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ESCOLA SUPERIOR BATISTA DO AMAZONAS

Marissa de Almeida Chicre

RELATRIO DE AULA PRTICA

MANAUS AM 2011

Marissa de Almeida Chicre

RELATRIO DE AULA PRTICA

Relatrio apresentado para compor a nota da disciplina DE Microbiologia de Medicina Veterinria, sob orientao da Prof. MSc. Victria T. de M. G. Malagueta.

MANAUS AM 2011

SUMRIO

INTRODUO................................................................................................... 04 1 OBJETIVOS.................................................................................................... 05 2 PARTE EXPERIMENTAL............................................................................... 06 2.1 PREPARAO DAS PLACAS DE PETRI.................................................. 06 2. 2 OBSERVAO DO CRESCIMENTO DAS COLNIAS............................. 08 2. 3 FIXAO DA COLNIA NA LMINA.........................................................10 2. 4 OBSERVAO DAS LMINAS EM MICROSCPIO................................ 11 CONCLUSES.................................................................................................. 12 ANEXO I............................................................................................................13 ANEXO II...........................................................................................................14

INTRODUO

Estamos constantemente em contato com microorganismos, nosso corpo, nossos objetos, alimentos e nos ambientes. Estes seres unicelulares nem sempre so prejudiciais a sades dos seus hospedeiros. O que determina seu efeito patognico ou no se estabelece relao harmnica ou desarmnica com o organismo que esta interagindo ou tambm o seu nvel de concentrao, nmero de indivduos vivos. Por isso a Microbiologia que a cincia que estuda o ciclo de vida, a morfologia, a fisiologia, entre outras caractersticas dos organismos microscpicos, vem para contribuir fundamentalmente paras as reas de sade, proporcionando atravs deste conhecimento as possibilidades de combate, inibio e preveno contra os efeitos patognicos destes agentes. Sendo assim, tambm cabe ao mdico veterinrio a credibilidade em identificar e diferenciar os tipos e efeitos destes pequeninos indivduos em sua prtica acadmica e profissional, para que sua atuao contribua com o bem estar tanto dos animais quando do prprio homem, devido a existncia das zoonoses. Neste relatrio sero descritos os procedimentos realizados e as observaes obtidas em laboratrio, nos dias 26 a 29 de setembro de 2011, a partir do cultivo em Agar gel de microorganismos retirados de alimentos em estado de putrefao e de parte do corpo.

1 OBJETIVOS

Verificar a presena de microorganismos nos alimentos estragados; Aprender a tcnica de isolamento fngico e bacteriano de swab e in print em cultivo de Agar gel; Aprender o processo de fixao da colnia na lmina e os procedimentos de um antibiograma; Incentivar a curiosidade cientfica.

2 PARTE EXPERIMENTAL 2.1 PRIMEIRO DIA


No dia 26 de setembro de 2011, a professora Victria Malagueta, docente da disciplina de Microbiologia, realizou, junto com os acadmicos do 3 perodo do curso de Medicina Veterinria da Escola Superior Batista do Amazonas, em Laboratrio, primeiramente, a anlise de alimentos trazidos pelos prprios alunos, que j estavam iniciando o processo de colonizao de microorganismos. Os alimentos e os respectivos acadmicos que os levaram foram: Po de forma integral: Cristiane; Brioche: Marlia; Manga: Ingrid Caroo de manga: Carmem; Morango: Marlia; Salada de fruta: Samara; Queijo: Valdeiza.

Cada alimento foi observado na lupa eletrnica, que proporcionou a identificao de esporos de fungos em quase todos os alimentos, com exceo do queijo, alm da presena de caros no morando e no po de forma integral. Em seguida cada aluno recebeu dois swabs e duas placas de Petri com Agar gel. Umas delas seria para o cultivo da amostra de uma alimento e a outra de uma parte do corpo, como cabelo, mo, p, olho, boca, orelha, nariz. Para as parte do corpo seca o swab precisou ser umedecido, o que no necessrio no caso da boca, olhos e nariz. Todo procedimento foi feito dentro da cabine de segurana biolgica e prximo do bico de bunsen para evitar a contaminao do ambiente e das pessoas. Aps a coleta de uma amostra do material (Foto 1 no Anexo I), a parte do swab contaminada toca suavemente o gel (Foto 2 no Anexo I), desgastando-se bem e depois seguindo em direo ao centro da placa de Petri em zig-zag. Esse procedimento deve ser feito mais duas vezes, porm sempre evitando que as linhas do zig-zag se tocam, proporcionando assim uma concentrao e densidade de microorganismos diferentes na placa.

Tambm foi realizada a tcnica in print com o p do aluno Ricardo e cabelo do Guilherme, que consistiu em tocar o gel da placa de Petri na parte do corpo especfica, permitindo uma impresso deste material no gel. A seguir o nome dos alunos e os seus respectivos materiais coletados, alm da professora Victria: Marissa: boca e salada de fruta; Valdeiza: olho e queijo; Victria: nariz e manga; Anglica: nariz e po de forma integral; Maiara Neves: cabelo e brioche; Samara: cabelo e salada de fruta; Raimundo: mo e po de forma integral; Carmem: mo e manga; Cristiane: mo e po de forma integral; Guilherme: p e caroo de manga; Marlia: mo e brioche; Joo: mo Elton: ouvido e caroo de manga; Raiane: cabelo e morango; Cassius: cabelo Maiara Brasil: boca e po de forma integral.

