CC por la orina lo que conlleva necesidad de eliminar otros iones para mantener el equilibrio electrnico y de agua (osmolaridad) lo que conlleva la produccin de DESHIDRATACIN y prdida de electrolticas severas. Un factor limitante de la ruta tomada por el acetilCoA en las mitocondrias hepticas es la disponibilidad de oxalacetato para iniciar la entrada del ciclo de Krebs. Tras inanicin se extrae el oxalacetato del ciclo de Krebs para utilizarlo en la sntesis de glucosa. Cuando la concentracin de oxalacetato es muy baja, entra muy 90

poco acetilCoA en el ciclo y se favorece la formacin de CC. La produccin y exportacin de CC desde el hgado a los tejidos extrahepticos permite la oxidacin continuada de los cidos grasos en el hgado cuando el acetilCoA no est siendo oxidado via ciclo de Krebs. En personas sanas, la produccin de acetona a partir de acetoacetato se lleva a cabo por la accin de la actoacetato descarboxilasa. Por tanto los diabticos no sometidos a tratamiento mdico producen grandes cantidades de acetoacetato y acetona que es txica. Al ser voltil se exhala por va respiratoria confiriendo un olor caracterstico a la respiracin. En situaciones de diabetes no tratada no hay suficiente cantidad de insulina para que los tejidos extrahepticos puedan captar glucosa de la sangre de manera eficiente y para que los niveles de glucosa en sangre aumenten se acelera la gluconeognesis heptica as como la oxidacin de los cidos grasos en hgado y msculo con el resultado de la produccin de CC. Grfico pg. 322. TEMA 26. BIOSNTESIS DE CIDOS GRASOS: CARACTERSTOCAS GENERALES Y LOCALIZACIN CELULAR. FORMACIN DE MALONILCoA. COMPLEJO CIDO GRASO SINTASA. ETAPAS DE LA SNTESIS. BIOSNTESIS DE TRIACILGLICEROLES. BIOSNTESIS DE CIDOS GRASOS. Cualquier cido graso (AG), saturado o insaturado, puede ser sintetizado en el interior de la clula de los mamferos excepto el linoleico y linolnico que son esenciales. La biosntesis y el catabolismo de los AG transcurren por vas diferentes catalizadas por enzimas distintas y tiene lugar en partes diferentes de la clula. Adems, en la biosntesis de los AG participa un intermedio de 3 carbonos, el malonilCoA que no interviene en la degradacin. La fuente de carbonos para fabricar AG es el acetilCoA, procedente de los aminocidos cetgenos o de los carbohidratos y la obtencin del acetilCoA tiene lugar en la mitocondrias ( o en los peroxisomas) mientras que el sistema enzimtico fundamental para la biosntesis de AG es citoplasmtica. El AcetilCoA no tiene transportadores que le permitan salir de la mitocondria al citoplasma por lo que necesita de un sistema lanzadera de citrato el cual y dentro del citosol se rompe por la accin de la citrato liasa regenerando acetilCoA y precisando de energa en forma de ATP. Por tanto, el citrato es fundamental por 3 razones: Puede salir de la membrana interna mitocondrial gracias a un transportador tricarboxlico (citrato). Puede convertirse en acetilCoA a nivel del citosol, gracias a la citrato liasa. Induce la activacin de la enzima que controla el proceso de sntesis de cidos grasos, acetilCoA carboxilasa. Una vez que el citrato cede acetilCoA se transforma en oxalacetato que no puede volver a la matriz mitocondrial al no haber transportador por lo que es reducido a malato por medio de la malato deshidrogenasa citoslica y al disponer del transportador de malatocetoglutarato vuelve el malato a la matriz mitocondrial siendo reoxidado a oxalacetato para completar el intercambio. Alternativamente se puede utilizar el malato producido en el citosol para generar NADPH citoslico mediante la enzima mlica. Tras ello el malato se transforma en piruvato y este vuelve a la matriz mitocondrial al disponer de un transportador de piruvato. 91

Grfico Pg. 326 En resumen, cuando el ciclo de Krebs est ralentizado por que la clula tiene mucho ATP pero se sigue produciendo acetilCoA, funciona la citrato sintasa y se genera citrato y el ! de ATP frena a la isocitrato deshidrogenasa no avanzando el ciclo por lo que se acumula el citrato y sale de la mitocondria por medio del transportador citrato. El citrato citoslico es escindido por la citrato liasa en acetilCoA (precursor de cidos grasos) y osalacetato el cual a su vez se transforma en malato por medio de la mlico deshidrogenasa citoplasmtica. Posteriormente el malato pasa a la mitocondria gracias al transportador de malatocetoglutarato (no reconoce a oxalacetato). En la mitocondria y por medio de la mlico deshidrogenasa mitocondrial se regenera de el oxalacetato a partir del malato estando de nuevo disponible para fabricar citrato que puede volver a salir, si las circunstancias energticas celulares no han variado. Cuando baja el nivel de ATP celular, se desbloquea el ciclo de Krebs y detiene la salida de citrato al citoplasma. Para poder regular la biosntesis de AG independientemente de la oxidacin, no es conveniente que el acetilCoA, primer producto del ciclo de Krebs, sea tambin la molcula que ponga en marcha esta otra. Por ello y de forma previa a la actividad del complejo multienzimtico sintetasa de AG, hay una actividad enzimtica, ACETILCoA CARBOXILASA, que cataliza la conversin de acetilCoA en un metabolito especfico de la sntesis de AG, el MALONILCoA, el cual regula el funcionamiento del proceso global. Co2 ACETILCoA MALONILCoA PALMITICO AcetilCoA Corboxilasa Para conseguir formar el acilo de 16 tomos de carbono sern precisas 7 vueltas completas al sistema. 7 Ciclos de condensacin y reduccin producen el grupo saturado palmitoilo de 16 carbonos. La reaccin global para la sntesis de palmitato a partir de acetilCoA se puede separar en 2 partes. Primero la formacin de 7 molculas de malonilCoA: 7 acetilCoA + 7 C02 + 7 ATP 7 malonilCoA + 7 ADP + 7 Pi A continuacin 7 ciclos de condensacin y reduccin: AcetilCoA + 7 malonilCoA + 14 NADPH + 14 H* PALMITATO + 7 CO2 + 8 CoA + 14 NADP + 6 H2O El proceso global es: 8 acetilCoA + 7 ATP + 14 NADPH + 14 H* PALMITATO + 8 CoA + 6 H2O + 7 ADP + 7 Pi + 14 NADP* La biosntesis de AG requiere de acetilCoA y el aporte de energa qumica en 2 formas: el potencial de 92

transferencia de grupo ATP y el poder reductor del NADPH. El ATP une el CO2 al acetilCoA produciendo malonilCoA y el NADPH reduce los dobles enlaces. En los mamferos, el complejo de la cido graso sintetasa se encuentra exclusivamente en el citosol al igual que los enzimas biosintticos de los nucletidos, aminocidos y glucosa. El NADPH citoslico es generado por el enzima mlico (paso de malato a piruvato) o por las reacciones de la ruta de las pentosasfosfato. REGULACIN DE LA BIOSNTESIS DE CIDOS GRASOS. Cuando una clula u organismo tiene combustible ms que suficiente para sus necesidades energticas, el exceso se convierte en AG almacenndose en forma de triacilgliceroles en el tejido adiposo. La reaccin catalizada por la acetilCoA carboxilasa es el paso limitante de la velocidad de sntesis de AG siendo importante en la regulacin. El palmitoilCoA producto principal de la sntesis de Ag acta como retroinhibidor del enzima mientras que el citrato es un activador. La acetilCoA carboxilasa tambin est regulada por la fosforilacin desencadenada por las hormonas glucagn y adrenalina que la inactiva, con lo que disminuye la sntesis de AG. Cuando se produce un aumento en la concentracin de acetilCoA mitocondrial y ATP, se transporta citrato fuera de la mitocondria transformndose tanto en el precursor del acetilCoA citoslico como en una seal para la activacin de la acetilCoA carboxilasa. El complejo de la piruvato deshidrogenasa y la citrato liasa que proporcionan acetilCoA son activados por la insulina. La insulina y glucagn se liberan en respuesta a las concentraciones de glucosa sangunea segn sean altas o bajas, respectivamente. Si la sntesis y el catabolismo de los AG tuviesen lugar a la vez los 2 procesos constituiran un ciclo ftil, malgastando energa. La oxidacin es bloqueada por le malonilCoA que inhibe la carnitina aciltransferasa I. As durante la sntesis de AG la produccin del primer intermedio, malonilCoA, detiene la oxidacin. Grfico Pg 331. BIOSNTESIS DE CIDOS GRASOS DE CADENA LARGA. El palmitato, producto principal del sistema de la cido graso sintasa, es el precursor de otros AG de cadena larga, excepto los esenciales. Se pueden alargar para formar estearato o incluso AG saturados ms largos mediante adiciones de grupos acetilo presentes en retculo endoplsmico y el mitocondria. Grfico Pg. 332. BIOSNTESIS DE CIDOS GRASOS INSATURADOS. El palmitato y esterato son precursores de 2 AG insaturados en animales como son el palmitoleato y oleato. Cada uno de estos AG tiene un solo doble enlace cis en la posicin delta9. El doble enlace se introduce en la 93

cadena por una reaccin oxidativa catalizada por la acil grasoCoA desaturasa requiriendo el flujo electrnico de citocromos y flavoprotenas que estn presentes junto a la enzima en el retculo endoplsmico liso. Los mamferos no pueden sintetizar linoleato y linolenato (esenciales). Debera considerarse al araquidnico como esencial pero puede fabricarse a partir del linoleico. Grfico Pg. 333. BIOSNTESIS DE LA GRASAS. Las grasas ms importantes, los triacilgliceroles, se sintetizan en prcticamente todos los tejidos de mamferos, aunque sobre todo en el hgado y en el tejido adiposo. Son fuente de energa potencial y debido a su hidrofobicidad se deposita en forma de grasa y no agua. Cuando se degrada los triacilgliceroles se suministrar no slo ATP sino que tambin agua. No slo los lpidos en exceso sino tambin los hidratos de carbono e incluso algunos aminocidos sern convertidos en triglicridos. Los AG que se emplean para la sntesis de triglicridos pueden proceder de la dieta o de los biosintetizados en el propio tejido, indistintamente, pero deben ser activados a acilCoA antes de poderse utilizar en dicha biosntesis. El otro sustrato, glicerol, puede proceder de triacilgliceroles hidrolizados, o de intermediarios de la gliclisis, y tambin debe estar como glicerolfosfato para proceder a la sntesis. El equilibrio entre grasa depositada y movilizada est regulado hormonalmente. Si se produce un desequilibrio en el que predomine el depsito de grasa se origina el sobrepeso u obesidad (grave problema sanitario actual) que precisa de una dieta hipocalrica equilibrada y ejercicio fsico aerbico. Grfico Pg. 335. REGULACIN BIOSNTESIS DE GRASAS. Si se ingieren glcidos, grasas o protenas en cantidades superiores a las necesidades energticas, el exceso se almacena en forma de triacilgliceroles. La grasa conservada de este modo puede ser utilizada para obtener energa permitindose al cuerpo soportar periodos de ayuno. La biosntesis y degradacin de triglicridos estn reguladas recprocamente por varias hormonas. La insulina promueve la conversin de glcidos en triglicridos. Las hormonas lipolticas (glucagn, adrenalina, cortisol y hormona del crecimiento) estn implicadas en el catabolismo de los cidos grasos. Los diabticos mal controlados, debido a la falta de secrecin o de accin de la insulina, no slo no pueden utilizar adecuadamente la glucosa sino que tampoco pueden sintetizar Ag a partir de los glcidos o aminocidos. Presentan un aumento en la velocidad de oxidacin de grasas y de formacin de cuerpos cetnicos. La consecuencias es que pierden peso. Grfico Pg. 337. TEMA 27. METABOLISMO DEL COLESTEROL. BIOSNTESIS DEL COLESTEROL Y SU REGULACIN. BIOSNTESIS DEL COLESTEROL 94

El colesterol es el lpido natural ms popular debido a la fuerte correlacin entre los niveles elevados de colesterol en sangre y la incidencia de enfermedades del sistema cardiovascular. El colesterol es un compuesto esencial y fundamental en los tejidos ya que forma parte de las membranas celulares y es el precursor inmediato de varias biomolculas esenciales para la vida como son las hormonas esteroideas y los cidos biliares. Por tanto, todas las clulas precisan de colesterol que puede proceder de la dieta o de su sntesis de novo a partir del acetilCoA, sntesis que tiene lugar en prcticamente todos los tejidos, pero que es especialmente activa en el hgado, corteza suprarrenal, piel, intestino y aorta. Debido a la imposibilidad de oxidar el colesterol a CO2, el organismo lo excreta a la bilis como colesterol libre y el hgado se libera del colesterol por medio de la sntesis de los cidos biliares. El colesterol no se requiere en la dieta ya que el hgado puede sintetizarlo a partir de precursores sencillos. La cantidad de colesterol procedente de la sntesis es superior a la derivada de la dieta por lo que el organismo pone en marcha un complejo sistema de procesos para conseguir que el nivel de colesterol este equilibrado, metabolizando, excretando o ambas cosas, su exceso ya que es una fuente de problemas cardiovasculares. El colesterol se excreta como tal a travs de secreciones y descamaciones celulares de la piel o de las clulas intestinales, de las secreciones pancreticas, gstricas o intestinales o tras su transformacin en cidos biliares. Tambin tras su conversin en hormonas esteroideas y posterior degradacin de stas, puede aparecer en el tracto gastrointestinal u orina. Diariamente, un hombre adulto sintetiza unos 9 mg/Kg de peso. El precursor es el acetilCoA y el comienzo de la ruta de sntesis es exactamente el mismo que se observ en la sntesis de cuerpos cetnicos. Aunque la estructura del colesterol parece compleja, todos sus tomos proviene de un nico precursor: el ACETATO (CH3COO) El colesterol, al igual que los cidos grasos de cadena larga, se va a formar a partir del acetilCoA en 4 fases. En la fase 1 se condensan 3 unidades de acetato para formar un intermedio de 6C, el MEVALONATO. La fase 2 supone la conversin del mevalonato en unidades de isopreno activadas y la fase 3 la polimerizacin de 6 unidades de 5C para formar la estructura lineal de 30C del ESCUALENO. Finalmente en la 4 fase es la ciclacin del escualeno para formar los 4 anillos del ncleo esteroide y una serie de cambios adicionales (oxidaciones, eliminacin migracin de grupos metilo) conduce al producto final, el COLESTEROL. ACETATOMEVALONATOISOPRENO ACTIVADOESCUALENO COLESTEROL 1234 FASE 2. SNTESIS ISOPRENOS. GRFICO Pg 342. Se trasfieren 3 grupos fosfatos de 3 molculas de ATP al mevalonato. En el paso siguiente salen este fosfato y el grupo carboxilo vecino produciendo un doble enlace en el producto de 5C, isopentenil pirofosfato. ste es el primero de los 2 isoprenos activados cruciales en la formacin del colesterol. La isomerizacin del isopentenil pirofosfato produce el 2 isopreno activado, el dimetilalil pirofosfato. Se conbinan 6 de estas unidades para formar el ESCUALENO (30C).

