Analise Agua Bolso

MANUAL DE BOLSO
Manual Prtico de Anlise de gua
Braslia, 2004
Copyright 2004 Fundao Nacional de Sade (Funasa) Ministrio da Sade Editor Assessoria de Comunicao e Educao em Sade Ncleo de Editorao e Mdias de Rede/Ascom/Presi/Funasa/MS Setor de Autarquias Sul, Quadra 4, Bl. N, 5 andar - sala 511 70.070-040 - Braslia/DF Distribuio e Informao Departamento de Engenharia de Sade Pblica (Densp) Setor de Autarquias Sul, Quadra 4, Bl. N, 6 Andar Ala Sul Telefone: 0XX61 314-6262 - 314-6380 70.070-040 - Braslia/DF Tiragem 5.000 exemplares
Brasil. Fundao Nacional de Sade. Manual prtico de anlise de gua. 1 ed. - Braslia: Fundao Nacional de Sade, 2004. 146 p. 1. Saneamento. I. Ttulo.
permitida a reproduo parcial ou total desta obra, desde que citada a fonte. Impresso no Brasil Printed in Brazil
Apresentao
Este manual, elaborado de forma e linguagem simples, t em como objetivo auxi liar pessoas que t rabalham nos laboratrios de controle da qualidade da gua de estaes de tratamento de pequeno e mdio porte, no desenvolvimento de suas atividades dirias. A idia surgiu da necessidade de se ter no laboratrio um instrumento de consulta que pudesse acompanhar os passos do tcnico a todo instante e em qualquer lugar. Nele esto descritos os procedimentos mais comuns que so real izados rotineiramente no laboratrio de uma ETA. Qualquer procedimento aqui abordado que necessite de um conhecimento mais profundo, deve-se consultar os grandes compndios que tratam do assunto, como por exemplo, o Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater, publicao da AWWA, APHA e WPCF. A primeira parte do manual aborda o s exames bacteriolgicos envolvendo a pesquisa de coliformes totais e termotolerantes, inclusive Escherichia coli e a contagem padro de bactrias heterotrficas, desde a preparao do material a ser utilizado, passando pela realizao dos ensaios at a emisso de resultados. Na segunda parte esto descritas as tcnicas das anlises fsico-qumicas e testes de rotina de uma ETA e, finalmente, a preparao de todos os reagentes utilizados. Foram includos, tambm, alguns procedimentos de biossegurana em laboratrio, a Portaria MS n 518/2004 que trata das Normas e Padres de Potabilidade da gua para consumo humano no Brasil e uma relao de equipamentos e materiais de laboratrio.
Acredita-se que os parmetros aqui descritos so suficientes para monitorar o controle da qualidade da gua distribuda para consumo humano em diversas localidades do pas. O exame da gua, principalmente daquela destinada ao consumo humano, de fundamental importncia. Por ele pode-se ter certeza de que a gua distribuda de confiana, se est isenta de microorganismos ou substncias qumicas que podem ser prejudiciais sade das pessoas. Distribuir gua sem antes examin-la um tiro no escuro, muitas vezes de conseqncias irremediveis.
Sumrio
Apresentao Exame bacteriolgico da gua.................... 7 Coliformes termotolerantes ...................... 7 Bactrias heterotrficas............................ 7 Anlises fsico-qumica da gua ................. 35 Titulomtricas .......................................... 35 Colorimtricas ......................................... 35
Exame bacteriolgico da gua

Coliformes totais Coliformes termotolerantes Bactrias heterotrficas
Introduo
A gu a pot vel no deve cont er microorganis mos patognicos e deve estar livre de bactrias indicadoras de contaminao fecal. Os indicadores de contaminao fecal, tradicionalmente aceitos, pertencem a um grupo de bactrias denominadas coliformes. O principal representante desse grupo de bactrias chama-se Escherichia coli. A Portaria n 518/2004 do Ministrio da Sade estabelece que sejam determinados, na gua, para aferio de sua potabilidade, a presena de coliformes totais e termotolerantes de preferncia Escherichia coli e a contagem de bactrias heterotrficas. A mesma portaria recomenda que a contagem padro de bactrias no deve exceder a 500 Unidades Formadoras de Colnias por 1 mililitro de amostra (500/UFC/ml)
Bactrias do grupo coliforme

Conceito:
Denomina-se de bactrias do grupo coliforme bacilos gramnegativos, em forma de bastonetes, aerbios ou anaerbios facultativos que fermentam a lactose a 35-37C, produzindo cido, gs e aldedo em um prazo de 24-48 horas. So tambm oxidase-negativos e no formam esporos. A razo da escolha desse grupo de bactrias como indicador de contaminao da gua deve-se aos seguintes fatores: esto presentes nas fezes de animais de sangue quente, inclusive os seres humanos; sua presena na gua possui uma relao direta com o grau de contaminao fecal;
Fundao Nacional de Sade
so facilmente detectveis e quantificveis por tcnicas simples e economicamente viveis, em qualquer tipo de gua; possuem maior tempo de vida na gua que as bactrias patognicas intestinais, por serem menos exigentes em termos nutricionais, alm de s er incapazes de se multiplicarem no ambiente aqutico; so mais resistentes ao dos agentes desinfetantes do que os germes patognicos. A Contagem Padro de Bactrias muito importante durante o processo de tratamento da gua, visto que permite avaliar a eficincia das vrias etapas do tratamento. importante, tambm, conhecer a densidade de bactrias, tendo em vista que um aumento considervel da populao bacteriana pode comprometer a deteco de organismos coliformes. Embora a maioria dessas bactrias no seja patognica, pode representar riscos sade, como tambm, deteriorar a qualidade da gua, provocando odores e sabores desagradveis. As tcnicas adotadas neste manual para quantificar os coliformes e hetertrofos na gua so as preconizadas no Standard Methods for the Examination of Water and Was tewater p ubli cao da Ameri can Publ ic Heal th Association (APHA), American Water Works Association (AWWA) e Water Environment Federation.
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Algumas doenas veiculadas pela gua e seus agentes

Doenas Agentes Origem bacteriana patognicos Febre tifide e paratifide Disenteria bacilar Clera Gastroenterites agudas e diarrias Salmonella typhi Salmonella parathyphi A e B Shigella sp Vibrio cholerae Escherichia coli enterotxica Campylobacter Yersnia enterocoltica Salmonella sp Vrus da hepatite A e B Shigella sp Vrus da poliomielite Vrus Norwalk Rotavirus Enterovirus Adenovirus Entamoeba histolytica Girdia lmblia Cryptosporidium
Origem viral Hepatite A e B Poliomielite Gastroenterites agudas e crnicas Origem parasitria Disenteria amebiana Gastroenterites Fonte: Opas, 1999
Material utilizado em bacteriologia

a) autoclave; b) estufa bacteriolgica; c) estufa de esterilizao e secagem; d) balana; e) destilador; f) banho-maria; g) contador de colnias; h) ala de platina com cabo; i) tubo de Durhan;
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j) tubo de ensaio; k) algodo em rama; l) meios de cultura;
m) frascos de coleta; n) pipetas graduadas; o) papel-alumnio; p) lamparina a lcool ou bico de Bunsen; q) placas de Petri; r) pina de ao inox; s) membranas filtrantes; t) porta-filtro de vidro ou ao inox; u) lmpada ultravioleta.
Preparo do material de vidro

Tubos de ensaio
a) colocar o tubo de Durhan na posio invertida dentro do tubo de ensaio; b) tampar o tubo de ensaio com um chumao de algodo em rama.
Frascos de coleta
a) colocar duas gotas (0,1 ml) de Tiossulfato de Sdio a 10% dentro do frasco; b) colocar uma tira de papel-alumnio entre a boca tampa do frasco; c) envolver a boca e tampa do frasco em papel-alumnio.
e a
Pipetas
a) colocar um pequeno chumao de algodo no bocal da pipeta; b) envolv-la em papel-alumnio ou papel-madeira (Kraft).
Placas de petri de vidro

a) envolv-las em papel-alumnio ou papel-madeira.
Nota: Frascos de coleta, pipetas e placas de Petri devem ser esterilizados e antes de serem preparados devem estar limpos e secos (ver esterilizao pg. 48).
Meios de cultura
a) caldo lactosado; b) caldo lactosado verde brilhante Bile a 2%; c) caldo EC; d) Plate Count Agar
Preparao dos meios de cultura

Caldo lactosado de concentrao dupla a) pesar 26 gramas do meio de cultura e dissolver em 1.000 ml de gua destilada; b) distribuir em tubos de ensaio (10 ml em cada tubo), tampar os tubos;
c) esterilizar a 121 C (1 Kg/cm2 de presso) em autoclave
durante 15 minutos;
d) deixar esfriar; e) guardar no refrigerador (vlido por uma semana).

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Caldo lactosado de concentrao simples a) pesar 13 gramas do meio de cultura desidratado e dissolver em 1.000 ml de gua destilada; b) distribuir em tubos de ensaio (10 ml em cada tubo), tampar os tubos;
durante 15 minutos;
d) deixar esfriar; e) guardar no refrigerador (vlido por uma semana). Caldo lactosado verde brilhante bile a 2% a) pesar 40 gramas do meio de cultura desidratado e dissolver em 1.000 ml de gua destilada; b) distribuir em tubos de ensaio (10 ml em cada tubo), tampar os tubos;
durante 15 minutos;
d) deixar esfriar; e) guardar no refrigerador (vlido por uma semana). Meio EC a) pesar 37,0 gramas do meio desidratado e dissolver em 1000 ml de gua destilada; b) distribuir em tubos de ensaio contendo o tubo Durhan invertido, 10 ml em cada tubo, tampar os tubos;
c) esterilizar a 121 C (1Kg/cm2 de presso) em
durante 15 minutos;
autoclave
d) guardar no refrigerador (Vlido por 96 horas).

Plate Count Agar a) pesar 20,5 gramas do meio de cultura desidratado e dissolver em 1000 ml de gua destilada fria; b) deixar em repouso durante 5 minutos; c) aquecer, agitando freqentemente com basto de
vidro, at completa dissoluo do meio (durante o aquecimento no deixar entrar em ebulio); d) se necessrio, ajustar o pH para 7,0 com Hidrxido de Sdio soluo normal (NaOH 1N); e) distribuir em tubos de ensaio com tampa rosquevel (12 ml em cada tubo );
f) esterilizar a 121 C (1 Kg/cm2 de presso) em autoclave
durante 15 minutos.
Notas: 1. Este meio, depois de frio, se solidifica. Fundir em banhomaria antes de us-lo. 2. Devido variedade de meios de cultura existentes no mercado, seguir sempre as instrues do fabricante, que vem estampada no rtulo do frasco.
gua de diluio
Soluo 1 - Pesar 34 gramas de Fosfato de Potssio Monobsico (KH2PO4 ) e dissolver em 500 ml de gua destilada, ajustar o pH para 7,2 com Hidrxido de Sdio, soluo normal (NaOH 1N) e diluir a 1 litro com gua destilada. Normalmente so necessrios 175 ml de NaOH 1N para elevar o pH.
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Soluo 2 - P es ar 8 1,1 gramas de C loreto d e M agnsi o hexahidratado (MgCl2.6H2 O) e dissolver em 1 litro de gua destilada. Soluo 3 - Adicionar 1,25 ml da soluo 1 e 5 ml da soluo 2 a 1 litro de gua destilada. Distribuir em tubos de ensaio em quantidade que, aps autoclavao, assegurem um volume de 9 0,2 ml.
- Esterilizar em autoclave a 121 C (1Kg/cm2 de presso)
durante 15 minutos.
Modo de usar a gua de diluio quando for determinar o NMP de coliformes

a) tomar 1 tubo de ensaio contendo 9 0,2 ml de gua de diluio esterilizada; b) adicionar 1 ml da amostra de gua a ser examinada; c) misturar bem. Est pronta a diluio 1:10; d) tirar da diluio acima, com pipeta esterilizada, 1 ml e inocular no tubo contendo caldo lactosado de concentrao simples. (diluio 1:100).
Coleta de amostras de gua para exames bacteriolgicos

As amostras devem ser coletadas em frascos de vidro branco, boca larga, com tampa de vidro esmerilhada, bem ajustada, capacidade de 125 ml, previamente esterilizados ou saco plstico estril, descartvel, contendo pastilha de tiossulfato de sdio .
Os frascos para a coleta de guas cloradas devem receber, antes de serem esterilizados, 0,1 ml (2 gotas) de tiossulfato de sdio a 10%.
Procedimentos para coleta em residncias

a) lavar as mos com gua e sabo; b) limpar a torneira do usurio com um pedao de algodo embebido em lcool; c) abrir a torneira e deixar escorrer a gua durante 1 ou 2 minutos; d) fechar e flambar a torneira; e) abrir novamente a torneira e deixar escorrer por mais 2 ou 3 minutos; f) coletar a amostra de gua; g) encher com pelo menos 3/4 de seu volume; h) tampar o frasco, Identific-lo, anotando endereo, a hora e a data da coleta, o estado do tempo, o nome do coletor, etc; i) marcar o frasco com o nmero da amostra, correspondente ao ponto de coleta; j) preencher a ficha de identificao da amostra de gua; k) colocar o frasco da amostra na caixa de isopor com gelo; l) lacrar, identificar e enviar a caixa para o laboratrio. O tempo de coleta e a realizao do exame no deve exceder 24 horas;
Nota: Alm de residncias as amostras podem ser coletadas em hospitais, escolas, torneiras pblicas, etc, o procedimento o mesmo acima. Segundo a Cetesb antes da coleta, a
torneira pode ser flambada, se necessrio. Entretanto, esse procedimento no muito aconselhvel, pois alm de provocar danos s torneiras, comprovou-se no ter efeito letal sobre as bactrias. atualmente o processo de flambagem opcional. A Cetesb e Standard Methods recomendam utilizar soluo de hipoclorito de sdio a 100 mg/l e utilizando esse procedimento deve se remover completamente o hipoclorito, antes da coleta.
Fases do procedimento
Fonte: OMS, 1998

Outros locais de coleta

Nas estaes de tratamento, as amostras so coletadas na captao (gua bruta), nos decantadores, na sada dos filtros e nos reservatrios de gua tratada.
Procedimentos para o exame Coliformes totais

Mtodo dos tubos mltiplos Material necessrio: a) tubo de ensaio. b) estante para tubo de ensaio. c) tubo de Durhan. d) pipeta graduada de 10 mL. e) pipeta graduada de 1 mL. f) bico de Bunsen ou lamparina a lcool. g) caldo Lactosado de concentrao dupla. h) caldo Lactosado de concentrao simples. i) caldo Lactosado Verde Brilhante Bile a 2%. j) gua de diluio. k) ala de platina com cabo de Kolle. l) estufa bacteriolgica.
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Execuo do teste
Teste presuntivo a) t omar uma bateria contendo 15 tubos de ens aio distribudos de 5 em 5; b) n os p rimeiro s 5 t ubo s, ( os que co ntm cal do l act osado de concentrao dupl a) inocular com pipeta esterilizada, 10 ml da amostra de gua a ser examinada, em cada tubo. (Diluio 1:1); c) nos 10 tubos restantes (os que contm caldo lactosado de concentrao simples), inocular nos 5 primeiros, 1 ml da amostra (Diluio 1:10) e nos 5 ltimos tubos, inocular 0,1 ml da amostra, em cada tubo. (Diluio 1:100). Ver pgina 22; d) misturar; e) incubar a 35 0,5 C durante 24/48 horas; f) s e no final de 24/48 horas, houver a formao de gs dentro do tubo de Durhan, significa que o teste Pres untivo foi Pos itivo. Neste caso, fazer o test e confirmativo. Se no houver a formao de gs durante o perodo de incubao, o exame termina nesta fase e o resultado do teste considerado negativo.
Observao: No lugar do caldo Lactosado pode ser usado o caldo Lauril Triptose.
Teste comparativo a) tomar o nmero de tubos do Teste Presuntivo que deram Positivos (Formao de gs) nas 3 diluies 1: 1; 1:10 e 1:100;
b) tomar igual nmero de tubos contendo o Cultura Verde Brilhante Bile a 2%;
meio de
c) com a ala de platina, previamente flambada e fria, retirar de cada tubo positivo uma poro de amostra e inocular no tubo correspondente contendo o meio Verde Brilhante. Este procedimento chama-se repicagem; d) identificar os tubos; e) incubar durante 24/48 horas a 35 0,5C; f) se no final do perodo de 24/48 horas houver a formao de gs dentro do tubo de Durhan o teste considerado Positivo. Caso no haja formao de gs, o teste considerado negativo. Fases do teste
I nocu lar em Cl ou CLT e i no cul ar p or 24 2 h s a 3 5
0 ,5 0 C
( A ) Fo r m a o d e g s o u cr esci m ent o f or t e. Con fi r m ar em VB a 35 0, 50 C du r ant e 2 4/ 48 ho r as
( B ) Au s n ci a de gs o u pr od uo d uv id os a. In cub ar po r + 24 ho r as
1 ) N o p r o d u z g s . 2 ) P r o d u z g s . A u s n c ia d o g r u p o G r u p o c o li fo r me c ol if or me c o nf ir mad o .
1 ) P r o d u o d e g s o u A u s n c i a d e g s . 2) p r o d u o d u v i d o s a e e s t e n e ga t iv o p ar a o t cr es c ime n to fo r te . co mo e m ( A) g ru p o c o lif or me
Nota: CL = Caldo lactosado Co n fir ma r CLT = Caldo lauri triptose VB = Verde brilhante bile a 2%
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Expresso dos resultados a) os resultados so expressos em N.M.P (Nmero Mais Provvel) /100 ml de amostra. b) para se determinar o N.M.P, verifica-se a combinao f ormada pelo nmero de t ubos pos i tivos qu e apresentaram as diluies 1:1; 1:10 e 1:100 no Teste Confirmativo. Exemplo: a) nos 5 tubos da diluio 1:1, obtiveram-se 3 tubos positivos; b) nos 5 tubos da diluio 1:10, obtiveram-se 2 tubos positivos; c) nos 5 tubos da diluio 1:100, obteve-se 1 tubo positivo; d) formou-se, portanto, a combinao 3-2-1; d) determina-se o N.M.P consultando a tabela 1. Se no quiser trabalhar com 15 tubos para determinar o NMP fazer apenas 5 tubos na diluio 1:1 (10 ml do meio de cultura + 10 ml da amostra) e calcular o NMP consultando a tabela 2.
0Tabela 1 0-do0 NMP com limite de confiana de 95% para 0- 0 - 1 vrias combinaes de resultados positivos quando 5 tubos so usados 0- 1 - 0 cada diluio (10 ml, 1,0 ml e 0,1 ml) para 0- 2 - 0 1- 0 - 0 Com bi nao d e 1- 0 - 1 pos it i vos NM P/1 00 m l 1- 1 - 0 < 2 1- 1 - 1 1- 2 - 0 2- 0 - 0 2- 0 - 1 2- 1 - 0 2- 1 - 1 2- 2 - 0 2- 3 - 0 3- 0 - 0 3- 0 - 1 3- 1 - 0 3- 1 - 1 3- 2 - 0 3- 2 - 1 4- 0 - 0 4- 0 - 1 4- 1 - 0 4- 1 - 1 4- 1 - 2 4- 2 - 0 4- 2 - 1 4- 3 - 0 4- 3 - 1 4- 4 - 0 5- 0 - 0 5- 0 - 1 5- 0 - 2 5- 1 - 0 5- 1 - 1 5- 1 - 2 Lim i t es I nf eri or Super io r 1. 0 1. 0 1. 0 1. 0 1. 0 1. 0 2. 0 2. 0 1. 0 2. 0 2. 0 3. 0 3. 0 5. 0 3. 0 12 9. 0 4.
2 2 4 2 4 4 6 6 12 4 8 11 7 11 14 7 14 9 17 9 13
17 17 21 26 22 26 27 33 34 23
10 10 13 11 15 15 18 18 17 20 21 24 25 29 24 29 29 35 35
110 40 1 40 1 20 1 50 1 80 1 70 2 10 2 50 2 50 3 00 3 60 4 10 3 90 4 80 5 60 6 90
12 12 15 10 16 20 10 20 30 20 30 40 30 40 60 80 50 70
4. 0 6. 0 9 6. 0 7. 0 5. 0 7. 0 7. 0 9. 0
38 45 46 55 63 56 65 67 77 80 86
110 30 140 40 170 30 130 50 170 60 220 50 280 70
10 0 12 0
22
5- 2 - 0 Fundao Nacional de Sade 5- 2 - 1 90 5- 2 - 2 5- 3 - 0 5- 3 - 1 5- 3 - 2 5- 3 - 3 5- 4 - 0 5- 4 - 1 5- 4 - 2 5- 4 - 3
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continuao tabela 1
Co m bi nao de p osi t i vos NM P/1 00 m l 5- 4- 4 5- 5- 0 5- 5- 1 5- 5- 2 5- 5- 3 Fonte: APHA, 1985 5- 5- 4 350 240 300 16 00 500 = 160 0 900 Li m i t es I n fer io r Su peri or 160 100 100 200 300 600 8 20 9 40 130 0 200 0 290 0 530 0
5- 5 Tabela 2 do5-NMP com limite de confiana de 95% para os resultados positivos quando 5 pores de 10 ml so examinadas
0 1 2 3 4 Fonte: APHA, 1985 5
N m er o de t ubo s pos it i vos N MP/ 100 m l
Li m it es I nf eri or Super io r
< 2,2 2,2 5,1 9,2 16,0 >16,0
0 0,1 0,5 1,6 3,3 8,0
6,0 12,6 19,2 29,4 52,9 Infinito
Coliformes termotolerantes
Mtodo dos tubos mltiplos Material necessrio: a) b) c) d) tubos de ensaio com Meio EC; bico de Bunsen ou lamparina a lcool; ala de platina; banho-maria.
Execuo do ensaio a) tomar todos os tubos do Teste Presuntivo que deram Positivos (Formao de gs) e todos os tubos negativos em que houve crescimento aps 48 horas, nas 3 diluies (1:1; 1:10 e 1:100); b) transferir, com ala de platina flambada e fria, uma poro para os tubos de ensaio contento o meio EC; c) misturar e deixar todos os tubos em banho de gua durante 30 minutos; d) incubar em banho-maria a 44,5 0,2 C durante 24 2 horas; e) se no final de 24 horas ou menos houver a formao de gs, est indicado a presena de coliformes de origem fecal; f) calcular o N.M.P consultando a tabela 1.
Nota: Este ensaio deve ser realizado simultaneamente com o Teste Confirmativo para Coliformes Totais. Observao: Fazer sempre este exame toda vez que forem realizados testes confirmativo para coliformes totais.
Contagem padro de bactrias

