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Sumrio
Sumrio..............................................................................................................................2 Objetivos da Aula Prtica 03 (Microscopia).....................................................................3 Objetivos da Aula Prtica 04 (Cultivo de Microrganismos Retirados de Objetos)...........3 Introduo da Aula Prtica 03...........................................................................................4 Introduo da Aula Prtica 04...........................................................................................4 Metodologia da Aula Prtica 03........................................................................................5 Parte tica.....................................................................................................................5 Conceitos Bsicos de Microscopia................................................................................5 Parte Mecnica (Conceitos)..........................................................................................5 Manejo do Microscpio.................................................................................................6 Metodologia da Aula Prtica 04........................................................................................6 Concluso da Aula Prtica 03............................................................................................8 Concluso da Aula Prtica 04............................................................................................8 Referncias .......................................................................................................................9

Objetivos da Aula Prtica 03 (Microscopia)


A aula tem como objetivo a interao dos alunos com o Microscpio ptico (M.O.) e seus componentes, alem do manejo (aumento, focalizao, materiais, procedimento e os cuidados antes e depois do uso). Conhecer e identificar as partes, funcionalidades e propriedades da cada, e relevante o bom trato com o microscpio. Alem de treinarmos o manuseio do mesmo fazendo visualizaes e observaes de fungos.

Objetivos da Aula Prtica 04 (Cultivo de Microrganismos Retirados de Objetos)


A aula tem como o objetivo a interao dos alunos com o cultivo de microrganismos retirados de objetos, bem como a identificao de fungos e bactrias. Estes microrganismos retirados dos objetos so colocados em meios de cultura para que os mesmos possam se desenvolver no meio e consequentemente identificado e classificado conforme visto em sala de aula.

Introduo da Aula Prtica 03


Tendo em vista a disciplina de microbiologia, a utilizao do microscpio e de fundamental importncia para seus estudos, pesquisas e constataes j que seu material de analise em maioria fungos, bactrias e vrus (sendo este ultimo analisando em microscpios eletrnicos). E de conhecimento de todos que esses seres no vistos a olho nu tornado assim a utilizao do mesmo primordial. Acredita-se que o microscpio tenha sido inventado em 1590 por Hans Janssen e seu filho Zacharias, dois holandeses fabricantes de culos. Tudo indica, porm, que o primeiro a fazer observaes microscpicas de materiais biolgicos foi o neerlands Antonie van Leeuwenhoek. O microscpio e um instrumento de ptica utilizado para ampliao e observao de pequenos objetos. A ampliao consiste no aumento em grande proporo dos dimetros aparentes dos objetos a observar. Microscpio composto consta, em essncia, de um sistema ptico formado por dois conjuntos de lentes. Esses conjuntos so os da objetiva, voltada para o objeto e que forma no interior do aparelho a imagem do mesmo, e a ocular, que permite ao observador ver essa mesma imagem. H ainda a parte mecnica com objetivo se suporte e ajuste da visualizao.

Introduo da Aula Prtica 04


Nesta aula prtica ser realizado o cultivo de microrganismos retirados do arcondicionado, de um espirro, do trinco da porta e do cabelo, onde ambos foram colocados em duas placas de petri, sendo que uma continhas o BDA (Meio bsico de cultivo de fungos) e a outra o NA (Meio bsico para cultivo de bactrias). Aps cinco dias foram feitas as anlises identificando o nmero de colnias de fungos e bactria, colorao da colnia e tipo de colnia de fungos a partir dos seus esporos.

Metodologia da Aula Prtica 03


Foram utilizados microscpios pticos do laboratrio de microbiologia. A identificao das partes deste aparelho foi observada afim de melhor compreenso. Para a observao foi empregadas laminas preparadas tendo colocado duas gotas de corante em cada lamina, e encostadas nos fungos, cultivados em placa de pet ri, em seguida isolado com fita adesiva transparente e levado ao microscpio. Segue o processo de visualizao de ambos.

Parte tica
Um conjunto, denominado objetiva, montado perto do objeto examinado e formada no interior do aparelho uma imagem real. Obs.: para a visualizao de bactria deve ser utilizada a objetiva de imerso, sendo nesse cario o uso do leo de imerso entre as lentes. O outro conjunto, chamado ocular, permite ao observador ver essa imagem ampliada. A objetiva tem um poder de ampliao que varia de duas a cem vezes, enquanto o da ocular no ultrapassa dez vezes. H ainda uma parte de iluminao onde se encontra espelho, condensador, diafragma e filtro.

Conceitos Bsicos de Microscopia


Condensador conjunto de duas ou mais lentes convergentes que orientam e espalham regularmente a luz emitida pela fonte luminosa sobre o campo de viso do microscpio. Diafragma constitudo por palhetas que podem ser aproximadas ou afastadas do centro atravs de uma alavanca ou parafuso, permitindo regular a intensidade da luz que incide no campo de viso do microscpio. Filtro- placa de vidro colorida torna a luz vivel ao uso.

Parte Mecnica (Conceitos)


P ou base- serve de apoio s restantes componentes do microscpio. Coluna ou Brao Fixo base, serve de suporte aos outros elementos.