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FASE 3. SNTESIS ECUALENO. GRFICO. Pg 343. El isopentenil pirofosfato y el dimetilalil pirofosfato experimentan una condensacin cabezacola en la que se desplaza un grupo prifosfato formndose una cadena de 10C, el geranio pirofosfato. El geranio pirofosfato experimenta otra condensacin cabezacola con el isopentenil pirfosfato dando el intermedio de 15C, farnesil pirfosfato. Finalmente, se unen 2 molculas de farnesil pirofosfato cabezacabeza obtenindose el ESCUALENO de 30C con eliminacin de ambos grupos pirofosfato. FASE 4. SNTESIS COLESTEROL. GRFICO. Pg 344. Todos los esteroles tienen 4 anillos fusionados (ncleo esteroide) y todos son alcoholes de ah el nombre de esterol. La accin de la escualeno monooxigenasa adiciona un tomo de oxgeno formando un epxido. El NADH reduce el otro tomo de oxgeno a H2O. La ciclacin posterior conduce a la formacin de lanosterol, que contiene los 4 anillos caractersticos del ncleo esteroide. El lanosterol se convierte finalmente en COLESTEROL en una serie de unas 20 reacciones entre las que se incluye la migracin de algunos grupos metilo y la eliminacin de otros. La elucidacin de esta ruta biosinttica, una de las ms complejas que se conocen, fue obra principalmente de Honrad Bloch, Feodor Lyner, John Cornforth y Georges Popjak a finales de los aos cincuenta. El colesterol es el esterol caracterstico de las clulas animales, pero las plantas, hongos y protistas fabrican otros esteroles estrechamente relacionados utilizando la misma ruta sinttica hasta el epxido. En este punto las rutas sintticas divergen dando lugar en las plantas al estigmasterol y ergosterol en hongos. DESTINO DEL COLESTEROL La mayor parte de la sntesis del colesterol en los vertebrados tiene lugar en el hgado. Una pequea fraccin del colesterol all elaborado se incorpora a las membranas de los hepatocitos, pero la mayor parte se exporta en una de las 3 formas siguientes: COLESTEROL BILIAR, CIDOS BILIARES o ESTERES DE COLESTEROL. Los cidos biliares y sus sales sintetizados en el hgado ayudan a la digestin de los lpidos. Los steres de colesterol se forman en el hgado por medio de la accin de la acilCoAcolesterol aciltransferasa (ACAT). Esta enzima cataliza la transferencia de un cido graso desde el CoA al grupo hidroxilo del colesterol, convirtiendo al colesterol en una forma ms hidrofbica. Los steres de colesterol se transportan en lipoprotenas y se secretan a otros tejidos que ulizan colesterol o se almacenan en el hgado. Grfico pg 345.

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Los steres de colesterol entran en las clulas por endocitosis mediada por receptor. Los endosomas se fusionan finalmente con un lisosoma que contiene enzima que hidrolizan los steres de colesterol liberando colesterol y cidos grasos al citosol. La apo B se degrada dando aminocidos y el receptor 4 de LDL se escapa de la degradacin y vuelve a la superficie celular para recaptar nueva LDL (Brown y Goldstein). El colesterol que entra en las clulas por esta ruta puede incorporarse en membranas o ser reesterificado por la ACAT para su almacenamiento. Cuando se acumula mucho colesterol en la clula se reduce la velocidad de sntesis de colestero (disminuye la produccin del receptor LDL). Grfico Pg. 346. Grfico Pg. 347. HIPERCOLESTEROLEMIA. Los niveles de colesterol en sangre dependen de un perfecto equilibrio entre la ingesta y la sntesis de colesterol, por un lado, y su excrecin por otro. Diferentes estudios epidemiolgicos han demostrado una asociacin positiva entre niveles elevados de colesterol total y LDLcolesterol con un mayor riesgo de enfermedad coronario as como una correlacin inversa entre niveles elevados de HDLcolesterol con el riesgo de cardiopata isqumica. El colesterol no es soluble en agua por lo que para circular por los lquidos biolgicos, sangre y linfa, debe hacerlo formando parte de las lipoprotenas. Las 2 tipos de lipoprotenas con mayor presencia de colesterol aunque ste se encuentra principalmente esterificado con cidos grasos son LDL y HDL. Por el contrario las 2 lipoprotenas ricas en triglicridos son: quilomicrones y VLDL. Si aumenta mucho la concentracin de las lipoprotenas puede superarse el nivel de solubilidad admitido y empezar a producirse depsitos de las mismas sobre las paredes de los vasos sanguneos. A estos depsitos, que de forma general son LDL se le denomina ATEROMAS y la patologa que se presenta cuando se generaliza su depsito ATEROSCLEROSIS. Por tanto la hipercolesterolemia produce aumento de la concentracin de LDL en sangre que induce la formacin de ateromas y aterosclerosis y finalmente eventos cardiovasculares en forma de angina de pecho, infarto agudo de miocardio, accidente cerebrovascular, arteriopata perifrica, insuficiencia cardaca y muerte sbita. Un tipo de hipercolesterolemia es la denominada hipercolesterolemia familiar, enfermedad congnita autonmica dominante que se produce por la disfuncin del mecanismo habitual de eliminacin de las LDL de la sangre... Estos pacientes no tienen receptores de LDL o son disfuncionales y no se puede llevar a cabo la endocitosis aumentando los niveles plasmticos de colesterol total y LDLcolesterol junto a la produccin de aterosclerosis. Los heterocigotos respecto a la hipercolesterolemia familiar (1:500 recin nacidos) tienen desde muy jvenes una concentracin media de LDLcolesterol 2 veces o ms de lo normal. Estos pacientes van a sufrir de infartos de miocardios hacia los 35 aos de edad y ms de 1/5 de los infartados en personas > 60 aos sufren esta enfermedad. El 80% de estos pacientes van a sufrir de un evento cardiovascular antes de los 65 aos. An ms grave es la situacin de los homocigotos (1:1000.000 recin nacidos) donde los niveles de 97

LDLcolesterol son 6 veces superior a los normal desde muy jvenes comenzando con infartos a la edad de 2 aos no alcanzando los 20 aos de edad. Hoy da existen frmacos potentes para combatir esta enfermedad y son las estatinas: lovastatina, simvastatina, pravastatina, fluvastatina, atorvastatina, rosuvastatina. Reducen > 60% niveles de LDLColesterol y por tanto los eventos coronarios e incluso la mortalidad global. TEMA 28. DIGESTIN Y ABSORCIN DE LAS PROTENAS DE LA DIETA. ENZIMAS PROTEOLTICAS. METABOLISMO DEL GRUPO AMINO DE LOS AMINOCIDOS. TRANSAMINACIN Y DESAMINACIN OXIDATIVA. ELIMINACIN DEL GRUPO AMINO: CICLO DE LA UREA. INTRODUCCIN. Las protenas aunque potencialmente suministran un aporte energtico similar a los hidratos de carbono, su participacin media energtica es slo del 15% ya que su funcin diettica es ms plstica que energtica. Las protenas aportan material nitrogenado que en forma de aminocidos proteicos se necesita para la sntesis de las protenas caractersticas del cuerpo humano. Por todo ello, las rutas degradativas individuales de los aminocidos son mucho menos activas que la gluclisis y la oxidacin de los cidos grasos. Las protenas deben ser transformadas en sus componentes unitarios, los aminocidos, para ser absorbibles por el intestino. Las protenas que no son degradadas no pueden ser absorbidas y aparecen en las heces, siendo generalmente estas fraccin fecal una pequea proporcin del total de protenas ingeridas. Tambin mencionar que en los alimentos existen aminocidos libres que pueden ser absorbidos sin ninguna modificacin, si bien su aporte nitrogenado es prcticamente insignificante con respecto al de las protenas, excepto en el caso de los aminocidos no proteicos. DIGESTION La gran mayora de compuestos ingeridos sufren reacciones de transformacin que consisten en la conversin de biomolculas de tipo polimrico en otras monomricas ms sencillas que pueden ser transportadas a la sangre por las clulas intestinales. El conjunto de reacciones de degradacin son procesos hidrolticos exergnicos que se producen extracelularmente en la luz del aparato digestivo y se conoce con el nombre de DIGESTIN. La digestin corre a cargo de: ENZIMAS DIGESTIVAS: aceleran la velocidad de degradacin de los materiales polimricos en monomricos. Estas enzimas son sintetizadas en clulas y glndulas especializadas en forma de zimgenos digestivos. COMPONENTES NO ENZIMTICOS: presentes en las secreciones de diferentes glndulas digestivas que suministran los iones y pH adecuados para la actuacin de las enzimas o que ayudan como es la bilis a solubilizar los lpidos para favorecer su digestin y absorcin. PROCESOS FSICOS: masticacin o trituracin de los alimentos y los movimientos de contraccin del tubo digestivo.

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SISTEMA NERVIOSO Y ENDOCRINO: coordinacin entre tiempo de residencia del bolo alimenticio y el aporte de secreciones digestivas en tiempo y cantidad adecuado para llevar a cabo la degradacin de los alimentos. La degradacin de las protenas se lleva a cabo de forma conjunta por una serie de proteasas que catabolizan la ruptura de los enlaces peptdicos mediante el ataque de los mismos por parte de una molcula de agua. Las aminopeptidasas hidrolizan al enlace peptdico por el extremo amino terminal y las carboxipeptidasas por el carboxilo terminal. La entrada de protena en el estmago estimula a la mucosa gstrica que secrete a la hormona GASTRINA, la cual, a su vez estimula la secrecin de cido clorhdrico por las clulas parietales de las glndulas gstricas y pepsingeno por las clulas principales. La degradacin de las protenas comienza en el estmago y corre a cargo de la PEPSINA, endoproteasa cida que es sintetizada en forma de pepsingeno y que se activa por el pH cido del estmago. La acidez del jugo gstrico acta como antisptico eliminando la mayor parte de las bacterias y clulas forneas. La degradacin final de las protenas tiene lugar en el lumen del duodeno, donde actan una serie de endopeptidasas (tripsina, quimotripsina y elastasa) y carboxipeptidasas. Todas ellas son sintetizadas en forma de zimgenos en el pncreas y vertidas a la luz duodenal donde tiene lugar la activacin del tripsingeno mediante una protelisis parcial catalizada por una proteasa especfica, la enteropetidasa, transformando el tripsingeno en tripsina. La tripsina formada cataliza la activacin del resto del tripsingeno asi como el resto de los otros zimgenos, dando lugar a quimotripsina elastasa y carboxipeptidasas. Los cidos nucleicos son degradados durante el proceso digestivo fundamentalmente en el duodeno. La degradacin del ADN y del ARN se lleva a cabo por medio de las nucleasas pancreticas (ADNasas y ARNasas), que dan lugar a la formacin de nucletidos, que son transformados en desoxinuclesidos y nuclesidos por medio de las fosfatasas pancreticas. Estos ltimos a su vez son degradados a bases nitrogenadas y pentosas por medio de las nucleosidas pancreticas. ENZIMA Pepsina Tripsina Quimiotripsina Elastasa Carboxipep A Carboxipep B Aminopeptid PROENZIMA Pepsingeno Tripsingeno Quimiotripsin Proelastasa Procarboxip A Procarboxip B LUGAR SNTESIS Mucosa gstrica Pncreas Pncreas Pncreas Pncreas Pncreas Mucosa duodenal LUGAR ACTIVACIN Estmago Intestino delgado Intestino delgado Intestino delgado Intestino delgado Intestino delgado Intestino delgado ACTIVADOR ClH, Autoactiv. Enterop, Trips Tripsina Tripsina Tripsina Tripsina

ABSORCIN DE PROTENAS. Unas vez digeridas, es necesario que las biomolculas pasen a travs de la membrana luminar del entericito (absorcin). Los aminocidos se absorben por medio de un transporte activo secundario, dependiente de gradiente de sodio (parecido al de la glucosa) ubicado en la membrana luminar enteroctica, sobre todo de duodeno y yeyuno.