Bactrias heterotrficas Material necessrio a) placa de Petri; b) pipeta graduada; c) bico de Bunsen ou lamparina a lcool;
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d) plate Count Agar; e) estufa bacteriolgica; f) contador de colnia. Execuo do ensaio a) transferir, com pipeta estril, 1 ml da amostra para uma placa de Petri previamente esterilizada; b) entreabrir a placa e adicionar o meio de cultura, previamente fundido e estabilizado em banho-maria a 44-46C, contido no tubo de ensaio; c) homogeneizar o contedo da placa em movimentos circulares moderados em forma de ( 8 ), em torno de 10 vezes consecutivas; d) quando o meio de cultura se solidificar, incubar a placa em posio invertida a 35 0,5 C durante 48 3 horas; e) no final do perodo de incubao, fazer a contagem das colnias com o auxlio de um contador de colnias. Expresso dos resultados Os resultados so expressos como n de Colnias de bactrias/ ml ou Unidades Formadoras de Colnias (UFC)/ml. a) antes de iniciar os exames desinfetar a bancada do laboratrio, usando uma soluo de lcool etlico a 70% ou outro desinfetante que no deixe resduo; b) todas as amostras a s erem examinadas devem ser homogeneizadas pelo menos 25 vezes; c) no esquecer de flambar a boca dos tubos de ensaio contendo meios de cultura, antes de us-los;
d) o Tiossulfato de Sdio a 10% colocado nos frascos de coleta para neutralizar a ao do cloro; e) as placas de Petri devem ser colocadas na posio invertida para evitar a condensao de gua na superfcie do gar; f) fazer a Contagem Padro de Bactrias, sempre em duplicata.
Coliformes totais
Mtodo da membrana filtrante Material necessrio: a) equipamento de filtrao com porta-filtro; b) placa de Petri esterilizada de 47 mm; c) filtros de membrana de 47 mm e porosidade de 0,45m, com carto absorvente; d) meio de cultura (M ENDO MF); e) gua de diluio estril; f) pina de ao inox; g) copo de ao inox; h) bico de Bunsen ou lamparina a lcool; i) bomba de vcuo (Seringa); j) estufa bacteriolgica.
Execuo do ensaio a) com a pina, colocar cuidadosamente na placa de Petri um carto absorvente;
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b) com pipeta esterilizada colocar 1,8 ml do meio de cultura no carto absorvente e tampar a placa; c) colocar a membrana filtrante no porta-filtro, com a pina previamente flambada e fria; d) agitar o frasco contendo a amostra, pelo menos 25 vezes; e) destampar e flambar a boca do frasco; f) verter, cuidadosamente, 100 mL de amostra no portafiltro, evitando que a gua respingue sobre as bordas superiores; g) ligar a bomba de vcuo (seringa) e fazer a suco; h) aps filtrada a amostra, lavar 3 vezes as paredes do funil com gua de diluio estril com pores de 20 ml aplicando vcuo; i) aps a lavagem e filtrao, aliviar o vcuo e remover o funil do suporte; j) com a pina flambada e fria, remover o filtro do suporte e coloc-lo na placa de Petri, antes preparada, com o lado quadriculado para cima; k) tampar a placa de Petri e incub-la invertida a 35 C durante 24 2 horas; l) aps o perodo de incubao, examinar o filtro fazendo a contagem das colnias. Leitura dos resultados As colnias indicativas de Coliformes Totais tpicas tm uma cor rosa a vermelho escuro, com brilho metlico. O brilho pode aparecer no centro ou na periferia da colnia. As no coliformes aparecem com colorao vermelho-clara ou escura sem o brilho metlico caracterstico.
Observao: s vezes, quando o disco est muito mido e a fonte de luz muito intensa, as colnias de no Coliformes podem aparecer com um brilho falso, causando erros. Isto poder ser contornado usando-se fonte de luz mais difusa ou secando-se o filtro antes de ser examinado.
Preparo do meio de cultura Material necessrio: a) b) c) d) e) f) meio de cultura desidratado (M ENDO MF); gua destilada; lcool etlico a 95%; frasco Erlenmeyer de 125 ml; vidro de relgio; bico de Bunsen ou lamparina a lcool.
Tcnica a) pesar 4,8 gramas do meio desidratado; b) transferir para o Erlenmeyer; c) adici onar aos poucos 100 ml de gua destilada contendo 2 ml de lcool etlico a 95%; d) aquecer em banho-maria ou no bico de Bunsen at o incio da fervura (no deixar ferver); e) deixar esfriar; f) distribuir 1,8 ml em cada placa.
Observao: 1. Preparar somente a quantidade necessria para uso. Este meio pode ser adquirido em ampolas de 2 ml, porm o custo muito elevado. mais econmico prepar-lo no laboratrio.
2. Em substituio ao Caldo M FC poder ser utilizado o meio slido (gar M-Endo LES).
Coliformes termotolerantes
Mtodo da membrana filtrante Material necessrio a) equipamento de filtrao com porta filtro; b) placa de esterilizada de 47 mm; c) filtros de membrana de 47 mm e porosidade de 0,45m, com carto absorvente; d) meio de cultura (Caldo M FC); e) gua de diluio estril; f) pina de ao inox; g) copo de ao inox; h) bico de Bunsen ou lamparina a lcool; i) bomba de vcuo (seringa); j) estufa bacteriolgica ou banho-maria.
Preparo do meio de cultura Material necessrio: a) b) c) d) meio de cultura desidratado (Caldo M FC); gua destilada; cido roslico a 1% em NaOH 0,2 N; frasco Erlenmeyer de 125 ml;
e) vidro de relgio; f) bico de Bunsen ou lamparina a lcool. Tcnica a) pesar 3,7 gramas do meio desidratado; b) transferir para o Erlenmeyer; c) d is sol ver o mei o pesado, em 100 ml de gu a destilada; d) e) f) g) adicionar 1 ml da soluo de cido roslico a 1%; aquecer at a ebulio; deixar esfriar; distribuir 2,0 ml em cada placa.
Observao: 1. Preparar somente a quantidade necessria para uso; 2. Este meio pode ser adquirido em ampolas de 2 ml,porm o custo muito elevado. mais econmico prepar-lo no laboratrio; 3. Para preparar o cido roslico a 1% dissolver 1 grama do cido em 100 ml de NaOH 0,2 N; 4. Para preparar o NaOH 0,2 N diluir 20 ml da soluo 1N para 100 ml de gua destilada; 5. O cido roslico dura 2 semanas ou menos, quando guardado na geladeira (2 a 10C). Descarte-o quando a colorao mudar de vermelho-escuro 6. Em substituio ao Caldo M FC poder ser para marrom; utilizado o meio slido (gar M FC).
Execuo do ensaio a) com a pina, colocar cuidadosamente na placa de Petri um carto absorvente; b) com pipeta esterilizada colocar 2,0 ml do meio cultura no carto absorvente e tampar a placa;
de
c) colocar a membrana filtrante no porta-filtro, com a pina previamente flambada e fria; d) agitar o frasco contendo a amostra, pelo menos 25 vezes; e) destampar e flambar a boca do frasco; f) verter, cuidadosamente, 100 ml de amostra no porta filtro, evitando que a gua respingue sobre as bordas superiores; g) ligar a bomba de vcuo (seringa) e fazer a suco; h) aps filtrada a amostra, lavar 3 vezes as paredes do funil com gua de diluio estril com pores de 20 ml aplicando vcuo; i) Aps a lavagem e filtrao, aliviar o vcuo e remover o funil do suporte; j) com a pina flambada e fria, remover o filtro do suporte e coloc-lo dentro, da placa de Petri, com o lado quadriculado para cima; k) tampar a placa de Petri e incub-la invertida a 44,5 0,2 C durante 24 2 horas; l) aps o perodo de incubao, examinar o filtro fazendo a contagem das colnias; m) as colnias indicativas de Coliformes termotolerantes aparecem de cor azul. As no coliformes, aparecem com colorao clara ou rsea.
Esterilizao do conjunto de filtrao no campo

a) umedecer cuidadosamente o anel de asbesto situado na base do suporte, com meia tampa de lcool metlico (tampa do frasco de lcool); b) atear fogo;
c) colocar a cuba de ao por cima do funil quas e o tampando; d) aps aquecer a cuba at o suportvel pela mo, tampar o suporte; e) esperar 15 minutos, aproximadamente e ento remover a cuba e lavar o funil com gua de diluio estril a fim de remover qualquer resduo txico.
Observaes: a. A combusto incompleta do metanol provoca a formao de aldedo frmico que o agente esterilizante; b. O suporte do filtro deve estar estril no incio de cada srie de filtrao e essa srie no deve ultrapassar mais de 30 amostras. A cada srie de filtrao efetuar o exame de 100 ml da gua de diluio para controle da esterilidade do porta-filtro; c. Os meios de cultura preparados para uso com membrana filtrante valem por 96 horas quando guardados em refrigerador com temperatura entre 2 a 10 C; d. O conjunto de filtrao tambm pode ser esterilizado em autoclave.
Colimetria total e Escherichia coli

Teste de presena/ausncia Mtodo do substrato cromognico Material necessrio: a) b) c) d)
recipiente de coleta de vidro ou de plstico; substrato Cromognico; estufa bacteriolgica; lmpada ultravioleta de 365 nm.
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Execuo do ensaio a) coletar a amostra em um frasco estril ou saco de coleta contendo tiossulfato de sdio a 10% para gua tratada; b) no prprio frasco ou saco adicionar o contedo de 1 (um) frasconete contendo o substrato cromognico; c) fechar o frasco ou o saco e agitar levemente, no precisa dissolver totalmente, essa dissoluo ocorrer normalmente; d) incubar a 35,0 0,5 C durante 24 horas.
Interpretao e expresso dos resultados

D ecorridos 24 horas de incubao, retirar da estufa o material: ao observar a cor amarela, o resultado presena de Coliformes Totais na amostra. Com o auxlio de uma lmpada ultravioleta 365 nm, observar se existe fluorescncia azul no frasco amarelo aproximando a lmpada do frasco. Caso isso acontea, significa que h presena de Escherichia coli na amostra examinada. Caso a amostra permanea transparente, o res ultado negativo, tanto para Coliformes Totais como para E. coli. Expressar o resultado como: Presena ou Ausncia de Coliformes Totais ou Escherichia coli.
Nota: A fluorescncia azul ocorre somente na presena da luz ultravioleta, ao tirar o frasco da frente da luz ele volta a ficar amarelo.
Esterilizao
Os seguintes materiais devem ser esterilizados: frascos de coleta de amostra, pipetas, placas de Petri de vidro, frascos e tubos com gua de diluio e meios de cultura.
Procedimentos para a esterilizao

a) preparar todo o material; b) verificar o nvel da gua dentro da autoclave est acima das resistncias. Completar se necessrio; c) colocar todo o material dentro do depsito metlico e tampar a autoclave; d) apertar as travas da tampa duas a duas para no permitir sada de vapor pela borda do aparelho. Ligar o aparelho na tomada; e) ligar a chave s el etora de t emperatura na pos io Mximo; f) abrir imediatamente a vlvula de escape de vapor; g) quando comear sair vapor por esta vlvula, esperar trs minutos e fech-la; h) neste instante, o ponteiro do manmetro comear a subir; i) quando o ponteiro atingir a marca de 1Kg/cm de presso, a temperatura dever es tar em 121C. Deixar nes ta posio durante 15 minutos; j) se a presso continuar subindo, coloque a chave seletora de temperatura da autoclave, na posio "mdia e fique observando; k) depois de 15 minutos, o material j estar esterilizado;
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Observao:
Normalmente as autoclaves possuem uma chave seletora de temperatura que indica trs posies Mnima, Mdia e Mxima, justamente para manter a presso e temperatura dentro da faixa utilizada. Serve, tambm, para ligar e desligar o aparelho.
l) desligar o aparelho e esperar que o ponteiro do manmetro atinja a posio 0. Este procedimento poder ser acelerado abrindo-se lentamente a vlvula de escape de vapor; Ateno: No abrir esta vlvula de uma vez! m) quando o ponteiro do manmetro atingir a posio zero e no estiver mais saindo vapor pela vlvula, abrir a tampa do aparelho e retirar o material.
Nota: Existem vrios modelos de autoclaves no mercado. E importante seguir sempre as instrues do fabricante.
Anlises fsico-qumica da gua

Titulomtricas Colorimtricas
Alcalinidade total
A alcalinidade total de uma gua dada pelo somatrio das diferentes formas de alcalinidade existentes, ou seja, a concentrao de hidrxidos, carbonatos e bicarbonatos, expressa em termos de Carbonato de Clcio. Pode-se dizer que a alcalinidade mede a capacidade da gua em neutralizar os cidos. A medida da alcalinidade de fundamental importncia durante o processo de tratamento de gua, pois, em funo do seu teor que se estabelece a dosagem dos produtos qumicos utilizados. Normalmente as guas superficiais possuem alcalinidade natural em concentrao suficiente para reagir com o sulfato de alumnio nos processos de tratamento. Quando a alcalinidade muito baixa ou inexistente h a necessidade de se provocar uma alcalinidade artificial com aplicao de substncias alcalinas tal como cal hidratada ou Barrilha (carbonato de sdio) para que o objetivo seja alcanado. Quando a alcalinidade muito elevada, procede-se ao contrrio, acidificando-se a gua at que se obtenha um teor de alcalinidade suficiente para reagir com o sulfato de alumnio ou outro produto utilizado no tratamento da gua.
Mtodo de determinao
Titulao com cido Sulfrico Material necessrio: a) pipeta volumtrica de 50 ml; b) frasco Erlenmeyer de 250 ml;
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c) d) e) f)
bureta de 50 ml; fenolftalena; indicador metilorange; mistura Indicadora de Verde de Bromocresol/Vermelho de Metila;
g) soluo de cido Sulfrico 0,02 N; h) soluo de Tiossulfato de Sdio 0,1 N. Tcnica a) tomar 50 ml da amostra e colocar no Erlenmeyer; b) adicionar 3 gotas da soluo indicadora de verde de bromocresol/vermelho de metila; c) titular com a Soluo de cido Sulfrico 0,02 N at a mudana da cor azul-esverdeada para rseo;
d) anotar o volume total de H2SO4 gasto (V) em ml.
Clculo
Alcalinidade total em mg/l de CaCO3 = V x 20
Notas: 1. Usar 0,05 ml (1 gota) da soluo de Tiossulfato de Sdio 0,1 N, caso a amostra apresente cloro residual livre; 2. Utilizar esta tcnica na ausncia de alcalinidade fenolftaleina; 3. Caso haja alcalinidade Fenolftaleina, adicionar, antes da mistura indicadora de verde de bromocresol/ vermelho de metila 3 gotas de Fenolftaleina e titule com H2SO4 0,02N at desaparecer a cor rsea
formada. Em seguida continuar no passo 2 da tcnica; 4. A alcalinidade Fenolftalena s poder ocorrer se o pH da amostra for maior que 8,2; 5. Na impossibilidade de conseguir a mistura indicadora de verde de bromocresol/vermelho de metila, usar o indicado de metilorange. Nesse caso o ponto de viragem no passo 3 da tcnica ser de amarelo para alaranjado; 6. O ponto de viragem quando se usa o indicador verde de bromocresol/vermelho de metila mais ntido do que quando se usa metilorange; 7. A frmula acima para ser utilizada quando se usa uma amostra de 50 ml. Quando for usado 100 ml de amostra, o volume (V) passar a ser multiplicado por 10; 8. Fc Fator de correo da soluo titulante.
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Fluxograma da anlise
Gs carbnico livre
O gs carbnico livre existent e em guas superficiais normalmente est em concentrao menor do que 10 mg/L, enquanto que em guas subterrneas pode existir em maior concentrao. O gs carbn ico cont ido n a gua pode cont ribu ir significativamente para a corroso das estruturas metlicas e de materiais base de cimento (tubos de fibro-cimento) de um sistema de abastecimento de gua e por essa razo o seu teor deve ser conhecido e controlado.
Mtodo de determinao
Titulao com Hidrxido de Sdio Material necessrio: a) b) c) d) e) f) bureta de 50 ml; frasco Erlenmeyer de 250 ml; pipeta volumtrica de 100 ml; rolha de borracha; hidrxido de Sdio 0,02N; fenolftaleina.
Tcnica a) t omar 1 00 ml de amos tra (s em agi tar) em um Erlenmeyer; b) adicionar 10 gotas de fenolftaleina, se colorir, no
contm CO2 , se no colorir, prosseguir;
c) titular com a soluo de Hidrxido de Sdio (NaOH) 0,02 N gota a gota at o aparecimento de leve colorao rsea persistente por pelo menos 30 segundos; d) anotar o volume (ml) de NaOH gasto ( V ). Clculo
V x 10 x Fc = mg/L de CO2 livre
Onde: Fc = fator de correo.

