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GENÉTICA MICROBIANA

Todas as características microbianas são controladas ou influenciadas pela hereditariedade

Características hereditárias relacionam-se a:

características estruturais (morfológicas) reações bioquímicas (metabolismo) capacidade de se movimentar capacidade de sobreviver em várias condições ambientais capacidade de interação com outros microrganismos

GENÉTICA : ciência da hereditariedade que inclui o

- estudo dos genes;

- como eles transportam informações;

- como são replicados e passados para as gerações subseqüentes de células ou transmitidos entre microrganismos;

- como a expressão da informação determina as características.

CROMOSSOMOS: São estruturas particulares que transportam

fisicamente a informação hereditária e que contêm os genes.

GENES: São segmentos de DNA (exceto em alguns vírus, que são

feitos de RNA) que codificam os produtos funcionais (proteínas).

ÁCIDOS NUCLÉICOS: Moléculas orgânicas complexas, formadas pela polimerização de nucleotídeos (DNA e RNA)

• Contêm a informação que determina a seqüência de aminoácidos (aa) e a estrutura e função das proteínas (DNA);

• Fazem parte das estruturas celulares e alinham os aa de forma correta quando uma cadeia polipeptídica está sendo sintetizada (RNA);

• Catalisam uma série de reações químicas fundamentais nas células (pontes peptídicas entre os aa)

Estrutura dos ácidos nuclêicos

- quimicamente muito semelhantes

dos ácidos nuclêicos - quimicamente muito semelhantes - constituídos por 4 nucleotídeos: A, G – purinas

- constituídos por 4 nucleotídeos:

A, G – purinas (contém um

par de anéis fusionados)

T, C e U – pirimidinas

A, G – purinas (contém um par de anéis fusionados) T, C e U – pirimidinas
A, G – purinas (contém um par de anéis fusionados) T, C e U – pirimidinas

(anéis simples)

Bases Nitrogenadas

Nucleosídeo: açúcar + base Nucleotídeo: fosfato + açúcar + base

BASE NITROGENADA

AÇUCAR
AÇUCAR
fosfato + açúcar + base BASE NITROGENADA AÇUCAR GRUPO FOSFATO Estrutura geral dos Nucleotídeos. (a)

GRUPO

FOSFATO

+ açúcar + base BASE NITROGENADA AÇUCAR GRUPO FOSFATO Estrutura geral dos Nucleotídeos. (a)

Estrutura geral dos Nucleotídeos. (a) Adenosina-5-monofosfato (AMP), presente no RNA e (b) ribose e desoxirribose, as pentoses dos RNAs e DNAs.

DNA:

-Dupla hélice

-Fitas antipararelas

-Pontes de Hidrogênio entre as bases nitrogenadas

(A=T e C=G)

-Pareamento de bases: é ligação

entre uma pirimidina e uma purina

- Fitas Complementares

de bases: é ligação entre uma pirimidina e uma purina - Fitas Complementares Modelo da dupla

Modelo da dupla hélice de DNA.

A molécula de DNA pode ser linear ou circular (fechada) DNA linear - eucariotos DNA circular - procariotos, mitocondrial e dos cloroplastos

Genoma: material genético de um organismo O genoma da bactéria Escherichia coli possui :

– 4 milhões pares de bases

– 1 mm comprimento (1000x maior que a célula)

– representa 10% do peso da célula

Como o DNA é estruturado para caber dentro da célula???

Circular, compactado e superenrolado

Supertorção:

Quando a fita de DNA gira sobre si mesma

Superenrolamento do DNA

a fita de DNA gira sobre si mesma Superenrolamento do DNA Círculo relaxado: Quando a fita

Círculo relaxado:

Quando a fita de DNA é cortada (destorcida).

Topoisomerase I (enzima que catalisa a distorção do DNA)

SÍNTESE PROTÊICA

SÍNTESE PROTÊICA

GENÉTICA MICROBIANA

Variabilidade genética: tão importante quanto a estabilidade genética e está associada a alterações genotípicas (genótipo) e fenotípicas (fenótipo). Genótipo: conjunto de genes de um organismo (potencial genético) Fenótipo: genes que estão sendo expressos Alterações no fenótipo podem ocorrer em virtude de fatores ambientais: cor, tipo e tamanho da colônia ou utilização de determinado substrato. Exemplo: bactérias do gênero Azomonas na presença de sacarose formam grandes colônias viscosas na ausência de sacarose formam pequenas colônias não viscosas Embora a bactéria seja "sempre" capaz de produzir o material viscoso a presença ou ausência do açúcar determina se esta característica será expressa. As alterações genotípicas são resultantes de modificações no DNA

Alterações genotípicas

- Mutação: alteração na sequência de bases de um gene

- Recombinação: rearranjo de genes para formar novas combinações

MUTAÇÃO: 1. prejudicial

2. letal

3. útil

4. silenciosa

Tipos de mutações mais comuns :

- Mutação Pontual - resulta de uma substituição de um

nucleotídeo por outro em um gene (num ponto só)

- Mutação por Deslocamento - ocorre com a adição ou perda de um ou mais nucleotídeos no gene - mutação de inserção ou deleção

Mutações pontuais

Mutações pontuais
Mutações por deslocamento de leitura

Mutações por deslocamento de leitura

Mutante - é a célula ou o organismo que carrega o gene mutante

Selvagem - é o organismo parental com o gene normal

As mutações podem ser:

- espontâneas: ocorrem naturalmente

- induzidas: ocorrem pela ação de agentes mutagênicos

Os agentes mutagênicos podem ser químicos ou físicos

1. Químicos:

- ácido nitroso: modifica quimicamente a adenina (A) que passa a parear com citosina (C) em vez de timina (T). Atua de forma aleatória alterando qualquer gene presente no DNA

- 2-aminopurina e 5-bromouracil : são análogos estruturais de bases nitrogenadas que são incorporporados no DNA celular. 2- aminopurina é incorporada no lugar da Adenina e o 5-bromouracil no lugar da Timina.

