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Determinao de cido Ascrbico em Frmacos e Sucos de Frutas por Titulao Espectrofotomtrica

Determination of Ascorbic Acid in Pharmaceutical Formulations and Tropical Fruit Juices by means of Spectrophotometric Titration
Sueli Prcio Quinia Departamento de Qumica Universidade Estadual do Centro-Oeste UNICENTRO spquinaia@unicentro.br Mrcia Ferreira Departamento de Qumica Universidade Estadual do Centro-Oeste UNICENTRO Resumo: Um procedimento de titulao espectrofotomtrica para a determinao de cido ascrbico (AA) em frmacos e sucos de frutas tropicais baseado na decomposio do complexo de [Fe3+(SCN-)n]+3-n pela reduo com AA foi descrito. A praticabilidade do procedimento foi vericada atravs da determinao do cido ascrbico (AA) em amostras de suplementos alimentares e nos sucos dos frutos ara (Psidium cattleianum), acerola (Malphigia glaba), Maracuj (Passiora edulis), uvaia (Eugenia pyriformis) , buti (Butia eriosphata) e laranja (Citrus sinensis). Os frutos foram resfriados para minimizar a oxidao do AA. O teor de AA determinado na acerola foi duas vezes maior do que o quanticado nas espcies de laranja, buti e uvaia. O maracuj foi o fruto que apresentou o menor teor de AA. Os resultados mostraram que o mtodo foi rpido e sensvel quando comparado ao recomendado pela literatura. Palavras-chave: cido espectrofotomtrica ascrbico; sucos de frutos tropicais; titulao

Abstract: A procedure for spectrophotometric determination of ascorbic acid in pharmaceutical formulations and tropical fruits juices based on [Fe3+(SCN)n]+3-n complex decomposition by reduction has been described. The feasibility

Revista Cincias Exatas e Naturais, Vol.9 n 1, Jan/Jun 2007

of the procedure was veried by determination of ascorbic acid (AA) in samples of pharmaceutical food formulations and in juices made of ara (Psidium cattleianum), acerola (Malphigia glaba), maracuj [passionfruit] (Passiora edulis), uvaia (Eugenia pyriformis), buti (Butia eriosphata) and orange (Citrus sinensis) fruits. The fruits were frozen to minimize AA oxidation. The AA level determined in acerola was twice the amount found in species of orange, buti and uvaia. Passionfruit presented the lowest level of AA. The results have shown that the spectrophotometric method was fast and sensitive, unlike the recommendations in literature. Key words: ascorbic acid; tropical fruit juices; spectrophotometric titration

Introduo
O cido ascrbico (AA) faz parte de um grupo de substncias qumicas complexas necessrias para o funcionamento adequado do organismo. uma vitamina hidrossolvel, o que signica que o organismo usa o que necessita e elimina o excesso1. O AA encontra-se em equilbrio entre as formas reduzida e oxidada (cido L-ascrbico e cido L-dehidroascrbico, respectivamente). A carncia dessa vitamina pode ser originada atravs de uma dieta mal equilibrada. Os cidos L-ascrbico e dehidroascrbico ocorrem em quantidades signicativas nas frutas ctricas, tomate, batata e em vrias outras frutas e verduras.

A principal causa da degradao do AA a oxidao, aerbica ou anaerbica, ambas levando formao de furaldedos, compostos que polimerizam facilmente, com formao de pigmentos escuros. A estabilidade do AA aumenta em baixas temperaturas e a sua perda ocorre com facilidade durante o aquecimento dos alimentos1,2 .

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Os mtodos clssicos para a determinao do AA baseiam-se no seu forte poder redutor. Para sucos de frutas, a tcnica mais utilizada a da titulao de Tillmans que se baseia na reduo do 2,6 diclorofenol-indofenol por uma soluo de AA, mas este mtodo sofre a interferncia de ons ferrosos, estanho, cobre cuproso e sulto que so redutores, interferindo portanto na anlise3,4 . Encontram-se na literatura vrios procedimentos analticos para a determinao do AA, sendo a espectrofotometria de absoro molecular muito utilizada na determinao devido a facilidade de reduo do [Fe3+(SCN-)n]+3-n pelo AA e posterior complexao do Fe2+ com substncias que absorvem na regio de comprimento de onda do ultra-violeta ao visvel5,6,7,8,9,10. O efeito benco do AA como vitamina aliado ao seu emprego como aditivo em alimentos, leva-nos a desenvolver novos procedimentos analticos para a determinao do AA em frmacos e em alimentos. Avaliar a quantidade de AA constitui um importante fator para o controle da qualidade de alimentos, bebidas e frmacos. Sua caracterizao em frutos tropicais relevante, pois pode contribuir para um aproveitamento mais racional dos recursos naturais gerando benefcios sociais e econmicos. O objetivo desse experimento foi otimizar um procedimento analtico rpido e econmico para a determinao do teor de AA presente em suplementos vitamnicos e sucos de frutas. A reao da titulao foi baseada na destruio do complexo [Fe(SCN)n](+3-n) pelo AA presente nas amostras.