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Para calcular o CO2 total aplicar a seguinte frmula: mg/LCO2 total =A + 0,44(2B + C)
Onde:
A = mg/l CO2 livre
B = Alcalinidade devida a bicarbonato C = Alcalinidade devida a carbonato. Fluxograma da anlise de CO2
Cloretos
Geralmente os cloretos esto presentes em guas brutas e tratadas em concentraes que podem variar de pequenos traos at centenas de mg/l. Esto presentes na forma de cloretos de sdio, clcio e magnsio. A gua do mar possui concentrao elevada de cloretos que est em torno de 26. 000 mg/l . Concentraes altas de cloretos podem restringir o uso da gua em razo do sabor que eles conferem e pelo efeito laxativo que eles podem provocar. A portaria n 518/2004 do Ministrio da Sade estabelece o teor de 250 mg/l como o valor mximo permitido para gua potvel. Os mtodos convencionais de tratamento de gua no removem cloretos. A sua remoo pode ser feita por desmineralizao (deionizao) ou evaporao.
Mtodo de determinao:
Titulao com nitrato de prata. Material necessrio: a) bureta de 50 ml; b) becker de 250 ml; c) frasco Erlenmeyer de 250 ml; d) medidor de pH; e) proveta de 100 ml; f) soluo Padro de Nitrato de Prata 0,0141N; g) soluo Indicadora de Cromato de Potssio K2CrO4; h) hidrxido de Sdio 1N; i) cido Sulfrico 1N; j) cloreto de Sdio 0,0141 N.
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Tcnica a) colocar 100 ml de amostra no Erlenmeyer; b) ajustar o pH entre 7 e 10, se necessrio, com NaOH
ou H2SO4;
c) adicionar 1 ml da soluo indicadora de K2CrO4 ; d) titular com a Soluo Padro de Nitrato de Prata 0,0141 N at a viragem para amarelo avermelhado que o ponto final da titulao; e) fazer um branco da mesma maneira que a amostra. Clculo
mg/l Cl = (A - B) x N x 35.450 ml da amostra
Onde: A = ml do titulante gasto na amostra; B = ml do titulante gasto no branco; N = Normalidade do titulante;
Fluxograma da anlise de cloretos
Dureza total
A dureza tot al calculada como s endo a s oma das concentraes de ons clcio e magnsio na gua, expressos como carbonato de clcio. A dureza d e uma gua pod e s er t emp orr ia o u permanente. A dureza temporria, tambm chamada de dureza de carbonatos, causada pela presena de bicarbonatos de clcio e magnsio. Esse tipo de dureza resiste ao dos sabes e provoca incrustaes. denominada de temporria porque os bicarbonatos, pela ao do calor, se decompem em gs carbnico, gua e carbonatos insolveis que se precipitam.
A dureza permanente, tambm chamada de dureza de no carbonatos, devida presena de sulfatos, cloretos e nitratos de clcio e magnsio, resiste tambm ao dos sabes, mas no produz incrustaes por serem seus sais muito solveis na gua. No se decompe pela ao do calor. A portaria n 518/2004 do Ministrio da Sade estabelece para dureza o teor de 500 mg/L em termos de CaCO3 como o valor mximo permitido para gua potvel.
Mtodo de determinao
Titulao com EDTA Material necessrio: a) bureta de 50 ml; b) pipeta volumtrica de 25 ml; c) balo volumtrico de 50 ml; d) beaker de 100 ml; e) frasco erlenmeyer de 250 ml; f) soluo padro de EDTA 0,01 M; g) soluo tampo; h) indicador eriochrome Black T; i) inibidor I - cianeto de sdio P.A em p; j) inibidor II - sulfeto de sdio.
Tcnica a) tomar 25 ml da amostra e diluir para 50 ml com gua destilada em balo volumtrico;
b) transferir para um becker de 100 mL e adicionar 1 a 2 ml da soluo tampo para elevar o pH a 10 0,1; c) transferir para um frasco Erlenmeyer de 250 ml e adicionar aproximadamente 0,05 gramas do Indicador Eriochrome Black T; d) titular com EDTA 0,01M agitando continuamente at o desaparecimento da cor prpura avermelhada e o aparecimento da cor azul (final da titulao); e) anotar o volume de EDTA gasto (ml); f) fazer um branco com gua destilada; g) subtrair o volume de EDTA gasto na titulao do branco do volume de EDTA gasto na titulao da amostra. A diferena o volume que ser aplicado no clculo abaixo. Clculo
Dureza Total em mg/lCaCO3 =
ml de EDTA x 1000 x Fc ml de amostra
Notas: 1. A ausncia de um ponto de viragem definido,
geralmente, indica a necessidade de adio de um inibidor ou que o indicador est deteriorado; 2. No leve mais do que 5 minutos para a titulao, medido aps a adio da soluo tampo; 3. Caso a dureza da gua seja muito baixa, use amostra maior, 50 a 250 ml adicionando proporcionalmente maior quantidade de soluo tampo, do inibidor e indicador; 4. Se precisar usar o inibidor adicionar 20 gotas do inibidor II; 5. Fc = Fator de correo do EDTA quando houver e for diferente de 1.
Fluxograma da anlise
pH
O termo pH representa a concentrao de ons hidrognio em uma soluo. Na gua, es te fator de excepcional importncia, principalmente nos processos de tratamento. Na rotina dos laboratrios das estaes de tratamento ele medido e ajustado sempre que necessrio para melhorar o processo de coagulao/floculao da gua e tambm o controle da desinfeco. O valor do pH varia de 0 a 14. Abaixo de 7 a gua considerada cida e acima de 7, alcalina. gua com pH 7 neutra. A Portaria n 518/2004 do Ministrio da Sade recomenda que o pH da gua seja mantido na faixa de 6,0 a 9,0 no sistema de distribuio. Existem no mercado vrios aparelhos para determinao do pH. So denominados de potencimetros ou colormetros. Neste manual, descreve-se o funcionamento bsico de um
potencimetro, embora as instrues dos fabricantes devam ser seguidas. Material necessrio: a) b) c) d) e) potencimetro; cubetas; frasco lavador; papel absorvente; solues tampo de pH conhecido;
Tcnica a) ligar o aparelho e esperar a sua estabilizao; b) lavar os eletrodos com gua destilada e enxug-los com papel absorvente; c) calibrar o aparelho com as solues padro (pH 4 - 7 ou 9); d) lavar novamente os eletrodos com gua destilada e enxug-los; e) introduzir os eletrodos na amostra a ser examinada e fazer a leitura; f) l avar n ovamente e deix-l os imerso s em gu a destilada; g) desligar o aparelho.
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Fluxograma do teste
Anlises colorimtricas
Cloro residual livre
O cloro um produto qumico utilizado na desinfeco da gua. Sua medida importante e serve para controlar a dosagem que est sendo aplicada e tambm para acompanhar sua evoluo durante o tratamento. A portaria n 518/2004 do Ministrio da Sade determina a obrigatoriedade de se manter em qualquer ponto na rede de distribuio a concentrao mnima de cloro residual livre de 0,2 mg/l. Recomenda, ainda, que o teor mximo seja de 2,0 mg/l de cloro residual livre em qualquer ponto do sistema de abastecimento. Os principais produtos utilizados so: hipoclorito de clcio, cal clorada, hipoclorito de sdio e cloro gasoso.
Mtodo de determinao Comparao visual Material necessrio: a) comparador colorimtrico; b) cubetas de vidro ou de acrlico; c) DPD para cloro livre em cpsula; Tcnica a) Encher a cubeta com gua da amostra at a marca de 5,0 ml; b) Coloc-la na abertura do lado esquerdo do aparelho; c) Encher outra cubeta at a marca de 5,0 ml com a amostra a ser testada; d) Adicionar uma cpsula do reagente DPD na segunda amostra e misturar; e) Colocar a cubeta no compartimento no aparelho; f) Antes de 1 minuto fazer a leitura do teor de cloro.
Nota: Quando fizer a leitura posicionar o comparador
(equipamento) contra uma fonte de luz como, por exemplo, uma janela, o cu ou uma lmpada. Rotacione o disco at que se obtenha a mesma tonalidade nos dois tubos.
Resultado O resultado expresso em mg/l de Cloro Residual Livre.
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Observao: Existem no mercado vrios tipos de comparadores colorimtricos para medir o cloro residual, tanto com o uso de ortotolidina quanto o DPD. O uso da ortotolidina est sendo evitado por tratar-se de substncia cancergena e no recomendado pelo Stardard Methods.
Cor
A cor da gua proveniente da matria orgnica como, por exemplo, substncias hmicas, taninos e tambm por metais como o ferro e o mangans e resduos industriais f ortemente coloridos. A cor, em sistemas pbli cos de abastecimento de gua, esteticamente indesejvel. A sua medida de fundamental importncia, visto que, gua de cor elevada provoca a sua rejeio por parte do consumidor e o leva a procurar outras fontes de suprimento muitas vezes inseguras. A Portaria n 518/2004 do Ministrio da Sade estabelece para cor aparente o Valor Mximo Permitido de 15 (quinze) uH como padro de aceitao para consumo humano.
Mtodo de determinao
Comparao visual Material necessrio: a) tubos de Nessler forma alta de 50 ml; b) suporte de madeira; c) soluo-Padro de Cloroplatinato de Potssio (500 Unidades de Cor);
Tcnica a) preparar Padres de Cor na faixa de 5 a 50 unidades de cor, medindo 0,5; 1,0; 1,5; 2,0; 2,5; 3,0; 3,5; 4,0; 4,5; 5,0; 6,0 e 7,0 ml da soluo padro (500 Unidades de Cor) e colocar em tubos de Nessler de 50 ml; b) diluir com gua destilada at a marca de 50 ml; c) medir 50 ml da amostra em outro tubo de Nessler e comparar com os padres. Resultado O resultado expresso em Unidades de Cor ou unidade Hazen (uH).
Notas: 1. A comparao dever ser feita olhando os tubos
verticalmente contra um fundo branco; 2. Proteger os Padres contra evaporao e poeira; 3. Quando a cor da amostra for maior do que 70 unidades, fazer diluio at que se obtenha resultado dentro da faixa coberta pelos padres. Neste caso, o resultado deve ser multiplicado pelo fator de diluio; 4.uH a unidade de escala de Hazen (platinacobalto).
Alumnio
O teste de alumnio indicado para estaes de tratamento onde o sulfato de alumnio usado como coagulante. A dosagem incorreta desse coagulante denotada pela quantidade significativa de alumnio que persiste na gua tratada.
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O hidrxido de alumnio Al(OH)3 - formado na reao anftero. Sua ionizao se processa em pH cido ou bsico, segundo as equaes: Em pH cido:
Al(OH)3 [ H +] Al++ + + nH2O
Em pH bsico:
Al(OH)3 [OH- ] AlO3
- - - + nH2 O
Nas duas formas ele pode se solubilizar e atravessar os decantadores e filtros. A solubilizao acontece com a correo do pH. Quando o pH timo de floculao no est correto, o teor de alumnio da gua tratada aumenta. A Portaria n 518/2004 do Ministrio da Sade estabelece que o padro de aceitao para consumo humano de 0,2 mg/l.
Mtodo de determinao
A determinao do alumnio pode ser feita atravs dos mtodos de Absoro Atmica, Eriocromo Cianina R utilizando um fotmetro de filtro ou espectrofotmetro e tambm pelo mtodo de Comparao Visual, utilizando-se tubos de Nessler. Neste manual, descreveremos o mtodo de Comparao Visual, considerando que a maioria dos laboratrios dos servios de abastecimento de gua nem sempre possuem equipamentos como Espectrofotmetro de Absoro Atmica ou outro.
Material necessrio a) b) c) d) e) tubo de Nessler forma alta, de 50 ml; pipeta graduada de 1 ml; pipeta graduada de 5 ml; pipeta graduada de 10 ml; suporte para tubos de Nessler.
Reagentes a) b) c) d) cido sulfrico 0,02N; reagente tampo de acetato de sdio; eriocromo cianina-R - (corante); soluo de trabalho do corante.
Tcnica a) medir 25 ml de amostra ou uma poro diluda para 25 ml em um frasco Erlenmeyer de 125 ml; b) adicionar 3 gotas de metilorange e titular com cido sulfrico (H2SO4) 0,02N at ligeira colorao rosa plido; c) anot ar o vo lume gast o de ci do e descartar a amostra; d) medir novamente 25 ml de amostra ou uma alquota diluda a 25 ml e transferir para um tubo de Nessler de 50 ml; e) adi cionar amostra o mesmo volume de cido sulfrico gasto no passo 2, acrescentando 1 ml em excesso; f) adicionar 1,0 ml de cido ascrbico e misturar;
g) adicionar 10,0 ml do reagente tampo e misturar; h) adicionar 5,0 ml da soluo de trabalho do corante e misturar; i) imediatamente, diluir at a marca de 50 ml, com gua destilada; j) misturar e deixar em repouso por 5 a 10 minutos e comparar a cor desenvolvida pela amostra com os padres preparados da mesma maneira e na mesma hora. Resultado O resultado expresso em mg/l de alumnio.
Observao: Neste mtodo no necessrio preparar o branco da amostra e ele tambm no recomendado para amostras que contm cor e turbidez porque pode levar a erros considerveis.
Preparo dos Padres Material necessrio a) b) c) d) e) tubo de nessler forma alta, de 50 ml; pipeta graduada de 1 ml; pipeta graduada de 5 ml; pipeta graduada de 10 ml; suporte para tubos de Nessler.
Reagentes: a) cido sulfrico 0,02N; b) reagente tampo de acetato de sdio;
c) eriocromo cianina-R - (corante); d) soluo de trabalho do corante; e) soluo padro de alumnio (1 ml = 5 g Al). Tcnica Preparar os padres na faixa de 0 a 0,5 mg/l, pipetando: 0,0 0,5 1,0 1,5 2,0 e 2,5 ml da soluo padro (1 ml = 5 g) e diluindo para 25 ml com gua destilada em tubos de nessler (ver quadro abaixo). Tratar esses padres do seguinte modo: a) adicionar 1,0 ml de cido sulfrico 0,02N e misturar; b) adicionar 1,0 ml de cido ascrbico e misturar; c) adicionar 10 ml do reagente tampo e misturar; d) adicionar 5 ml da soluo de trabalho do corante e misturar; e) levar o volume para 50 ml com gua destilada e misturar; f) deixar em repouso por 5 a 10 minutos.
ml da soluo padro g Al/ml Volume de Amostra mg/l Al
0,0 0,5 1,0 1,5 2,0 2,5
0,0 2,5 5,0 7,5 10,0

12,5
25 25 25 25 25 25
0,0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5
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Notas: 1. Para o padro 0,0 mg/l, tomar 25 ml de gua
destilada e proceder igual aos outros; 2. Preparar os padres toda vez que for examinar a amostra; 3. Caso o laboratrio possua espectrofotmetro, fazer a leitura dos padres a 535 nm e traar a curva de calibrao em papel semi-logaritmo (% de transmitncia x concentrao). Nesse caso, no necessria a preparao de todos os padres quando examinar a amostra. Fazer apenas um ou dois para checar a curva de calibrao do aparelho.
Turbidez
A turbidez da gua devida presena de materiais slidos em suspenso, que reduzem a sua transparncia. Pode ser provocada tambm pela presena de algas, plncton, matria orgnica e muitas outras substncias como o zinco, ferro, mangans e areia, resultantes do processo natural de eroso ou de despejos domsticos e industriais. A turbidez tem sua importncia no processo de tratamento da gua. gua com turbidez elevada e dependendo de s ua natureza, forma flocos pesados que decantam mais rapidamente do que gua com baixa turbidez. Tambm tem suas desvantagens como no caso da desinfeco que pode ser dificultada pela proteo que pode dar aos microorganismos no contato direto com os desinfetantes. um indicador sanitrio e padro de aceitao da gua de consumo humano. A Portaria n 518/2004 do Ministrio da Sade estabelece que o Valor Mximo Permitido de 1,0 uT para gua subterrnea desinfectada e gua filtrada aps tratamento completo ou filtrao direta, e 5,0 uT como padro de aceitao para consumo humano. Para gua resultante de filtrao lenta o Valor Mximo Permitido 2,0 uT.
Existem equipamentos especficos para determinao da turbidez na gua. Neste manual, apresenta-se a tcnica de determinao da turbidez utilizando a metodologia nefelometrica. Mtodo Nefelomtrico Material necessrio: a) b) c) d) e) f) turbidmetro com nefelmetro; clulas de amostras de vidro incolor (quartzo), balo volumtrico de 100 ml; pipeta volumtrica de 5 ml; conjunto de filtrao; filtros de membrana de 0,2 m.
Reagentes: gua isenta de turbidez: a) passar gua destilada atravs de um filtro de membrana de 0,02 m de porosidade. Enxaguar o frasco de coleta pelo menos duas vezes com gua filtrada e desprezar os primeiros 200 ml; Suspenso estoque de turbidez padro primrio. Soluo I
- Dissolver 1,0 g de Sulfato de Hidrazina (NH2).H2SO4
em gua dest ilada e di luir a 100 ml em balo volumtrico;
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Advertncia: Sulfato de Hidrazina carcinognico. Evitar inalao, ingesto e contato com a pele. Soluo II - D issolver 10,0 gramas de Hexametilenotetramina (CH2)6N4 em gua destilada e diluir a 100 mL em balo volumtrico; - Mistura 5,0 ml da soluo I e 5,0 ml da soluo II. Deixar em repouso por 24 horas a 25 3 C. A turbidez desta suspenso de 4000 UTN. Transferir a soluo estoque para um frasco de cor mbar ou outro frasco protegido da luz ultravioleta, para armazenagem. Fazer diluio desta suspenso estoque. A suspenso estoque estvel por um ano quando corretamente armazenada; Suspenso padro de turbidez: a) Diluir 1, 0 ml da soluo estoque para 100 ml com gua isenta de turbidez. A turbidez desta suspenso de 40 UTN. Preparar diariamente Padres de turbidez diludos: a) D iluir pores da suspens o padro de turbidez com gua livre de turbidez de acordo com a faixa de interesse. Preparar diariamente. Procedimento: a) Calibrar o turbidmetro de acordo com as instrues do fabricante; b) M edida de turbidez menor que 40 UTN: Agitar a amostra suavemente e esperar at que as bolhas de ar desapaream e coloc-la na clula de amostra do
turbidmetro; Fazer a leitura da turbidez diretamente na escala do instrumento ou na curva de calibrao apropriada c) Medida de turbidez acima de 40 UTN: Diluir a amostra com um ou mais volumes de gua isenta de turbidez at que a turbidez da amostra diluda fique entre 30 e 40 NTU. Fazer a leitura e multiplicar o resultado pelo fator de diluio. Clculo A x (B+ C)
UTN = _ _ _ _ _ _ _ __ _ _ _ _ _ _
Onde: UTN = Unidade de Turbidez Nefelomtrica; A = Turbidez da amostra diluda; B = Volume da diluio (ml); C = Volume da amostra tomado para a diluio.
Exemplo: Uma poro de 10 ml da amostra foi diluda para 50 ml com gua isenta de turbidez. Feita a leitura dessa amostra diluda obteve-se 20 UTN, ento o resultado ser :
20 x (40 + 10)
UTN = _ _ _ _ _ _ _ _ __ _ _ _ _ _ _ _ _ __ _ _ UTN = 100 10
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Temperatura A temperatura es t relacionada com o aumento do consumo de gua, com a fluoretao, com a solubilidade e ionizao das substncias coagulantes, com a mudana do pH, com a desinfeco, etc. Procedimento para determinao na gua. Material necessrio: a) termmetro; b) becker de 250 ml. Tcnica a) coletar um pouco de gua em um becker de 250 ml; b) mergulhar o termmetro na gua; c) esperar at que o material dilatante (mercrio) se estabilize; d) fazer a leitura com o bulbo do termmetro ainda dentro da gua.
Fluoretos
A aplicao de flor na gua para consumo humano tem a finalidade de prevenir a crie dental. Hoje, esse procedimento considerado um processo normal de tratamento de gua e o teor timo de flor parte essencial de sua qualidade. Em razo disso e outros fatores, que o seu controle se faz necessrio na estao de tratamento de gua. Existem vrios mt odos para determinao de flor na gua. Os trs mais conhecidos so: O mtodo Spadns, o
Scott-Sanchis e o mtodo do eletrodo especfico para ons fluoretos. Neste manual, descreve-se apenas o mtodo Scott-Sanchis, que embora no seja o que d maior grau de exatido, atende s expectativas e o de custo mais barato. um mtodo de comparao visual de cor feito em tubos de Nessler.
Procedimentos para anlise de fluoretos

