RELATÓRIO - MÉTODO BRADFORD

INTRODUÇÃO

DESCRIÇÃO DO MÉTODO

O método Bradford, é dado através da reação colorante de proteínas

por meio do ácido Coomassie Brilliant Blue G-250, que ao interagir com as
proteínas da amostra resulta uma cor azulada por se ligarem a acidez do
ambiente, sendo proporcional a quantidade de proteínas medida pelo
espectrofotômetro, (equipamento que mede um valor com base na absorção de
luz atravessada pela amostra).

PROCEDIMENTO

DILUIÇÃO SERIADA

O método de diluição, feito a partir da metade da concentração da

amostra anterior, sendo a concentração inicial de 2 mg/mL. A amostra pura
(padrão) utilizada é o Soro de Albumina Bovina (BSA), que foi solubilizada em
água destilada a priori.
Após adicionar 200 µL da amostra pura, a 2mg/mL, nos 2 primeiros
poços da placa de fundo curvo, acrescentou-se 100 µL de água nos poços
restantes. Em seguida passou-se seriadamente 100 µL da primeira casa e
despejando na de baixo, fazendo isso seguidamente até o final da coluna.
Ademais, foi colocado uma amostra desconhecida e água pura, a fim
comparativo.

COLORIMETRIA

Posteriormente a diluição, passou-se 10 µL