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Hay varios tipos de transportadores: para aminocidos cidos, bsicos, neutros, para iminocidos, etc. Una vez dentro del entericito, gracias a un transporte pasivo de la membrana basal, salen a la sangre y una parte llega al hgado, va portal. Sin embargo hay diferencias en la composicin de los aminocidos que circulan por va enteroheptica con respecto a los absorbidos ya que glutamina, glutamato, aspartato y asparragina son rpidamente covertidos en CO2, lactato y amonaco y en otros aminocidos: citrulina, alanina y prolina que son los que se liberan a la sangre. Este proceso tiene connotaciones de proteccin al organismo ya que glutamato y aspartato son neurotransmisores y si hay una alta concentracin afecta al sistema nervioso. Es conocido que personas sensibles a la sobrecarga de glutamato tienen problemas d quemazn, presin facial y dolor en el pecho cuando ingieren grandes cantidades de glutamato: Sindr. Restaurante chino. METABOLISMO DEL GRUPO AMINO DE LOS AMINOCIDOS. Grfico Pg. 356. El metabolismo nitrogenado incluye a protenas y aminocidos, as como a otros muchos compuestos importantes que se pueden considerar derivados de los aminocidos, bases nitrogenadas, porfirinas, etc. El esqueleto carbonado aminoacdico puede servir de punto de partida, dependiendo de las vas particulares de cada caso para la obtencin de cidos grasos, grasas y esteroides o como precursor gluconeognico, ayudando, al aporte necesario de glucosa al cerebro en condiciones de dficit de carbohidratos. Adems de ese papel precursor de los aminocidos, su catabolismo oxidativo es esencial para proporcionar energa al organismo en situaciones de necesidad energtica, como el ayuno. Los esqueletos carbonados de los aminocidos generalmente van a parar al ciclo del cido ctrico y de all se oxidan para producir energa qumica o se canalizan hacia la gluconeognesis. Sin embargo hay un factor importante que distingue la degradacin de aminocidos de los procesos catablicos descritos hasta el momento: cada aminocido contiene un grupo amino. En 1960 Schinke conluy que las protenas se renuevan ms rpidamente de lo que vive la clula. Existe una renovacin proteica intracelular, cuyo equilibrio dinmico de biosntesis/degradacin es de 300 g/da, lo que supone que una energa, aproximadamente del 20% de la correspondiente al metabolismo basal, se debe utilizar para efectuar la biosntesis endergnica compensadora. El papel del catabolismo proteico intracelular puede ser mltiple: contrarrestar la acumulacin de protenas anormales, potencialmente dainas; luchar contra el envejecimiento celular; colaborar al aporte energtico en ocasiones metablicas especiales (ayuno, situacin hipocalrica); finalmente la proteolisis puede constituir un eficaz sistema para controlar la cantidad de protenas relevantes. Para catalizar la degradacin existen proteasas intracelulares (similares a las digestivas) que han sido asociadas a diversas estructuras celulares pero suelen abundar ms en las organelas especializadas en la digestin intracelular, los lisosomas, que son vesculas intracelulares de tamao variable acdicas dotadas de enzimas denominadas CATEPSINAS. Desde el punto de vista hormonal, la degradacin aumenta con niveles elevados de hormonas tiroideas, glucocorticoides, glucagn o la alta ingesta proteica mientras que la insulina acta de modo opuesto. En todo caso, la degradacin intracelular de las protenas conduce a la liberacin de sus aminocidos, componentes que pueden volver a utilizarse en la resntesis proteica, catabolizarse totalmente o transformarse en precursores neoglucognicos para glucosa o cetognicos, hasta acetilCoA.

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Grfico Pg. 359 DESTINO DEL NITRGENO AMNICO. El nitrgeno ocupa el 4 lugar despus del hidrgeno, oxgeno y carbono en la composicin de las clulas vivas. El nitrgeno atmosfrico es abundante pero inerte para su utilizacin en la mayora de procesos bioqumicos. Los aminocidos presentes en las protenas de la dieta son la fuente de la mayor parte de grupos amino. La mayora de los aminocidos se metabolizan en el hgado. Parte del amonaco generado se recicla y utiliza en diversos procesos biosintticos; el exceso se excreta directamente o se convierte en cido rico o urea para su excrecin segn el organismo. Grfico Pg. 360 En estas reacciones encontramos el coenzima piridoxal fosfato (forma funcional de vitamina B6). Los aminocidos glutamato y glutamina juegan papeles especialmente crticos en estas rutas. Los grupos amino de los aminocidos se transfieren en 1 lugar al cetoglutarato del citosol de las clulas hepticas formando glutamato. A continuacin se transporta el glutamato a la mitocondria y slo all se elimina el grupo amino para formar NH4+. El exceso de amonaco generado en la mayor parte de los tejidos se convierte en el nitrgeno amdico de la glutamina transportndolo despus a la mitocondria. En el msculo los grupos amino en exceso se transfieren al piruvato formando alanina que es otra molcula importante en el transporte de grupos amino llevndolos desde el msculo hasta el hgado. Grfico Pg. 361. El piridoxal fosfato (PLP) falicita la transferencia de grupos amino al glutamato. Los grupos amino de los 20 aminocidos que se encuentran en las protenas se eliminan durante la degradacin oxidativa de los aminocidos. Muchos organismos acuticos (peces y anfibios) liberan simplemente amonaco en forma de NH4+ al medio circulante (animales amoniotlicos). La mayora de vertebrados terrestres convierten primero al amonaco en urea (hombre, otros mamferos y tiburones) o cido rico (aves, reptiles) que se eliminan por orina (animales ureotlicos y uricotlicos, respectivamente). La eliminacin de los grupos amino, 1 paso del catabolismo de la mayora de los aminocidos se lleva a cabo por medio de las enzimas denominadas amonotransferasas o transaminasas. En estas reacciones de transaminacin se transfiere el grupo amino al tomo de carbono a del cetoglutarato, dejando el correspondiente cetocido anlogo del aminocido. El efecto de las reacciones de transaminacin es recoger los grupos amino de muchos aminocidos diferentes en forma de uno slo, el Lglutamato. Reaccin de las aminotransferasas (transaminacin). El cetoglutarato es el aceptor del grupo amino. Grfico Pg. 363. 101

El grupo prosttico de las aminotransferasas es el piridoxal fosfato (PLP), forma coenzimtica de la piridoxina o vitamina B6. La medida de las concentraciones de alanina aminotransferasa (ALT = GPT; glutamatopiruvato transaminasa) y aspartato aminotransferasa (AST = GOT: glutamatooxalacetato transaminasa) en el suero constituye un procedimiento diagnstico importante en medicina utilizando como indicador de lesin cardaca y/o heptica y para comprobar la recuperacin de la misma. El amoniaco se forma a partir del glutamato. En el hgado, los grupos amino de muchos aminocidos se eliminan mediante la transaminacin con cetoglutarato formando Lglutamato. Grfico Pg. 364. El glutamato se transporta desde el citosol a la mitocondria en donde experimenta desaminacin oxidativa catalizada por la Lglutamato deshidrogenasa. Esta enzima, que slo se encuentra en la matriz mitocondrial, requiere el NAD+ como aceptor de los equivalentes de reduccin. La accin combinada de las aminotrasferasas y la glutamato deshidrogenasa se conoce con el nombre de tansdesaminacin. La glutamato deshidrogenasa est influenciada por el modulador positivo ADP y por el modulador negativo GTP. Cuando un hepatocito necesita combustible para el ciclo de Krebs aumenta la actividad de la glutamato deshidrogenasa, suministrando cetoglutarato (c. Krebs) y libera NH4+ para su excrecin por orina. La glutamina transporta amonaco al hgado. El amonaco es muy txico para los tejidos animales y debe ser convertido en un compuesto no txico antes de ser exportado de los tejidos extrahepticos a la sangre y de ah al hgado o riones. El glutamato, que es muy importante para el metabolismo de grupos amino intracelulares, es sustituido por Lglutamina para la funcin de transporte. En muchos tejidos, includo el cerebro, el amonaco se combina enzimticamente con el glutamato dando glutamina por accin de la glutamina sintasa. Esta reaccin requiere de ATP y tiene lugar en 2 pasos. La glutamina es un compuesto neutro, no txico que puede pasar fcilmente a travs de las membranas celulares, cosa que no puede hacer el glutamato. En la mayora de animales terrestres la glutamina se transporta por la sangre al hgado. La glutamina da origen al amonaco slo dentro de las mitocondrias hepticas en donde la glutaminasa convierte la glutamina en glutamato y NH4+ La glutamina es una forma principal de transporte de amonaco, normalmente se halla presente en la sangre a concentraciones mucho ms elevadas que otros aminocidos. Adems de su papel de transporte de grupo amino, la glutamina sirve de fuente de grupos amino en diversas reacciones biosintticas. Grfico Pg. 366. La alanina transporta amonaco desde los msculos al hgado. La alanina transporta a los grupos amino al hgado en forma no txica mediante el ciclo de la glucosaalanina. La alanina pasa a la sangre y es transportada al hgado. Al igual que con la glutamina, el exceso de nitrgeno transportado al hgado en forma de alanina se descarga flcilmente como amonaco en la mitocondria. La alanina transfiere su grupo amino al cetoglutarato formando glutamato en el citosol. Parte de este glutamato se transporta a la mitocondria y sobre l actua la glutamato deshidrogenasa liberando NH4+.

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Grfico Pg. 367. El glutamato transfiere en el msculo su grupo amino al piruvato, un producto fcilmente asequible de la gluclisis muscular, por accin de la alanina aminotransferasa. La utilizacin de la alanina para transportar amonaco desde msculos esquelticos muy activos al hgado es otro ejemplo de la economa intrnseca de los organismos vivos. Los msculos esquelticos sometidos a contraccin vigorosa operan de forma anaerbica, produciendo no slo amonaco a partir de la degradacin de protenas sino tambin grandes cantidades de piruvato a partir de la gluclisis. Los dos productos van al hgado: el amonaco para ser convertido en urea para excrecin y el piruvato para formar glucosa y volver a los msculos. Se transporta tomos de carbono del piruvato as como el exceso de amonaco, desde el msculo al hgado en forma de alanina. En el hgado, la alanina forma piruvato, material de partida de la gluconeognesis y libera NH4+ para la sntesis de urea imponindose la carga energtica de la gluconeognesis al hgado y no al msculo de modo que el ATP disponible en el msculo sirve para la contraccin muscular. Resumen: El metabolismo de cualquier aminocido suele inciarse con una desaminacin, es decir la prdida de su nitrgeno amnico y produccin de amonico. Ello puede ocurrir de varias formas: Por medio de las transaminasas o aminotransferasas, cuyo grupo prosttico es le fosfato de piridoxal (vitamina B6). Entre las transaminasas ms abundantes en los tejidos animales destacan la glutamato/oxalacetato transaminasas o GOT (AST = aspartato aminotransferasa) y la glutamato/piruvato transaminasa o GPT (ALT = alanina aminotransferasa). Los niveles de transaminasas estn regulados por va hormonal y por la dieta y el inters clnico radica en que son marcadores de enfermedades cardacas (infarto) y hepticas (hepatitis). Desaminacin oxidativa efectuada por una aminocido deshidrogenasa (ej: la glutamato deshidrogenasa cataliza la transformacin de glutamato en cetoglutarato). Mediante la accin combinada de la glutamato deshidrogenasa con la transaminasa. Conversin entre glutamato y glutamina, catalizada por la glutamina sintetasa o la recproca de glutamina a glutamato catalizada por la glutaminasa. Ciclo de los nucletidos adenlicos. El amonaco es un producto muy txico para todos los tejidos de los mamferos, especialmente para el sistema nervioso. Cuando aumenta la concentracin de amonaco en plasma aparece visin borrosa, torpeza en la expresin oral pudiendo provocar el coma y la muerte del paciente. Para liberar al citosol del amonaco se utiliza la afinacin reductora del cetoglutarato que forma glutamato mediante la glutamato deshidrogenasa y la conversin del glutamato a glutamina por la glutamina sintetasa. Estas 2 enzimas se hallan a concentraciones elevadas en el cerebro, aunque el 2 representa la va ms importante para la eliminacin de amonaco. Los mamferos superiores, como el hombre, son ureotlicos y fabrican urea, que se elimina por orina. En el hombre y muchos organismos superiores, para evitar la acumulacin txica del amonaco libre, existen mecanismos de control en rganos y tejidos, como el msculo, rin, intestino y cerebro. 2 vas: a. 103

glutamato, transformndose en glutamina por medio de la glutamina sintetasa; b. cetoglutarato que pasa a glutamato (glutamato deshidrogenasa). El glutamato vuelve nuevamente a cetoglutarato por accin de las transaminasas que simultneamente convierten el piruvato en alanina y el oxalacetato en aspartato. Grfico Pg. 371. As pues, en estos rganos y tejidos se produce una desaparicin de glutamato, piruvato y oxalacetato, y una produccin de glutamina, aspartato y alanina, que son transportados por la sangre hasta el hgado. All, el aspartato puede entrar directamente en el ciclo de la urea, de donde saldr como fumarato, y la alanina y glutamina retornan a sus formas iniciales titulares de piruvato y glutamato, cediendo el amonaco al ciclo de la urea. Para cerrar todo el proceso, el fumarato mediante los sistemas enzimticos relacionados con el ciclo de Krebs puede convertirse a la forma original tisular de oxalacetato. CICLO DE LA UREA Los seres ureotlicos, como el hombre, eliminan el nitrgeno amnico de los aminocidos en forma de urea por la orina, de modo que el nitrgeno ureico, en condiciones normales representa el 80% del nitrgeno total excretado. La sntesis de urea se realiza en el denominado ciclo de la urea, merced a un conjunto de enzimas que actan coordinadamente y que suelen estar presentes, muchos de ellas, en la mayor parte de los tejidos de los mamferos, aunque el ciclo parece funcionar globalmente como tal tan slo en el hgado. Por tanto, el amonaco en las mitocondrias de los hepatocitos se convierte en urea mediante el CICLO DE LA UREA. Grfico Pg. 372. Esta ruta fue descubierta en 1932 por Hans Krebs y Kart Henseleit. La produccin de urea tiene lugar casi exclusivamente en el hgado y representa el destino de la mayor parte del amonaco all canalizado. Krebs y Henseleit encontraron que la velocidad de formacin de urea a partir del amonaco se aceleraba mucho al aadir cualquiera de los siguientes aminoncidos: ornitina, citrulina y arginina y que el proceso es CICLICO en el que la ornitina juega un papel similar al del oxalacetato en el ciclo de Krebs. Por tanto, los 3 aminocidos que estimulan la formacin de urea a partir de amonaco en el hgado son ornitina, citrulina y arginina siendo los 2 primeros los precursores sucesivos de la arginina. Una molcula de ornitina se combina con una molcula de amonaco y una de CO2 para formar citrulina. Se adiciona un segundo grupo amino a la citrulina formando arginina que es hidrolizada a continuacin dando UREA y regenerando la ornitina. Los animales ureotlicos tienen grandes cantidades del enzima arginasa en el hgado. Este enzima cataliza la hidrlisis irreversible de la arginina en urea y ornitina. La ornitina est entonces a punto para la prxima vuelta del ciclo d ela urea. La urea pasa, a travs de la sangre, a los riones y es excretada por la orina. En la formacin de urea a partir de amonaco intervienen 5 pasos enzimticos. El ciclo de la urea empieza en el interior de las mitocondrias de los hepatocitos si bien 3 pasos tienen lugar en 104