Mtodo Scott-Sanchis Material necessrio a) b) c) d) e) tubo de Nessler de 100 ml; suporte para tubo de Nessler; termmetro; pipeta volumtrica de 5 ml; pipeta graduada de 10 ml.
Reagentes: a) soluo padro de fluoretos (1ml = 10 gF- ); b) reagente Scott-Sanchis; c) arsenito de sdio (0,5%). Preparo dos padres e da amostra: a) b) c) d) tomar 7 tubos de Nessler de 100 ml; encher o 1 tubo com gua destilada (branco); pipetar no 2 tubo 2 ml da soluo padro, pipetar no 3 tubo 4 ml da soluo padro,
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e) f) g) h)
pipetar no 4 tubo 6 ml da soluo padro, pipetar no 5 tubo 8 ml da soluo padro, pipetar no 6 tubo 10 ml da soluo padro, encher o 7 tubo com 100 ml de amostra ou uma alquota diluda a 100 ml. Caso haja cloro na amostra, remov-lo pela adio de 0,1ml (2 gotas) da soluo de arsenito de sdio para cada mg/l de cloro;
i) di luir os padres de 2 a 6 destilada;
a 100 ml com gua
j) ajustar a temperatura dos padres e da amostra; k) adicionar a cada tubo, inclusive no branco (1 tubo) 5 ml do reagente Scott-Sanchis; l) misturar e deixar em repouso por uma hora; m) decorrido uma hora da adio do reagente ScottSanchis, comparar a amos tra com os padres e expressar o resultado em mg/l F-.
Exemplo: Se a colorao desenvolvida pela amostra for semelhante ao padro do tubo n 5 essa amostra ter 0,8 mg/l de on fluoreto. Caso a amostra desenvolva uma colorao que se situe entre dois padres poder ser feita a interpolao dos resultados. Ex.: leitura entre 0,6 e 0,8 expressar como 0,7 mg/l.
Fluxograma do teste
D epoi s de m edi r os p adr es , com p let ar p ar a 10 0 m l co m gua des ti l ada.
Adi cio nar
em cada t ubo 5 m l
do R eagent e Sco tt - Sanch is Esper ar 1 ho r a p ar a fazer a lei t ur a
Notas: 1. A concentrao dos padres preparados (tubos de 2 a 6) correspondem a 0,2 0,4 0,6 0,8 1,0 mg/l de on fluoreto, respectivamente;
2. Podero ser analisadas vrias amostras simultaneamente com os padres; 3. Caso haja interferentes nas amostras em concentraes que possam alterar os resultados, essas amostras devero ser destiladas;
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Tabela de interferentes
Substncias interferentes
Alcalinidade (CaCO3 ) Alumnio (AL++ + ) Cloreto (Cl- ) Ferro (Fe+ + +)
Mtodo Scott-Sanchis Tipo de erro 400 mg/l 0,25 mg/l 2000 mg/l 2,0 mg/l 1,0 mg/l 5,0 mg/l 300 mg/l
+ -
Fosfato (PO4 - -- ) Hexametafosfato (NaPO3 )6 Sulfato (SO4 - -)
Procedimentos para destilao:

Equipamento para destilao
Fonte: Adaptado de Mayer, 1971
+ + +
Fazer primeiro uma destilao preliminar para remover qualquer contaminao de fluoreto e ajustar a reao cido/gua para as destilaes subseqentes, do seguinte modo: a) colocar 400 ml de gua des til ada no balo de destilao; b) adicionar lentamente e com agitao 200 ml de cido
sulfrico concentrado (H2 SO4);
c) adicionar algumas prolas de vidro; d) conectar o bal o ao condens ador e comear a destilao; e) quando a temperatura atingir 180 C, parar a destilao e eliminar o destilado. O conjunto est pronto para a destilao da amostra. Destilao da amostra Adicionar mistura de cido que sobrou da destilao preliminar 300 ml de amostra, misturar cuidadosamente e destilar como anteriormente, at que a temperatura atinja 180 C. Nesse momento o destilado ser igual a 300 ml.
Notas: 1. No deixar que a temperatura ultrapasse 180 C, assim se evita que haja arraste de sulfato para o destilado. 2. Quando amostras de alto contedo de cloretos so analisadas, adicionar ao balo de destilao 5 mg de sulfato de prata para cada mg de cloreto presente na amostra. 3. Usar a soluo de cido sulfrico vrias vezes at que os contaminantes das amostras de gua acumulados no frasco de destilao, comecem a interferir no destilado. Quando isso acontecer, o melhor desprezar o cido e comear tudo novamente.
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Importante: A dosagem de flor na gua para consumo humano estabelecida em funo da mdia das temperaturas mximas dirias da localidade observadas durante um determinado perodo. A Portaria n 518/2004 do Ministrio da Sade estabelece como Valor Mximo Permitido 1,5 mg/l de on fluoreto.
Coleta e preservao de amostras para anlise fsico-qumicas deste manual

Parmetros Recipientes Volume (ml) Preservao Tempo Mnimo Mximo Alcalinidade Vidro ou polietileno Polietileno Vidro ou polietileno Vidro ou polietileno 200 100 100 100 300 200 500 200 500 Refrigerar Anlise imediata
HNO3 pH < 2
24h/14d
CO2
Dureza Cloretos Alumnio Fluoretos Temperatura Turbidez Cloro Residual pH Cor
6 meses 7 dias 6 meses 28 dias 24h 30min/2h 24h
No requer
HNO3 pH < 2
No requer Anlise imediata Proteger da luz Anlise imediata Anlise imediata Refrigerar
Fonte: Adaptado de APHA, 1985

Notas: 1. Os volumes aqui descritos so estimados. Na prtica, deve-se coletar o volume necessrio para realizao das anlises, at porque existem repeties de anlises muitas vezes necessrias. 2. Quando preservar com cido ntrico, usar 2 ml do cido para cada litro de amostra. 3. Normalmente, nas ETAs, as anlises devem ser efetuadas imediatamente aps a coleta. No de boa prtica deixar as amostras por muito tempo para serem analisadas.
Ensaio de coagulao (Jar-test )

O ensaio de coagulao um procedimento de rotina em estaes de tratamento de gua para determinar a dosagem dos produtos qumicos utilizados no tratamento. Podemos dizer, que uma simulao do que ocorre na ETA. Para realizar este ensaio, neces srio que se conhea previamente as seguintes caractersticas da gua bruta: cor, turbidez, alcalinidade, pH e temperatura; alm de parmetros hidrulicos da estao de tratamento, tais como: vazo, tempo de deteno no floculador, velocidade de sedimentao no decantador, etc. O ensaio de coagulao no uma operao muito simples, pois devem ser consideradas algumas variveis do processo, como a cor e turbidez da gua bruta; se a alcalinidade natural da gua suficiente, se o pH est dentro da faixa tima de floculao, o tipo de coagulante empregado, etc. N es te exempl o prtico, vamo s apenas considerar os parmetros: cor, turbidez, pH e alcalinidade total, j que o objetivo principal do teste a remoo da cor e turbidez da gua, aplicando-se uma menor quantidade de coagulante. O produto qumico utilizado o sulfato de alumnio, sendo o mais comum.
Etapas do teste de coagulao que devem ser observados

a) fazer anlise da amostra bruta cor, pH, turbidez e alcalinidade total, temperatura; b) c) d) e) descobrir o pH timo de floculao; verificar a menor dosagem do coagulante no pH timo; observar a velocidade de sedimentao dos flocos; analisar o sobrenadante, verificando, principalmente, a remoo de cor e turbidez. Material necessrio: a) b) c) d) e) aparelho de Jar-test conforme o da figura; becker forma baixa de 1000 ml; soluo de sulfato de alumnio a 1%; soluo de cal a 0,5%; Pipetas graduadas de 5 e 10 ml.
Fonte: Adaptado de Cetesb, 1973

Procedimento 1
Considerando que a gua bruta tenha alcalinidade natural suficiente e tenha, tambm, um pH timo de floculao). a) colocar 6 beckers de 1 litro na plataforma do aparelho de Jar-Test; b) ench-los com gua bruta at a marca de 1000 ml; c) ligar o aparelho na velocidade mxima 100 r.p.m; d) adicionar simultaneamente nos beckers a quantidade de coagulante (sulfato de alumnio) que foi calculada para cada becker; e) deixar agitar nessa velocidade por 2 a 3 minutos (tempo de deteno na cmara de mistura rpida); f) reduzir a velocidade de agitao para 50 r.p.m durante 10 a 30 minutos (tempo de deteno nos floculadores); g) deixar as amostras decantar por algum tempo(esse tempo seria o correspondente velocidade de sedimentao no decantador 10 a 30 minutos); h) coletar o sobrenadante de todos os beckers e analisar os parmetros necessrios para verificar qual deles apresentou melhor resultado; i) normalmente o melhor resultado aquele que apresentou maior reduo de cor e turbidez e essa dosagem dever ser a escolhida.
Procedimento 2
Quando a gua no tem alcalinidade natural suficiente e desconhece-se o pH timo de floculao. a) colocar 6 beckers de 1 litro na plataforma do aparelho de Jar-Test;
b) ench-los com gua bruta at a marca de 1000 ml; c) ligar o aparelho na velocidade mxima 100 r.p.m; d) estabelecer diferentes pH nos beckers usando lcali (cal hidratada); e) aplicar uma quantidade fixa de sulfato de alumnio em todos os beckers e proceder de acordo com os passos 5 a 9 do procedimento 1; f) medir o pH do frasco que apresentou melhor resultado; g) executar novo ensaio, fixando em todos os beckers o pH timo encontrado no item anterior; h) adicionar sulfato de alumnio em cada becker, variando a concentrao em valores prximos (menor e maior) da dosagem utilizada no item 5; i) proceder de aco rdo com os pas so s de 5 a 9 do procedimento 1.
Notas: 1. dependendo das alteraes que a gua bruta
possa sofrer, conseqncia de enchentes, estiagens, alteraes climticas, etc., recomendado sempre fazer novos testes para ajustar as dosagens dos coagulantes.
2. Quando a gua bruta no tiver alcalinidade natural suficiente para reagir com o sulfato de alumnio, usar cal hidratada ou outro lcali para promover uma alcalinidade artificial. 3. Quando a gua bruta no tiver um pH timo de floculao, criar essa condio, utilizando cidos ou bases (lcalis). 4. O lcali mais usado a cal hidratada. 5. Normalmente se usa sulfato de alumnio a 1% e cal a 0,5% para fazer os ensaios, pois facilita a medio de volumes utilizados no processo.
6. Para dosagens de sulfato de alumnio de 10 15 20 25 30 e 35 mg/L de uma soluo a 1% so necessrios os seguintes volumes: 1,0 ml, 1,5 ml, 2,0 mL, 2,5 ml, 3,0 ml e 3,5 ml, respectivamente. Para dosagem de cal, usa-se metade desses volumes em ml. 7. Consultar a tabela abaixo para estabelecer a quantidade de cal necessria em funo do consumo de sulfato de alumnio.
Alcal i ni dade Con sum o d e t eori cam ent e s ul fat o d e al um ni o n ecessr ia
m g/l . ( Al 2 ( SO 4 ) 3 m g/l ( CaCO 3 )
10 15 20 25 30
5 7 9 12
14 18
Al cali ni dad e Q u ant i dade Q uan t id ade nat u ral t eri ca de de cal des ejad a cal desej vel m g/l * m g/ l * m g/ l ( CaCO 3 )
10 14 17 20
25 Fonte: 40 Tcnicas de Abastecimento 27 Tratamento de gua1-9 vol. II e Cetesb SP 34 50 * se no houver alcalinidade natural.
3 4 5 7 10 8 13
4 6 18 0
12 15
Teoricamente, cada mg/l de sulfato de alumnio requer: O,45 mg/l de alcalinidade natural; 0,25 mg/l de cal (CaO);
0,33 mg/l de cal como Ca(OH)2;
0,48 mg/l de carbonato de sdio Na2CO3 (barrilha).
Correo do pH da gua tratada

A correo do pH da gua tratada um procedimento utilizado nas ETAs com a finalidade de prevenir o processo de corroso das estruturas metlicas do sistema de distribuio que provocado pela acidez da gua, conseqncia da presena de gs carbnico dissolvido.
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As guas superficiais possuem gs carbnico dissolvido. Esse gs carbnico pode ser proveniente da atmosfera, da respirao dos seres aquticos e at da reao do sulfato de alumnio quando este reage com a alcalinidade natural da gua. A correo do pH significa elevar o pH da gua tratada at o pH de saturao que o ponto onde no acontece mais o processo de corroso. Esse pH no igual para todas as guas e sua determinao pode ser feita no laboratrio.
Mtodo de determinao
Ensaio do mrmore Material necessrio: a) balo volumtrico de 1000 mL; b) medidor de pH; c) balana; Reagente Carbonato de clcio Tcnica a) col ocar 750 ml de gu a fi ltrada em um b alo volumtrico de 1000 ml; b) determinar o pH e a alcalinidade (I) dessa gua; c) adicionar 10 gramas de Carbonat o de clcio ao balo; d) agitar por 1/2 hora e deixar decantar e filtrar;
d) e) f) g)
determinar o pH; agitar novamente o balo por mais 1/2 hora; deixar decantar e filtrar; determinar novamente o pH.
Repetir a operao iniciada no item 6 at pH constante. O pH de saturao ser o pH constante encontrado. Determinar na ltima operao a alcalinidade (II).
Concluso
Se a alcalinidade II > alcalinidade I gua corrosiva Se a alcalinidade II=alcalinidade I gua no corrosiva Se a alcalinidade II < alcalinidade I gua incrustante
Determinao do teor de cloro ativo em uma soluo de cloro (hipoclorito de sdio e hipoclorito de clcio)
Material necessrio: a) b) c) d) frasco Erlenmeyer de 250 ou 500 ml; bureta de 50 ml; pipeta volumtrica de 1; 5 e 10 ml; balana de preciso.
Reagentes: a) tiossulfato de sdio 0,1N (Na2S2O3. 5H2O); b) iodeto de potssio (KI); c) cido actico P.A;
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d) indicador de amido. Tcnica a) medir 1,0 ml da soluo; b) Dissolver em 50 ml de gua destilada; c) A dicionar 5,0 ml de cido acti co concentrado (glacial); d) Adicionar 1, 0 g de Iodeto de potssio; e) Titular com a soluo de tiossulfato de sdio 0,1 N; f) Anotar os ml de tiossulfato gastos. Clculo (A-B) x N x 35,45
% de cloro =
P x 10
_ _ _ _ _ _ _ __ _ _ _ _ _ _ _ _ __ _ _ _ _ _ _ _ _
onde: A = ml de tiossulfato gasto na titulao da amostra; B = ml de tiossulfato gasto no branco; N = Normalidade do tiossulfato; P = Peso ou volume do produto.
Observao: Dependendo da concentrao da soluo a ser analisada usar um peso ou volume que no gaste mais do que a capacidade da bureta utilizada, de tiossulfato de sdio 0,1 N. Fazer um branco com gua destilada.
Preparao dos reagentes para anlise do Teor de Cloro ativo:

Tiossulfato de sdio 0,1 N Dissolver 25 gramas de tiossulfato de sdio Na2S2 O3.5H2 O em 1 litro de gua destilada fervida recentemente. Armazenar durante duas semanas e padronizar com Dicromato de potssio K2Cr2 O7 0,1 N. Notas: 1. Usar gua destilada fervida na preparao do
tiossulfato
2. Adicionar alguns mililitros de clorofrmio (5 ml) para minimizar a decomposio bacteriana da soluo de tiossulfato.
Dicromato de potssio 0,1 N Pesar 4,904 gramas de dicromato de potssio (K2Cr2O7 .) e dissolver em um pouco de gua destilada e em seguida diluir para 1 litro. Armazenar em frasco de vidro com tampa de vidro. Soluo indicadora de amido Pesar 5,0 gramas de amido. Adicionar um pouco de gua destilada at formar uma pasta. Em seguida dissolver essa pasta em um litro de gua destilada fervente. Deixar em repouso durante uma noite. Usar o lquido sobrenadante preservando-o pela adio de 1,25 gramas de cido saliclico
Padronizao da soluo de tiossulfato de sdio 0,1N.

Material necessrio: a) bureta de 50 ml; b) frasco Erlenmeyer de 250 ml; c) Pipeta graduada de 1 ml;
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d) Pipeta volumtrica de 10 ml. Procedimento:

a) colocar 80 ml de gua destilada no Erlenmeyer; b) adicionar, com agitao constante, 1 ml de H2SO4
concentrado e 10 ml de dicromato de potssio 0,1 N; c) adicionar 1,0 grama de Iodeto de potssio; d) deixar a mistura reagir durante 6 minutos no escuro; e) titular com a soluo de Tiossulfato de sdio at o aparecimento da colorao amarelo claro; f) adicione 1,0 ml da soluo de amido e continue a titulao at o desaparecimento da cor azul formada. Clculo 1
Normalidade = _ _ __ _ _ _ _ ml de tiossulfato_ _ _ _ __ _ _ _ _ _ _ _ _ __ _ _ _ _ _ _ _ _ __ _ _ _ _ _ _ _ _ __ consumido
Preparao dos Reagentes Utilizados nas Anlises Constantes neste Manual
Reagentes para alcalinidade

Soluo de cido sulfrico 0,02 N
Para preparar esta soluo, faz-se primeiro uma soluo 0,1N do seguinte modo: a) trans ferir, com pipeta, lentamente, 2,8 ml de acido sulfrico concentrado (96% d=1,84) para um balo volumtrico de 1000 ml contendo cerca de 500 ml de gua destilada; b) completar o volume, at a marca, com gua destilada e agitar; b) desta soluo, medir, com pipeta volumtrica, 200 ml e transferir para um balo volumtrico de 1000 ml e completar o volume com gua destilada. Esta soluo aproximadamente 0,02 N.
Soluo de carbonato de sdio 0,02 N

Para preparar a soluo de carbonato de sdio 0,02 N secar 1,5 a 2,0 gramas de Na2Co3 grau padro primrio, a 2500C por quatro horas. Esfriar em dessecador. Em seguida, pesar 1,060 gramas e dissolver em 250 ml de gua destilada e completar o volume para 1000 ml com gua destilada em balo volumtrico. P ara calcular a normali dade corret a, us e a segu inte frmula:
N = N:V' /V
Onde:
N = normalidade do H2SO4 desejada;
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V = volume do cido gasto na titulao; N' = normalidade do carbonato de sdio; V' = volume do carbonato de sdio usado
1 ml de H2SO4 0,02N = 1,0 mg de CaCO3
Padronizao da soluo
Colocar 50 ml de uma soluo de carbonato de Sdio 0,02 N em um frasco Erlenmeyer de 250 ml e adicionar 4 gotas do indicador metilorange. Titular com H2 SO4 0,02N at a viragem do indicador para leve colorao avermelhada. Anotar o volume do cido gasto. P ara calcular a n ormalidade correta, use a seguint e frmula: N = NV/V onde:
N = normalidade do H2SO4 desejada;
V = volume do cido gasto na titulao; N = normalidade do carbonato de sdio; V = volume do carbonato de sdio usado.
1 ml de H2SO4 0,02 N = 1,0 mg de CaCO3
Soluo de tiossulfato de sdio 0,1 N

Pesar exatamente 25,0 gramas de Na2S2O3 .5H2O e dissolver em um pouco de gua destilada e completar o volume para 1000 ml em balo volumtrico.
Indicador metilorange
Pesar 0,100 gramas de metilorange e dissolver em 200 ml de gua destilada.
Fenolftaleina
a) dissolver 1 grama de fenolftalena em um pouco de gua destilada e diluir a 200 ml. b) adicionar gotas de NaOH 0,02 N at o aparecimento de leve colorao cor-de-rosa.
Mistura indicadora de verde de bromocresol/ vermelho de metila