Materiais e mtodos
Solues de reagentes e amostras
Todos os reagentes utilizados na execuo do trabalho foram de grau analtico (PA) e a gua utilizada na preparao de todas as solues foi ultra-pura (Human UP 900). Soluo de tiossulfato de sdio: 1,0 x 10-1 mol L-1 padronizada com dicromato de potssio. Soluo de iodo: 3,0.10-2 mol L-1 padronizada com soluo padro de tiossulfato. Em todos os procedimentos envolvendo iodo, usouse uma soluo de amido 1% m/v como indicadora do ponto nal da titulao. 43

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A soluo do complexo de Fe3+ foi preparada a partir do reagente cromognico tiocianato de potssio. Uma soluo padro de AA 1,1.10-2 mol L-1 foi utlizada nas titulaes espectrofotomtricas para a otimizao do mtodo analtico. Desenvolveu-se o trabalho com amostras comerciais de suplementos vitamnicos base de AA e frutas coletadas na regio de Guarapuava-PR. Os frutos foram resfriados aps a coleta e o teor de AA foi determinado no mesmo dia. Para as amostras de laranja e maracuj, extraiu-se e ltrou-se o suco. As amostras de buti, uvaia, acerola e ara foram despolpadas e ltradas.

Titulao iodomtrica de frmacos


Pesou-se exatamente a massa da pastilha do suplemento vitamnico contendo o AA. A amostra foi solubilizada com gua e transferida para um balo volumtrico de 100 mL. Pipetou-se 25 mL da amostra e transferiu-se para um erlenmeyer de 250 mL. Adicionou-se 5 mL da soluo de amido. Fechou-se o erlenmeyer com plstico PVC contendo uma pequena abertura para inserir a ponta da bureta e titulou-se com a soluo de iodo 3,0.10-2 mol L-1 rapidamente at o aparecimento da cor azul11.

Otimizao do procedimento analtico para espectrofotomtrica de frmacos e sucos de frutas

titulao

As determinaes de AA foram realizadas em um espectrofotmetro UVVIS (E225 D, monofeixe). Para efetuar as anlises, utilizou-se a tcnica da titulao espectrofotomtrica do complexo Fe3+[(SCN)n]+3-n com solues contendo o AA. soluo de Fe3+[(SCN)n]+3-n sob agitao, adicionou-se um volume medido do titulante e efetuou-se as leituras de absorvncia. A operao foi repetida alm do ponto de equivalncia. A curva de titulao espectrofotomtrica foi otimizada usando-se solues padro do complexo de Fe3+ e de AA. O comprimento de onda utilizado nas medidas foi de 460 nm, escolhido com base no espectro obtido atravs de uma curva de absorvncia versus comprimento de onda (Figura 1). A gura 2 apresenta a titulao do complexo Fe3+[(SCN)n]+3-n (4,7.10-4 mol L-1 ) com AA (1,1.10-2 mol L-1 ), o ponto 44

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de encontro entre as duas retas forneceu o volume exato para quanticar o teor de AA. Foi observado o decrscimo de absorbncia da soluo de Fe3+[(SCN)n]+3-n pela adio do AA. A juno da amostra contendo o AA reduziu o Fe3+ a Fe2+ desfavorecendo a ligao entre o tiocianato e o ferro. A variao de absorvncia foi proporcional concentrao de AA adicionada durante a titulao. As medidas espectrofotomtricas foram realizadas a cada adio do titulante e o ponto de equivalncia foi determinado gracamente. Quando a titulao foi realizada atravs de agitao manual, obtevese uma mistura lenta entre o titulante e titulado e a repetibilidade entre as triplicatas de uma mesma amostra no foram boas, gerando erros de at 58% na recuperao do analito, no entanto, com a utilizao de agitao magntica durante a titulao, a recuperao do analito foi satisfatria e os grcos obtidos apresentaram retas bem denidas. Traou-se uma curva de calibrao para o tiocianato de ferro (1,0.10-5 a 8,0.10-4 mol L-1 ) no comprimento de onda otimizado a m de identicar a faixa linear de trabalho da tcnica. O coeciente de regresso linear obtido para a curva foi de 0,9981. Para cada amostra de suco de frutas analisada, utilizou-se 25 mL de soluo padro de tiocianato de ferro de concentrao denida. Figura 1. Espectro de absoro molecular para o complexo Fe3+[(SCN)n]+3n

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Figura 2. Curva da titulao espectrofotomtrica do complexo Fe3+[(SCN)n]+3-n 4,75.104 mol L-1 com soluo de AA padro 1,1.10-2 mol L-1