el citosol; por tanto el ciclo abarca 2 compartimentos celulares. El primer grupo amino que entra en el ciclo de la urea proviene del amonaco del interior de la mitocondria resultado de las mltiples rutas antes descritas o del intestino a travs de la vena porta llega al hgado, en donde se produce por oxidacin bacteriana de aminocidos. Cualquiera que sea su origen, el NH4+ generado en las mitocondrias hepticas se utiliza inmediantamente, junto con el HCO3 producido por la respiracin mitocondrial, produciendo carbamoil fosfato en la matriz. Esta reaccin gasta 2 ATP y es catalizada por el enzima mitocondrial, carbamoil fosfato sintetasa I (enzima regulador). El paso siguiente consiste en la transferencia del carbamoil fosfato hasta el grupo lateral del aminocido no proteco ornitina para dar lugar a otro aminocido no proteco, citrulina, mediante la enzima mitocondrial ornitina transcarbamoilasa. La citrulina abandona la mitocondria gracias a un transportador especfico ubicado en la membrana interna mitocondrial. En esta situacin, se incorpora el que ser el segundo grupo amnico de los 2 que forman la urea. El donador directo del mismo es el aspartato, que condensa al grupo carbonilo de la critrulina, necesitando de la participacin de ATP y de la enzima arginosuccinato sintetasa producindose el argininosuccinato que es escindido por la enzima argininosuccinato liasa liberndose fumarato y formndose el aminocido directamente precursor de la urea, la arginina, que entra en el fondo de intermedios del ciclo de Krebs. En muchos seres vivos, el proceso finaliza aqu, pero en los seres ureotlicos, el ciclo suele concluir con la accin de una ltima enzima, la arginasa, que de modo muy irreversible escinde arginina en urea y ornitina entrando en la mitocondria y reiniciando el ciclo. 2 NH4 + HCO3 + 4 ATP + 2H2O CO(NH2)2 + 4 ADP + 4 Pi + 5 H Urea El ciclo de la urea es un proceso oneroso para los organismos ureotlicos, con el consumo de 4 ATP por cada uera eliminada. Respecto al oxalacetato, se puede recuperar del fumarato que sale del ciclo de la urea, va malato, gracias a las enzimas descritas en el ciclo de Krebs, fumarasas y malato deshidrogenasa, con lo que se obtendra un NADH por lo que si consideramos la reconversin del fumarato en oxalacetato, el costo energtico queda notablemente reducido. Grfico Pg. 376. Los ciclos del cido ctrico y de la urea estn conectados. El fumarato producido en la reaccin de la argininasuccinato liasa es tambin un intermedio del ciclo de krebs. El fumarato entra en la mitocondria en donde las actividades combinadas de la fumarasa y de la malato deshidrogenasa transforman el fumarato en oxalacetato. Con la formacin de oxalacetato se obtiene un NADH por lo que si consideramos la reconversin del fumarato en oxalacetato, el costo energtico del ciclo de la urea de 4 ATP queda notablemente reducido (1 ATP). El aspartato, que acta como dador de nitrgeno en la reaccin del ciclo de la urea catalizada por la angininosuccinato sintetasa del citosol, se forma a partir del oxalacetato por transaminacin desde 105

glutamato; el otro producto de esta transaminacin es el cetoglutarato que es otro intermediario del ciclo de Krebs. Dado que las reacciones de los ciclos de la urea y de Krebs estan interconectadas se las han denominado conjuntamente como DOBLE CICLO DE KREBS. Grfico Pg. 377. Grfico Pg. 378. Cuando la dieta es hiperproteica y durante la inanicin severa, en la que la degradacin de la protena muscular suministra gran parte del combustible metablico, aumenta de manera sustancial la produccin de urea. El enzima que regula el proceso en su conjunto es la carbamoil fosfato sintetasa I. Hay que destacar la activacin alostrica ejercida por un metabolito, Nacetilglutamato, que no participa en el ciclo de la urea, pero que con su presencia regula la actividad. Dicho producto resulta de la actuacin de una enzima mitocondrial, Nacetilglutamato sintetasa, que cataliza la reaccin. La enzima necesita, para ser activa, de la presencia de niveles altos de arginina. El ciclo de la urea apareci como una reconversin necesaria de la ruta biosinttica de arginina en respuesta a la necesidad de eliminar los altos niveles de NH4+ y HCO3 y constituye adems una va indirecta de regulacin del equilibrio cidobase y del mantenimiento del pH corporal. Grfico Pg. 378. Si el ciclo no funciona correctamente existe una hiperamoniemia acompaada de citrulinemia, aciduria arginosiccnica y/o hiperargninemia segn los enzimas que fallen. Los individuos afectos congnitamente mueren en las primeras semanas de vida o presentan retraso mental como consecuencia de los altos niveles de amonaco y de la grave repercusin en el desarrollo cerebral. Si se le detecta precozmente, estas enfermedades pueden paliarse e incluso prevenirse mediante la adopcin de dietas especiales bajas en protenas y el uso de frmacos que disminuyen los niveles de amonaco. Tambin puede haber problemas si la carencia congnita es de una enzima que no participa en el ciclo, pero que desarrolla un papel fundamental en la regulacin como la Nacetilglutamato sintasa, cuyo dficit provoca cierta hiperamoniemia. El tratamiento es suministrar al afectado frmacos con sustancias anlogas a la Nacetilglutamato. TEMA 29. DEGRADACIN DEL ESQUELETO CARBONADO DE LOS AMINOCIDOS. AMINOCIDOS CETOGNICOS Y GLUCOGNICOS. DEFECTOS ENZIMTICOS DE INTERS. DESCARBOXILACIN DE LOS AMINOCIDOS. DEGRADACIN ESQUELETO CARBONADO DE LOS AMINOCIDOS. El catabolismo de los esqueletos carbonados de los aminocidos se realiza en cada caso mediante reacciones especficas que desembocan en molculas participantes en el ciclo de Krebs o bien en el metabolismo intermediario (piruvato, acetilCoA). Teniendo en cuenta el carcter renoglucognico de los intermedios del ciclo de Krebs, los aminocidos cuyo producto final nico es un intermedio del ciclo o el piruvato se consideran como NEOGLUCOGENICOS, mientras que la leucina y lisina, al rendir en su degradacin nicamente acetilCoA, se clasifican como aminocidos exclusivamente CETOGNICOS. El resto se clasifican como mixtos, ya que junto a un 106

precursor neoglucognico se obtiene tambin acetilCoA. Hay una ruta catablica diferente para cada aminocido (20 rutas). Las 20 rutas catablicas convergen para formar slo 5 productos que entran en el ciclo de Krebs. De ah los carbonos se pueden desviar hacia la gluconeognesis o cetognesis o se pueden oxidar a CO2 y H2O. Los esqueletos carbonados de 10 aminocidos se degradan total o paricialmente, dando en ltimo trmino acetilCoA y entran directamente en el ciclo de Krebs [ 5 se degradan a acetilCoA va piruvato (alanina, glicina, serina, cisterna, triptfano); los otros 5 se convierten en acetilCoA y/o acetoacetilCoA que se rompe seguidamente para formar acetilCoA (lisina, fenilamina, tirosina, leucina e isoluecina)]. Grfico Pg. 382. El triptfano constituye la ruta ms compleja de todas las vas catablicas de aminocidos ya que parte de l produce acetilCoA por 2 rutas diferentes, una va piruvato y la otra va acetoacetilCoA. 5 aminocidos se convierten en cetoglutarato (prolina, glutamato, glutamina, arginina e histidina), 4 en succinilCoA (metionina, isoleucina, treonina y valina), 2 en fumarato (fenilalanina y tirosina) y 2 en oxalacetato (asparragina y aspartato). Algunos aminocidos aparecen ms de una vez indicando de que partes diferentes de sus esqueletos carbonados tienen destinos diferentes. Algunos aminocidos (los que se degradan a acetoacetilCoA y/o acetilCoA: triptfano, fenilalanina, tirosina, isoleucina, leucina y lisina) pueden dar cuerpos cetnicos en el hgado por conversin del acetoacetilCoA en acetona y hidroxibutirato: Aminocidos CETOGNICOS. La capacidad de formacin de cuerpos cetnicos por los aminocidos cetognicos es evidente en la diabetes no tratada (a partir no slo de cidos grasos sino tambin de estos aminocidos). La degradacin de la leucina, aminocidos exclusivamente cetognico muy abundante en las protenas, contribuye de forma sustancial a la cetosis durante la inanicin. Los aminocidos que se pueden convertir en piruvato, succinilCoA, cetoglutarato, fumarato y oxalacetato se pueden convertir en glucosa y glucgeno. Se denominan Aminocidos GLUCOGNICOS. Los mejores precursores neoglucognicos son alanina y serina. La divisin entre aminocidos cetognicos y glucognicos no es absoluta ya que 4 aminocidos (triptfano, fenilalanina, tirosina e isoleucina) son a la vez glucognicos y cetognicos. Algunos de los aminocidos que se pueden convertir en piruvato, especialmente alanina, cisterna y serina, pueden formar tambin acetoacetato via acetilCoA, especialmente en la inanicin severa y en la diabetes sin tratar. Los aminocidos tambin pueden ceder parte de sus esqueletos para sintetizar algunos productos nitrogenados de gran inters biolgico. As, pueden ser precursores del grupo hemo y de porfirinas, de las bases purnicas y pirimidnicas, de ciertos coenzimas, nucletidos y cidos nucleicos y de numerosos neurotransmisores y hormonas. En concreto, la histamina, sustancia de gran potencia vasodilatadora involucrada en los fenmenos de alergia, procede de la descarboxilacin de la histidina, mientras que la serotonna, otro frecuente neurotransmisor, procede de la descarboxilacin del triptfano. Las catecolaminas (adrenalina, dopamina y noradrenalina) derivan de tirosina. El producto de oxidacin de la fenilalania es la tirosina. Adems, la fenilalania, despus de su hidroxilacin a 107

tirosina, es tambin precursor de las hormonas adrenalina y noradrenalina secretadas por la mdula adrenal y del neutrotransmisor dopamina y melanina que es el pigmento de la piel y del pelo. Descarboxilaciones de inters biolgico en los aminocidos. Grfico Pg. 385. CATABOLISMO DE LOS AMINOCIDOS. El catabolismo de los aminocidos ocurre en los siguientes puntos: El hgado es el rgano ms importante en el catabolismo de los aminocidos ya que en l se produce el 7580% del catabolismo de los aminocidos incluyendo a casi todos los esenciales, pero exceptuando los ramificados. En el msculo esqueltico se metabolizan principalmente los aminocidos ramificados (leucina, isoleucina y valina). En el tejido adiposo, rin y tejido cerebral ocurre lo mismo, pero en menor cuanta. En el intestino, con clulas que poseen una alta velocidad de divisin existe una gran necesidad de nitrgeno y de aminocidos, como el aspartato, precursor de los nucletidos. En el rin, el equilibrio glutamato/glutamina es de gran utilidad para la regulacin del pH urinario. En el cerebro, si no cuantitativamente, si tiene gran inters cualitativo las actuaciones de las descarboxilasas y otras enzimas que a partir de los aminocidos producen neurotransmisores, tales como el GABA o cido aminobutrico (desde glutamato); a la dopamina, noradrenalina y adrenalina (desde tirosina); o la serotonina (desde 5hidroxitriptfano). AMINOACIDOPATAS. Trastornos del catabolismo de algunos aminocidos por defecto de una enzima participante, lo que provoca un bloqueo metablico con mltiples consecuencias: acumulacin de metabolitos situados con anterioridad al bloqueo; intensificacin de rutas metablicas alternativas para poder transformar o eliminar los metabolitos inusuales acumulados; y dficit de metabolitos que deberan estar presentes tras el lugar en el que ocurre el bloqueo. Las consecuencias de estas metabolopatas, enzimopatas o aminoacidopatas son variadas pero producen diversas alteraciones neurolgicas en las etapas madurativas e incluso la muerte. Hiperfenilalaninemias. La tipo I o fenilcetonuria aparece en 1:10.000 recin nacidos y produce oligofrenia por defecto de la fenilalania hidroxilasa. En orina y la sangre de los afectados se acumula fenilalanina cuyo tratamiento es dar dietas libres de fenilalanina (est incluida dentro de los programas de deteccin de metabolopatas en recin nacidos). Albinismo (3/100.000 recin nacidos): defecto de la sntesis de melanina a partir de tirosina y el enzima defectuosa es la tirosinasa originando falta de pigmentacin, cabello blanco y piel rosada. Homocistinuria (0.5/100.000 r.n.): alteracin en la degradacin de metionina por defecto de la enzima cistatina sintasa y origina desarrollo incorrecto de los huesos y retraso mental. Grfico Pg. 388. BIOSNTESIS DE AMINOCIDOS. En el hombre normal existen una sntesis y catabolismo diario de protenas de unos 300 g.