Pesar 20 mg de vermelho de metila e 100 mg e verde de bromocresol e dissolver em 100 ml de gua destilada ou lcool etlico a 95%.
Reagentes para CO2
Hidrxido de sdio 0,02 N a) Para preparar esta soluo, faz-se primeiro uma soluo 0,1N do seguinte modo; b) Pesar rapidamente 4,2 gramas de Hidrxido de sdio em lentilhas e transferir para um becker de 500 ml e dissolver em gua destilada isenta de gs carbnico; c) Transferir esta soluo para um balo volumtrico de 1 litro e completar o volume at a marca. Esta soluo aproximadamente 0,1 Normal. Padronizar com uma soluo de cido Sulfrico 0,1 normal do seguinte modo:
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a) Tomar 100 ml de gua destil ada em um fras co Erlenmeyer de 250 ml; b) Medir, com pipeta volumtrica ou bureta 10 ml da Soluo de NaOH 0,1 Normal e transferir para o Erlenmeyer acima; c) Juntar 3 a 4 gotas do Indicador de Metilorange; d) Ti tul ar com a Soluo de cid o Su lf ri co 0 ,1 Normal;
e) Anotar os ml de H2SO4 gastos que devem ser 10 ou
prximo de 10.
Se o volume de H2SO4 0,1 N gastos na titulao forem maior ou menor que 10 ml, calcular o Fator de Correo (Fc) da soluo de NaOH utilizando a seguinte frmula:
Fc (NaOH) = ml H2SO4 x Fc / ml de NaOH
Anotar o Fc no rtulo do frasco. Preparao da soluo de hidrxido de sdio N/50: a) Transferir 200 ml da soluo estoque de NaOH 0,1 N para um balo volumtrico de 1 litro e completar com gua destilada. Esta nova soluo aproximadamente N/50 (0,02 N). Padronizao da soluo de NaOH 0,02 N: a) Tomar 100 ml de gua destilada em um frasco Erlenmeyer de 250 ml; b) Medir, com pipeta volumtrica ou bureta 10 ml da Soluo de NaOH 0,02 N, e transferir para o Erlenmeyer acima; c) Juntar 3 a 4 gotas do Indicador de Metilorange; d) Titular com a Soluo de cido Sulfrico 0,02 N at a viragem do indicador;
e) Anotar o volume de H2 SO4 gastos que devem ser
torno de 10 ml .
em
Clculo do fator de correo do NaOH

ml de H2SO4 0,02 N x Fc = Fc NaOh 0,02N ml de NaOH
Notas: 1. A viragem do indicador no muito fcil de se visualizar. Fazer um branco com 100 mL de gua destilada para a comparao de cor no momento da viragem do indicador; 2. Ao adicionar o indicador, a soluo fica amarelada e no final da titulao a soluo fica levemente avermelhada;
3. gua isenta de CO2 pode ser obtida pela fervura da gua
destilada durante 15 minutos e resfriada rapidamente at a temperatura ambiente.
Fenolftaleina
a) Dissolver 1 grama de fenolftalena em um pouco de gua destilada e diluir a 200 ml; b) Adicionar gotas de NaOH 0,02N at o aparecimento de leve colorao cor-de-rosa.
Reagentes para anlise de cloretos

Soluo-Padro de Nitrato de Prata 0,0141 N
a) pesar 2,395 gramas de AgNO3 e dissolver em um pouco
de gua destilada. Completar para 1 litro em balo volumtrico; 1,00 ml = 500 g Cl
b) padronizar contra uma soluo de Cloreto de Sdio 0,0141N; c) guardar a soluo em frasco escuro.
Cloreto de sdio 0,0141 N

a) dissolver 824,1 mg de Cloreto de Sdio seco a 140
C em gua livre de cloretos e diluir para 1000 ml. 1,00 ml = 500 g Cl.
Padronizao da soluo de nitrato de prata 0,0141 N a) usar 100 ml de amostra (NaCl 0,0141 N) ou uma poro diluda a 100 ml; b) ajustar o pH entre 7 e 10 com NaOH ou H2 SO4 1 N; c) adicionar 1 ml de K2 CrO4 (Cromato de Potssio); d) titular com a soluo de Nitrato de Prata 0,0141 N at o aparecimento da cor amarelo avermelhado; e) anot ar o volume de N itrato d e Prata gasto n a titulao;
f) calcular o fator de correo do AgNO3 0,0141 N
usando a seguinte frmula: Fc =100/Vp onde: Fc = Fator de correo.
Vp = Volume de AgNO3 gasto na titulao.

Soluo indicadora de cromato de potssio (K2CrO4 )
a) pesar 50 gramas de K2CrO4 e dissolver em um pouco
de gua destilada;
b) adicionar soluo de AgNO3 0,0141 N at formar um
precipitado vermelho;
c) deixar em repouso por 12 horas;

d) filtrar e completar o volume para 1000 ml com gua destilada. Hidrxido de sdio (NaOH) 1N a) pesar 40 gramas de Hidrxido de Sdio e dissolver em um pouco de gua destilada e diluir a 1 litro; b) guardar em frasco de polietileno ou vidro-pirex.
cido sulfrico (H2SO4 ) 1N
a) em um becker de 1000 ml colocar cerca de 500 ml de gua destilada; b) Em seguida medir 28 ml de cido sulfrico concentrado e adicionar lentamente no becker acima, com agitao constante; c) Deixar esfriar; d) Trans feri r para um balo vol umtri co de 1000 ml e compl et ar o volu me com gua d es til ada, homogeneizando a seguir; e) Armazenar em frasco de polietileno ou vidro pirex.
Notas: 1. Agitar com basto de vidro; 2. Nunca adicionar gua no cido, e sim cido na gua.
Reagentes para anlise de dureza

Soluo padro de EDTA 0,01 M a) pesar 3,723 gramas de EDTA (sal di-sdio do cido etil enodiamino tetraacti co), dis solver em gua destilada e diluir a 1000 ml; b) padronizar contra uma soluo-padro de Carbonato de Clcio;
c) guardar esta soluo em frasco de polietileno. Soluo padro de clcio

a) pesar 1,0 grama de Carbonato de Clcio anidro (CaCO3)
padro primrio e colocar em um frasco Erlenmeyer de 250 ml;

1 at dissolver todo CaCO3;
b) adicionar aos poucos, com auxlio de um funil HCl 1: c) adicionar 200 mL de gua destilada e ferver por alguns
minutos para eliminar o CO2;
d) esfriar e adicionar algumas gotas de vermelho de metila e ajustar para a cor laranja intermediria por adio de
NH4OH 3N ou HCl 1:1;
e) transferir toda a mistura para um balo volumtrico de

1000 ml e completar o volume at a marca com gua destilada (1 ml desta soluo = 1,0 mg de CaCO3 ).
Padronizao da soluo de EDTA 0,01 M a) medir 25 ml da soluo padro de clcio e diluir para 50 ml com gua destilada em frasco Erlenmeyer de 125 ml; b) adicionar 1 a 2 ml da soluo tampo para obter o pH em torno de 10 0,1; c) adici onar 0,05 gramas do indicador Eriochrome Black T; d) titular com EDTA 0,01 M gota a gota at desaparecer a ltima colorao violcea e aparecer a cor azul indicadora do ponto final da titulao.
Clculo:
25 Fc= Vp
onde: Fc = Fator de Correo; Vp = Volume de EDTA gasto na titulao. Soluo tampo para dureza
a) pesar 16,9 gramas de Cloreto de Amnia (NH4 Cl) e dissolver em 143 ml de Hidrxido de Amnia concentrado (NH4OH);
b) adicionar 1,25 gramas do sal de magnsio do EDTA e diluir a 250 ml com gua destilada.
Observao: Caso no disponha do sal de magnsio do EDTA, dissolver 1,179 gramas do sal sdico do EDTA e 780 mg do MgSO4 .7H2 O ou 644 mg do MgCl2.6H2 O em 50 ml de gua destilada e juntar soluo do item 1, completando o volume para 250 ml com gua destilada.
Indicador Eriocrome Black T a) pesar 0,5 gramas de Eriocrome Black T em um vidro de relgio; b) pesar 100 gramas de Cloreto de Sdio P. A. em um Becker; c) transferir os dois reagentes para um almofariz e triturar a mistura at se transformar em p;
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d) armazenar em frasco de boca larga, bem fechado. Inibidor I cianeto de sdio P.A. Usar 250 mg na soluo a ser titulada. Inibidor II sulfeto de sdio
a) pesar 5 gramas de Sulfeto de Sdio ( Na2 S.9H2O) ou 3,7 gramas de Na2S.5H2O;
b) dissolver em 100 ml de gua destilada; c) guardar em frasco de vidro bem fechado a fim de evitar sua deteriorao por contato com o ar. Soluo padro de cor a) pes ar 1,246 gramas de Cloroplatinato de Potssio
(K2 PtCl6) e 1,0 grama de Cloreto Cobaltoso cristalizado ( CoCl2.6H2O);
b) dissolver em gua destilada; c) acrescentar 100 ml de cido clordrico concentrado e diluir para 1000 ml com gua destilada. (Esta soluo equivale a 500 Unidades de Cor). Reagentes para anlise de alumnio
cido sulfrico (H2SO4) 0,02N
a) preparar igual ao utilizado para alcalinidade total. cido ascrbico a) pesar 0,1g de cido ascrbico e dissolver em um pouco de gua destilada e completar o volume para 100 ml. Esta soluo dever ser preparada diariamente.
Reagente tampo
a) pesar 136 g de acetato de sdio NaC2H3O2 .3H2O
e dissolver em gua destilada. Adicionar 40 ml de soluo de cido actico 1N e diluir para 1000 ml com gua destilada.
Soluo de cido actico 1N a) medir 58 ml de cido actico concentrado e diluir para 1000 ml com gua destilada. Soluo de Eriocromo Cianina-R (estoque) a) pesar e dissolver 150 mg do corante em cerca de 50 ml de gua destilada. Ajustar o pH para 2,9 com cido actico 1:1 (so requeridos aproximadamente 2 ml de cido). Diluir para 100 ml com gua destilada. Soluo de trabalho (Eriocromo Cianina-R) a) medir 10 ml da soluo-estoque e diluir para 100 ml com gua destilada. Esta soluo estvel por 6 meses. Soluo indicadora de Metilorange. a) pesar e dissolver 100 mg de metilorange em 200 ml de gua destilada. Soluo Estoque de Alumnio (1ml=500 g Al)
a) pesar 8,791 g de Sulfato duplo de alumnio e potssio
AlK(SO4)2.12H2O e dissolver em um pouco de gua destilada. Completar o volume para 1000 ml em balo volumtrico.
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Soluo Padro (1ml = 5 g) a) diluir 10 ml da soluo estoque para 1000 ml com gua destilada, em balo volumtrico. Preparar diariamente.
Observao: a) todos os reagentes devem ser preparados com gua destilada isenta de alumnio. b) todos os procedimentos que determinam diluir ou completar para x ml, fazer em balo volumtrico.
Soluo de EDTA 0,01M a) (3,7 gramas de EDTA lada). em 1000 ml de gua desti-
Reagentes para anlise de fluoretos Soluo padro de fluoretos a) preparar uma soluo-estoque, dissolvendo 221,0 mg
de Fluoreto de Sdio anidro (NaF) em gua destilada e diluir a 1000 ml (1 ml desta soluo equivale a 100 gF- );
b) diluir 100 ml da soluo estoque acima, para 1000 ml

com gua destilada (1 ml = 10 gF- ).
Reagente zirconio-alizarina a) pesar e dissolver 300 mg de Oxicloreto de Zircnio (ZrOCl2 .8H2 O), em 50 ml de gua destilada e transferir para um frasco volumtrico de 1000 ml com tampa; b) pesar e dissolver 70 mg de Monosulfato de Alizarina em 50 ml de gua destilada;
c) colocar a soluo 2 na soluo 1, lentamente e com agitao; d) a soluo resultante dever ficar em repouso por alguns minutos. Mistura cida a) medir 101 ml de cido Clordrico concentrado (HCl) e diluir para aproximadamente 400 ml com gua destilada; b) adicionar cuidadosamente 33,3 ml de cido Sulfrico concentrado (H2SO4) em aproximadamente 400 ml de gua destilada; c) aps esfriar, misturar as duas solues cidas. Reagentes Scott-Sanchis a) adicionar a mistura cida soluo reagente Zirconilalizarina; b) completar o volume para 1000 ml com gua destilada e misturar; c) guardar em frasco de cor mbar e em lugar protegido da incidncia de luz direta. Este reagente estvel por 6 meses. Arsenito de sdio
a) pesar 5 g de Arsenito de Sdio (NaAsO3) e dissolver
em um pouco de gua, diluir para 1 litro com gua destilada (usar 1 gota para cada 0,1mg de cloro existente na amostra).
Observao: esta soluo txica evitar ingesto.
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Regras gerais para corrigir as solues tituladas

A correo das solues tituladas um procedimento muito utilizado em laboratrio. Serve para aferir o grau de exatido das solues padronizadas. Periodicamente, o tcnico deve verificar a exatido dessas solues para que os resultados das anlises sejam os mais corretos possveis.
Regra 1
Quando o volume consumido de soluo a titular for igual ao volume da soluo-padro tomado para a titulao, significa que aquela est exata. Ex.: 10 ml de HCl 0,1N foram consumidos para titular 10 ml de Na2CO3 0,1N.
Regra 2
Quando o volume consumido da soluo a titular for menor que o volume do padro tomado, significa que a soluo a titular encontra-se mais concentrada. Nesse caso, faz-se a correo do seguinte modo: Ex.: Foram gastos na titulao de 10 ml de Na2CO3 0,1N; 8,3 ml de HCl 0,1 N. Aplicando-se a seguinte equao, temos: 8,3 : 10 :: x : 1000. Efetuando-se os clculos tem-se: 10x = 8,3 x 1000 x = 8300/10 x = 830 ml Logo, mede-se 830 ml da soluo a titular e completa-se a 1000 ml com gua destilada. Fazer nova titulao para verificar o rigor da dosagem, que no deve ficar abaixo de 9,9 e acima de 10,1 ml.
Regra 3
No caso em que o volume da soluo a titular for maior do que o da soluo padro, significa que a soluo a titular encontra-se mais diluda. Nesse caso, calcula-se o fator de correo da seguinte forma:
Exemplo: 10,5 ml de uma soluo de HCl 0,1N foram consumidos para titular 10 ml de uma soluo padro de Carbonato de Sdio. Aplicando-se a seguinte equao, temos: 10,5 : 10 :: 1 : x Efetuando-se os clculos temos: 10 = 10,5x x = 10/10,5 x = 0,9524 Logo o Fator de correo da soluo 0,9524.
Limpeza de material de vidro no laboratrio

A preciso e exatido das anlises esto, alm de outros fatores, tambm, ligadas ao uso do material de vidro no laboratrio. Faz-se, portanto, necessrio que toda a vidraria esteja perfeitamente limpa, livre de impurezas, tais como sabes, detergentes e outros produtos que podem ficar aderidos s paredes dos recipientes. A vidraria em geral pode ser lavada simplesmente com gua, gua e sabo neutro ou por meio de solues especiais, como a soluo sulfo-crmica, por exemplo.
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Procedimento de lavagem
Para vidraria nova:
a) a maioria dos materiais de vidros novos levemente
alcalina, portanto esses materiais devem ser colocados de molho por alguma horas em soluo de cido clordrico ou ntrico a 1% antes de serem lavadas.
Para vidraria usada: a) os materiais de vi dro j uti lizados com meio de cultura (placas de Petri, tubos de cultura), devem s er es terilizados antes de serem lavados. Depois devem ser colocados em um recipiente grande, com gua contendo 1 a 2 % de sabo ou detergente, deixando ferver por 30 minutos. Em seguida devem ser enxaguados com gua corrente, esfregados com detergentes neutros e enxaguados novamente; b) em determinadas situaes em que os materiais de vidro no puderem ser limpos com os detergentes comuns ou outros produtos de limpeza, faz necessrio o uso de uma mistura constituda de acido sulfrico e soluo saturada de dicromato de sdio, preparada do seguinte modo: misturar 1 litro de cido sulfrico concentrado com 35 ml da soluo s aturada de dicromato de sdio. Esta soluo no deve ser usada para lavagem de vidrarias utilizadas para anlise de cromo.
Notas: 1. a soluo acima cida e ataca a pele;
2. no permitir contato da mo com a soluo; 3. a soluo ataca os tecidos. Evitar contato com a roupa; 4. no lavar com a esta soluo vidros colados como cubetas utilizadas em espectrofotmetros, cubetas de turbidez, etc.; 5. depois de passar esta soluo na vidraria, enxagu-la com bastante gua e em seguida com gua destilada.
Relao de materiais de laboratrio de anlise de gua

Equipamentos
a) autoclave vertical, capacidade para 18, 24,48 ou 72 litros, 110/220 volts; b) estufa para cultura bacteriolgica, com termostato regulvel na faixa de 30 a 65 C, tamanho 45x45x40 cm de largura, profundidade e altura, respectivamente, equipada com bandeja regulvel para trs posies; c) balana anal tica, eltrica, capacidade para 160 g, sensibilidade de 1/100 mg, cinco casas decimais, 110/ 220 volts; d) balana de preciso, com dupla escala, pesagem mxima 200 gramas, sensibilidade de 0,1 g; e) destilador de gua, capacidade para 2 litros/hora, 110/220 volts; f) banho-maria capacidade para 50 tubos de ensaio, com termostato regulvel na faixa de 35 a 65 C, 110/220 volts; g) banho de vapor, para 6 provas simultneas, construdo em chapa metlica, com termostato regulvel em at 6 posies, 110/220 volts; h) capela para exausto forada de gases, com motor eltrico de 1/3 de HP, 110/220 volts; i) chapa aquecedora com termostato regulvel, tamanho x, 110/220 volts; j) estufa para esterilizao e secagem, tamanho 50x40x50 cm de largura, profundidade e altura, respectivamente,
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com termostato regulvel at 300 C, e bandeja regulvel para 3 posies, 110/220 volts; k) aparelho de Jar-Test para 6 provas simultneas, com regulador de velocidade de 0 a 100 rpm, com base de vidro ou acrlico iluminada, 110/220 volts; l) medidor de cloro residual, porttil, com disco de cor, escala de 0 a 3,5 mg/L, para uso com reagente DPD; m) termmetro bacteriolgico, com escala de 0 a 60 C, com divises de 1C; n) termmetro qumico com escala de 0 a 300 C, com diviso de 1 C; o) turbidmetro , completo; p) medidor de pH digital, de bancada, faixa de medio de 0 a 14, com eletrodo, 110/220 volts; q) medidor de pH, digital, porttil, faixa de medio de 0 a 14, com eletrodo, funcionamento bateria de 9 volts; r) lanterna para identificao de E.coli, com lmpada fluorescente ultravioleta, 6 watts, 365 nm, recarregvel, porttil, 110 volts; s) bico de Bunsen; t) deionizador capacidade para 50 litros/hora 110/220 volts.
Vidraria
a) b) c) d) tubo para cultura, sem borda, tamanho 150 x 16 mm; tubo para cultura, sem borda, tamanho 180 x 18 mm; tubo para cultura, sem borda, tamanho 125 x 15 mm; tubo de Nessler, forma alta, capacidade de 50 e 100 ml;
e) tubo de Durhan, tamanho 40 x 5 mm; f) balo volumtrico, fundo chato, com tampa de teflon ou vidro esmerilhado, classe A capacidade de 50, 100, 250, 500 e 1000 ml; g) becker forma baixa, graduado, capacidade de 50, 100, 250, 500 e 1000 ml; h) bureta com t orneira de vidro o u teflon , gravao permanente, classe A capacidade de 10, 25, e 50 ml; i) pipeta sorolgica, codificada por cores, com bocal para algodo, gravao permanente, capacidade de 1, 2, 5 e 10 ml; j) pipeta de MOHR, codificada por cores, bocal e bico temperados, gravao permanente, capacidade de 1, 2, 5 e 10 ml; k) pipeta volumtrica, codificada por cores, bocal e bicos temperados, gravao permanente, classe A, capacidade de 10, 25, 50 e 100 ml; l) frasco de vidro para reagentes, boca larga, cor branca, com rolha de vidro esmerilhada intercambivel, capacidade de 125 ml; m) proveta graduada a conter, com base hexagonal de vidro, gravao permanente, classe A , capacidade de 10, 25, 50, 100, 250, 500 e 1000 ml; n) fras co Erlenmeyer, boca larga, reforada, graduado, capacidade de 125, 250 e 500 ml; o) funil analtico, ngulo de 60, liso, haste curta, com dimetro de 50, 75 e 100 mm; p) funil analtico, ngulo de 60, raiado, haste longa, com dimetro de 50, 75 e 100 mm;
100
q) funil analtico, ngulo de 60, raiado, haste curta, com dimetro de 50, 75 e 100 mm; r) Placa de Petri de vidro, transparente, tamanho 100 x 15 mm; s) conjunto de destilao para fluoretos, constitudo de balo de fundo chato de 1000 ml com sada lateral para condensador Grahan, com juntas esmerilhadas; t) basto de vidro de 30 cm de comprimento x 5 mm de dimetro;
Materiais diversos
a) b) c) d) e) ala de platina calibrada com 3 mm de dimetro; cabo de Kolle para ala de platina; algodo em rama para bacteriologia; lpis dermogrfico; caldo lactosado, desidratado, embalagem de 100 ou 500 gramas; f) caldo lactosado, verde brilhante bile a 2%, desidratado, embalagem de 100 ou 500 gramas; g) Meio ENDO MF, para coli total, embalagem de 100 ou 500 gramas; h) Meio EC MF, para coli fecal, embalagem de 100 ou 500 gramas; i) prpura de bromocresol, embalagem de 5 gramas; j) estante para tubo de ensaio, com capacidade para 15 tubos de 180 x 18 mm, de madeira ou plstico resistente. k) estante para tubo de ensaio com capacidade para 40 tubos de 180 x 18 mm, em arame resistente a autoclavao;
l) caldo lauril triptose, desidratado, embalagem de 100 ou 500 gramas; m) Meio EC, desidratado, embalagem de 100 ou 500 gramas. n) Plate Count Agar, desidratado, embalagem de 100 ou 500 gramas; o) substrato cromognico para determinao enzimtica qualitativa de coliformes totais e E.coli em amostras de 100 ml de gua, caixa com 20 ampolas; p) cesto de arame com capacidade para 50 tubos de ensaio de 180 x 18 mm, resistente a autoclavao; q) suporte para tubo de Nessler de 50 e 100 ml, em madeira ou alumnio, capacidade para 8 tubos; r) papel de alumnio, medindo 7,5 m de comprimento x 30 cm de largura; s) algodo hidrfilo, pacote de 500 gramas; t) Placa de Petri, de plstico, esterilizada, de 47 mm de dimetro; u) filtros est ries de 47 mm de dimetro, 0,45m de porosidade, com carto absorvente, embalagem com 100 unidades; v) conjunto porta-filtro de membrana, construdo em ao inoxidvel, com dispositivo para esterilizao no campo; w) pina de ao inoxidvel, de 10 cm de comprimento.
Biossegurana em laboratrio
Neste manual, constam apenas os principais procedimentos relacionados a Biossegurana em laboratrio que devero ser observados pelos tcnicos que atuam na rea.
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Procedimentos de ordem pessoal:

a) no pipetar nenhum tipo de lquido com a boca; b) usar culos de proteo nos ambientes do laboratrio onde o uso obrigatrio; c) no levar as mos boca ou aos olhos quando estiver manuseando produtos qumicos; d) e) f) g) no guardar alimentos na geladeira do laboratrio; no fazer refeies dentro do laboratrio; no fumar no interior do laboratrio; lavar cuidadosamente as mos com bastante gua e sabo, antes de fazer qualquer refeio; h) usar avental, sempre; i) no manipular produtos txicos sem antes se certificar de sua toxicidade.
Procedimentos relacionados ao laboratrio

a) manter as bancadas do laboratrio sempre limpas e livres de materiais estranhos ao trabalho; b) retirar da bancada os materiais, amostras e reagentes empregados no trabalho, logo aps utiliz-los; c) limpar imed iatament e qualq uer d erramamento de produtos e reagentes com os cuidados necessrios; d) ao esvaziar um frasco de reagente, fazer a limpeza prvia com gua, antes de coloc-lo para lavagem; e) rotular imediatamente qualquer reagente ou soluo preparada e as amostras coletadas; f) no jogar produtos corrosivos concentrados na pia; descart-los somente aps serem diludos;
g) na preparao de solues cidas nunca adicionar gua no cido e sim cido na gua; h) no jogar na pia lquidos inflamveis e/ou volteis; estoclos em recipientes adequados; i) dispor os cilindros com gases em ambiente externo ao laboratrio, devidamente acondicionados; j) usar capela de exausto de gases para trabalhos com lquidos inflamveis e/ou volteis.
Procedimentos para o uso de vidrarias:

a) no utilizar materiais de vidro trincados; b) usar luvas de amianto para manusear peas de vidro que estejam quentes; c) no deixar frascos quentes sem proteo sobre as bancadas do laboratrio, coloc-los sobre placas de amianto; d) no aquecer recipiente de vidro em chama direta, usar tela de amianto; e) no pressurizar recipientes de vidro; f) no esquecer vidraria em aquecimento usar despertador, sempre; g) no us ar f ras cos para amos tras que no est ej am perfeitamente limpos e sem certificar-se de sua adequao aos servios a serem executados; h) usar luvas de pelica e culos de segurana, sempre que: atravessar ou remover rolhas de borracha ou cortia, de tubos de vidro ou termmetros; i) remover tampas de vidro emperradas; j) remover cacos de vidro usar p de lixo e escova;
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k) us ar protetor facial e luvas de pelica quando agitar solventes volteis em frascos fechados.
Procedimento para uso de equipamentos em geral

a) antes de utilizar qualquer equipamento ler antes as instrues de operao fornecidas pelo fabricante; b) nunca ligar equipamentos eltricos sem antes verificar a voltagem; c) no instalar nem operar equipamentos eltricos sobre superfcies midas; d) no deixar equipamentos eltricos ligados no laboratrio fora do expediente, exceto os de energia constante como geladeiras, estufas, etc.; e) combater fogo em equipamentos eltricos somente com
extintor de CO2;
f) manter os equipamentos de segurana em locais de fcil acesso e ao alcance de todos os funcionrios do laboratrio, tais como: - extintor de incndio; - chuveiro de emergncia; - lavador de olhos; - cobertor de segurana; - mscara contra gases; - mscaras e culos de segurana, etc.
Portaria
Portaria n 518, de 25 de maro de 2004 (DOU n 59 de 26 de naro de 2004, Seo 1 Estabelece os procedimentos e responsabilidades relativos ao controle e vigilncia da qualidade da gua para consumo humano e seu padro de potabilidade, e d outras providncias. O Ministro de Estado da Sade, Interino, no uso das atribuies que lhe confere o artigo 2 do Decreto n 79.367, de 9 de maro de 1977, resolve: Art. 1 Aprovar a Norma de Qual idade da gua para Consumo Humano, na forma do Anexo desta Portaria, de uso obrigatrio em todo territrio nacional. Art. 2 Fica estabelecido o prazo mximo de 12 meses, contados a partir da publicao desta Portaria, para que as instituies ou rgos aos quais esta Norma se aplica, promovam as adequaes necessrias a seu cumprimento, no que se refere ao tratamento por filtrao de gua para consumo humano suprida por manancial superficial e distribuda por meio de canalizao e da obrigao do monitoramento de cianobactrias e cianotoxinas. Art. 3 de responsabilidade da Unio, dos estados, do Distrito Federal e dos municpios a adoo das medidas necessrias para o fiel cumprimento desta Portaria. Art. 4 O Ministrio da Sade promover, por intermdio da Secretaria de Vigilncia em Sade (SVS), a reviso da Norma de Qualidade da gua para Consumo Humano estabelecida nesta Portaria, no prazo de cinco anos ou
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a qualquer t empo, medi ante soli citao devidamente justificada de rgos governamentais ou no governamentais de reconhecida capacidade tcnica nos setores objeto desta regulamentao. A rt. 5 Fica delegad a competncia ao Secretrio de Vigilncia em Sade para editar, quando necessrio, normas regulamentadoras desta Portaria. A rt. 6 Es ta Portaria entra em vi gor na data de s ua publicao. Art. 7 Fica revogada a portaria n 1469, de 29 de dezembro de 2000,publicada no DOU n 1-E de 2 de janeiro de 2001, Seo 1, pgina n 19. Gasto Wagner de Sousa Campos Anexo a Portaria n 518 de 25 de maro de 2004 Norma de Qualidade da gua para Consumo Humano Captulo I Das disposies preliminares A rt. 1 Es ta N orma dis p e s ob re p roced imento s e responsabilidades inerentes ao controle e vigilncia da qualidade da gua para consumo humano e estabelece seu padro de potabilidade e d outras providncias. Art. 2 Toda a gua destinada ao consumo humano deve obedecer ao padro de potabilidade e est sujeita vigilncia da qualidade da gua. Art. 3 Esta Norma no se aplica s guas envasadas e a outras, cujos usos e padres de qualidade so estabelecidos em legislao especfica.
Captulo II Das definies Art. 4 Para os fins a que se destina esta Norma, so adotadas as seguintes definies: I - gua potvel gua para consumo humano cujos parmetros microbiolgicos, fsicos, qumicos e radioativos atendam ao padro de potabilidade e que no oferea riscos sade; I I - sistema de abast eci mento de gua para consumo humano instalao composta por conjunto de obras civis, materiais e equipamentos, destinada produo e distribuio canalizada de gua potvel para populaes, s ob a res ponsabilidade do poder pblico, mesmo que administrada em regime de concesso ou permisso; III - s oluo alternativa de abastecimento de gua para consumo humano toda modalidade de abastecimento coletivo de gua distinta do sistema de abastecimento de gua, incluindo, entre outras, fonte, poo comunitrio, d is tri bui o p or ve cu lo t ransp ortado r, i ns talaes condominiais horizontal e vertical; IV - controle da qualidade da gua para consumo humano conjunto de atividades, exercidas de forma contnua pelo(s) responsvel(is) pela operao de sistema ou soluo alternativa de abastecimento de gua, destinadas a verificar se a gua fornecida populao potvel, assegurando a manuteno desta condio; V - vigilncia da qualidade da gua para consumo humano conjunto de aes adotadas continuamente pela autoridade de sade pblica para verificar se a gua consumida pela populao atende esta Norma e para avaliar os riscos que os sistemas e as solues alternativas de abastecimento de gua representam para a sade humana;
VI - coliformes totais (bactrias do grupo coliforme) - bacilos gram-negati vos, aerbios ou anaerbios f acultativo s, no formadores de esporos , oxidase-negativos, capazes de desenvolver na presena de sais biliares ou agentes tensoativos que fermentam a lactose com produo de cido, gs e aldedo a 35,0 0,5 oC em 24-48 horas, e que podem apresentar atividade da enzima - galactosidase. A maioria das bactrias do grupo coliforme pertence aos gneros Escherichia, Citrobacter, Klebsiella e Enterobacter, embora vrios outros gneros e espcies pertenam ao grupo; VII - coliformes termotolerantes - subgrupo das bactrias do grupo coliforme que fermentam a lactose a 44,5 0,2C em 24 horas; tendo como principal representante a Escherichia coli, de origem exclusivamente fecal; VIII - Escherichia Coli - bactria do grupo coliforme que fermenta a lactose e manitol, com produo de cido e gs a 44,5 0,2oC em 24 horas, produz indol a partir do triptofano, oxidase negativa, no hidroliza a uria e apresenta atividade das enzimas galactosidase e glucoronidase, s endo cons id erada o mai s es pec fico i ndi cador de contaminao fecal recente e de eventual presena de organismos patognicos; IX - contagem de bactrias heterotrficas - determinao da densidade de bactrias que so capazes de produzir unidades formadoras de colnias (UFC), na presena de compostos orgnicos contidos em meio de cultura apropriada, sob condies pr-estabelecidas de incubao: 35,0, 0,5C por 48 horas; X - cianobactrias - microorganismos procariticos autotrficos, tambm denominados como cianofceas (algas azuis), capazes de ocorrer em qualquer manancial superficial especialmente naqueles com elevados nveis de nutrientes (nitrognio e fsforo), podendo produzir toxinas com efeitos adversos sade; e
XI - cianotoxinas toxinas produzidas por cianobactrias que apresentam efeitos adversos sade por ingesto oral, incluindo: a) microcistinas - hepatotoxinas heptapeptdicas cclicas produzidas por cianobactrias, com efeito potente de inibio de protenas fosfatases dos tipos 1 e 2A e promotoras de tumores; b) cilindrospermopsina - alcalide guanidnico cclico produzido por cianobactrias, inibidor de sntese protica, predominantemente hepatotxico, apresentando tambm efeitos citotxicos nos rins, bao, corao e outros rgos; e c) saxitoxinas - grupo de alcalides carbamatos neurotxicos produzido por cianobactrias, no sulfatados (saxitoxinas) ou sulfatados (goniautoxinas e C-toxinas) e derivados decarbamil, apresentando efeitos de inibio da conduo nervosa por bloqueio dos canais de sdio. Captulo III Dos deveres e das responsabilidade Seo I Do nvel federal Art. 5 So deveres e obrigaes do Ministrio da Sade, por intermdio da Secretaria de Vigilncia em Sade (SVS): I - promover e acompanhar a vigilncia da qualidade da gua, em articulao com as Secretarias de Sade dos Estados e do Distrito Federal e com os responsveis pelo controle de qualidade da gua, nos termos da legislao que regulamenta o SUS; II - estabelecer as referncias laboratoriais nacionais e regionais, para dar suporte s aes de maior complexidade na vigilncia da qualidade da gua para consumo humano;
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III - aprovar e registrar as metodologias no contempladas nas referncias citadas no artigo 17 deste Anexo; IV - definir diretrizes especficas para o estabelecimento de um plano de amostragem a ser implementado pelos Estados, Distrito Federal ou Municpios, no exerccio das atividades de vigilncia da qualidade da gua, no mbito do Sistema nico de Sade (SUS); e V - executar aes de vigilncia da qualidade da gua, de forma complementar, em carter excepcional, quando constatada, tecnicamente, insuficincia da ao estadual, nos termos da regulamentao do SUS. Seo II Do nvel estadual e Distrito Federal Art. 6 So deveres e obrigaes das Secretarias de Sade dos Estados e do Distrito Federal: I - promover e acompanhar a vigilncia da qualidade da gua em sua rea de competncia, em articulao com o nvel municipal e os responsveis pelo controle de qualidade da gua, nos termos da legislao que regulamenta o SUS; II - garantir, nas atividades de vigilncia da qualidade da gua, a implementao de um plano de amostragem pelos municpios, observadas as diretrizes especficas a serem elaboradas pela SVS/MS; III - estabelecer as referncias laboratoriais estaduais e do Distrito Federal para dar suporte s aes de vigilncia da qualidade da gua para consumo humano; e IV - executar aes de vigilncia da qualidade da gua, de forma complementar, em carter excepcional, quando constatada, tecnicamente, insuficincia da ao municipal, nos termos da regulamentao do SUS.
Seo III Do nvel municipal Art. 7 So deveres e obrigaes das Secretarias Municipais de Sade: I - exercer a vigilncia da qualidade da gua em sua rea de competncia, em articulao com os responsveis pelo controle de qualidade da gua, de acordo com as diretrizes do SUS; I I - s istemat izar e i nterpretar os dados gerados pelo responsvel pela operao do sistema ou soluo alternativa de abastecimento de gua, as sim como, pelos rgos ambientais e gestores de recursos hdricos, em relao s caractersticas da gua nos mananciais, sob a perspectiva da vulnerabilidade do abastecimento de gua quanto aos riscos sade da populao; III - estabelecer as referncias laboratoriais municipais para dar suporte s aes de vigilncia da qualidade da gua para consumo humano; IV - efetuar, sistemtica e permanentemente, avaliao de risco sade humana de cada sistema de abastecimento ou soluo alternativa, por meio de informaes sobre: a) a ocupao da bacia contribuinte ao manancial e o histrico das caractersticas de suas guas; b) as caractersticas fsicas dos sistemas, prticas operacionais e de controle da qualidade da gua; c) o histrico da qualidade da gua produzida e distribuda; e d) a associao entre agravos s ade e situaes de vulnerabilidade do sistema.
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V - auditar o controle da qualidade da gua produzida e distribuda e as prticas operacionais adotadas; VI - garantir populao informaes sobre a qualidade da gua e riscos sade associados, nos termos do inciso VI do artigo 9 deste Anexo; VII - manter registros atualizados sobre as caractersticas da gua distribuda, sistematizado de forma compreensvel populao e disponibilizados para pronto acesso e consulta pblica; VIII - manter mecanismos para recebimento de queixas referentes s caractersticas da gua e para a adoo das providncias pertinentes; IX - informar ao responsvel pelo fornecimento de gua para consumo humano sobre anomalias e no conformidades detectadas, exigindo as providncias para as correes que se fizerem necessrias; X - aprovar o plano de amostragem apres entado pelos responsveis pelo controle da qualidade da gua de sistema ou soluo alternativa de abastecimento de gua, que deve respeitar os planos mnimos de amostragem expressos nas Tabelas 6, 7, 8 e 9; XI - implementar um plano prprio de amostragem de vigil ncia da qualidade da gua, consoante diretrizes especficas elaboradas pela SVS; e XII - definir o responsvel pelo controle da qualidade da gua de soluo alternativa.
Seo IV Do responsvel pela operao de sistema e/ou soluo alternativa Art. 8 Cabe ao(s) responsvel(is) pela operao de sistema ou soluo alternativa de abastecimento de gua exercer o controle da qualidade da gua. Pargrafo nico. Em caso de administrao, em regime de concesso ou permisso, do sistema de abastecimento de gua, a concessionria ou a permissionria a responsvel pelo controle da qualidade da gua. Art. 9 Ao(s) responsvel(is) pela operao de sistema de abastecimento de gua incumbe: I - operar e manter sistema de abastecimento de gua potvel para a populao consumidora em conformidade com as normas tcnicas aplicveis publicadas pela Associao Brasileira de Normas Tcnicas (ABNT) e com outras normas e legislaes pertinentes; II - manter e controlar a qualidade da gua produzida e distribuda, por meio de: a) controle operacional das unidades de captao, aduo, tratamento, reservao e distribuio; b) exigncia do controle de qualidade, por parte dos fabricantes de produtos qumicos utilizados no tratamento da gua e de materiais empregados na produo e distribuio que tenham contato com a gua; c) capacitao e atualizao tcnica dos profi ssionais encarregados da operao do sistema e do controle da qualidade da gua; e
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d) anlises laboratoriais da gua, em amostras provenientes das di vers as partes que co mpem o si s tema d e abastecimento. III - manter avaliao sistemtica do sistema de abastecimento de gua, sob a perspectiva dos riscos sade, com base na ocupao da bacia contribuinte ao manancial, no histrico das caractersticas de suas guas, nas caractersticas fsicas do sistema, nas prticas operacionais e na qualidade da gua distribuda; IV - encaminhar autoridade de sade pblica, para fins de comprovao do atendimento a esta Norma, relatrios mensais com informaes sobre o controle da qualidade d a gu a, segundo modelo es tabelecido pel a referi da autoridade; V - promover, em conjunto com os rgos ambientais e gestores de recursos hdricos, as aes cabveis para a proteo do manancial de abastecimento e de sua bacia contribuinte, assim como efetuar controle das caractersticas das suas guas, nos termos do artigo 19 deste Anexo, notificando imediatamente a autoridade de sade pblica sempre que houver indcios de risco sade ou sempre que amostras coletadas apresentarem resultados em desacordo com os limites ou condies da respectiva classe de enquadramento, conforme definido na legislao especfica vigente; VI - fornecer a todos os consumidores, nos termos do Cdigo de Defesa do Consumidor, informaes sobre a qualidade da gua distribuda, mediante envio de relatrio, dentre outros mecanismos, com periodicidade mnima anual e contendo, pelo menos as seguintes informaes: a) descrio dos mananciais de abastecimento, incluindo informaes sobre sua proteo, disponibili dade e qualidade da gua;
b) estatstica descri tiva dos valores de parmetros de qualidade detectados na gua, seu significado, origem e efeitos sobre a sade; e c) ocorrncia de no conformidades com o padro de potabilidade e as medidas corretivas providenciadas. VII - manter registros atualizados sobre as caractersticas da gua distribuda, sistematizados de forma compreensvel aos consumidores e disponibilizados para pronto acesso e consulta pblica; VIII - comunicar, imediatamente, autoridade de sade pblica e informar, adequadamente, populao a deteco de qualquer anomalia operacional no sistema ou no conformidade na qualidade da gua tratada, identificada como de risco sade, adotando-se as medidas previstas no artigo 29 deste Anexo; e IX - manter mecanismos para recebimento de queixas referentes s caractersticas da gua e para a adoo das providncias pertinentes. A rt . 10. Ao res pons vel por s oluo al ternat iva de abastecimento de gua, nos termos do inciso XIII do artigo 7 deste Anexo, incumbe: I - requerer, junto autoridade de sade pblica, autorizao para o fornecimento de gua apresentando laudo sobre a anlise da gua a ser fornecida, incluindo os parmetros de qualidade previstos nesta Portaria, definidos por critrio da referida autoridade; II - operar e manter soluo alternativa que fornea gua potvel em conformidade com as normas tcnicas aplicveis, publicadas pela Associao Brasileira de Normas Tcnicas (ABNT), e com outras normas e legislaes pertinentes;
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III - manter e controlar a qualidade da gua produzida e distribuda, por meio de anlises laboratoriais, nos termos desta Portaria e, a critrio da autoridade de sade pblica, de outras medidas conforme inciso II do artigo anterior; IV - encaminhar autoridade de sade pblica, para fins de comprovao, relatrios com informaes sobre o controle da qualidade da gua, segundo modelo e periodicidade estabelecidos pela referida autoridade, sendo no mnimo trimestral; V - efetuar controle das caractersticas da gua da fonte de abastecimento, nos termos do artigo 19 deste Anexo, notificando, imediatamente, autoridade de sade pblica sempre que houver indcios de risco sade ou sempre que amostras coletadas apresentarem resultados em desacordo com os limites ou condi es da res pecti va cl ass e de enquadramento, conforme definido na legislao especfica vigente; VI - manter registros atualizados sobre as caractersticas da gua distribuda, sistematizados de forma compreensvel aos consumidores e disponibilizados para pronto acesso e consulta pblica; VII - comunicar, imediatamente, autoridade de sade pblica competente e informar, adequadamente, populao a deteco de qualquer anomalia identificada como de risco sade, adotando-se as medidas previstas no artigo 29; e VIII - manter mecanismos para recebimento de queixas referentes s caractersticas da gua e para a adoo das providncias pertinentes.
Captulo IV Do padro de potabilidade Art.11. A gua potvel deve estar em conformidade com o padro microbiolgico conforme Tabela 1, a seguir:
Tabela 1 Padro microbiolgico de potabilidade da gua para consumo humano