6 Mesa ou Platina Onde se fixa a lmina a ser observada, possui uma janela por onde passam os raios luminosos e tambm parafusos dentados que permitem deslocar a preparao. Charriot Pea ligada platina que possibilita mover a lmina, permitindo a melhor centralizao da mesma. Tubo ou canho Suporta a lente ocular na extremidade superior. Revlver ou ptico Pea giratria que sustenta as objetivas. Parafuso de ajuste macromtrico e micromtrico tem finalidade aproximao dos materiais a serem observados tem velocidades em relao aos nomes.

Manejo do Microscpio
A utilizao do aparelho requer cuidados na hora do seu manuseio, pois alem da sua fragilidade devemos observa o valor material. O aparelho no estando em uso deve esta sempre coberto, para inicio do manuseio descobrimos o mesmo e conectou o fio de energia.Para inicio as objetivas devem estar em menor aumento, ou seja, a 4 vezes ento foi girado o revolver ate encaix-la. Colou a lamina preparada com amostras de fungos sobre a platina sendo presa com a presilha. Acendeu a luz do microscpio e fez a centralizao da Lamina atravs do orifcio da platina utilizando os parafusos do charriot. Logo aps fez o ajuste da viso com auxilio dos parafusos macromtricos para cima com devinda ateno para que no encoste-se a lamina na objetiva. Em seguida foi feito os ajustes das distancias interpupilar bem como as intensidades de luz.

Observao dos Fungos


Para to utilizamos a lente de aumento de 70 vezes. Fungos observados foram Tricoderma ssp e Rizoctonia ssp. Nestes foram observadas suas estruturas anatmicas esporos esfricos e hifas septadas nesta ordem.

Metodologia da Aula Prtica 04


Nesta aula foram utilizados duas placas de petri contendo meios de culturas diferentes sendo um Batata Destrose gar BDA e o outro Nutriente-gar NA para cada

7 um dos quatro matrias utilizados para o cultivo de microrganismos (so seres muito pequenos que no podem ser vistos a olho nu e, para enxerg-los, precisa-se da ajuda de um microscpio). Um meio de cultura consiste em preparaes slidas, lquidas ou semi-slidas que contm todos os nutrientes necessrios para o crescimento de microrganismos, onde so utilizados com a finalidade de cultivar e manter microrganismos viveis no laboratrio, sob a forma de culturas puras.A especificidade dos meios de cultura muito importante, nomeadamente no isolamento e identificao de certos microrganismos. Os meios bsicos e seletivos (Meio que contm substncias que inibem o desenvolvimento de determinados grupos de microrganismos, permitindo o recscimento de outros) BDA para cultivo de fungos e NA para o cultivo de bactrias. Nas placas de petri nmero 01 e 02 foram retirados microrganismos do arcondicionado, logo na placa 01 onde continha o meio bsico BDA foram identificados 27 colnias sendo que 07 eram verdes e pulverulentos, 04 brancas e aveludadas, 15 marrom e aveludado e 01 salmo e algodonoso. Na placa 02 onde continha o meio bsico NA foram identificados 50 bactrias e 07 fungos. Nas placas de petri de nmero 03 e 04 foram retirados microrganismos de um espirro ou tosse onde no meio de cultura BDA foram identificados 02 colnias de fungos sendo 01 verde e 01 branco e ambos algodonoso. J na placa 04 contendo o meio de cultura NA foram identificadas 20 colnias de bactrias sendo que 10 eram amarelas e 09 eram brancas e 01 colnia de fungo branco e aveludado. Nas placas de petri de nmero 05 e 06 foram retirados microrganismos do trinco da porta do laboratrio de microbiologia onde na placa 05 onde continha o meio de cultura BDA identificou-se 07 colnias de fungo sendo que todas elas eram verdes e pulverulentas. J na placa 06 continha o meio bsico NA onde foram encontrados 56 colnias de bactrias sendo que 48 delas eram amarelas e 08 eram brancas e 01 colonia de fungo branco e algodonoso. Nas placas de petri de nmero 07 e 08 foram retirados microrganismos do cabelo de uma aluna onde no meio BDA nada se desenvolve, caracterizando que este meio no favorvel para o cultivo deste fungo. J na placa 08 que continha o meio bsico NA apresentou 56 colnias de bactrias sendo que 16 eram amarelas e 30 delas eram branca e ainda 01 colnia de fungo com caracterstica aveludada de cor branca.

Concluso da Aula Prtica 03


Conclumos que e necessrio que haja cuidados e treinamento para um bom manuseio do M.O. Alm de seguir os metodos de uso afim de no danificar-lo ou fazer uma m visualizao.

Concluso da Aula Prtica 04


Conclui-se que para cada tipo de micoroganismo existe um meio de cultura bsico para que o mesmo possa se desenvolver e ter um possvel classificao, no caso dos fungos so classificados de acordo com a consistncia dos seus esporos e a sua colorao. Esta aula de fundamental importncia para a distino de um fungo e de uma bactria, pela sua colnia formada.

Referncias
AMBRSIO, M. M. de; GUIMARES, L. M. S. Roteiros de aulas prticas (Microbiologia Agrcola). Mossor, 2010; http://www.e-escola.pt/topico.asp?hid=312 Acessado em 05 de setembro de 2011; http://decomposicao.vilabol.uol.com.br/pagina4.htm - Acessado em 05 de setembro de 2011.