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Una parte de los aminocidos necesarios para la sntesis proteica (75%) se recuperan de los obtenidos en el catabolismo proteico, pero el resto deben suministrarlos la dieta o sintetizarse en nuestras clulas. La mitad de los 20 aminocidos protenicos no son sintetizados (carecemos de genes y de enzimas precisos) en nuestro organismo, y por tanto se deben de tomar en los alimentos: AMINOCIDOS ESENCIALES, que en los adultos son: fenilalanina, triptfano, valina, isoleucina, leucina, lisina, metionina y treonina. A ellos es normal sumar durante el periodo de infancia la arginina y la histidina e incluso la tirosina y la cisterna en nios prematuros con sistemas enzimticos inmaduros. Atendiendo a la naturaleza de sus precursores respectivos, la biosntesis de los aminocidos puede agruparse en familias. Grfico Pg. 390. Aminocidos no esenciales y esenciales para el hombre. NO ESENCIAL Alanina Asparagina Aspartato Cistena Glutamato Glutamina Glicina Prolina Serina Tirosina ESENCIALES Arginina* Histidina* Isoleucina Leucina Lisina Metionina Fenilalania Treonina Triptfano Valina

Esencial en individuos jvenes en crecimiento, pero en los adultos. TEMA 30. METABOLISMO DE LOS NUCLETIDOS PURNICOS Y PIRIMIDNICOS. FORMACIN DE CIDO RICO. INTRODUCCIN Grfico Pg. 393. 1. Los nucletidos son los precursores de los cidos nucleicos ADN y ARN. 2. El ATP y en cierta medida el GTP, son los principales transmisores de energa. 3. Los nucletidos son cofactores NAD, FAD, coenzima A,

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4. Finalmente tanto AMPc como CMPC pueden actuar como segundos mensajeros. La estructura ribonucleotdica purnica se puede alcanzar mediante una sntesis total desde sus adecuados precursores (de novo) o bien a travs de las vas de salvamento o de recuperacin (reciclan las bases libres y los nuclesidos liberados a partir de la ruptura de los cidos nucleicos), a partir del depsito de bases y nuclesidos procedentes de la dieta o del propio catabolismo purnico. Los nucletidos primimidnicos se sintetizan a partir de bases y nuclesidos ya disponibles, pero en este caso la sntesis intracelular de novo se realiza al nivel de base, no en forma de nucletido, como ocurre con los purnicos. En cuanto a los desoxirribonucletidos, se obtienen desde los correspondientes ribonucletidos, mediante una reduccin a nivel de ribosa hasta 2desoxirribosa, catalizada enzimticamente. Los lugares de sntesis ms activa se corresponden con situaciones de multiplicacin o divisin celular y por tanto de gran produccin de los correspondientes ARNmensajero que formarn los nuevos cidos nucleicos. El catabolismo es mayor en los sitios en que hay prididas celulares importantes (piel, mucosa intestinal, sangre, etc). ORIGEN ESTRUCTURA PRIMARIA Grfico Pg. 395. El ncleo purnico consta de 2 heterociclos unidos entre s, con un total de 9 tomos. Las 2 bases purnicas ms habituales de los cidos nucleicos son la ADENINA y la GUANINA, siendo de inters, asi mismo la HIPOXANTINA y la XANTINA. BIOSNTESIS DE NUCLETIDOS PURNICOS. La va de biosntesis de las purinas fue descrita por 1 vez por Buchanan y Grenberg en la dcada de los cincuenta. Existen vas metablicas que pueden reutilizar bases ya preformadas (procedentes de la dieta o del metabolismo) que junto al 5fosforribosil1pirofosfato (PRPP) y mediante enzimas fosforribosil transferasas, catabolizan la formacin de los correspondientes nucletidos... Estas rutas denominadas de salvamento o recuperacin permiten, a partir de adenina y con la enzima adenaina fosforribosil transferasa, sintetizar AMP o cido adenlico, mientras que otra enzima, la hipoxantinaguanina fosforribosil fransferasa permite obtener IMP o GMP a partir, respectivamente, de hipoxantina o de guanina. La falta de esta ltima enzima, codificada por un gen del cromosoma X, es el origen del sndrome de LeschNyhan que cursa con importantes afectaciones neurolgicas y funcionales de los nios afectados. En cualquier caso, la va biosinttica ms importante desde el punto de vista cuantitatio es la de novo, que conduce a la estructura purnica del nucletido cido inosnico, IMP, precursor de AMP, XMP y el GMP. El origen final de los tomos del ncleo purnico vara. Los tomos 4, 5 y 7 proceden de la glicina. Los 2 nitrgenos, en posiciones 3 y 9, de la glutamina, mientras que el N1 tiene su origen en el aspartato. 1 etapa del proceso: sntesis del 5fosforribosil1pirofosfato (PRPP), catalizada por la correspondiente sintetasa que necesita de la hidrlisis de ATP y que es muy importante para la regulacin de la ruta.

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El PRPP da origen tras varios pasos al IMP y este nuclotido precursor purnico puede seguir 2 alternativas: Mediante la adenilsuccinato sintetasa y la adenilsuccinato liasa, el nitrgeno del aspartato se introduce en la molcula aceptora del IMP, que se convierte en AMP, con la ayuda de la energa de hidrlisis de un GTP. Con el concurso de la IMP deshidrogenasa, se transforma el IMP en XMP que, mediante la GMP sintetasa (XMPglutamina amidotransferasa), conduce hasta GMP, necesitndose la energa de hidrlisis de un ATP hasta AMP. Grfico Pg. 398. ORIGEN ESTRUCTURA PIRIMIDNICA. Grfico Pg. 399. El ncleo pirimidnico es un heterociclo con 2 tomos de nitrgeno situados en posiciones 1 y 3. Las bases pirimidnicas ms usuales en los cidos nucleicos son el URACILO, CITOSINA Y TIMINA. El origen de los tomos del ncleo primidnico es menos variado que en el caso del purnico. As, los tomos 1, 4, 5 y 6 proceden del aspartato y el N3 y C2 del carbamoilfosfato, es decir, de glutamina y CO2, respectivamente. BIOSNTESIS DE NUCLETIDOS PIRIMIDNICOS. La principal diferencia entre la biosntesis de nucletidos pirimidnicos y purnicos es que el ncleo primidnico se sintetiza a nivel de base, no de nucletido. La va biosinttica se lleva a cabo en el citoplasma aunque una de sus etapas (dihidrooroato deshidrogenasa) transcurre en el interior de la mitocondria. Se inicia con la formacin de carbamoil fosfato. Tras ella acta la aspartato transcarbamoilasa y otras 2 enzimas ms y se consigue la ciclacin pirimidnica en forma de la base cido ertico, que mediante la ornato fosforribosil transferrasa cataliza la sntesis del nucletido purnico cido orotidlico, cuya descarboxilacin conduce al UMP. El CTP deriva del UTP mediante la CTP sintetasa, reaccin en la que la glutamina proporciona el nitrgeno necesario y el ATP su energa de hidrlisis. Grfico Pg. 401. Alteraciones patolgicas del metabolismo purnico: Aciduria ertica: falla la ornato fosforribosil transferasa o la orotidilato descarboxilasa, o ambas, presentando los afectados cuadros de anemia megaloblstica, retraso mental y excresin de mucho cido ortico. FORMACIN DE DESOXIRRIBONUCLETIDOS. Grfico Pg. 402. Para la sntesis o replicacin del ADN son necesarios los correspondientes desoxirribonucletidos (nucletidos que poseen 2desoxirribosa en lugar de ribosa).

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La reduccin correspondiente se realiza en los nuclesidos difosfato, actuando el NADPH como reductor final, mediante un sistema enzimtico, cuya actividad ribonucletido reductasa o ribonucletido difosfato reductasa hace que una pequea protena participante, la tiorredoxina, acte de reductora. La situacin inicial de la tiorredoxina se recupera mediante una actividad flavoenzimtica tiorredoxina reductasa, cuyo reductor final es el NADPH. Existe un mecanismo alternativo que en vez de utilizar la tiorredoxina se sustituye por la glutarredoxina reductasa. El dATP y el ATP son los principales reguladores. El precursor inmediato del dTMP es el dUMP, catalizda por la timidilato sintasa. En efecto, el dATP bloquea todas las reacciones, mientras que el ATP estimula la reduccin de todos los nucletidos, directamente con los pirimidnicos UDP y CDP hasta dUDP y dCDP, e indirectamente los purnicos. El ATP favorece la obtencin secuencial de dCDP, dUMP y dTTP y el dTTP activa la transformacin de GDP hasta dGDP; el dGTP, a su vez incrementa la conversin de ADP hasta dADP. Todo ello significa la existencia de un fino control del proceso. DEGRADACIN DE LAS PURINAS: FORMACIN DE CIDO RICO. Grfico Pg. 404 La degradacin de los nucletidos purnicos mediante las nucleotidasas y nuclesido fosforilasas correspondientes conduce hasta sus bases constitutivas, salvo en el caso de la adenosina que, mediante la adenosina desaminasa, se transforma en inopina, no existiendo la adenosina fosforilasa. De un modo anlogo, la base guanina se convierte en xantina. Finalmente, es la enzima xantina oxidasa la que acta catalizando la oxidacin de hipoxantina en xantina. La xantina se convierte por medio de la xantina oxidasa en cido rico, producto final, que se excreta por la orina en la mayora de los primates entre ellos el hombre y algunas aves. El alopurinol (frmaco) inhibe a la xantina oxidasa. Grfico Pg. 405. El cido rico es el producto final de excrecin del catabolismo de las purinas en los primates, aves y algunos otros animales. La velocidad de excrecin de cido rico por un ser humano adulto normal est alrededor de 0.6 g/24 horas, formndose a partir de las purinas ingeridas y del recambio de los nucletidos de purina. En otros seres vivos, el cido rico pude continuar la ruta degradativa hasta alantona por medio de la accin de la urato oxidasa (mamferos no primates, ciertos reptiles y moluscos), cido alantoico (peces telesteos) o incluso urea y amonaco (otros peces y anfibios). La va de degradacin de las pirimidinas por lo general produce UREA. Una sobreproduccin de purinas conduce a la produccin de unos niveles elevados de cido rico y GOTA. En la enfermedad de la gota existe hiperuricemia y poca solubilidad de urato monosdico el cual se deposita en forma de cristales en articulaciones y riones. Las articulaciones se inflaman, son dolorosas y se desarrolla artritis (depsito anormal de cristales de urato monosdico). No se sabe cual es la causa de la gota pero se piensa en un defecto gentico enzimtico implicado en el metabolismo de las purinas.

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El alopurinol (frmaco para el tto de la gota), por su similitud estructural con el sustrato, es un inhibidor competitivo de la xantina osidasa reduciendo la produccin de cido rico. Favorece la produccin de hipoxantina y xantina, ms soluble en agua y con menos posibilidad de formar cristales, eliminndose xantina e hipoxantina por orina. La falta de adenosina desaminasa (mutacin en su gen, cromosoma 20) es la responsable de una cierta proporcin de los casos de inmunodeficiencia combinada (T y B) grave (nios burbuja). El tratamiento gnico realizado por 1 vez fue exitoso y por tanto es un nuevo camino teraputico. Xantina: enfermedad hereditaria por falta de xantina oxidasa que impide la formacin de cido rico, por lo que los productos catablicos consisten fundamentalmente en xantina, que se deposita en forma de clculos en el tracto urinario, adems de producir otras complicaciones. Las bases purnicas y pirimidnicas libres que se forman en la degradacin metablica de los nucletidos se recuperan y pueden utilizarse de nuevo para sintetizar nucletidos. La va es distinta de la utilizada para la sntesis de novo de purinas. Una de las vas de recuperacin consiste en una nica reaccin catalizada por la adenosina fosforribosltransferasa en la que la adenina libre reacciona con el PRPP para dar el correspondiente nucletido de adenina (AMP). La guanina libre y la hipoxantina se recuperan de la misma forma utilizando el enzima hipoxantinaguanina fosforribosiltransferasa. La carencia gentica de actividad hipoxantinaguanina fosforribosil transferasa, enfermedad gentica ligada al sexo, o enfermedad de LeschNyham: son nios varones con retraso mental, mala coordinacin, hostiles, tendencias compulsivas autodestructivas (automutilacin de dedos y labios) y se suele expresar a los 2 aos de edad. UNIDAD III: BASE MOLECULAR DE LA INFORMACIN GENTICA. TEMA 31. CIDOS NUCLEICOS. CARACTERSTICAS ESTRUCTURALES DEL ADN. ARN: CARCTERSTICAS, TIPOS Y FUNCIONES. INTRODUCCIN. Los cidos nucleicos (ADN y ARN) van a participar en multitud de funciones del metabolismo celular y son los depositarios moleculares de la informacin gentica celular. Son compuestos ricos en energa que dirigen los procesos metablicos en todas las clulas y adems son seales qumicas y como componentes estructurales de cofactores enzimticos e intermediarios metablicos. La estructura de cada una de las protenas es producto de la informacin programada en la secuencia de nucletidos de los cidos nucleicos de la clula. En el ADN de cada clula se encuentra especificada las secuencias de aminocidos de todas sus protenas y las secuencias de nucletidos de todas sus molculas de ARN. Estructuralmente un nucletido est formado por 3 componentes: base nitrogenada (pirimidina o purina), pentosa (ADN: 2desoxiDribosa; ARN: Dribosa) y grupo fosfato. Bases y pentosas son compuestos heterocclicos unidos por medio de un enlace Nglucosdico y el fosfato est esterificado a la pentosa. Cuando la molcula no contiene el grupo fosfato se denomina NUCLESIDO. Tanto el ADN como el ARN contienen 2 bases purnicas: adenina (A) y guanina (G). El ADN y el ARN contienen tambin 2 bases pirimidnicas: citosina (C) en ambos tipos de cido nucleico y la segunda base es la nica diferencia importante entre las bases del ADN que es timina (T) y del ARN que es uracilo (U).

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Los 4 desoxirribonucletidos del ADN son: dAMP, dGMP, dTMP y dCMP. Los 4 ribonucletidos del ARN son: AMP, GMP, UMP, CMP. Los nucletidos sucesivos del ADN y del ARN estn unidos covalentemente mediante puentes de grupo fosfato. El grupo hidroxilo en 5' de un nucletido est unido al grupo hidroxilo 3' del siguiente nucletido por un enlace fosfodiester. La estructura de uan cadena o hebra simple de cido nucleico se escribe siempre con el extremo 5' a la izquierda y el 3' a la derecha; es decir en la direccin 5' 3' (ejemplo pApCpGpT pACGT). Un cido nucleico de cadena corta (< 50 nucletidos) se denomina oligonucletido. Los cidos nucleicos de mayor longitud se denominan polinucletidos. Las bases se unen entre s por medio de puentes de hidrgeno y permiten la asociacin complementaria de 2 cadenas de cido nucleico. Los patrones de formacin de enlaces de hidrgeno son los definidos por Watson y Crack, segn los cuales A se enlaza especficamente con T (o U) y G se enlaza con C (bases complementarias). Estos 2 tipos de pares de bases predominan en el ADN y el ARN de doble cadena. El apareamiento especfico de las bases complementarias permite la duplicacin de la informacin gentica. ADN y ARN, componentes fundamentales de c. Nucleicos, estn localizados en el ncleo de la clula eucariota. Tambin existe ADN en mitocondrias y ARN en mitocondrias, ribosomas y citosol. Adems ambos tipos de c. Nucleicos forman parte de procariotas y virus. Las molculas de ARN sirven como portadoras de la informacin gentica en algunos virus y en la clula el ARN puede llevar a cabo funciones de transmisor temporal de parte de la informacin gentica (ARN mensajero, ARNMm) o bien participar en el proceso de sntesis de protenas o como componentes esenciales de parte de la maquinaria biosinttica: ARN de transferencia (ARNt) y ARN ribosmico (ARNr). TIPOS DE CIDOS NUCLEICOS. El descubrimiento de la estructura del ADN a cargo de James Watson y Francis Crack en 1953 fue un acontecimiento trascendental para la ciencia que supuso el inicio de la era moderna de la bioqumica gentica: la estructura en doble hlice del ADN. La teora gentica aport el concepto de que la codificacin corre a cargo de los genes. La bioqumica desvel la composicin del ADN. La unidad fundamental de informacin en los sistemas vivos es el GEN y el ADN es el nico componente cromosmico dotado de informacin gentica en las clulas vivas. Un gen se define como aquel segmento de ADN (o ARN en algunos casos) que codifica la informacin necesaria para la sntesis de un producto biolgico final (protena o ARN). Una clula tiene muchos miles de genes (< 100.000 genes9 y por tanto las molculas de ADN tienden a ser muy largas. ARN ribosomico (ARNr): componentes estructurales de los ribosomas, son de gran tamao y llevan a cabo la sntesis de protenas. ARN mensajeros (ARNm): cidos nucleicos que transportan la informacin desde un gen o unos pocos genes hasta el ribosoma, donde se sintetizan las protenas codificadas por dichos genes. ARN de transferencia (ARNt): molculas adaptadoras que traducen con fidelidad la informacin contenida en el ARNm en secuencias especficas de aminocidos. Gracias al descubrimiento del ARNm y del ARNt y a la resolucin del cdigo gentico se pudo comprender de qu modo se converta la informacin contenida en el ADN en protenas funcionales. 3 pasos fundamentales utilizacin celular de la informacin gentica:

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REPLICACIN: copia del ADN paterno para formar molculas d eADN hijas con idntica secuencia de nucletidos. TRANSCRIPCIN: proceso mediante el cual parte del mensaje gentico del ADN se copia de manera precisa en forma de ARN. TRADUCCIN: por la cual el mensaje gentico codificado en el ARNm se traduce en los ribosomas en forma de protena caracterizada por una secuencia de aminocidos especfica. Grfico Pg. 413. Hoy da se est desarrollando a partir de estos conocimientos la base de la tecnologa del ADN recombinante por la cual es posible el diagnstico prenatal de enfermedades genticas, produccin de una gran variedad de agentes farmacuticos, secuenciacin de la totalidad del genoma humano, introduccin de caractersticas nuevas en bacterias, plantas y animales con aplicaciones agrcolas e industriales, terapia gnica humana, etc.. La informacin gentica de todas las clulas est almacenada bajo la forma de ADN que forma el genoma celular. La estructura del ADN permite llevar a cabo 2 funciones bsicas: Portar la informacin para la sntesis de la diferentes protenas celulares que van a determinar el fenotipo celular. asegurar la continuidad gentica entre generaciones, mediante la capacidad de replicacin o copia de la informacin que se transmite a la descendencia. La informacin codificada en el ADN bajo secuencias de 4 bases nitrogenadas necesita ser copiada a otro tipo de molculas muy parecidas, constituidas por ARN. CARACTERSTICAS ESTRUCTURALES DEL ADN CADENA POLINUCLETIDA. Grfico Pg. 415. La estructura qumica base de las molculas de los cidos nucleicos es una cadena polinucletida formada por la repeticin de unidades (nucletidos) unidas por enlaces tpicos: enlaces fosfodister entre la posicin 5' de un nucletido y la 3' del nucletido adyacente. La sucesin de bases nitrogenadas forma la denominada secuencia. Las cadenas polinucletidas de ADN y ARN son muy similares, ya que slo se diferencian en que la pentosa es 2desoxiDribosa en el ADN y ribosa en le ADN y en el que el ADN utiliza la base timina y el ARN el uracilo. Las cadenas de ADN son ms estables que las de ARN. ESTRUCTURA DEL ADN. La estructura primaria de un cido nucleico es su estructura covalente y su secuencia de nucletidos. Cualquier estructura regular y estable adoptada por secuncia de nucletidos. Cualquier estructura regular y estable adoptada por algunos o todos los nucletidos de un cido nucleico puede ser considerada secundaria. En general se denomina estructura terciaria al plegamiento complejo de grandes cromosomas en la cromatina eucaritica.

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Diferentes tipos de estudios han puesto de manifiesto que la mayor parte de las molculas de ADN son estructuras largas, flexibles y de aspecto filamentoso en disolucin, que pueden adoptar estructuras ms empaquetadas al interactuar con otros componentes en el interior de las clulas. La forma predominante de las molculas de ADN es una estructura de doble hlice formada por 2 cadenas polinucleotdas que se enrollan helicoidalmente, una alrededor de la otra, sobre un eje imaginario central. Las bases purnicas y pirimidnicas de ambas cadenas estn apiladas en el interior de la doble hlice. Todas las bases de cada una de las cadenas interactan por medio de enlaces por puentes de hidrgeno, siendo 0.34nm la separacin entre cada par. La hlice tiene un enrollamiento con giro a la derecha dando una vuelta completa cada 3.6 nm (cada 10 pares de bases). Grfico Pg. 417. La estructura helicoidal presenta 2 surcos de diferentes anchura denominadas surco mayor y menor. Se forman 3 enlaces de hidrgeno entre G y C mientras que solamente se pueden formar 2 entre A y T (reglas de Chargaff). Watson y Crack postularon un modelo tridimensional para la estructura del ADN. Las 2 cadenas de la doble hlice tiene secuencias complementarias, ya que slo estn permitidos los apareamientos especficos entre bases: AT y GC. La caracterstica fundamental del modelo es la complementariedad de las 2 hebras de ADN. El proceso de copia de la estructura (replicacin) ocurre tras la separacin de las 2 hebras y la sntesis de una hebra complementaria para cada una de ellas mediante la secuencia de apareamiento. La forma de doble hlice descrita es la B pero existen la forma A y Z (ms rara). TAMAO Y FORMA DE LAS MOLCULAS ADN. Grfico Pg. 418. Las molculas de ADN presentan tamaos diferentes, segn su origen, que van desde los miles de pares de bases (las ms pequeas) hasta millones de pares de bases. El tamao del ADN se expresa en kilobases (1kb = 1000 pares de bases). El ADN en el interior de la clula debe de encontrarse bajo formas que permitan un mayor empaquetamiento. En cuanto a la forma, se conocen molculas de ADN lineal (cromosomas de clulas eucariotas), ADN circular (cromosomas bacterianos, virus, etc) pero la gran mayora del ADN es bicatenario a excepcin de los genomas de determinados virus que es circular monocatenario. DINMICA DEL ADN: DESNATURALIZACIN Y RENATURALIZACIN. El ADN funciona correctamente como un depositario de la informacin gentica gracias en parte a su estabilidad inherente. Las transformaciones qumicas que tienen lugar en su estructura son generalmente muy lentas en ausencia de un catalizador enzimtico. Procesos como la carcinognesis y el envejecimiento pueden estar ntimamente ligados a la acumulacin lenta de alteraciones irreversibles en el ADN. Adems de proporcionarnos informacin sobre procesos biolgicos, el conocimiento de la qumica de los cidos nucleicos nos ha dotado de mitologas de aplicacin en biologa molecular, medicina y medicina legal. 116

Debido a que las uniones entre las 2 cadenas del ADN son dbiles (enlaces por puentes de hidrgeno e interacciones entre bases) es posible separar parcial o totalmente ambas cadenas con un aporte bajo de energa. Las disoluciones de ADN cuidadosamente aislado y en estado nativo son muy viscosas a pH 7 y temperatura ambiente (20 25C). La separacin total de las cadenas de un ADN bicatenario en disolucin recibe el nombre de DESNATURALIZACIN y sta se puede conseguir fcilmente elevando el pH de la disolucin o por calentamiento de la misma (> 80 90C). La desnaturalizacin no rompe ningn enlace covalente del ADN. La desnaturalizacin conlleva la rotura de enlaces de hidrgeno entre las bases apareadas y la rotura de las interacciones hidrofbicas. Como consecuencia de ello la doble hlice se desenrolla y da lugar a 2 hebras simples separadas uno de otra. La temperatura de desnaturalizacin depende de cada especie de ADN y va a depender del contenido G + C (son ms estables que los A + T) ya que al poseer 3 enlaces por puentres de hidrgeno necesita ms temperatura. La renaturalizacin del ADN es un proceso rpido si es de un solo paso y algo ms lento en el de 2 pasos, cuando la temperatura y el pH retornan a valores situados dentro del margen biolgico. Los segmentos desenrollados de las 2 hebras vuelven a enrollarse, es decir, hibridarse o templarse (anneal) para dar lugar al dplex intacto. El proceso de desnaturalizacin es reversible, por lo que al restablecer las condiciones normales las cadenas complementarias vuelven a aparearse para formar la estructura bicatenaria, mediante el paso de renaturalizacin. Tambin se pueden separar los ARN de doble cadena pero las molculas dplex de ARN son ms estables que las molculas dplex de ADN y necesitarn > 20 C para desnaturalizarse con respecto al ADN. Si las molculas dplex de ADN aisladas a partir de clulas humanas se desnaturalizan completamente por accin del calor y a continuacin se mezclan y mantienen a 65C durante muchas horas, una gran parte del ADN se renaturalizar o hibridar (anneal) en doble hebra a cadenas complementarias. La hibridacin del ADN de origen diferente es la base de un conjunto de poderosas tcnicas, esenciales para la prctica moderna de la gentica molecular. Gracias a estas tcnicas de hibridacin es posible actualmente la exacta identificacin de un individuo (cabello) o predecir ciertas enfermedades. Las purinas y pirimidinas junto a los nucletidos de los que forman parte sufren una serie de reacciones (desaminacin, radiaciones UV, ionizantes, frmacos, etc) en las que se producen alteraciones espontneas de su estructura covalente. Las alteraciones en la estructura del ADN que dan lugar a variaciones permanentes en la informacin gentica codificada por la molcula se denominan MUTACIONES. Es posible que la fuente ms importante de alteraciones mutagnicas en el ADN sean los procesos oxidativos (radicales libres, in superxido, etc) y disponemos de catalasas o superxido dismutasa. La propiedad ms importante del ADN es su secuencia de nucletidos (identificar el GENOMA HUMANO). La secuenciacin de nucletidos se basa en mtodos electroforticos que permiten la separacin de hebras de ADN que difieren en nicamente un nucletido. La electroforesis (archilamida o agarosa) del ADN es similar a las de las protenas. Grfico Pg. 422. EMPAQUETAMIENTO DEL ADN EN LOS CROMOSOMAS. 117

Las molculas del ADN que contienen los genes celulares son las mayores macromolculas. Normalmente se encuentran empaquetadas en estructuras denominadas CROMOSOMAS. La mayor parte de las bacterias y los virus tienen un nico cromosoma; los organismos eucariticos suelen tener muchos de ellos. Un cromosoma suele contener normalmente miles de genes individuales. El conjunto de todos ellos y del ADN intergnico de todos los cromosomas de una clula se conoce como GENOMA CELULAR. Cromosoma: molcula de cido nucleico que acta como depositaria de la informacin gentica en un virus, bacteria, orgnulo o clula eucariota. Se localiza en el ncleo durante el periodo inmediatamente anterior a la mitosis y si la clula eucaritica no est en proceso de divisin, el material cromosmico, denominado CROMATINA, es amorfo y aparece disperso y desordenado por la totalidad del ncleo. La cromatina est formada por ADN y protenas en cantidades aproximadamente equivalente, siendo las histonas las protenas ms abundantes en la cromatina y una pequea cantidad de ARN. Las histanos son protenas de bajo peso molecular, ricas en aminocidos bsicos (arginina y lisina), que empaquetan y ordenan el ADN en unidades estructurales denominadas NUCLEOSOMAS (unidad fundamental de organizacin). Una porcin del ADN, de aproximadamente 200 pb se enrolla dando lugar a la formacin del nucleosoma. El plegamiento empaqueta el ADN unas 50 veces. El grado de compactacin final del cromosoma es de aproximadamente 10.000 veces. Grfico Pg. 424. Adems del gran cromosoma de ADN circular que se encuentra en el ncleo, muchas especies de bacterias contienen 1 o ms molculas pequeas de ADN circular que se encuentran libre en el citosol denominados plsmidos. Los plsmidos constituyen modelos de utilidad para el estudio de muchos procesos del metabolismo del ADN. La longitud de contorno total de todo el ADN de una nica clula humana es de aproximadamente 2 metros, si el cuerpo contiene aproximadamente 1014 clulas, se encuentra alrededor de 2 x 1011 Km (distancia al sol 1,5 x 1014 Km o circunferencia de la tierra 4 x 104 Km). Por ello es necesario un nivel de organizacin y compactacin extraordinaria para conseguir empaquetar el ADN de las clulas. La estructura de la cromatina es variable (en forma de fibras delgadas o empaquetados como los cromosomas durante la metafase). El n diploide de cromosomas depende de cada especie (humano: 46 (23 pares); bacterias: 1; mosca de la fruta:8; gato: 38; rata: 42; conejo: 44; gallina: 78). Cada cromosoma tiene unos determinados genes. Adems del ADN del ncleo existe ADN mitocondrial (0.1% del total). Un gen es aquella parte de un cromosoma que determina o afecta a un solo carcter o fenotipo (enzima, protena o polipptido) como por ejemplo, el color de los ojos. Sin embargo, no todos los genes se expresan finalmente en forma de cadena polipiptidica. Algunos genes codifican diferentes clases de ARN, como ARNt y ARNr. Los genes que codifican para polipptidos o ARN se conocen como GENES ESTRUCTURALES: codifican la secuencia primaria de algn producto gnico final, como una enzima o un ARN estable. El ADN contiene tambin otros segmentos o secuencias que tiene una funcin puramente REGULADORA. Cada aminocido de una cadena polipeptdica est codificada por una secuencia de 3 nucletidos consecutivos en una sola cadena de ADN.

