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GENTICA MICROBIANA

Todas as caractersticas microbianas so controladas ou influenciadas pela hereditariedade

Caractersticas hereditrias relacionam-se a:


caractersticas estruturais (morfolgicas) reaes bioqumicas (metabolismo) capacidade de se movimentar capacidade de sobreviver em vrias condies ambientais capacidade de interao com outros microrganismos

GENTICA : cincia da hereditariedade que inclui o


- estudo dos genes; - como eles transportam informaes; - como so replicados e passados para as geraes subseqentes de clulas ou transmitidos entre microrganismos; - como a expresso da informao determina as caractersticas.

CROMOSSOMOS: So estruturas particulares que transportam fisicamente a informao hereditria e que contm os genes. GENES: So segmentos de DNA (exceto em alguns vrus, que so feitos de RNA) que codificam os produtos funcionais (protenas).

CIDOS NUCLICOS: Molculas orgnicas complexas, formadas pela polimerizao de nucleotdeos (DNA e RNA)

Contm a informao que determina a seqncia de aminocidos (aa) e a estrutura e funo das protenas (DNA);

Fazem parte das estruturas celulares e alinham os aa de forma correta quando uma cadeia polipeptdica est sendo sintetizada (RNA);

Catalisam uma srie de reaes qumicas fundamentais nas clulas (pontes peptdicas entre os aa)

Estrutura dos cidos nuclicos


- quimicamente muito semelhantes - constitudos por 4 nucleotdeos:

A, G purinas (contm um
par de anis fusionados)

T, C e U pirimidinas
(anis simples)

Bases Nitrogenadas

Nucleosdeo: acar + base BASE NITROGENADA Nucleotdeo: fosfato + acar + base

GRUPO FOSFATO

AUCAR

Estrutura geral dos Nucleotdeos. (a) Adenosina-5-monofosfato (AMP), presente no RNA e (b) ribose e desoxirribose, as pentoses dos RNAs e DNAs.

DNA:

-Dupla hlice -Fitas antipararelas -Pontes de Hidrognio entre as bases nitrogenadas (A=T e C=G) -Pareamento de bases: ligao entre uma pirimidina e uma purina - Fitas Complementares

Modelo da dupla hlice de DNA.

A molcula de DNA pode ser linear ou circular (fechada) DNA linear - eucariotos DNA circular - procariotos, mitocondrial e dos cloroplastos Genoma: material gentico de um organismo O genoma da bactria Escherichia coli possui : 4 milhes pares de bases 1 mm comprimento (1000x maior que a clula) representa 10% do peso da clula Como o DNA estruturado para caber dentro da clula??? Circular, compactado e superenrolado

Superenrolamento do DNA

Crculo relaxado: Supertoro: Quando a fita de DNA cortada (destorcida).

Quando a fita de DNA gira sobre si mesma

Topoisomerase I (enzima que catalisa a distoro do DNA)

SNTESE PROTICA

GENTICA MICROBIANA
Variabilidade gentica: to importante quanto a estabilidade gentica e est associada a alteraes genotpicas (gentipo) e fenotpicas (fentipo). Gentipo: conjunto de genes de um organismo (potencial gentico) Fentipo: genes que esto sendo expressos Alteraes no fentipo podem ocorrer em virtude de fatores ambientais: cor, tipo e tamanho da colnia ou utilizao de determinado substrato. Exemplo: bactrias do gnero Azomonas na presena de sacarose na ausncia de sacarose formam grandes colnias viscosas formam pequenas colnias no viscosas

Embora a bactria seja "sempre" capaz de produzir o material viscoso a presena ou ausncia do acar determina se esta caracterstica ser expressa. As alteraes genotpicas so resultantes de modificaes no DNA

Alteraes genotpicas - Mutao: alterao na sequncia de bases de um gene - Recombinao: rearranjo de genes para formar novas combinaes

MUTAO: 1. prejudicial

2. letal 3. til 4. silenciosa

Tipos de mutaes mais comuns : - Mutao Pontual - resulta de uma substituio de um nucleotdeo por outro em um gene (num ponto s) - Mutao por Deslocamento - ocorre com a adio ou perda de um ou mais nucleotdeos no gene - mutao de insero ou deleo

Mutaes pontuais

Mutaes por deslocamento de leitura

Mutante - a clula ou o organismo que carrega o gene mutante Selvagem - o organismo parental com o gene normal As mutaes podem ser: - espontneas: ocorrem naturalmente - induzidas: ocorrem pela ao de agentes mutagnicos Os agentes mutagnicos podem ser qumicos ou fsicos 1. Qumicos: - cido nitroso: modifica quimicamente a adenina (A) que passa a parear com citosina (C) em vez de timina (T). Atua de forma aleatria alterando qualquer gene presente no DNA - 2-aminopurina e 5-bromouracil : so anlogos estruturais de bases nitrogenadas que so incorporporados no DNA celular. 2aminopurina incorporada no lugar da Adenina e o 5-bromouracil no lugar da Timina.