Parmetro
gua para consumo humano2 VMP1
Escherichia coli ou coliformes termotolerantes(3) Ausncia em 100 ml gua na sada do tratamento Coliformes totais Ausncia em 100 ml gua tratada no sistema de distribuio (reservatrios e rede) Escherichia coli ou coliformes termotolerantes(3) Ausncia em 100 ml Sistemas que analisam 40 ou mais amostras por ms: Ausncia em 100 ml em 95% das amostras Coliformes totais examinadas no ms Sistemas que analisam menos de 40 amostras por ms: Apenas uma amostra poder apresentar mensalmente Notas: (1) Valor Mximo Permitido. resultado positivo em 100 ml
(2) gua para consumo humano em toda e qualquer situao, incluindo fontes individuais como poos, minas, nascentes, dentre outras. (3) a deteco de Escherichia coli deve ser preferencialmente adotada.
1 No controle da qualidade da gua, quando forem detectadas amostras com resultado positivo para coliformes totais, mesmo em ensaios presuntivos, novas amostras devem ser coletadas em dias imediatamente sucessivos at que as novas amostras revelem resultado satisfatrio. Nos sistemas
de distribuio, a recoleta deve incluir, no mnimo, trs amostras simultneas, sendo uma no mesmo ponto e duas outras localizadas a montante e a jusante. 2 Amostras com resultados positivos para coliformes totais devem ser analisadas para Escherichia coli e, ou, coliformes t ermotolerantes , devendo, nest e caso, ser ef etuada a verificao e confirmao dos resultados positivos. 3 O percentual de amostras com resultado positivo de coliformes totais em relao ao total de amostras coletadas nos sistemas de distribuio deve ser calculado mensalmente, excluindo as amostras extras (recoleta). 4 O resultado negativo para coliformes totais das amostras extras (recoletas) no anula o resultado originalmente positivo no clculo dos percentuais de amostras com resultado positivo. 5 Na proporo de amostras com resultado positivo admitidas mensalmente para coliformes totais no sistema de distribuio, expressa na Tabela 1, no so tolerados resultados positivos que ocorram em recoleta, nos termos do 1 deste artigo. 6 Em 20% das amostras mensais para anlise de coliformes totais nos sistemas de distribuio, deve ser efetuada a contagem de bactrias heterotrficas e, uma vez excedidas 500 unidades formadoras de colnia (UFC) por ml, devem ser providenciadas imediata recoleta, inspeo local e, se constatada irregularidade, outras providncias cabveis. 7 Em complementao, recomenda-se a incluso de pesquis a de organismos patognicos, com o objeti vo de atingir, como meta, um padro de ausncia, dentre outros, de enterovrus, cistos de Giardia spp e oocistos de Cryptosporidium sp.
8 Em amost ras individuai s procedentes de poos , fontes, nascentes e outras formas de abastecimento sem distribuio canalizada, tolera-se a presena de coliformes totais, na ausncia de Escherichia coli e, ou, coliformes termotolerantes, nesta situao devendo ser investigada a origem da ocorrncia, tomadas providncias imediatas de carter corretivo e preventivo e realizada nova anlise de coliformes. Art. 12. Para a garantia da qualidade microbiolgica da gua, em complementao s exigncias relativas aos indicadores microbiolgicos, deve ser observado o padro de turbidez expresso na Tabela 2, abaixo:
Tabela 2 Padro de turbidez para gua ps-filtrao ou pr-desinfeco

Tratamento da gua VMP(1) Desinfeco(gua subterrnea) 1,0 UT(2) em 95% das amostras Filtrao rpida (tratamento completo ou filtrao direta) 1,0 UT(2) Filtrao lenta 2,0 UT(2) em 95% das amostras
Notas: (1) Valor mximo permitido. (2) Unidade de turbidez.
1 Dentre os 5% dos valores permi tidos de turbidez s uperiores aos VMP estabelecidos na Tabela 2, o limite mximo para qualquer amostra pontual deve ser de 5,0 uT, assegurado, simultaneamente, o atendimento ao VMP de 5,0 UT em qualquer ponto da rede no sistema de distribuio. 2 Com vistas a assegurar a adequada eficincia de remoo de enterovrus, cistos de Giardia spp e oocistos de Cryptosporidium sp., recomenda-se, enfaticamente, que, para
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a filtrao rpida, se estabelea como meta a obteno de efluente filtrado com valores de turbidez inferiores a 0,5 uT em 95% dos dados mensais e nunca superiores a 5,0 uT. 3 O atendimento ao percentual de aceitao do limite de turbidez, expresso na Tabela 2, deve ser verificado, mensalmente, com base em amostras no mnimo dirias para desinfeco ou filtrao lenta e a cada quatro horas para filtrao rpida, preferivelmente, em qualquer caso, no efluente individual de cada unidade de filtrao. Art. 13. Aps a desinfeco, a gua deve conter um teor mnimo de cloro residual livre de 0,5 mg/l, sendo obrigatria a manuteno de, no mnimo, 0,2 mg/L em qualquer ponto da rede de distribuio, recomendando-se que a clorao seja realizada em pH inferior a 8,0 e tempo de contato mnimo de 30 minutos. Pargrafo nico. Admite-se a utilizao de outro agente desinfetante ou outra condio de operao do processo de desinfeco, desde que fique demonstrado pelo responsvel pelo sistema de tratamento uma eficincia de inativao microbiolgica equivalente obtida com a condio definida neste artigo. Art.14. A gua potvel deve estar em conformidade com o padro de substncias qumicas que representam risco para a sade expresso na Tabela 3, a seguir:
Tabela 3 Padro de potabilidade para substncias qumicas que representam risco sade
Parmetro Unidade VMP(1) Inorgnicas Antimnio mg/l Arsnio mg/l Brio mg/l Cdmio mg/l Cianeto mg/l Chumbo mg/l Cobre mg/l Cromo mg/l Fluoreto( 2) mg/l Mercrio mg/l Nitrato (como N) mg/l Orgnicas Nitrito (como N) mg/l Acrilamida g/l Selnio mg/l Benzeno g/l Benzoalpireno g/l Cloreto de metila g/l 1,2 Dicloroetano g/l 1,1 Dicloroetano g/l Diclorometano g/l Estireno g/l Tetracloreto de carbono g/l Tetracloroeteno g/l Agrotxicos Triclorobenzenos g/l Alaclor g/l Tricloroeteno g/l Aldrin e Dieldrin g/l Atrazina g/l Bentazona g/l Clordano (Ismeros) g/l 2,4 D g/l DDT (Ismeros) g/l Endosulfan g/l Endrin g/l
0,005 0,01 0,7 0,005 0,07 0,01 2 0,05 1,5 0,001 10 1 0,01 0,5 5 0,7 5
10 30 20 20 2 40 20 70
20,0 0,03 2 300 0,2 30 2 20 0,6
Continuao Parmetro Unidade VMP(1)
Glifosato
Orgnicas
g/l
500
0,03
Heptacloro e Heptacloro g/l epxido g/l Hexaclorobenzeno g/l Lindano -BHC g/l Metolacloro g/l ]Metoxicloro g/l Molinato g/l Pendimetalina g/l Pentaclorofenol g/l Permetrina g/l Propanil Cianotoxinas g/l Simazina Microcistina( 3) g/l 1,0 g/l Trifluralina
Desinfetantes Bromato e produtos secundrios da desinfeco(4 ) mg/l Clorito mg/l Cloro livre (4) mg/l Monocloroamina mg/l 2,4,6 triclorofenol mg/l Trihalometanos Total mg/l
1 2 10
20
6 20 9 2 20
20 20
0,025 0,2
0,2 0,1
5 3
Notas: (1) Valor Mximo Permitido. (2) Os valores recomendados para a concentrao de on fluoreto devem observar legislao especfica vigente relativa fluoretao da gua, em qualquer caso devendo ser respeitado o VMP desta Tabela (3) aceitvel a concentrao de at 10 g/l de microcistinas em at 3 (trs) amostras, consecutivas ou no, nas anlises realizadas nos ltimos 12 (doze) meses. (4) Anlise exigida de acordo com o desinfetante utilizado.
1 Recomenda-se que as anlises para cianotoxinas incluam a determinao de cilindrospermopsina e saxitoxinas (STX), observando, respectivamente, os valores limites de 15,0 g/l e 3,0 g/l de equivalentes STX/l. 2 Para avaliar a presena dos inseticidas organofosforados e carbamatos na gua, recomenda-se a determinao da atividade da enzima acetilcolinesterase, observando os limites mximos de 15% ou 20% de inibio enzimtica, quando a enzima utilizada for proveniente de insetos ou mamferos, respectivamente. Art. 15. A gua potvel deve estar em conformidade com o padro de radioatividade expresso na Tabela 4, a seguir: Tabela 4 padro de radioatividade para gua potvel
Parmetro Unidade VMP(1) Radioatividade alfa global Radioatividade beta global Bq/L
0,1(2 )
Bq/L
1,0(2 )
Notas: (1) Valor mximo permitido. (2) Se os valores encontrados forem superiores aos VMP, dever ser feita a identificao dos radionucldeos presentes e a medida das concentraes respectivas. Nesses casos, devero ser aplicados, para os radionucldeos encontrados, os valores estabelecidos pela legislao pertinente da Comisso Nacional de Energia Nuclear (CNEN), para se concluir sobre a potabilidade da gua.
Art. 16. A gua potvel deve estar em conformidade com o padro de aceitao de consumo expresso na Tabela 5, a seguir:
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Tabela 5 padro de aceitao para consumo humano

Parmetro Unidade VMP(1) Alumnio mg/l Amnia (como NH3) mg/l Cloreto mg/l uH(2 ) Cor Aparente mg/l Dureza mg/l Etilbenzeno mg/l Ferro mg/l Gosto mg/l Mangans mg/l Monoclorobenzeno mg/l Odor mg/l Sdio mg/l Slidos dissolvidos totais mg/l mg/L Sulfato Sulfeto de Hidrognio uT(4 ) mg/l Surfactantes mg/l Tolueno Notas: (1) Valor mximo permitido. Turbidez (2) Unidade Hazen (mg PtCo/L). Zinco (3) critrio de referncia Xileno
250 15 500
0,2 1,5
0,2 0,3
No objetvel(3 )
0,1 0,12
No objetvel(3 )
200 1000 250 0,05 0,5 0,17 0,3
5 5
(4) Unidade de turbidez.
1 Recomenda-se que, no sistema de distribuio, o pH da gua seja mantido na faixa de 6,0 a 9,5. 2 Recomenda-se que o teor mximo de cloro residual livre, em qualquer ponto do sistema de abastecimento, seja de 2,0 mg/l. 3 Recomenda-se a realizao de testes para deteco de odor e gosto em amostras de gua coletadas na sada do tratamento e na rede de distribuio de acordo com o plano mnimo de amostragem estabelecido para cor e turbidez nas Tabelas 6 e 7.
Art. 17. As metodologias analticas para determinao dos parmetros fsicos, qumicos, microbiolgicos e de radioatividade devem atender s especificaes das normas nacionais que disciplinem a matria, da edio mais recente da publicao Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater, de autoria das instituies American Public Health Association (APHA), American Water Works A ssociation (AWWA) e Water Environment Federation (WEF), ou das normas publicadas pela ISO (International Standartization Organization). 1 Para anlis e d e cianobact ri as e cianot oxinas e compro vao de toxici dade por bi oens ai os em camundongos, at o estabelecimento de especificaes em normas nacionais ou internacionais que disciplinem a matria, devem ser adotadas as metodologias propostas pela Organizao Mundial da Sade (OMS) em sua publicao Toxic cyanobacteria in water: a guide to their public health consequences, monitoring and management. 2 Metodologias no contempladas nas referncias citadas no 1 e caput deste artigo, aplicveis aos parmetros estabelecidos nesta Norma, devem, para ter validade, receber aprovao e registro pela Funasa. 3 As anlises laboratoriais para o controle e a vigilncia da qualidade da gua podem ser realizadas em laboratrio prprio ou no que, em qualquer caso, deve manter programa de controle de qualidade interna ou externa ou ainda ser acreditado ou certificado por rgos competentes para esse fim.
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Captulo V Dos planos de amostragem At. 18. Os responsveis pelo controle da qualidade da gua de sistema ou soluo alternativa de abastecimento de gua devem elaborar e aprovar, junto a autoridade de sade pblica, o plano de amostragem de cada sistema, respeitando os planos mnimos de amostragem expressos nas Tabelas 6, 7, 8 e 9. Tabela 6 Nmero mnimo de amostras para o controle da qualidade da gua de sistema de abastecimento, para fins de anlises fsicas, qumicas e de radioatividade, em funo do ponto de amostragem, da populao abastecida e do tipo de manancial.
Si st em a de di st r ib ui o ( reser vat ri os e Sad a d o red e) t r at a- m ent o Pop ul ao abast eci da ( nm er o de am os t ra por < 5 0. 000 50. 00 0 a > 25 0. 00 0 u ni dade de hab h ab 2 50. 00 0 t r a- t am ent o) h ab 40 + ( 1 par a Cor Tu r bi dez pH Cl ( 1) Su bt er r neo 1 5 1 par a cada Su per f ici al 1 Su bt er r neo 1 Su per f ici al 1 1 0 1 par a cada 5. 00 0 hab cada 25. 00 0 20 hab) + (1 p ar a cad a 5 0. 000 1 0. 000 h ab hab ) ( Conf or m e 3 do ar t igo 1 8) 1 par a cada 10. 00 0 hab 20 + (1 p ar a cad a 5 0. 000 hab )
Par m et ro Ti po de m anan cial
ou Flu or et o Su per Su bt al r neo 1 5 f ici er Cian ot oxi nas Su per f ici al 1

Tr i hal om et ano s Su per f ici al 1 1( 2 ) 4 ( Su bt er r neo - 1( 2 ) 1 ( Demais
( Con fo r m e 5 do ar t i go 18)
2 ) 4( 2 ) 2 ) 1( 2 ) 4 ) 1( 4 )
Su per f ici al ou
par m e- t os ( ) Notas:r (1) 3Cloro residual livre. (2) As amostras devem ser coletadas, preferencialmente, em pontos de maior tempo de deteno da gua no sistema de distribuio.
Su bt er r neo 1 1( 4 ) 1 (
(3) Apenas ser exigida obrigatoriedade de investigao dos parmetros radioativos quando da evidncia de causas de radiao natural ou artificial. (4) Dispensada anlise na rede de distribuio quando o parmetro no for detectado na sada do tratamento e, ou, no manancial, exceo de substncias que potencialmente possam ser introduzidas no sistema ao longo da distribuio.
Tabela 7 Freqncia mnima de amostragem para o controle da qualidade da gua de sistema de abastecimento, para fins de anlises fsicas, qumicas e de radioatividade, em funo do ponto de amostragem, da populao abastecida e do tipo de manancial.
Si st em a de di st r ib ui o ( reser vat ri os e red e) Sa da do t r at am en t o ( nm er o 50. 00 0 a Par m et ro Tim anan cial de am ost r a p or po de < 5 0. 000 h ab > 250 .0 00 hab un id ade de 2 50. 00 0 h ab t rat a- m en t o) Co r Tur b id ez pH Fl uo r eto Cl (1 ) Su per f ici al A cada du as ho r as M ensal m ens al m en sal Su bt er r neo D ir i a Su per f ici al A cada du as ho r as Su bt er r neo D ir i a Sem anal Ci ano to xin as Su per f ici al (Co nf or m e 5 do ar t igo 1 8) Tr i hal om et anos Su per f ici al Tr i m est r al Tr im es tr al Tr i m est r al Tr im es tr Su bt er r neo - Anu al Sem est r al Sem es tr al al
D em ai s par m et r os ( 2 ) Su per f ici al ou
( Conf or m e 3 do ar t igo 1 8)
Su bt er neo Sem est livre. Notas: (1) Cloror residualr al Sem es tr al ( 3 ) Sem est r al ( 3) Sem es tr al ( 3 ) (2) Apenas ser exigida obrigatoriedade de investigao dos parmetros radioativos quando da evidncia de causas de radiao natural ou artificial. (3) Dispensada anlise na rede de distribuio quando o parmetro no for detectado na sada do tratamento e, ou, no manancial, exceo de substncias que potencialmente possam ser introduzidas no sistema ao longo da distribuio.
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Tabela 8 Nmero mnimo de amostras mensais para o controle da qualidade da gua de sistema de abastecimento, p ara fins de anli ses microbiolgicas, em funo da populao abastecida.
Sistema de distribuio (reservatrios e rede) Parmetro Populao abastecida 20.000 a < 5.000 hab 5.000 a 20.000 hab 250.000 hab >250.000 hab 105 + (1 para 30 + (1 para cada 5.000 Coliformes cada hab.) totais 10 1 para cada 500 hab 2.000 hab.) Mximo de 1.000
Nota: na sada de cada unidade de tratamento devem ser coletadas, no mnimo, 2 (duas) amostra semanais, recomendando-se a coleta de, pelo menos, 4 (quatro) amostras semanais.
Tabela 9 Nmero mnimo de amostras e freqncia mnima de amostragem para o controle da qualidade da gua de soluo alternativa, para fins de anlises fsicas, qumicas e microbiolgicas, em funo do tipo de manancial e do ponto de amostragem.
Nmero de Sada do amostras retiratratamento das no ponto de Freqncia de ( para gua consumo para amostragem canalizada) cada 500 hab. (1)
Parmetro Tipo de manancial
Cor Turbidez pH e Coliformes totais(2 )
Superficial 1 1 Semanal Subterrneo 1 1 Mensal Superficial ou Subterrneo 1 1 Dirio
Notas: (1) Devem ser retiradas amostras em, no mnimo, 3 pontos de consumo de gua. (2) Para veculos transportadores de gua para consumo humano, deve ser realizada 1 (uma) anlise de CRL em cada carga e 1 (uma) anlise, na fonte de fornecimento, de cor, turbidez, PH e coliformes totais com freqncia mensal, ou outra amostragem determinada pela autoridade de sade pblica. (3) Cloro residual livre.
1 A amostragem deve obedecer aos seguintes requisitos: I - distribuio uniforme das coletas ao longo do perodo; e II - representatividade dos pontos de coleta no sistema de distribuio (reservatrios e rede), combinando critrios de abrangncia espacial e pontos estratgicos, entendidos como aqueles prximos a grande circulao de pessoas terminais rodovirios, terminais ferrovirios, etc.) ou edifcios que alberguem grupos populacionais de risco (hospitais, creches , asilos , etc.), aqueles localizados em trechos vulnerveis do sistema de distribuio (pontas de rede, pontos de queda de presso, locais afetados por manobras, sujeitos intermitncia de abastecimento, reservatrios, etc.) e locais com sistemticas notificaes de agravos sade tendo como possveis causas agentes de veiculao hdrica. 2 No nmero mnimo de amostras coletadas na rede de distribuio, previsto na Tabela 8, no se incluem as amostras extras (recoletas). 3 Em t odas as amost ras coletadas para anl is es microbiolgicas deve ser efetuada, no momento da coleta, medio de cloro residual livre ou de outro composto residual ativo, caso o agente desinfetante utilizado no seja o cloro. 4 Para uma melhor avaliao da qualidade da gua dist ribu da, recomenda-se que, em todas as amostras
referidas no 3 deste artigo, seja efetuada a determinao de turbidez.