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Sin embargo no siempre es as ya que muchos genes se hallan interrumpidos por segmentos de ADN no codificantes denominados INTRONES, dando como resultado genes considerablemente ms largos. Los segmentos del ADN codificantes se denomina EXONES. Grfico Pg. 427. El ADN celular debe estar altamente compactado para poder caber dentro de la clula. El empaquetamiento debe permitir el acceso a la informacin contenida en el ADN y hacer posible los procesos de replicacin y transcripcin. Para ello se necesita del superenrollamiento (enrollar algo que ya est enrollado). El superenrollamiento es una caracterstica intrnseca e importante de la estructura terciaria del ADN. Se estima que en el genoma humano existen 100.000 genes. CARACTERSTICAS ESTRUCTURALES DEL ARN Las molculas de ARN son polinucletidos semejantes al ADN pero en los que el azcar es ribosa en lugar de desoxirribosa y de uracilo en lugar de timina. Las molculas de ARN suelen tener monocatenarias y de tamao mucho menor que las molculas de ADN. El ADN se localiza en el ncleo mientras que el ARN se localiza en el ncleo y citoplasma. El ARN, el segunto tipo principal de cido nucleico de la clula, acta de intermedio en la conversin de la informacin gentica en protenas funcionales. El ARN transporta la informacin gentica por medio del ARNm, desde el ADN hacia la maquinaria biosinttica del ribosoma, lugar en el cual los mensajeros actan como moldes que sirven para especificar las secuencias de aminocidos de las cadenas polipeptdicas. El proceso de formacin del ARNm sobre un molde de ADN se conoce con el nombre de TRANSCRIPCIN. Si nicamente contiene informacin para la sntesis de un polipptido, el ARNm es monocistrnico (son los habituales en las clulas eucariticas) y si codifica para 2 o ms polipptidos diferentes, el ARNm es policistrnico. Una cadena polipeptdica de 100 residuos aminocidos requiere una secuencia codificante de ARN de al menos 300 nucletidos, puesto que cada aminocido est codificado por un triplete de nucletidos. El ARNm es slo una de las varias clases de ARN celulares. Los ARN de transferencia actan como molculas adaptadoras en la sntesis de protenas; unidos covalentemente a un aminocido por un extremo, se aparean por el otro extremo con el ARNm, de tal modo que los aminocidos se unen formando cadenas con la secuencia correcta. Los ARN ribosmicos son componentes estructurales de los ribosomas.. En las clulas, el ARN es ms abundante que el ADN, ocupando el ARNr alrededor del 80% del total, seguido del ARNt con un 15%. El ARNm representa alrededor del 5% del ARN celular. Los ARN tienen una funcin relacionada con el proceso de sntesis de protenas, sinj embargo se conocen molculas de ARN que representan por s misma actividad cataltica semejante a las enzimas, por lo que se conoce con el nombre de RIBOZIMAS. Independientemente de la clase de ARN que se sintetice, el producto de la transcripcin es siempre una cadena simple de ARN. La naturaleza nonohebra de estas molculas no implica que su estructura sea al azar. El ARN puede formar pares de bases de hebras complementarias de ARN o ADN. Las reglas estndar de apareamiento son idnticas que las de ADN: GC y AU. 119

FLUJO DE INFORMACIN EN LOS SERES VIVOS. En todos los seres vivos, la informacin alamacenada en el ADN sirve para la sntesis de protenas especficas, existiendo un flujo de informacin que va desde las secuencias codificadas del ADN a las secuencias protecas, a travs de la sntesis de molculas intermediarias del ARNm, portadoras de la informacin de una parte reducida del genoma. Este camino se puede considerar dividido en 2 etapas: TRANSCRIPCIN Y TRADUCCIN. TRANSCRIPCIN: informacin de una determinada parte del genoma, escrita en una secuencia de 4 bases en el ADN que es copiada bajo la forma de una molcula de un material muy similar, el ARNm, que presenta una secuencia de bases similar a la copiada (con la expcecin de U en lugar de T). TRADUCCIN: con esta copia la informacin escrita bajo la forma de secuencia de bases en el ARNm va a servir para la sntesis de una cadena polipetdica en la que el orden o secuencia de aminocidos dentro de la misma refleja la sucesin de bases en la molcula de mensajero. Grfico Pg. 430 La lectura de secuencia de bases se realiza en conjuntos de 3 bases o unidades de codificacin (CODONES), denominndose cdigo gentico a la relacin existente entre los diferentes codones y los 20 aminocidos proteicos. Las transmisin de la informacin gentica entre las diversas generaciones celulares requiere de la duplicacin del material gentico por medio de un proceso de copiado o REPLICACIN de ADN. Por tanto, los procesos de replicacin, transcripcin y traduccin son fundamentales para el mantenimiento del flujo de la informacin gentica. La informacin gentica de muchos virus est tambin codificada por ADN y sigue mecanismos de expresin similares a los utilizados por el ADN celular. Sin embargo, existen virus en los que la informacin est codificada por un genoma de ARN, que sirve para la sntesis de protena y para su replicacin sin el concurso de ADN, transmitindose la informacin de ARN a ARN (replicacin de ARN). Tambin existen virus ARN en los que la va de flujo de informacin gentica incluyen la sntesis de ADN a partir de ARN (transcripcin inversa). Grfico Pg. 432. Aunque la informacin gentica se encuentra almacenada en el ADN, no todas las secuencias de ADN son codificantes. Una secuencia codificante est formada por una sucesin de nucletidos, que ledos de 3 en 3 y de manera no solapada (cada base forma parte de un solo triplete) codifican para una secuencia polipeptdica, incluyendo adems las seales de iniciacin y terminacin en ambos extremos. En el ADN humano, slo una pequea fraccin del ADN total es codificante. Parte del ADN no codificante est formado por regiones reguladores que flaquean las regiones codificantes y por secuencias intercaladas que interrumpen las regiones codificantes. Las secuencias ms altamente repetidas se denominan ADN satlite y se han asociado con 2 estructuras importantes de los cromosomas: centrmero y los telmeros (situados en los extremos de los cromosomas, ayudan a estabilizarse). Una caracterstica de muchas secuencias diana es la de poseer elementos de simetra como ocurre con las 120

secuencias palindrmicas (se leen igual en un sentido que en el opuesto). TEMA 32. REPLICACIN DEL ADN: ADN POLIMERASA. TRANSCRIPCIN: ARN POLIMERASA. ETAPAS DE LA TRANSCRIPCIN. MADURACIN DEL ARN. CARACTERSTICAS GENERALES DE LOS PROCESOS DE SNTESIS DE CIDOS NUCLEICOS. El ADN ocupa un lugar central y nico entre las macromolculas biolgicas. Las secuencias de nucletidos del ADN describen en ltimo trmino la estructura primaria de todos los ARN y protenas celulares. Se puede utilizar el trmino de metabolismo del ADN para describir el proceso mediante el cual se hacen copias fieles de las molculas de ADN (REPLICACIN) junto con los procesos de afectan a la estructura de la informacin contenida (REPARACIN y RECOMBINACIN). El ADN es la nica molcula para la que existen mecanismos de reparacin. Los procesos mediante los que se reordenan la informacin gentica se denomina RECOMBINACIN. La mayora de procesos de recombinacin son conservadores en le sentido de que no se pierde ni gana informacin gentica. La replicacin tiene como misin la transmisin de la informacin gentica de clula a clula, de generacin a generacin, mientras que la transcripcin es la 1 etapa en el camino de la obtencin de la informacin gentica del ADN, lo que va a conferir a cada clula su propia identidad, manifestada en la sntesis de un conjunto de protenas tpicas responsables del fenotipo celular. La replicacin es un proceso previo a la divisin por el que las molculas de ADN de una clula se duplican para formar nuevas molculas iguales a las preexistentes, que se van a repartir equitativa entre cada una de las 2 clulas hijas formadas en el proceso de divisin celular. Este proceso se produce tan slo una vez para una clula en cuestin y afecta a todo el ADN de la misma. La transcripcin es un proceso de sntesis de molculas de ARN que consiste en el copiado de la secuencia de 1 de las 2 cadenas de una zona concreta del ADN. Es un proceso de copia parcial y reiterativa del ADN, a diferencia de la replicacin en la que se copian integramente y de una sola vez las 2 cadenas del mismo. Desde el punto de vista qumico, ambos son procesos de sntesis de cadenas polinucletidas a partir de desoxinuclesidos trifosfato (dNTP), en el caso de replicacin, o de nuclesidos trifosfato (NTP) en el de la transcripcin. A parte de los 2 procesos mayoritarios de sntesis de cidos nucleicos existen otros minoritarios: transcripcin inversa y replicacin de ARN. Las enzimas que llevan a cabo la sntesis de cidos nucleicos (ADN plimerasas y ARN polimerasas) slo son capaces de hacerlo en direccin 5' 3'. Las cadenas de ADN deben de estar desapareadas, en forma parcialmente monocatenaria, para que sus bases pueden aparearse de manera especfica con las bases de los nucletidos que van a ser polimerizados. La degradacin dirigida del ADN se lleva a cabo por enzimas denominadas NUCLEASAS O DNasas son especficos para el ADN. Cada clula contiene diversas nucleasas diferentes que se reparten en 2 clases amplias: exonucleasas y endonucleasas. Las exonucleasas degradan ADN desde un extremo de la molcula (rompen enlaces terminales, liberando mononucletidos). Las endonucleasas actan en el interior de los cidos nucleicos reducindolos a fragmentos cada vez ms pequeos (rompen enlaces internos). Existen tambin unas cuantas clases importantes de endonucleasas que cortan en secuencias nucleotdicas especficas (ej: endonucleasas de restriccin). 121

Una diferencia importante en el mecanismo de sntesis de los 2 tipos de cidos nucleicos es que el proceso de transcripcin la sntesis de ARN puede comenzar mediante la unin de 2 NTP, mientras que los enzimas que sintetizan a ADN slo puedn unir dNTP al hidroxilo del extremo 3' de una cadena preexistente de cido nucleico, denominada CEBADOR. Debido a que al apareamiento entre cadenas slo puede ser antiparalelo, la cadena molde es leda o recorrida por las enzimas en la direccin 3'5'. REPLICACIN DEL ADN La replicacin es un proceso muy complejo que se desarrolla con gran fidelidad ya que en l se lleva a cabo la copia de millones de pares de bases con una tasa de error prcticamente insignificante. La replicacin del ADN es semiconservadora. Si cada cadena de ADN acta de molde para la sntesis de una nueva cadena, se producirn 2 molculas de ADN nuevas cada una con una cadena nueva y una vieja. Este proceso se denomina replicacin semiconservadora (hiptesis propuesta por Watson y Crack). La replicacin del ADN bacteriano es un proceso altamente coordinado en el que las cadenas parenterales se desarrollan y replican simultneamente, siendo bidireccional. Comienza en una zona concreta del cromosoma circular, denominada origen de replicacin y se extiende a partir de este punto en direcciones opuestas (replicacin bidireccional), mediante la actuacin de 2 equipos de maquinaria replicativa (replisomas), cada uno de los cuales se encarga de la sntesis de la mitad del cromosoma. La sntesis del ADN transcurre en direccin 5'3' y es semidiscontinua. Una cadena nueva de ADN siempre se sintetiza en la direccin 5'3'. Debido a que las 2 cadenas de ADN son antiparalelas, la cadena que acta de molde se lee desde su extremo 3' al 5'. Ms del 90% de la actividad ADN polimerasa de los extractios de E. Coli se debe a la ADN polimerasa I. En los aos 70 se identificaron a la ADN polimerasa II y III. La II tiene una funcin de reparacin de ADN muy especializada y la III es el enzima primario de replicacin en E. Coli. La I cumple importantes funciones de limpieza durante la replicacin, recombinacin y reparacin. 2 requisitos centrales para la polimerizacin del ADN: Todas las ADN polimerasas requiere de un molde (reglas apareamiento de bases en donde hay una G en el molde se aade una C). Se requiere de un cebador. Un cebador es un segmento de cadena nueva (complementario al molde) con un grupo 3' hidroxilo al que se pueden aadir nucletidos. Despus de la adicin de un nucletido a una cadena creciente de ADN, la ADN polimerasa se ha de disociar o bien trasladarse a lo largo del molde y aadir otro nucletido. La ADN polimerasa adems de su actividad polimerizante 5'3' posee una actividad exonucleasa 3' 5' (actividad correctora que asegura el copiado sin errores de las largas cadenas polinucleotdicas). En los organismos eucariotas, la replicacin del ADN nuclear es ms compleja que en las bacterias (mayor n de pares de bases y de ms longitud, la organizacin de la fibra de cromatina es ms compleja). La sntesis del ADN eucariota tiene lugar durante una fase concreta del ciclo celular (la fase S) en la que se replican los diferentes cromosomas nucleares y en la que se produce una gran sntesis de protenas histonas (necesarias para regenerar la cromatina). Maquinaria de replicacin del ADN eucariota: ADN POLIMERASA (, , , , ). Otras enzimas (cebadora, 122

ADN ligasa topoisomerasa, etc). En las bacterias, adems de la molcula de ADN principal, existen pequeas molculas de ADN circular, denominadas plsmidos, que se replican, simultneamente o no, con el cromosoma principal, y por un mecanismo similar. En las clulas eucariticas, tiene tambin lugar la replicacin del ADN mitocondrial por medio de la maquinaria mitocondrial que es diferente a la existencia en el ncleo celular. Grfico Pg. 440. LESIONES DEL ADN. MUTACIONES. Una clula generalmente slo tiene 1 2 conjuntos de ADN genmico y mientras que las protenas y las molculas de ARN pueden ser reemplazadas rpidamente en caso de resultar daadas utilizando informacin codificada en le ADN, las molculas de ADN son irreemplazables. Las molculas de ADN y la informacin gentica se va transmitiendo de generacin con muy pocos cambios. Ello se debe por una parte a que el proceso de replicacin se realiza de una manera muy precisa y por otra a que las molculas de ADN son metablicamente estables. Sin embargo, las molculas de ADN no son invulnerables y estn sujetas a una serie de ataques tanto por agentes fsicos como qumicos, exgenos y endgenos, que producen lesiones o alteraciones de las estructura del mismo. Gran n de estas lesiones pueden ser detectadas y corregidas por los sistemas de reparacin del ADN presentes en cada clula. Las que no se reparan, pueden dar lugar a errores en la replicacin, originando un cambio permanente de la informacin gentica o mutacin. Por tanto, las MUTACIONES son los cambios permanentes en la secuencia nucleotdica del ADN. Lesiones y modificaciones del ADN Tipos de lesiones Prdida de bases Cambios de bases Modificaciones qumica de bases Cortes en cadenas polinucleot. Entrecruzamiento de cadenas Causa de las lesiones Desaminaciones Prdida de bases Errores de replicacin Radiacin UV (dmeros de pirimidina) Radiacin ionizante (cortes en las cadenas) Acido nitroso (CU) Agentes alquilantes (mutilaciones, alguilaciones) Agentes bifuncionales (entrecruzamientos) Carcingenos, etc. Produccin de sitios apurnicos o apirimidnicos. Desaminaciones (Curacilo, Ahipoxantina, etc) Errores de replicacin (sustitucin de bases). Mutilacin, alquilacin, etc

Espontneas Inducidas Agentes fsicos Agentes qumicos

Efectos sobre el ADN 123

 alteraciones de bases: Desaminaciones Metilaciones Etc

Distorsin de la estructura Dmeros de pirimidinas Entrecruzamientos Modificaciones de bases por grupos voluminosos.