Resultados e discusses
A volumetria de oxido-reduo a tcnica recomendada pela legislao para a determinao do AA4. No entanto, a tcnica passvel da introduo de erros sistemticos provenientes do analista, alm de consumir uma quantidade considervel de reagentes. As titulaes espectrofotomtricas tm diversas vantagens sobre as titulaes clssicas e determinaes colorimtricas diretas. A presena de outras substncias que absorvem no mesmo comprimento de onda no provoca, necessariamente, interferncias, pois somente a variao de absorvncia signicativa. No procedimento proposto, por meio da titulao espectrofotomtrica com AA, a amostra foi o agente titulante e a soluo padro de tiocianato de ferro o titulado. No procedimento analtico, foram tomadas alquotas durante o processo de titulao para a vericao das absorvncias a cada adio de titulante. As alquotas eram ento retornadas ao frasco de titulao e dada a sequncia da mesma. 46

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A pelcula de lquido que cou aderida a cubeta de leitura no introduziu um erro signicativo nas medidas, pois os valores obtidos atravs do estudo da adio e recuperao de analito foram da ordem de 96% a 102%. Os teores de AA obtidos por espectrofotometria de absoro molecular no UV-VIS foram satisfatrios, pois apresentaram concentraes iguais s obtidas com a tcnica tradicional (volumetria iodomtrica). A tabela 1 apresenta os resultados obtidos nas determinaes das amostras usando tcnicas analticas distintas. Tabela 1. Determinao de cido ascrbico em frmacos (n=3) Frmaco E R C Titulao Iodomtrica 1,110 g 0,002 1,030 g 0,004 1,090 g 0,002 Titulao Espectrofotomtrica 1,120 g 0,030 0,980 g 0,007 1,060 g 0,020

Como o mtodo de titulao espectrofotomtrica proposto apresentou-se exato, o mesmo foi aplicado para a determinao do AA em sucos de frutas tropicais. O suco de algumas frutas apresentaram uma pequena absoro no comprimento de onda de 460 nm. Quando necessrio, estes valores foram subtrados dos valores de absorvncia a cada volume de amostra adicionado. A concentrao do titulado foi da ordem de 10-4 mol L-1 , uma concentrao pequena quando comparada aos teores de AA obtidos nas amostras. Portanto, nesse caso o efeito da diluio durante o processo de titulao pode ser considerado desprezvel pelo uso do titulante sucientemente concentrado. A gura 3 apresenta as curvas das titulaes espectrofotomtricas obtidas para as frutas laranja bahia, laranja lima, laranja pra, acerola, maracuj, buti, uvaia e ara. O perl obtido nas curvas de titulao para as amostras foi o mesmo demonstrado para a curva obtida com os padres de AA e do complexo de Fe (Figura 2). O tiocianato de ferro se decomps a medida que alquotas dos sucos contendo AA foram introduzidas na titulao. Pode ser vericado que a quantidade de amostras e reagentes gastos no procedimento foram pequenos. A tabela 2 apresenta os teores de AA encontrados nos sucos de frutas em estudo. A acerola, tal como esperado, mostrou-se uma fonte rica em AA (1,254 g L-1 do suco), enquanto que, a buti e laranja foram caracterizadas como uma fonte mdia (0,505 0,687 g L-1 do suco). A literatura cita que o teor de AA pode variar 47

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de acordo com o grau de maturao das frutas12 . Em nosso estudo, o composto AA foi determinado em frutos completamente maduros. Todas as titulaes apresentaram desvios padro relativos inferiores a 2% para as triplicatas. As frutas ara, uvaia e buti so encontradas com facilidade na regio de Guarapuava-PR. Essas frutas apresentaram teores de cido ascrbico inferiores acerola, no entanto, so teores signicativos e que podem ser introduzidos na dieta alimentar da populao gerando benefcios sociais e econmicos para a regio. Tabela 2. Determinao de cido ascrbico em frutas por titulao espectrofotomtrica (n=3) Sucos de Frutas Acerola Buti Laranja Lima Laranja Pera Laranja Bahia Uvia Ara Maracuj Teor de cido ascrbico (g L-1) 1,254 0,003 0,687 0,002 0,547 0,006 0,536 0,014 0.505 0,003 0,482 0,007 0,393 0,030 0,221 0,012

Figura 3. Determinao de AA por titulao espectrofotomtrica: (a) Laranja Bahia, (b) Laranja Lima, (c)Laranja Pra, (d) Maracuj, (e) Buti, (f) Uvaia, (g) Acerola, (h) Ara

Continua

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Concluses
A titulao espectrofotomtrica demonstrou ser vivel para a determinao de cido ascrbico em frmacos e sucos de frutas, pois utiliza pequenos volumes de reagentes, possibilita maior rapidez nas anlises e elimina erros sistemticos que podem ocorrer durante a determinao do AA pela tcnica tradicional de anlise. A uvia, o ara e a buti so frutos regionais comuns em Guarapuava, PR, portanto, podem ser facilmente incorporados na dieta alimentar de crianas e adultos a m de suprir as necessidades dirias.

Agradecimentos
Os autores agradecem UNICENTRO pela bolsa de Iniciao Cientca institucional concedida a acadmica Mrcia Ferreira.

Referncias
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