5 Sempre que o nmero de cianobactrias na gua do manancial, no ponto de captao, exceder 20.000 clulas/ml (2mm3 /l de biovolume), durante o monitoramento que trata
o 3 do artigo 19, ser exigida a anlise semanal de cianotoxinas na gua na sada do tratamento e nas entradas (hidrmetros) das clnicas de hemodilise e indstrias de i njetveis, sendo que esta anlise pode s er dispensada quando no houver comprovao de toxicidade na gua bruta por meio da realizao semanal de bioensaios em camundongos. Art. 19. Os responsveis pelo controle da qualidade da gua de sistemas e de solues alternativas de abastecimento supridos por manancial superficial devem coletar amostras semestrais da gua bruta, junto do ponto de captao, para anlise de acordo com os parmetros exigidos na legislao vigente de classificao e enquadramento de guas superficiais, avaliando a compatibilidade entre as caractersticas da gua bruta e o tipo de tratamento existente. 1 O monitoramento de cianobactrias na gua do manancial, no ponto de captao, deve obedecer freqncia mensal, quando o nmero de cianobactrias no exceder 10.000 clulas/ml (ou 1mm3/l de biovolume), e semanal, quando o nmero de cianobactrias exceder este valor. 2 vedado o us o de algici das para o controle do crescimento de cianobactrias ou qualquer interveno no manancial que provoque a lise das clulas desses microrganismos, quando a densidade das cianobactrias exceder 20.000 clulas/ml (ou 2mm3/l de biovolume), sob pena de comprometimento da avaliao de riscos sade associados s cianotoxinas.
Art. 20. A autori dade de sade pblica, no exercci o das atividades de vigilncia da qualidade da gua, deve implementar um plano prprio de amostragem, consoante diretrizes especficas elaboradas no mbito do Sistema nico de Sade - SUS. Captulo VI Das exigncias aplicveis aos sistemas e solues alternativas de abastecimento de gua Art. 21. O sistema de abastecimento de gua deve contar com responsvel tcnico, profissionalmente habilitado. Art. 22. Toda gua f ornecida coletivamente deve ser submetida a processo de desinfeco, concebido e operado de forma a garantir o atendimento ao padro microbiolgico desta Norma. Art. 23. Toda gua para consumo humano suprida por manancial superficial e distribuda por meio de canalizao deve incluir tratamento por filtrao. Art. 24. Em todos os momentos e em toda sua extenso, a rede de distribuio de gua deve ser operada com presso superior atmosfrica. 1 Caso esta situao no seja observada, fica o responsvel pela operao do servio de abastecimento de gua obrigado a notificar a autoridade de sade pblica e informar populao, identificando perodos e locais de ocorrncia de presso inferior atmosfrica. 2 Excepcionalmente, caso o servio de abastecimento de gua necessite realizar programa de manobras na rede de distribuio, que possa submeter trechos a presso inferior atmosfrica, o referido programa deve ser previamente comunicado autoridade de sade pblica.
132
Art. 25. O responsvel pelo fornecimento de gua por meio de veculos deve: I - garantir o uso exclusivo do veculo para este fim; II - manter registro com dados atualizados sobre o fornecedor e, ou, sobre a fonte de gua; e III - manter registro atualizado das anlises de controle da qualidade da gua. 1 A gua fornecida para consumo humano por meio de veculos deve conter um teor mnimo de cloro residual livre de 0,5 mg/l. 2 O veculo utilizado para fornecimento de gua deve conter, de forma visvel, em sua carroceria, a inscrio: gua potvel. Captulo VII Das penalidades Art. 26. Sero aplicadas as sanes administrativas cabveis, aos responsveis pela operao dos sistemas ou solues alternativas de abastecimento de gua, que no observarem as determinaes constantes desta Portaria. Art. 27. As Secretarias de Sade dos Estados, do Distrito Federal e dos municpios estaro sujeitas a suspenso de repasse de recursos do Ministrio da Sade e rgos ligados, diante da inobservncia do contido nesta Portaria. Art. 28. Cabe ao Ministrio da Sade, por intermdio da SVS/ MS, e s autoridades de sade pblica dos Estados, do Distrito Federal e dos Municpios, representadas pelas respectivas Secretarias de Sade ou rgos equivalentes, fazer observar o fiel cumprimento desta Norma, nos termos da legislao que regulamenta o Sistema nico de Sade (SUS).
Captulo VIII Das disposies finais Art. 29. Sempre que forem identificadas situaes de risco sade, o responsvel pela operao do sistema ou soluo alternativa de abastecimento de gua e as autoridades de s ade pblica devem estabelecer entendimentos para a elaborao de um plano de ao e tomada das medidas cabveis, incluindo a eficaz comunicao populao, sem prejuzo das providncias imediatas para a correo da anormalidade. A rt . 30. O responsvel pela operao do sis tema ou soluo alternativa de abastecimento de gua pode solicitar autoridade de sade pblica a alterao na freqncia m nima de amos tragem de det erminados p armetros estabelecidos nesta Norma. Pargrafo nico. Aps avaliao criteriosa, fundamentada em inspees sanitrias e, ou, em histrico mnimo de dois anos do controle e da vigilncia da qualidade da gua, a autoridade de sade pblica decidir quanto ao deferimento da solicitao, mediante emisso de documento especfico. Art. 31. Em funo de caractersticas no conformes com o padro de potabilidade da gua ou de outros fatores de risco, a autoridade de sade pblica competente, com fundamento em relatrio tcnico, determinar ao responsvel pela operao do sistema ou soluo alternativa de abastecimento de gua que amplie o nmero mnimo de amostras, aumente a freqncia de amostragem ou realize anlises laboratoriais de parmetros adicionais ao estabelecido na presente Norma. Art. 32. Quando no existir na estrutura administrativa do estado a unidade da Secretaria de Sade, os deveres e responsabilidades previstos no artigo 6 deste Anexo sero cumpridos pelo rgo equivalente.
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Apndice
No final da elaborao deste manual, j revisado e adaptado para a atual legislao sobre qualidade de gua para consumo humano, foram includos os procedimentos bsicos de coleta de amostras de gua para a quantificao das cianobactrias e anlise das cianotoxinas em mananciais de abastecimento. A finalidade da incluso deste tpico orientar os operadores de ETAs a se familiarizarem com o procedimento para tomada de posio quando o fato ocorrer ou houver necessidade de atuao. O estudo das cianobactrias, atualmente, tem sido a coqueluche do momento. Depois do acidente ocorrido em uma clnica de hemodilise na cidade de Caruar-PE, as autoridades sanitrias do pas, passaram a dar mais ateno questo que se tornou um grande problema para a sade pblica, culminando com a sua incluso na legislao que trata da potabilidade da gua, como parmetro de controle. A Fundao Nacional de Sade, entidade ligada ao Ministrio da Sade, patrocinou a realizao de dois eventos que tratam do estudo das Cianobactrias txicas: o primeiro foi realizado na cidade do Rio de Janeiro no ano de 2001 e o segundo durante o 1 Seminrio Internacional de Sade Pblica realizado na cidade de Recife-PE em 2002. Neste ltimo evento, foi ministrado um curso sobre Diagnstico Preliminar da Ocorrncia de Cianobactrias em Mananciais de gua para Consumo Humano tendo como instrutoras as Professoras Sandra M. F. O. Azevedo e Vera L. M. Huszar, ambas especialistas no assunto. Durante o curso, foram abordados a ocorrncia de Cianobactrias em mananciais de abastecimento, os perigos que representam para a sade dos animais, principalmente do homem, as formas de preveno das floraes, os limites tolerveis, tanto de clulas quanto de toxinas e os procedimentos de coleta para anlise de cianobactrias em gua bruta e cianotoxinas em amostras de gua bruta
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e tratada. Com o material fornecido pelas instrutoras, foi possvel incluir neste manual os procedimentos de coleta.
Procedimento de coleta de amostras para quantificao de cianobactrias em gua bruta

Material necessrio
a) Frasco de vidro cor mbar de 100 ml. b) Garrafa de van Dorn ou Similar. c) Soluo de lugol (fixador).
Local da coleta
a) Ponto de captao (tomada dgua); b) Amostras de superfcie; c) Amostras de vrias profundidades(estratificadas).
Tcnica
Amostra de superfcie a) Encher o recipiente (frasco de 100 mL) com gua da superfcie ou do ponto de captao; b) Adicionar 1 mL da soluo de lugol; c) A amostra preservada dura 10 semanas (aprox. 3 meses). Amostras de profundidade a) Mergulhar a garrafa de van Dorn at a profundidade desejada; b) Ench-la e retornar superfcie;
c) Desconectar a parte superior da mangueira que fica na lateral da garrafa e encher o frasco de 100 ml; d) Adicionar ao frasco de coleta (100 ml), 1 ml da soluo de lugol; e) A amostra preservada com lugol dura aproximadamente 3 meses. Identificao das amostras a) Identificar as amostras anotando o local da coleta, as prof undi dades (s e fo rem co letadas a vri as profundidades), a data e hora da coleta, o nome do coletador, etc.
Destino das amostras a) As amostras podem ser analisadas no prprio laboratrio da ETA, caso haja condies, ou serem enviadas para laboratrios especializados.
Procedimento de coleta de amostras de gua brutra para anlise de cianotoxinas

Frao Particulada
Material necessrio a) b) c) d) Frasco de plstico; Filtro de fibra de vidro; Conjunto de filtrao; Garrafa de van Dorn ou similar.
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Tcnica a) Coletar 1 litro de gua bruta a 10 cm da superfcie ou na profundidade do ponto de captao de gua; b) Fil trar a amost ra utilizando quantos f iltros forem necessrios; c) Secar os filtros a uma temperatura no s uperior a 0C; d) Pes ar os filt ros e determinar o pes o do material retido; e) Enviar os filtros secos (50C) o mais rapidamente pos svel para o laboratrio, sem a necessidade de refrigerao, identificando o local e data da coleta e o peso do material retido.
Nota: O material retido calculado pela diferena de peso entre o filtro virgem e o peso seco obtido aps filtrao.
Frao dissolvida a) Coletar 1 litro de gua bruta a 10 cm da superfcie ou na profundidade do ponto de captao de gua; b) Fil trar a amost ra utilizando quantos f iltros forem necessrios; c) Recolher a poro filtrada em um frasco plstico; d) Refrigerar ou congelar a poro filtrada; e) Envi ar para o l aboratrio, em caixa de is opor, informando a origem da amostra, local e data da coleta.
Procedimento de coleta de amostras de gua tratada para anlise de cianotoxinas

a) Coletar 1 litro de gua tratada no reservatrio a 10 cm da superfcie; b) Congelar ou resfriar a amostra c) Enviar para o laboratrio, em caixa de isopor, informando a origem da amostra, local e data da coleta.
Lavagem dos frascos:

a) Sugere-se para lavar os frascos de coleta e acondicionamento de amostras para anlise de cianotoxinas o s eguinte procedimento: deix-los previamente imersos em sabo neutro por 12 horas, depois lavar exaustivamente com gua e colocar em soluo de HCl a 5% durante 12 horas, lavar novamente e exaustivamente com gua destilada e
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secar. Caso o frasco j tenha sido utilizado anteriormente para coleta de amostras contendo cianobactrias, deix-lo em uma soluo de gua sanitria por 30 minutos antes de passar pelo sabo neutro. b) A garrafa de van Dorn (fig.) consiste de um tubo de PVC com volume de 2; 5 e 7 litros ou mais. O funcionamento consiste em mergulhar a garrafa aberta em ambas as extremidades e aps atingir o ponto desejado, deixa-se cair o mensageiro que fecha hermeticamente as duas extremidades. A amostra retirada pela mangueira que fica na parte lateral da garrafa desconectando a parte superior.
Bibliografia
BATALHA, B.H.L., PARLATORE, A. C. Controle da qualidade da gua para o consumo humano; bases conceituais e operacionais. 1 ed. So Paulo: Cetesb, 1977. BRASIL. Fundao Nacional de Sade. Manual tcnico de anlise de gua para consumo humano. Braslia: Funasa, 1999. BRASIL. Ministrio da Sade. Portaria n. 1469, de 29.12.00. Dispe sobre normas e padres de potabilidade de gua para consumo humano. Braslia: Funasa, 2001. COELHO, L. Tcnicas de laboratrio clnico: guia de coleta e preservao de amostras de gua. 1 ed. So Paulo: Cetesb, 1987. LI MPEZA d e vidraria. D is pon vel em: h ttp : / /www.profcupido.ig.com.br/conserv_e_limpeza_ vidrarias.htm. Acesso em: marco 2004. MAIER, F. J. Fluoruracion del agua potable. 1 ed. Mxico: Limusa-Wiley, 1971. MANUAL de tratamiento de aguas. 4 ed. Mxico: LimusaWiley, 1974. OPERAO e manuteno de E.T.A. So Paulo: Cetesb, 1973. V.2. ORGANIZAO PAN-AMERICANA DA SADE. Fascculo gua: a desinfeco da gua. Braslia: OPAS, 1999.
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SANTOS FILHO, D. F. Tecnologia de tratamento de gua: Elaborao gua para indstria. 1 ed. Rio de Janeiro: AN, 1976.
Marinaldo da Silva Valente/Core/AM/Funasa SILVA, M.O.S.A. Anlises fsico-qumicas para controle de Colaboradores estaes de tratamento de esgotos. 1 ed. So Paulo: Cetesb, 1977. de Oliveira Lira/Core/PE/Funasa Osman Nilce Bazzoli/Core/MG/Funasa STANDARD methods for the examination of water and Jlio Csar Reis da Silva/Core/MA/Funasa wastewater. 16th ed. Washington: APHA, 1985. Raimundo Rodrigues dos Santos Filho/Core/MA/Funasa TCNICAS de abastecimento e tratamento de gua. 2 ed. Miguel Crisstomo Leite Brito/Densp/Funasa So Paulo: Cetesb, 1977. V.2. Coordenao
TCNICAS de anlises microbiolgicas da gua; membrana Maria Fernanda Bittencourt/Densp/Funasa filtrante, 1 ed. So Paulo: Cetesb, 1997. Reviso tcnica
Felizana M.M. da S. Palhano Girlene Rodrigues Leite Ilustrao Leonardo Ribeiro da Silva Terra/Ascom/Presi/Funasa Projeto grfico e capa Glacia Elizabeth de Oliveira/Ascom/Presi/Funasa Diagramao Maria Clia de Souza/Ascom/Presi/Funasa Reviso Ortogrfica e Gramatical Olinda Myrtes Bayma S. Melo Ascom/Presi/Funasa/MS Reviso bibliogrfica Raquel Machado Santos/Ascom/Presi/Funasa
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MANUAL DE BOLSO

Manual Prtico de Anlise de gua

Exame bacteriolgico da gua

Bactrias do grupo coliforme

Fundao Nacional de Sade

Manual Prtico de Anlise de gua 9

Algumas doenas veiculadas pela gua e seus agentes

Material utilizado em bacteriologia

Fundao Nacional de Sade

j) tubo de ensaio; k) algodo em rama; l) meios de cultura;

Preparo do material de vidro

Placas de petri de vidro

Preparao dos meios de cultura

d) deixar esfriar; e) guardar no refrigerador (vlido por uma semana).

d) guardar no refrigerador (Vlido por 96 horas).

Fundao Nacional de Sade

Modo de usar a gua de diluio quando for determinar o NMP de coliformes

Coleta de amostras de gua para exames bacteriolgicos

Procedimentos para coleta em residncias

Fonte: OMS, 1998

Outros locais de coleta

Procedimentos para o exame Coliformes totais

Fundao Nacional de Sade

Manual Prtico de Anlise de gua 19

( A ) Fo r m a o d e g s o u cr esci m ent o f or t e. Con fi r m ar em VB a 35 0, 50 C du r ant e 2 4/ 48 ho r as

Fundao Nacional de Sade

Manual Prtico de Anlise de gua 21

110 30 140 40 170 30 130 50 170 60 220 50 280 70

5- 2 - 0 Fundao Nacional de Sade 5- 2 - 1 90 5- 2 - 2 5- 3 - 0 5- 3 - 1 5- 3 - 2 5- 3 - 3 5- 4 - 0 5- 4 - 1 5- 4 - 2 5- 4 - 3

0 1 2 3 4 Fonte: APHA, 1985 5

N m er o de t ubo s pos it i vos N MP/ 100 m l

< 2,2 2,2 5,1 9,2 16,0 >16,0

0 0,1 0,5 1,6 3,3 8,0

6,0 12,6 19,2 29,4 52,9 Infinito

Manual Prtico de Anlise de gua 23

Contagem padro de bactrias

Fundao Nacional de Sade

Manual Prtico de Anlise de gua 25

Fundao Nacional de Sade

Manual Prtico de Anlise de gua 29

Esterilizao do conjunto de filtrao no campo

Colimetria total e Escherichia coli

Fundao Nacional de Sade

Interpretao e expresso dos resultados

Manual Prtico de Anlise de gua 33

Procedimentos para a esterilizao

Fundao Nacional de Sade

Manual Prtico de Anlise de gua 35

Anlises fsico-qumica da gua

Fundao Nacional de Sade

Alcalinidade total em mg/l de CaCO3 = V x 20

Fundao Nacional de Sade

Manual Prtico de Anlise de gua 41

Onde: Fc = fator de correo.

B = Alcalinidade devida a bicarbonato C = Alcalinidade devida a carbonato. Fluxograma da anlise de CO2

Manual Prtico de Anlise de gua 43

Fundao Nacional de Sade

Onde: A = ml do titulante gasto na amostra; B = ml do titulante gasto no branco; N = Normalidade do titulante;

Manual Prtico de Anlise de gua 45

Fluxograma da anlise de cloretos

Dureza Total em mg/lCaCO3 =

ml de EDTA x 1000 x Fc ml de amostra

Notas: 1. A ausncia de um ponto de viragem definido,