Las mutaciones ms corrientes son las denominadas PUNTUALES, que afectan a un par de bases en la secuencia del ADN, y que incluyen el cambio de una base por otra (sustitucin) o la prdida (delecin) o ganancia (insercin) de una base. Grfico Pg. 443 En algunos casos, la mutacin no produce ninguna alteracin (mutuacin silenciosa) pero en otros origina el cambio de un aminocido de una protena por lo que puede afectar a su actividad biolgica. En algunos casos, la mutuacin puntual puede dar lugar a una protena truncada o con gran parte de la secuencia alterada, por lo que sern biolgicamente inactivas. Las mutuaciones favorables que confieren alguna ventaja a la clula en la que tienen lugar son raras si bien la frecuencia es suficiente para conferir la variacin necesaria para la seleccin natural y, por tanto, la evolucin. No obstante la mayora de las mutuaciones son deletreas para la clula y algunas estn ligadas al cncer. Otras mutuaciones comprenden la prdida de varios pares de bases o incluso secuencias ms grandes, multiplicaciones anormales de determinadas secuencias o traslados de secuencias de unas regiones del cromosoma a otras o entre diferentes cromosomas (translocaciones). Todas ellas suelen ocasionar alteraciones fenotpicas evidentes. Las mutuaciones del ADN son muchas menos que el n de alteraciones que se producen en las molculas de ADN debido a la existencia de mecanismos de reparacin. Sistemas de reparacin del ADN: Reparacin apareamientos incorrectos: varias protenas y enzimas. Reparacin por eliminacin de bases alteradas: ADN glicosilasas (eliminan uracilo, hipoxantina, bases metiladas,etc). Reparacin por escisin (eliminacin secuencia): endonucleasas, ADN polimerasa, ADN ligasas. Reparacin con tendencia al error: ADN polimerasa II y otras enzimas. Las alteraciones de algunos de los sistemas de reparacin dan lugar a determinadas enfermedades (xerodemia pigmentosa: gran parte de las lesiones son inducidas por la luz UV por lo que los pacientes desarrollan mltiples cnceres de piel si se exponen a la luz solar, ataxia telangiectasia) y a un aumento de la predisposicin a neoplasias. La reparacin del ADN es posible en gran parte debido a que la molcula de ADN consta de 2 cadenas complementarias. Puede eliminar y reemplazarse de forma precisa la lesin del ADN en una cadena siguiendo las instrucciones del molde en la cadena complementaria no daada. TRANSCRIPCIN En la expresin de la informacin gentica contenida en un segmento de ADN siempre interviene la generacin de una molcula de ARN. Por tanto, el ARN es la nica molcula conocida que tiene tanto 124

funciones informativas como catalticas. El ARN tiene una diversidad estructural mayor que el ADN que le permite asumir varias funciones celulares. La transcripcin es el proceso por el cual la informacin que, en forma de secuencia de 4 bases (A, T, C, G) en una cadena de polidesoxirribonucletidos, se plasma en una informacin escrita en el mismo lenguaje (4 bases: A, U, C, G) en forma de cadena de polirribonucletido. Desde el punto de vista qumico, es un proceso de sntesis de ARN a partir de 4 ribonuclesidos trifosfato y ADN que acta como molde. Por tanto por medio de la transcripcin, un sistema enzimtico convierte la informacin gentica de un segmento de ADN en una cadena de ARN con una secuencia de bases complementaria a una de las cadenas de ADN. Resultado global de la transcripcin: sntesis de los diferentes tipos de molculas de ARN celulares: ARNr: se asocia con la formacin de protenas en los ribosomas. ARNt: lee la informacin codificada en el ARNm y transfiere el aminocido adecuado a la cadena polipeptdica en crecimiento durante la sntesis proteica. ARNm: portador de las secuencias de a.a. de 1 ms polipptidos especificiados por un gen o conjunto de genes de cromosomas. La replicacin y la transcripcin difieren en un aspecto importante. Durante la replicacin se copia el cromosoma entero dando ADN hijo que es idntico al ADN parenteral, mientras que la transcripcin es un proceso selectivo. La transcripcin es un proceso reiterativo ya que una zona concreta del ADN se puede copiar repetidamente, dando lugar a la formacin de copias mltiples de una determinada molcula de ARN. Las transcripcin es muy similar a la replicacin en trminos de mecanismo qumico. Los 2 procesos difieren en que la transcripcin no requiere de un cebador, slo afecta generalmente a cortos segmentos de una molcula de ADN y dentro de estos segmentos, slo una de las 2 cadenas de ADN acta como molde. TRANSCRIPCIN DE GENES PROCARIOTAS En las bacterias existe una nica enzima, ARN polimerasa dependiente de ADN, que se encarga de transcribir todos los genes del cromosoma bacteriano, dando lugar a la formacin de los 3 tipos fundamentales de ARN (ARNr, ARNt y ARNm). La ARN polimerasa requiere adems de un molde de ADN, los 4 ribonuclesidos trifosfatos (ATP, GTP, UTP y CTP) como precursores de las unidades nucleotdicas del ARN, as com magnesio. La ARN polimerasa elonga una cadena de ARN por adicin de unidades de ribonucletido al extremo 3' de la cadena de ARN, por lo que construye cadenas de ARN en la direccin 5' 3'. Slo se utiliza una de las 2 hebras de ADN como molde, copiada en la direccin 3' 5' (antiparalela a la nueva cadena de ARN) al igual que en la replicacin de ADN. A diferencia de la ADN polimerasa, la ARN polimerasa no requiere de un cebador para iniciar la sntesis. Sin embargo, el inicio de la sntesis de ARN slo tiene lugar en secuencias especficas llamadas PROMOTORES. La hebra que sirve de molde para la sntesis de ARN se denomina hebra molde o hebra menos (). La hebra de ADN complementaria al molde se denomina hebra codificante, no molde o ms (+) que es idntica en secuencia de bases al ARN transcrito del gen con T en lugar de U. Codificante (5') CGCTATAGCGTTT (3') Hebra no molde de ADN (+)

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(3') GCGATATCGCAAA (5') Hebra molde de ADN () (5') CGCUAUAGCGUUU (3') Transcrito de ARN La ARN polimerasa se une a secuencias especficas del ADN o promotores que dirigen la transcripcin de segmentos adyacentes de ADN (genes). Mutuaciones que afecten a los promotores modulan la eficiencia de la fijacin de la ARN polimerasa y de la transcripcin. El proceso de sntesis se puede considerar dividido en 3 etapas denominadas iniciacin, elongaciny terminacin. Las unidades de transcripcin procariotas suelen estar formadas por ms de 1 gen, por lo que el ARNm resultante, denominado policistrnico, lleva la informacin para la sntesis de 2 o ms cadenas polipeptdicas diferentes. TRANSCRIPCIN EN EUCARIOTAS La transcripcin del ADN nuclear en organismos eucariotas es muy similar a la que tiene lugar en bacterias, aunque las enzimas participantes, la organizacin de las unidades de transcripcin y sus promotores son muy diferentes a las procariotas. Se conocen 2 ARN polimerasas nucleares diferentes, cada una de las cuales participa en la sntesis de un tipo determinado de ARN. Adems, existe una ARN polimerasa dependiente de ADN localizada en la mitocondria que se encarga de la sntesis de los ARN mitocondriales. Los eucariotas tienen 3 ARN polimerasas diferentes designados como I, II y III. Los genes eucariotas se pueden clasificar, de acuerdo con la polimerasa que los transcribe, en genes tipo I (codifican para las cadenas grandes de ARNr), de tipo II (codifican para ARNm) y de tipo III (codifican para ARNt, ARNr y otros ARN). Las ARN polimerasas dependientes de ADN, para llevar a cabo la transcripcin, requieren de una serie de factores auxiliares (de transcripcin), que participan en el proceso de iniciacin favoreciendo la localizacin o anclaje de la ARN polimerasa al lugar de iniciacin o el inicio de la sntesis de ARN. Los factores de transcripcin que modulan la fijacin de la ARN polimerasa al promotor. Adems estos factores junto con la ARN polimerasa forman un complejo multiproteico que es capaz de comenzar la sntesis de ARN en los lugares adecuados. Los factores de transcripcin se clasifican en generales (estn presentes en todos los tipos de clulas) y especficos o inducibles (se sintetizan o activan en tejidos determinados y en un momento croncreto). INHIBIDORES DE LA REPLICACIN Y TRANSCRIPCIN Existen inhibidores que interactan con el ADN, afectando su estructura y su capacidad para actuar como molde en los proceos de replicacin y transcripcin. Estos inhibodres son muy poco especficos ya que afectan a dichos procesos tanto en virus como en clulas procariotas y eucariotas. Determinadas sustancias afectan a la sntesis de cidos nucleicos, porque inhiben los procesos de sntesis de nucletidos (caso de anlogos de bases y nuclesidos), o bien porque se transforman en nucletidos que al incorporarse a la cadena en sntesis paralizan su extrensin o crecimiento.

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Por ltimo, los inhibidores ms especficos son aquellos que interactan con alguna de las enzimas implicadas en las diferentes reacciones de la replicacin o la transcripcin. Dentro de este grupo se encuentran inhibidores de ADN polimerasa, topoisomerasas, ADN ligasas, ARN polimerasas dependientes de ADN, etc, tanto de origen eucariota como procariota. Los inhibidores especficos de enzimas bacterianos tienen un potencial teraputico interesante para el tto. De enfermedades bacterianas, mientras que determinados inhibidores de enzimas eucariotas poseen gran inters como agentes antineoplsicos. PROCESOS POSTRANSCRIPCIONALES El producto directo de la transcripcin suele sufrir una serie de modificaciones estructurales necesarias para que la molcula de ARN sea funcional (procesos postranscripcionales). El proceso postranscripcional engloba 3 reacciones: recorte de la cadena polinucleotdica, modificacin de bases y nuclesidos y adicin de secuencias a ambos extremos de la cadena de ARN. Estas modificaciones contribuyen a hacer ms resistentes estas molculas a los procesos de degradacin celular, aumentando, por tanto, su estabilidad metablica o vida media. Estos procesos de maduracin de los ARN eucariotas ocurren en el ncleo celular y son catalizados por enzimas diferentes. Dichos procesos son necesarios para la salida al citosol de las molculas de ARN maduro correspondiente. La mayora de exones codifican cadenas polipeptdicas de 30 a 50 aminocidos de longitud. Los intrones presentan una variacin de tamao superiores, incluido el hombre, tienen mucho ms ADN dedicado a los intrones que los exones. Los intrones son capaces de autocorte y empalme. Ciertos virus ARN contine una ADN polimerasa denominada transcriptsa inversa (retrovirus) por medio de la cual la informacin gentica fluye desde ARN a ADN. Los retrovirus produce cancer y SIDA. Grfico Pg. 453. TEMA 33. BIOSNTESIS DE PROTENAS. CDIGO GENTICO: CARACTERSTICAS. ACTIVACIN DE AMINOCIDOS. ETAPAS DE LA SNTESIS DE PROTENAS. MADURACIN DE LAS PROTENAS. PRINCIPIOS GENERALES DE LA TRADUCCIN. Las protenas son los productos finales de la mayora de las rutas informativas. La sntesis de protenas que se hace en respuesta a las necesidades celulares del momento es el ms complejo de los mecanismos biosintticos y su dilucidacin ha sido uno de los mayores retos de la historia de la bioqumica. La sntesis de protenas o traduccin va a permitir que la informacin gentica almacenada en las molculas de cidos nucleicos se plasme bajo la forma de protenas, que son los componentes estructurales y funcionales bsicos para la organizacin y funcionamiento de la clula. La sntesis proteica requiere la participacin de casi 300 macromolculas diferentes para sintetizar polipptidos y consume hasta el 90% de la energa qumica utilizada por la clula en todas las reacciones biosintticas. A pesar de esta complejidad, las protenas se fabrican a velocidades vertiginosas (cadena polipeptdica de 100 residuos se sintetizan a 37C en 5 segundos). El 1 descubrimiento: la sntesis de protenas se produce en los ribosomas. 127

Un 2 descubrimiento importante fue el hecho de que los aminocidos estaban unidos a una forma especial de ARN termoestable llamada ARN de transferencia formado aminoacilARNt y los enzimas que catalizan este proceso son las aminoacilARNt sintetasas. Un 3 descubrimiento importante fue el que el ARNt adaptador traduce la secuencia nucleotdica de un ARNm a la secuencia de aminocidos de un polipptido y a este proceso global de sntesis de protenas guiada por el ARNm se denomina TRADUCCIN. La informacin que determina la secuencia proteica est especificada en el ADN, bajo la forma de secuencia de las 4 bases nitrogenadas (A, T, C, G) caractersticas de este tipo de cido nucleico. La unidad de codificacin o CODN viene determinado por una secuencia de 3 bases, que codifica para un determinado aminocido. La estructura 1 de un determinado polipptido (secuencia de aminocidos) est escrita en una secuencia concreta de ADN denominada GEN, que se leen en forma de tripletes y en direccin 5' 3'. La relacin existente entre los aminocidos proteicos y los diferentes tripletes se conoce como CDIGO GENTICO. Esta informacin, cifrada en el ADN, no es transmitida de manera directa a las protenas, sino que lo es a travs de molculas intermediaras de ARN (funciones: informacin gentica; descifrado de la misma; y constitucin de la maquinaria celular que va a llevar a cabo el proceso de sntesis proteica). Existen 3 tipos principales de ARN, que participan activamente en el proceso de sntesis de protenas y que, de acuerdo con su funcin se clasifican en ARNm, ARNt y ARNr.. La molcula de ARN, resultado de la transcripcin de un gen codificante de una cadena polipeptdica determinada, y que lleva la informacin correspondiente al gen, se denomina ARNm. Existen tantas molculas de ARN diferentes como genes. Estas molculas de ARNm son monocatenarias y portan una sucesin de codones equivalentes a la del gen a partir del cual se han copiado. La lectura o descifrado del mensaje, utilizando el ARNm como molde, por la maquinaria biosinttica de protenas, va a dar lugar a la unin de aminocidos por medio de enlaces peptdicos en una ordenacin determinada.

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