- benzopirenos, aflatoxinas e corantes de acridina causam mutações por deslocamento

2. Físicos:

- raios X e raios gama: formação radicais livres que se combinam com bases do DNA, levando a erros no pareamento.

- luz ultravioleta: promove ligações cruzadas entre timina e citosina

adjacentes causando sérios danos ao DNA e até mesmo a morte celular.

RECOMBINAÇÃO

Em procariotos a transferência de genes ocorre principalmente por três mecanismos:

1. Conjugação

2. Transformação

3. Transdução

CONJUGAÇÃO

Transferência de genes através do contato entre células bacterianas. O DNA é transferido diretamente de uma bactéria para outra.

2 tipos de células envolvidas na conjugação:

-Doadora: possui plasmidio F (fertilidade) denominada célula F+

-Receptora: não possui plasmídio F, denominada célula F-

Plasmídio - É uma pequena molécula de DNA circular, auto-replicativa,

que não faz parte do cromossomo bacteriano. Carrega genes de

resistência a antibióticos, fatores de virulência

que não faz parte do cromossomo bacteriano. Carrega genes de resistência a antibióticos, fatores de virulência
Transferência do plasmídio F de uma célula doadora (F+) para célula receptora (F-) Plasmídio F

Transferência do plasmídio F de uma célula doadora (F+) para célula receptora (F-)

Plasmídio F carrega genes envolvidos na síntese do pêlo F ou pelo sexual

Células Hfr (high frequency of recombination) são células onde o plasmídio F torna-se integrado ao

Células Hfr (high frequency of recombination) são células onde o plasmídio F torna-se integrado ao cromossomo.

Possuem maior capacidade conjugativa ou de transferência.

O cruzamento entre célula Hfr x F- resulta na transferência de fragmentos de DNA cromossomal

O cruzamento entre célula Hfr x F- resulta na transferência de fragmentos de DNA cromossomal de uma célula para outra. Raramente ocorre transferência completa dos genes do plasmídio F então a célula receptora continua F- porém incorpora genes da célula doadora em seu genoma (recombinação)

TRANSFORMAÇÃO

Processo de incorporação de DNA exógeno na forma livre, geralmente decorrente da lise celular ou extraídos de células doadoras. Para que ocorra transformação a célula deve ser competente, isto é, deve apresentar sítios de superfície para a ligação do DNA da célula doadora e apresentar a membrana em uma condição que permita a passagem deste DNA. Envolve a participação de diferentes proteínas (proteína de ligação ao DNA, presente na membrana, autolisinas, nucleases), sendo um processo variável entre os microrganismos (nem todos apresentam competência). Exemplos de bactérias naturalmente competentes: Bacillus, Streptococcus, Neisseria

Célula transformada (recombinante)

Célula transformada (recombinante)

A competência pode ser induzida: permite entrada de DNA em células que naturalmente não apresentam competência .

Técnicas indução competência:

-eletroporação: célula é exposta a campo elétrico pulsante que produz pequenos poros na membrana celular facilitando a entrada de DNA exógeno.

- tratamento com íons Ca +2 e baixa temperatura

- revólver de partículas: “ atira” partículas cobertas com DNA na célula alvo.

Quando a transformação ocorre com DNA extraído de vírus (bacteriófagos) e não com DNA bacteriano TRANSFECÇÃO

TRANSDUÇÃO

Transferência de genes mediada por vírus bacterianos (bacteriófagos ou fagos). A transdução pode ser generalizada (qualquer fragmento de DNA) ou especializada (determinados genes, passados por fagos temperados

Transdução generalizada: durante um ciclo lítico, pode haver a incorporação de DNA bacteriano no capsídeo viral. Este DNA poderá ser transferido para outra bactéria, pois os processos de adsorção e injeção de DNA dependem da estrutura do vírus, independente do tipo de DNA contido em seu interior.

Transdução generalizada

Transdução generalizada

Transdução especializada: este processo é dependente da ocorrência de um ciclo lisogênico. O fago integra seu DNA ao DNA bacteriano (profago) e após indução, este fago pode iniciar um ciclo lítico. Caso a excisão do DNA viral ocorra de maneira defeituosa, poderá haver a transferência de um pequeno fragmento de DNA bacteriano. Este vírus "defeituoso" poderá transferir o DNA bacteriano para outras células.

fragmento de DNA bacteriano. Este vírus "defeituoso" poderá transferir o DNA bacteriano para outras células.
fragmento de DNA bacteriano. Este vírus "defeituoso" poderá transferir o DNA bacteriano para outras células.

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