BIO 141C BIOLOGÍA DE LA CÉLULA

Dr. María Paz Marzolo C

Retículo endoplásmico (RE) y el

Aparato de Golgi (AG),
Secreción de proteínas I
La Ruta Exocítica y Endocítica
Organelos subcelulares involucrados en la Ruta exocítica y endocítica
IF y EM del retículo endoplásmico
 Cisternas apiladas de membrana
del RER

Poli-ribosomas unidos a la membrana

del ER
Estructura del Retículo endoplásmico: Liso (REL) y Rugoso (RER)

REL RER

Reconstrucción tridimensional
Obtención de Fracción microsomal
 Funciones del RE

• Síntesis de lípidos

• Síntesis de
proteínas de
secreción y de
membrana

• Activación de la
Respuesta a
“Proteínas Mal
Plegadas”
SINTESIS DE PROTEINAS
Inserción co-traduccional de proteínas secretorias en microsomas
Estructura del SRP
El péptido señal y el SRP llevan al ribosoma a la membrana del RER
Requerimiento energético para la inserción del péptido naciente
en el translocón.
Síntesis de proteínas de secreción en RER
Translocación de una proteína a través de la membrana del RER
Identificación de las proteínas que forman el translocón
Inserción de proteínas de membrana en el RER
Diferentes topologías de proteínas de membrana
SINTESIS DE PROTEÍNAS DE MEMBRANA TIPO I
SINTESIS DE PROTEINAS DE MEMBRANA TIPO II
SINTESIS DE PROTEÍNAS POLITÓPICAS
 RESUMEN
* En ribosomas unidos a la membrana del RE se sintetizan proteínas
de secreción, enzimas y proteínas del RE, aparato de Golgi y
lisosomas. La síntesis comienza con los ribosomas libres.

* • El péptido señal está compuesto por aminoácidos de carácter

hidrofóbico, que es reconocido por la partícula de reconocimiento del
péptido señal (SRP) la que a su vez es reconocida por un receptor en
la membrana del RER.

* • Generalmente el péptido señal se localiza hacia el extremo

aminoterminal de la proteína y se corta en el lúmen del RER .

* • El SRP dirige tanto la unión del ribosoma a la membrana y la

inserción de la proteína naciente al canal de transmembrana. La
hidrólisis de GTP por la subunidad P54 del SRP y la subunidad alfa
del receptor SRP es esencial para este proceso.

* • Las proteínas cruzan la membrana del RER en un estado

desplegado a través del canal proteico, el translocón, un complejo
multiproteico compuesto de TRAM y el complejo sec61.

* • En células de mamífero las proteínas de membrana requeridas

para la translocación son el receptor de SRP, TRAM y sec61.
Modificaciones Post-traduccionales y Control de calidad en
RER

Las Proteínas neosintetizadas en la membrana y el lumen del RER

experimentan una serie de modificaciones antes de alcanzar su
destinación final:

1. Formación de Puentes disúlfuro

2. Plegamiento correcto

3. Incorporación y procesamiento de azúcares (carbohidratos).

4. Cortes proteolíticos específicos.

5. Ensamblaje de complejos multiméricos.

6. Degradación de proteínas mal plegadas

Reordenamiento de los enlaces disulfuro por la Disulfito Isomerasa
(PDI)
Modificación post-traduccional: N-glicosilación
Incorporación de N- azúcares en el RE
Plegamiento de la hemaglutinina y glicosilación en el RE.
Modificación Postraduccional: Anclaje de proteínas a un tallo
de glicofosfatidilinosiltol (GPI)
 RESUMEN

* El ambiente oxidante del RER favorece la oxidación de los grupos SH-

de las cisteínas a enlaces S-S, mientras que esta reacción no está
favorecida en el citosol. De esto se desprende que los puentes S-S son
comunes en proteínas secretorias y en los ectodominios de proteínas de
membrana, y están ausentes en proteínas citosólicas.

* La enzima PDI, localizada en el lumen del RE cataliza el reordenamiento

de los S-S, acelerando el plegamiento de proteínas de secreción y de
membrana en el RER.

*El Plegamiento de proteínas en el RER está facilitada por otras proteínas

chaperonas como BIP y lectinas como calnexina y calrreticulina.

* El ensamblaje de subunidades para formar proteínas multiméricas

ocurre en el RER.

* Solo las proteínas plegadas correctamente serán transportadas fuera

del RE hacia el Aparato de Golgi en transportadores vesiculares.

.
 Resumen (continuación)

* Proteínas mal plegadas o subunidades no ensambladas se retienen

selectivamente en el RER ya sea como agregados o porque están
unidos a la Hsc70 u otra chaperona.

* Las proteínas mal ensambladas son a menudo devueltas al citosol a

través del translocón y son luego degradadas por el proteosoma
previa ubiquitinación.

* La acumulación de proteínas mal plegadas en el lumen del RE

induce una producción aumentada de la UPR.

* Algunas proteínas del RE se retienen por la presencia de una

secuencia KDEL en el carboxilo terminal que es reconocido por el
receptor de KDEL, que cicla entre las zona cis del aparato de Golgi y
el RE.
EL APARATO DE GOLGI
Función relevante del AG en célula secretoria
EL APARATO DE GOLGI
Compartamentalización Funcional del Aparato de Golgi
Funciones del Aparato de Golgi: Procesamiento de azúcares
Funciones del Aparato de Golgi: Procesamiento de azúcares
Funciones del Aparato de Golgi: Procesamiento de azúcares
Funciones del AG: Procesamiento Proteolítico
 Función del AG: Modificación de enzimas lisosomales
y segregación en su transporte

Transporte de enzimas lisosomales

Síntesis de Manosa
6 -fosfato
Segregación de proteínas de acuerdo a su destinación final ocurre en
la zona Trans del AG
Segregación de proteínas de acuerdo
a su destinación final ocurre en
la zona Trans del AG
Páncreas exocrino
RUTAS DE TRAFICO VESICULAR
Mecanismo básico presente en todo evento de transporte vesicular
Proteínas que definen transporte vectorial en la célula
ETAPAS EN EL TRANSPORTE VESICULAR DE
PROTEINAS

• Formación de la cubierta: Reclutamiento de proteínas

citosólicas, selección de carga, deformación de
membrana, yemación, fisión (liberación de la vesícula).

• Liberación de cubierta: hidrólisis de GTP y,o ATP

• Reconocimiento de membrana blanco y anclaje

• Fusión de membranas
 Etapas y Componentes de Cubierta en la Ruta Exocítica

Transporte anterógrado entre Retículo y Golgi: vesículas con COPII y sar1p

Transporte retrógrado entre Golgi y Retículo: vesículas con COPI y ARF

Transporte entre cisternas de Golgi : vesículas con COPI y ARF

Transporte entre Golgi y sistema endosoma/lisosoma: vesículas con

clatrina, ARF y AP1

Transporte entre Golgi y membrana plasmática: ?

Transporte Vesicular: Proteínas participantes en
las distintas etapas
•Proteínas de Cubierta: Clatrina,
Adaptinas, Coatómeros (COP-I, COP-II)

•Receptores de carga y de cubierta

•Proteínas de anclaje:reconocimiento

•SNARES: fusión de membrana

•Rabs: Regulación del proceso a varios

niveles
Formación de una vesícula
Ensamblaje y desensamblaje de vesículas cubiertas :
Requerimientos de activación y desactivación de
GTPasas
 COPI: Transporte de proteínas entre
Golgi
y RE (retrógrado) y entre cisternas de
Golgi (anterógrado)

COPII: Transporte de proteínas de

membrana y secreción entre RE y
Golgi