Aps a coleta de todas as placas e suas devidas identificaes com o nome de cada aluno e o material coletado, foram guardas na estufa a uma temperatura de 37C, temperatura esta que melhor viabiliza o crescimento dos microorganismos.

2.2 SEGUNDO DIA No dia 27 de setembro de 2011 todas as placas de Petri foram retiradas da estufa e cada aluno pegou a sua para fazer a observao do crescimento das colnias. No cabelo do Guilherme por in print observou-se um crescimento lento e no circunscrito de fungos. J a sua manga observou-se um crescimento maior, onde a colnia j se apresentava algodonada. Na placa de seu p foram encontrados fungos e bactrias. Na amostra de olho de Valdeiza no houve um crescimento aparente mais h um provvel crescimento de bactrias. Na placa do queijo no houve um bom desgaste do material no primeiro contato com o gel, o que no permite uma diferenciao dos crescimentos, mas observou-se partes algodonosas. Com as amostras da professora observou-se que no houve contato entre os crescimentos. Na sua placa com a manga, houve apenas crescimento fngico e na do nariz foram vistas colnias isoladas de estafilococos. Na do nariz da Anglica observou-se pontos rosados

(caractersticas de estreptococos) e brancos (estafilococos). No cabelo e na salada de fruta da Samara foram encontrados fungos e bactrias. No cabelo de Maiara Neves observamos o crescimento de bactrias e no brioche a colnia de fungos at apresentou aparncia algodonada. Tambm haviam bactrias no brioche. Na mo de Raimundo encontraram-se colnias arredondadas de bactrias e as de fungo no se apresentavam to arredondas. No po integral escolhido por ele observou-se apenas bactrias.

Na mo de Carmem e Cristiane havia a presena de fungos e bactrias e na manga de uma, o crescimento bem delimitado e algodonado de fungos e no po integral da outra fungos e bactrias. No brioche que Marlia colheu amostra observou-se em sua placa o desenvolvimento de colnia bacteriana alaranjadas e um fungo preto. Em sua mo foram identificados fungos e bactrias. Na mo do Joo observou-se crescimento fungico e bacteriano. No seu alimento escolhido a colnia ainda estava em crescimento. No ouvido do Elton observou-se um crescimento lento devido a cera do ouvido que inibe a proliferao. No cultivo de in print do p do Ricardo vimos fungos e bactrias. No seu alimento escolhido apenas fungos. No cabelo de Raiane vimos um crescimento bacteriano menos do que o da Samara provavelmente porque esta lavou o cabelo um dia antes do experimento. No morango que Raiane escolheu o crescimento fngico foi bem pequeno, porque o morango j se encontrava em estgio bem avanado de decomposio o que pode ter levado os fungos nele contido ao declnio, pois o meio no estava mais favorvel ao seu desenvolvimento, ento quando chegaram a gel a colnia ir inicia primeiramente o reconhecimento do meio em fase lag lenta. No cabelo de Cassius houve crescimento de fungos e bactrias e no seu alimento houve um amplo crescimento de fungos. Na boca de Maiara Brasil houve um crescimento igual ao da minha placa (Foto 3 no Anexo I), apenas bactrias. J no po integral escolhido vimos alm de bactrias, poucos fungos. Na minha placa da salada de fruta foram identificados 2 ou 3 tipos diferentes de fungos (Foto 4 no Anexo I).

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2. 3 FIXAO DA COLNIA NA LMINA Este experimento foi realizado no dia 28 de setembro de 2011 e iniciou-se com a flambagem rpida do vidro da lmina para o esterilizar mas evitar que o quebre se muito aquecido. Em seguida a flambagem da ala. Depois pingamos uma gota de gua na lmina para receber a coleta do material que estava na placa de Petri, tocado levemente pela ala e depois esfregar este material junto com a gua espalhando-o pela lamina para que os organismos fiquem bem isolados. Em seguida flambou-se novamente a lmina at seca a gua, proporcionando a fixao do organismo no vidro. Em seguida aplicou-se a tcnica de colorao de Gram que segue os seguintes passou (Foto 5 no Anexo I): Colorao violeta genciana (1 minuto); Lugol (1 minuto); lcool pra descolorar (at tirar o corante anterior); Lavar com gua; Aplicar colorao de safranina (1 minuto); Lavar com gua novamente.

Microscopicamente seguindo esse procedimento, as bactrias isoladas ficaram avermelhadas de forem Gram negativas e violeto-azuladas se forem Gram positivas. Em meu experimento escolhi uma amostra de bactrias da placa que continha o crescimento de organismos da minha boca. A lmina macroscopicamente ficou com pontos avermelhados.

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2. 4 OBSERVAO DAS LMINAS EM MICROSCPIO No dia 29 de setembro de 2011 fizemos a anlise microscpica das lminas que fixamos e coloramos no dia anterior. Segundo orientao da Professora Victoria, em minha foram observados no aumento de 1000 do microscpio, estafilococos violeta-azulados, o que significa que no bactrias Gram positivas, conforme ilustrado no Axeno II deste relatrio.

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CONCLUSO

Esta atividade em laboratrio foi extremamente importante para ns acadmicos, pois alm de podermos conhecer melhor e de forma prtica o crescimento dos microorganismos macro e microscopicamente, pudemos conhecer tambm, as tcnicas, to importantes, utilizadas para identificao de do organismo que est contido em determinado material, para podermos, como futuros profissionais de Medicina Veterinria, realizar o tratamento e combate especficos a este determinado agente patognico.

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ANEXO I

Foto 1

Foto 2

Foto 3

Foto 4

Foto 5

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