- benzopirenos, aflatoxinas e corantes de acridina causam mutaes por deslocamento 2. Fsicos: - raios X e raios gama: formao radicais livres que se combinam com bases do DNA, levando a erros no pareamento. - luz ultravioleta: promove ligaes cruzadas entre timina e citosina adjacentes causando srios danos ao DNA e at mesmo a morte celular.

RECOMBINAO
Em procariotos a transferncia de genes ocorre principalmente por trs mecanismos: 1. Conjugao 2. Transformao 3. Transduo

CONJUGAO Transferncia de genes atravs do contato entre clulas bacterianas. O DNA transferido diretamente de uma bactria para outra. 2 tipos de clulas envolvidas na conjugao: -Doadora: possui plasmidio F (fertilidade) denominada clula F+ -Receptora: no possui plasmdio F, denominada clula FPlasmdio - uma pequena molcula de DNA circular, auto-replicativa, que no faz parte do cromossomo bacteriano. Carrega genes de resistncia a antibiticos, fatores de virulncia

Transferncia do plasmdio F de uma clula doadora (F+) para clula receptora (F-) Plasmdio F carrega genes envolvidos na sntese do plo F ou pelo sexual

Clulas Hfr (high frequency of recombination) so clulas onde o plasmdio F torna-se integrado ao cromossomo. Possuem maior capacidade conjugativa ou de transferncia.

O cruzamento entre clula Hfr x F- resulta na transferncia de fragmentos de DNA cromossomal de uma clula para outra. Raramente ocorre transferncia completa dos genes do plasmdio F ento a clula receptora continua F- porm incorpora genes da clula doadora em seu genoma (recombinao)

TRANSFORMAO

Processo de incorporao de DNA exgeno na forma livre, geralmente decorrente da lise celular ou extrados de clulas doadoras. Para que ocorra transformao a clula deve ser competente, isto , deve apresentar stios de superfcie para a ligao do DNA da clula doadora e apresentar a membrana em uma condio que permita a passagem deste DNA. Envolve a participao de diferentes protenas (protena de ligao ao DNA, presente na membrana, autolisinas, nucleases), sendo um processo varivel entre os microrganismos (nem todos apresentam competncia). Exemplos de bactrias naturalmente competentes: Bacillus, Streptococcus, Neisseria

Clula transformada (recombinante)

A competncia pode ser induzida: permite entrada de DNA em clulas que naturalmente no apresentam competncia . Tcnicas induo competncia: -eletroporao: clula exposta a campo eltrico pulsante que produz pequenos poros na membrana celular facilitando a entrada de DNA exgeno. - tratamento com ons Ca+2 e baixa temperatura - revlver de partculas: atira partculas cobertas com DNA na clula alvo. Quando a transformao ocorre com DNA extrado de vrus (bacterifagos) e no com DNA bacteriano TRANSFECO

TRANSDUO

Transferncia de genes mediada por vrus bacterianos (bacterifagos ou fagos). A transduo pode ser generalizada (qualquer fragmento de DNA) ou especializada (determinados genes, passados por fagos temperados

Transduo generalizada: durante um ciclo ltico, pode haver a incorporao de DNA bacteriano no capsdeo viral. Este DNA poder ser transferido para outra bactria, pois os processos de adsoro e injeo de DNA dependem da estrutura do vrus, independente do tipo de DNA contido em seu interior.

Transduo generalizada

Transduo especializada: este processo dependente da ocorrncia de um ciclo lisognico. O fago integra seu DNA ao DNA bacteriano (profago) e aps induo, este fago pode iniciar um ciclo ltico. Caso a exciso do DNA viral ocorra de maneira defeituosa, poder haver a transferncia de um pequeno fragmento de DNA bacteriano. Este vrus "defeituoso" poder transferir o DNA bacteriano para outras clulas.

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